乙型肝炎后肝硬化伴发糖代谢异常97例

目的:探讨乙型肝炎肝硬化伴发糖代谢异常的胰岛β细胞的分泌功能.方法:乙型肝硬化患者97例,经口服糖耐量试验分为糖耐量正常组、减退组及糖尿病组,另设正常健康组30例,观察比较各组之间的胰岛素释放试验、C肽释放试验、胰岛素敏感性(IS)及胰岛β细胞功能指数(HBCI),并进行分析.结果:乙型肝炎肝硬化糖耐量正常组、减退组存在高胰岛素血症,糖耐量正常组、减退组及糖尿病组均存在胰岛素敏感性(IS)降低,糖尿病组胰岛D细胞功能指数(HBCI)降低,与正常组比较有明显差异(q=3.89、5.02、4.07、5.09、7.72、3.80,P<0.05或0.01).结论:乙型肝炎肝硬化患者存在高胰岛素血症及胰岛素敏感性降低,糖耐量正常与减退者其胰岛β细胞仍有一定的分泌功能,伴发糖尿病者胰岛β细胞分泌功能明显减弱.

伊立替康联合奈达铂二线治疗晚期食管鳞癌24例

目的:观察伊立替康(CPT-11)联合奈达铂(NDP)二线治疗晚期食管鳞癌的疗效及不良反应.方法:依照开放原则,24例经组织学证实的食管鳞状细胞癌患者一线化疗疾病进展(PD)者,按CPT-11 65 mg/m2在第1-8天1h内静脉输注,然后NDP 80 mg/m2第12 h内静脉输注,21 d为1周期.每化疗2周期后按RECIST标准评价疗效,每1周期后根据CTCAE3.0进行不良反应分级.所有患者随访24 mo,结果采3用KaplanMeier进行生存分析.结果:24例均可评价疗效,完全缓解(CR)1例(4%),部分缓解(PR)5例(21%),稳定(SD)7例(29%),PD 11例(46%),有效率25%(CR+PR),疾病控制率54%(CR+PR+SD);中位生存时间(OS)248.5 d(95%CI:159-563 d),中位至疾病进展时间(TTP)131 d(95%CI:45-382 d).3级血液学毒性:贫血1例(4%),中性粒细胞减少4例(17%),白细胞减少5例(21%),血小板减少1例(4%).仅有1例4级中性粒细胞减少,研究中未观察到3-4级非血液学毒性,无治疗相关性死亡.结论:伊立替康联合奈达铂二线治疗晚期食管鳞癌的近期疗效显著,不良反应轻,耐受性好.

直肠类癌内镜诊断及治疗46例

目的:探讨内镜下直肠类癌的诊断率及其内镜治疗方法的安全性和有效性.方法:对46例直肠类癌病例进行回顾性分析,总结其内镜下表现,对瘤体直径小于2.0 cm的16例直肠类癌采用内镜下黏膜切除术进行治疗.结果:本组共诊断直肠类癌46例,内镜下治疗16例,术中或术后即刻出血2例,迟发性出血1例,术中穿孔1例,均经内镜治疗及内科保守治疗痊愈,无患者死亡.1例肿瘤切除不完全,转外科追加手术治疗.1例术后3 mo随访时见复发,转外科行手术治疗.结论:直肠类癌可通过内镜下钳取组织行病理检查或全瘤切除后活检而确诊,内镜治疗对于直径小于1.0 cm的直肠类癌是一种简单、安全有效的方法,术后应定期随访.

钾通道在D型钠尿肽抑制胃动力中的作用

目的:探讨钾通道在D型钠尿肽抑制豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动中的作用.方法:采用四道生理记录仪记录豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动;应用放射免疫法测定豚鼠胃窦环形肌组织和灌流液中环-磷酸鸟苷(cGMP)含量;运用全细胞模式的膜片钳技术记录豚鼠胃窦环形肌上钙敏感钾电流和延迟整流型钾电流.结果:DNP抑制豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动并呈现剂量依赖性.1、10、100及1000nmol/L的DNP抑制自发性收缩幅度分别为35%±6%、54%±6%、78%±13%及94%±6%.10 nmol/L鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583使收缩幅度抑制减弱(42%±6%vs60%±4%.P<0.05);而用100 nm01/L的cGMP依赖的磷酸脂酶抑制剂zaparinast使DNP对胃窦环行肌自发性收缩的抑制效应增强(72%±7%vs58%±5%,P<0.05).DNP明显增加豚鼠胃窦环形肌组织和灌流液中的cGMP水平.10 nmol/LDNP增加豚鼠胃窦环形肌上钙敏感钾电流,在60mV时增加的幅值为62.31%±3.22%,抑制延迟整流型钾电流,在60 mV时抑制幅度为18%±2.3%.结论:DNP通过增加I<,K(ca)>和cGMP途径实现对豚鼠胃窦环形肌的舒张作用.I<,K(v)>不参与此过程,但在维持豚鼠胃窦环形肌细胞的静息膜电位中起重要作用.

Genistein对大鼠肝星状细胞的增殖及TG F-β1、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的:观察4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及TGF-β1、MMP-2及TIMP-2基因表达的影响,探讨其抗肝纤维化的可能机制.方法:将体外培养的大鼠HSC-T6分别给予不同浓度的Genistein作用24 h后,用噻唑兰比色法(MTT)检测测定活细胞数,采用半定量RT-PCR法检测细胞中TGF-β1、MMP-2及TIMP-2的mRNA水平.结果:Genistein作用于大鼠HSC-T6后,活细胞数目减少,12.5、25及50 mg/L 3个作用浓度组与对照组的4值比较有显著性差异(0.306±0.0067,0.256±0.0085,0.1316±0.0049VS 0.4468±0.0299,均P<0.05).不同浓度的Genistein干预HSC-T6,MMP-2 mRNA表达水平与对照组比较均明显增强(均P<0.05);TGF-β1和TIMP-2 mRNA表达水平与对照组比较均明显降低(均P<0.05).结论:Geni Steill可能通过增强大鼠HSCMMP-2 mRNA的表达,同时抑制TGF-β与TIMP-2 mRNA的表达发挥抗纤维化的作用.

SD大鼠羊水间充质干细胞向神经样细胞体外诱导分化

目的:探讨体外诱导羊水间充质干细胞(AF-MSCs)分化成神经干细胞.方法:10只SD怀孕大鼠,180-240 g,胎龄16d,过量腹腔麻醉致死,开腹全部切除子宫,在无菌的条件下抽取全羊水,采用贴壁法分离AF-MSCs,体外培养扩增,观察细胞生长特性,流式细胞仪检测AF-MSCs表面抗原表达及细胞周期.取第3代AF-MSCs,加入预诱导液(DMEM/F12、100 mL/L FBS、1 mmol/Lβ-MEM)诱导24 h,然后加入诱导液(DMEM/F12、100 mL/L FBS、5 mmol/L β-MEM)诱导24 h,后在分化维持培养液(DMEM/F12、20μg/L EGF、20μg/L bFGF)中培养,行免疫荧光染色,检测NSE和GFAP的表达.结果:成功分离、培养和传代SD大鼠AF-MSCs,流式细胞术检测提示大鼠AF-MSCs的G0/G1期细胞比例约为87.5%、S+G2+M期比例为12.5%,表达CD44为98.3%、GD29为70%、和CD105为33.2%、不表达CD45为0.5%,CD34为1%,DLA-DR(MHC class Ⅱ)为0.1%.诱导后,AF-MSCs能表达神经细胞标示物NSE和GFAP,且可在体外继续存活2 wk左右.结论:羊水中也存在MSCs,与其他来源的MSCs特点相符:羊水可以作为一种新的胎儿MSCs来源,而且能在体外诱导分化为神经细胞.

丹参酮ⅡA联合5-FU对低氧下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及与HIF-1α和突变型P53表达的关系

目的:观察低氧环境下不同浓度的丹参酮ⅡA(Tan Ⅱ A)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及与HIF-1α和突变型P53的表达.方法:用氯化钴(CoCl<,2>)创建低氧模型,采用0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的TanⅡA联合10.0 mg/L的5-FU分别作用于低氧SGC7901细胞24、48和72 h,MTT法检测细胞活力:用上述同样方式作用于低氧SGC7901细胞24、48和72 h后,Hoechst染色法检测细胞凋亡:TanⅡA(0、0.5、2.0、10.0 mg/L)联合10.0 mg/L的5-FU作用于低氧SGC7901细胞48h后,免疫细胞化学二步法检测IHIF-1α及突变型P53的表达.结果:低氧环境下,不同浓度的Tan Ⅱ A联合10.0 mg/L 5-FU呈时间、剂量依赖性地抑制SGC7901细胞的增殖(均P<0.01),10.0 mg/LTan Ⅱ A联合5-FU作用细胞72 h后,其抑制率为67.46%.0.5-10.0 mg/L TanⅡA联合5-FU作用细胞24、48、72 h.TanⅡA呈时间、剂量依赖性地促进SGC7901细胞凋亡(均P<0.01).HIF-1α及突变型P53表达明显高于常氧组(t=22.786,13.914,均P<0.01),不同浓度的Tan Ⅱ A联合10.0 mg/L 5-FU作用细胞48 h后,HIF-1α、突变型P53蛋白表达明显降低(F=182.234,130.062,均P<0.01),且二者呈高度正相关(n=5,r=0.995,P<0.01).结论:在低氧环境下,TanⅡA可能通过抑制HIF-1α及突变型P53蛋白表达从而增强5-FU抑制SGC7901细胞增殖及诱导凋亡作用.

Cdx2基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

目的:构建尾型同源盒基因Cdx2 RNA干扰(RNAi)慢病毒表达栽体并进行鉴定.方法:选取Cdx2基因的19 nt特异性序列,设计针对Cdx2的shRNA序列,应用基因重组技术插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒表达栽体中,Xba Ⅰ和Not Ⅰ进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,重组病毒质粒及其3种辅助包装原件载体质粒通过LipofectamineTM2000共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,将其浓缩后在293T细胞中测定病毒滴度.结果:通过对pLL-Cdx2-shRNA载体进行双酶切鉴定,证实短发夹RNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,Cdx2基因RNA干扰重组慢病毒载体经293T细胞包装成功,收集293T细胞分泌的病毒上清测定病毒的滴度为5×107TU/mL.结论:成功构建A.Cdx2基因RNAi慢病毒栽体,为研究Cdx2对胃癌生长的影响提供了稳定感染细胞载体.

胰星状细胞对胰腺癌细胞株Patu8988侵袭和转移的影响

目的:探讨永生化人胰星状细胞(IPSC)对胰腺癌细胞株Patu8988侵袭和转移的影响.方法:制备IPSC上清,用IPSC上清和Patu8988共培养,以单独培养的Patu8988为对照,比较实验组与对照组细胞的增殖、黏附能力.侵袭、迁移能力,克隆形成以及抵抗H2O2诱导的Patu8988凋亡能力.结果:与单独培养的胰腺癌细胞株Patu8988相比,IPSC上清对胰腺癌细胞株Patu8988细胞的增殖、黏附、迁移、侵袭能力及克隆形成能力有促进作用(均p<0.05),并能抑制H2O2诱导的Patu8988的凋亡(P<0.05).结论:胰星状细胞可能通过增强胰腺癌细胞株Patu8988的增殖、黏附、迁移、侵袭能力及克隆形成能力,并抑制其的凋亡,在胰腺癌的发展和转移中起重要作用.

氧应激在大鼠乙醇及四氯化碳致慢性肝损伤中的作用

目的:复制大鼠乙醇及四氯化碳(CCl4)致慢性肝损伤模型,观察氧应激反应在其发生中的作用.方法:50只,♂ Wistar大鼠平均分为A-E 5组,实验持续8 wk.A组生理盐水灌胃;B组乙醇灌胃(560 mL/L);C组在B组基础上同时PGE1腹腔内注射;D组乙醇(560 mE/L,)灌胃4 wk,然后CCl4腹腔注射4 wk.E组在D组基础上同时PGE1腹腔内注射.实验4、8 wk结束时分别检测全血GSH-Px,血清ALT、AST、ALP、TBA、TG、CHO、MDA.8 wk结束时处死动物,留取肝脏标本,行光镜及电镜检查.结果:5组大鼠的原始体质量在统计学上无显著性差异,实验结束时,与A组相比,B组和D组的终体质量和增加体质量明显降低(249.00 g±18.83 g,258.50 g±20.28 g vs319.00 g±29.61 g;65.00 g±15.28 g,76.50 g±15.82 g vs 134.00 g±21.58 g,均P<0.01),肝质量占体质量百分比明显增高(3.267%±0.3165%,4.735%±0.7567%vs2.736%±0.1988%.均P<0.01),相应PGE1干预后(C组和E组),大鼠的生长缓慢、肝脏肿大情况得到明显改善(均P<0.01);B组和D组血清中的ALT、AST、ALP、TBA、TG和CHO含量发生不同程度的升高(P<0.01或0.05),PGE1干预后增高水平明显下降;乙醇和CCl4能引起外周血GSH-Px降低和MDA升高(均P<0.01),PGE1干预后能够得到明显改善,而PGE1的干预则可明显减轻乙醇和CCl4引起的肝脏病理学改变.结论:氧应激反应可能在大鼠乙醇及CCl4致慢性肝损伤过程中发挥重要作用,抑制氧应激反应可能是缓解肝损伤的重要措施.

溶血磷脂酸在消化系肿瘤中的作用

溶血磷脂酸是一种细胞间磷脂类信号分子,通过G蛋白偶联受体参与多种肿瘤的发生和发展,本文就溶血磷脂酸的结构及生物学作用在消化系肿瘤发生、发展中的作用机制进行探讨.

雌激素和大肠癌关系的研究进展

大肠癌是临床上常见的恶性肿瘤,近年来其发病率及死亡率在我国都呈上升趋势.自20世纪80年代有研究认为使用外源性的雌激素可降低妇女结肠癌的发病率后,人们对雌激素的使用与结肠癌发病率的相关性进行了较多研究.本文就雌激素和结肠癌关系研究进展进行综述.

幽门螺杆菌感染与胃癌局部浸润的相关性

胃癌是一种常见的恶性肿瘤,严重威胁着人类的健康,幽门螺杆菌被国际上确认为胃癌的主要病因之一,且其与胃癌的不良预后相关.本文主要通过探讨幽门螺杆菌与胃癌局部浸润的关系,阐明幽门螺杆菌与胃癌转移的可能机制,为胃癌患者根除幽门螺杆菌治疗提供理论依据.

长期应用川芎嗪对大鼠结肠黏膜阴离子分泌的影响

目的:探讨长期应用川芎嗪对大鼠结肠黏膜阴离子分泌的影响.方法:健康SD大鼠分为两组:川芎嗪组[腹腔注射川芎嗪40 mg/(kg·d)]和对照组(腹腔注射等量生理盐水),7 d后剥离结肠黏膜,采用短路电流技术并运用吲哚美辛和forsktin观察大鼠结肠黏膜阴离子的分泌.结果:对照组和川芎嗪组结肠黏膜的基础电流相比有显著差异(23.4 μA/cm2±2.2μA/cm2vs 18.1μA/cm2±2.2μA/cm2,P<0.05);预先加入前列腺素环化酶抑制剂-吲哚美辛后,对照组和川芎嗪组结肠黏膜的基础电流相比无显著差异;对照组和川芎嗪组分别加入腺苷酸环化酶的激动剂-forskolin后,30 min内转运的电荷数的增加量有显著差异(47.9 mC/cm2±3.6 mC/cm2 vs 27.1 mC/cm2±2.6 mC/cm2,P<0.01);而川芎嗪组结肠黏膜30 min内转运的电荷数与川芎嗪组单纯加入forskolin后的短路电流相比差异无显著性.结论:川芎嗪可通过抑制结肠黏膜对前列腺素的自发分泌来降低阴离子的分泌.

人结肠癌Caco-2细胞羧酸酯酶的表达及代谢活性

目的:评价Caco-2细胞对酯类药物的水解活性及羧酸酯酶(CES)表达的影响.方法:采用人类CES1(hCE-1)和CES2(hCE-2)特异性底物咪达普利和伊立替康(CPT-11)与Caco-2细胞S9组分共同孵育,HPLC法测定原药及代谢产物浓度,评价Caco-2细胞的药物水解活性,并通过RT-PCR法测定细胞内hCE-1和hCE-2表达.结果:Caco-2细胞与正常小肠微粒体酶相比,更倾向于代谢咪达普利,而几乎不水解CPT-11.RT-PCR结果发现.Caco-2细胞CES表达与正常肠道上皮组织不同,表现为hCE-1高表达,而几乎不表达hCE-2.结论:Caco-2细胞CES表达与正常肠道上皮组织存在较大差异,因此在使用Caco-2细胞评价酯类药物口服吸收时应十分谨慎.

不同胆汁酸诱导AR42J细胞凋亡与坏死的作用

目的:探讨7种不同胆汁酸对AR42J胰腺腺泡细胞的损伤作用,检测在各种胆汁酸作用下胰腺腺泡细胞的存活率和凋亡/坏死的改变.方法:以大鼠AR42J胰腺腺泡细胞系为研究对象,应用MTT法检测7种不同胆汁酸对细胞存活率的影响和剂量与时间依赖性,采用光学显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学改变与凋亡/坏死的变化,流式细胞术AV/PI双染法检测细胞的凋亡/坏死卒.结果:CA,GCA和GDCA在0.1-1.0 mmol/L内对AR42J细胞不具有损伤作用;而DCA,CDCA和LCA分别从0.3 mmol/L开始,TDCA从0.4 mmol/L开始,呈剂量依赖性对AR42J细胞产生损伤作用.0.8 mmol/L CA组细胞凋亡率与坏死率同CON组无明显区别(1.2%VS'0.9%;1.0%VS 1.0%,均P>0.05);0.4 mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为45.2%和8.9%:0.8 mmol/L DCA组细胞凋亡率和坏死率分别为18.6%和45.4%.结论:7种胆汁酸对AR42J细胞的损伤作用不同,主要表现为凋亡或/和坏死,同剂量相关.

Smad7抑制TGF-β1对肝星状细胞α1(Ⅲ)前胶原基因表达的促进作用

目的:探讨在加入TGF-β1的条件下,Smad7过度表达对肝星形细胞-T6(HSC-T6)α1(Ⅲ)前胶原mRNA水平的作用.方法:体外培养HSC-T6细胞,分为正常对照组、TGF-β1对照组、空载质粒组、Smad7质粒组、TGF-β1+空载质粒组和TGF-β1+Smad7质粒组.通过Fugene6介导Smad7质粒转染,继续培养48 h.采用Real time-PCR、RT-PCR方法检测Smad7和α1(Ⅲ)前胶原mRNA水平.结果:TGF-β1+Smad7质粒组、Smad7质粒组Smad7 mRNA水平较正常对照组、空载质粒组显著增高(t=59.43、59.41、54.27及54.25,均t>t0.01,均P<0.01).Smad7质粒组α1(Ⅲ)前胶原基因mRNA表达与正常对照组、空载质粒组相比无明显差异(t=1.25与1.27,均t0.05).但TGF-β1+Smad7质粒组α1(Ⅲ)前胶原mRNAff水平较TGF-β1+空载质粒组和TGF-β1对照组明显降低(t=103.87与45.70,均t>t0.01,均P<0.01).结论:Smad7可显著抑制TGF-β1对HSC-T6ct1(Ⅲ)前胶原mRNA表达的促进作用,而对HSC-T6α1(Ⅲ)前胶原mRNA表达无明显影响.

重症急性胰腺炎治疗研究进展

重症急性胰腺炎是一种累及多种脏器的全身性疾病,并发症多,病死率高.由于病情的复杂性,其治疗方法涉及内科、外科、中医和内镜治疗等方面,在选择治疗方法时需要判断患者的病情,给予全面综合及个体化治疗.本文就重症急性胰腺炎各类治疗措施的研究进展及治疗的新观念作一综述.

直肠癌合并腹膜上皮样间皮瘤1例

本文报道直肠癌合并腹膜上皮样问皮瘤1例,并分析直肠癌及腹膜上皮样间皮瘤临床病理学特点、病理诊断及鉴别诊断,以提高医务人员对该病的诊疗水平.

《世界华人消化杂志》投稿须知

2010年国内国际会议预告

志谢世界华人消化杂志编委