野生直立百部的化学成分

目的:研究采集于江苏句容宝华山的野生直立百部Stemona sessilifolia(Miq.)Miq.的化学成分.方法:用75%乙醇回流提取,氯仿和正丁醇萃取,采用大孔树脂、反复硅胶柱色谱法和重结晶等方法分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构.结果:从直立百部的根中分离得到10个化合物,分别鉴定为:7-甲氧基-3-甲基-2,5-二羟基-9,10-二氢菲(7-methoxy-3-methyl-2,5-dihydroxy-9,10-dihydrophenanthrene,1)、stilbostemin D(2)、原百部碱(protostemonine,3)、原百部次碱(protostemotinine,4)、stemospironine(5)、左旋丁香树脂酚葡萄糖苷[(-)-syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside,6]、苯甲酸(7)、香草酸(8)、胡萝卜苷(9)和豆甾醇(10).结论:化合物1为新化合物,化合物6首次从该属植物中分离得到,化合物7～10为首次从该植物中分离得到.

红景天苷对犬冠状动脉结扎所致心肌缺血的保护作用

目的:研究红景天苷对麻醉开胸犬冠状动脉结扎所致心肌缺血的保护作用.方法:麻醉犬冠状动脉结扎造成心肌缺血模型,随机分为对照组、模型组、溶剂组、地尔硫革注射液(0.8 mg/kg)组、葛根素注射液(4.0 mg/kg)组、红景天苷高、中、低(8.0,4.0,2.0 mg/kg)剂量组.采用心外膜标测和定量组织学硝基四氮唑蓝(NBT)染色法测定心肌损伤范围及损伤程度,并取结扎部位下1 cm处心肌组织作病理检测.测定血浆中的丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:红景天苷可显著减轻由心外膜电图所标测的心肌缺血程度及心肌缺血范围;可显著减小通过NBT染色所显示的梗死区;可显著减少血浆中MDA的含量,增强SOD的活性.结论:红景天苷对麻醉犬冠脉结扎所致心肌缺血有显著的保护作用.

抗栓肽Ala34→Trp突变体的表达及活性研究

目的:将抗栓肽34位的丙氨酸突变为色氨酸,构建活性较高的突变体.方法:通过设计合成两对引物经PCR获得抗栓肽突变体基因,利用质粒pET32a(+)作为载体,在大肠杆菌BL21(DE4)内表达.利用融合蛋白本身的组氨酸标签,以金属亲和色谱进行纯化,然后用肠激酶切除融合部分,所得蛋白用体外抗血小板凝集实验检测其活性.结果与结论:抗栓肽突变体以可溶形式高效表达,活性检测显示其抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集的IC50为150 nmol/L.与原型蛋白相比,突变体活性明显提高.

柱前手性衍生化-HPLC法测定普瑞巴林的光学纯度

目的:建立柱前手性衍生化-HPLC法测定普瑞巴林的光学纯度.方法:以N2-(5-氟-2,4-二硝基苯基)-L-丙氨酰胺为手性衍生化试剂,对普瑞巴林S/R对映体进行衍生化,生成具有紫外吸收的一对非对映体衍生化产物(λmax=339nm),经C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),0.5%三乙胺溶液(用磷酸调节pH至3.0)-乙腈(55∶45)为流动相进行分离,测定普瑞巴林的光学纯度.结果:所形成的普瑞巴林非对映体衍生化产物稳定且分离良好,R-异构体浓度在0.20～2.02 μg/mL范围内与其衍生化产物峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6),加样回收率为96.3%,低检测浓度为0.02 μg/mL.结论:所建立方法快速、灵敏、重复性好,可用于普瑞马林光学纯度的检查.

鱿鱼墨黑色素铁对大鼠缺铁性贫血的治疗作用

目的:探讨鱿鱼墨黑色素铁对缺铁性贫血(IDA)模型大鼠的治疗作用.方法:采用低铁饲料并辅以尾静脉定期放血法建立IDA模型,灌胃给予不同剂量的鱿鱼墨黑色素铁,分别检测IDA大鼠外周血血红蛋白(Hb)含量、红细胞(RBC)数、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)和血清铁(SI)含量及红细胞内游离原卟啉(FEP)浓度.结果:鱿鱼墨黑色素铁能够显著提高IDA大鼠Hb、RBC、HCT、MCV和SI数量,有效降低FEP浓度,显著促进IDA大鼠贫血症状的恢复.与无机铁剂相比,生物利用度高且不影响大鼠正常生长.结论:鱿鱼墨黑色素对IDA大鼠贫血症状具有显著的治疗作用.

异丙酚对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的:考察异丙酚对大鼠离体心肌缺血再灌注的影响及蛋白激酶C(PKC)激活在其中的作用.方法:应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血再灌注损伤模型.大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注(I/R)模型组、异丙酚低、中、高剂量(15,30,60 μmol/L)组和异丙酚(60 μmol/L)和PKC抑制剂白屈菜红碱(chelerythrine,5μmol/L)组.除正常对照组外,各组分别平衡灌注20 min后,常温全心停灌25 min,再灌注30 min,记录各组平衡末、缺血前及再灌30 min时心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVDEP)、左室压力变化速率(±dp/dtmax)、冠脉流量(CF)等心功能指标;测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性;透射电镜观察心肌细胞超微结构变化.差速离心提取心肌线粒体,测定线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、ATP酶活性和丙二醛(MDA)含量.结果:异丙酚中、高剂量组能有效减轻缺血再灌注引起的左室功能下降,降低冠脉流出液中LDH、CK的活性(P＜0.05);心肌细胞超微结构显示线粒体损伤明显减轻;增强心肌线粒体中SOD、GSH-PX活性、减少MDA的生成(P＜0.05),提高线粒体ATP酶活性(P＜0.05).白屈菜红碱能部分减弱异丙酚的心肌保护作用.结论:异丙酚对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤有保护作用,这可能与其抗脂质过氧化和激活PKC有关.

汉黄芩素脂质体的制备及大鼠体内药代动力学

目的:制备包封率高且粒径适宜的汉黄芩素脂质体,考察其体外释放及大鼠体内药代动力学.方法:用薄膜分散法制备汉黄芩素脂质体,用葡聚糖凝胶色谱法测定脂质体的包封率,考察脂质体在等渗磷酸盐缓冲液(pH7.4)中的释放规律及血浆存在对其释放的影响,并研究其在大鼠体内的药代动力学.结果:制备的汉黄芩素脂质体包封率为(81.2±4.2)%,粒径为(157±22)nm.在磷酸盐缓冲液中24 h仅释放约40%,血浆的存在会导致释放有所增加.脂质体在大鼠体内具有明显的缓释效果,生物利用度是溶液剂的3.48倍.结论:制备的汉黄芩素脂质体包封率较高,粒径符合要求,体内外研究均表明脂质体具有缓释效果.

N-辛基-O,N-羧甲基壳聚糖自组装纳米粒的制备、理化性质及安全性评价

目的:制备两亲性壳聚糖衍生物N-辛基-O,N-羧甲基壳聚糖(OCC)自组装纳米粒,并对其理化性质及安全性进行评价.方法:以透析法制备OCC自组装纳米粒;利用动态光散射(DLS)、Zeta电位仪、透射电镜对其形态、结构进行表征;通过体外溶血实验及小鼠尾静脉注射急性毒性实验评价其安全性.结果:OCC自组装纳米粒粒径为165.6 nm,多分散指数为0.191.由于纳米粒表面羧甲基基团的存在,纳米粒表面带负电荷,其表面电势为-30.2 mV.透射电镜结果显示该自组装聚合体为规则球形结构,粒径分布均匀.溶血实验和急性毒性实验结果表明,OCC溶血性远远小于Tween 80,与Cremophor EL相当;OCC小鼠尾静脉注射的LD50及95%可信限为560.2(523.0～600.0)mg/kg.结论:OCC自组装纳米粒可初步推断为安全可靠的静脉注射用纳米药物载体.

HPLC法同时测定鲜鱼腥草不同部位8个活性成分的含量

目的:同时测定鲜鱼腥草不同药用部位8个活性成分的含量.方法:Alltima C18柱(7.5 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:0.2%的冰乙酸溶液(A),乙腈(B),梯度洗脱:0～20 min,5%～20%B;20～40 min,20%～20.5%B;40～50 min,20.5%～35%B;50～90 min,35%～90%B;流速:0.6 mL/min;检测波长:280 nm.结果:表明不同药用部位含量不同.结论:该法简便、准确、分离效果好,适用于鱼腥草的质量控制.

少腹逐瘀汤对小鼠离体子宫收缩模型的生物效应及物质基础评价

目的:分析评价少腹逐瘀汤及各分离部位对小鼠离体子宫收缩的拮抗效应,并探讨各部位物质基础与效应之间的关系.方法:采用大孔吸附树脂分离制备各部位样品(SF-1～SF-14);采用小鼠离体子宫收缩模型评价该方及各部位的生物效应;采用TLC法对活性部位进行定性分析,并初步分析各部位所包含化学成分的结构类型与效应间的相关性;采用HPLC-DAD-ESI-MS法对活性显著部位SF-3中的主要色谱峰进行分析鉴定.结果:少腹逐瘀汤拮抗子宫平滑肌收缩的活性部位主要为SF-3、SF-7、SF-10,其化合物类型包含黄酮苷类、内酯类、有机酸类等;部位SF-6、SF-9、SF-11也有一定的活性;通过与标准化合物对照及质谱特征对活性显著部位SF-3色谱峰进行了归属和指认,鉴定了其中11个化合物分别为芍药苷、芍药内酯苷、原儿茶酸、咖啡酸、香草酸、盐酸川芎嗪、阿魏酸、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷、洋川芎内酯H、洋川芎内酯Ⅰ.结论:少腹逐瘀汤拮抗离体子宫收缩效应源于挥发油部位及除去生物大分子的水溶性部位的贡献;水溶性小分子部位经大孔树脂吸附,醇梯度洗脱得到了以30%～40%(SF-6、SF-7)、60%～80%(SF-9～SF-11)两段活性部位,前者主含黄酮苷类、内酯类、有机酸类,后者主含生物碱类等;实验中发现生物大分子物质对小鼠离体子宫收缩模型呈现出兴奋作用.

麦冬类药材皂苷元含量与其抑制中性粒细胞呼吸爆发的相关性

目的:分析麦冬类药材总皂苷元含量与抑制中性粒细胞呼吸爆发作用的相关性,考察通过总皂苷元含量预测药材的药效活性.方法:采用HPLC-ELSD法测定麦冬类药材鲁斯可皂苷元及薯蓣皂苷元含量;采用化学发光法测定对中性粒细胞呼吸爆发的作用活性.结果:不同种麦冬类药材在皂苷元组成及含量上均有区别,其总苷元含量从高到低依次为:短葶山麦冬、川麦冬和湖北麦冬、杭麦冬;在活性作用方面:麦冬类药材对中性粒细胞呼吸爆发呈抑制作用,其中短葶山麦冬对中性粒细胞的呼吸爆发具有较强的抑制作用.经分析不同种麦冬类药材的总皂苷元含量与其对中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用,总皂苷元含量与抑制中性粒细胞呼吸爆发作用呈相关性.结论:麦冬类药材可根据总皂苷元含量预测对中性粒细胞呼吸爆发的抑制活性,总皂苷元含量是反映药材抗炎活性的一个很好的综合指标,该研究为麦冬类药材的品质评价提供了科学依据.

影响产气肠杆菌EAM-Z1中嘧啶核苷磷酸化酶活力的因素

目的:研究影响产气肠杆菌EAM-Z1的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)酶活力的因素.方法:分别考察添加底物、金属离子、速效碳源和磷酸盐对菌体浓度及PyNPase活力的影响.结果:加入4 g/L胞苷,菌体的量增加了19.30%,综合考虑对菌体量和比酶活,加入3 g/L胞苷可使PyNPase活力增加10.46%;4 mg/L Ca2+使菌体量增加了10.90%,PyNPase活力增加了30.25%;低浓度的速效碳源可以增加菌体浓度,但均使PyNPase的活力降低;1 g/L磷酸盐使PyNPase活力增加了17.40%.结论:底物诱导、金属离子、速效碳源和磷酸盐均对PyNPase的活力有一定的影响.

甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒的制备及特性研究

目的:制备具有肝细胞靶向的甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒,并考察其理化特性.方法:采用离子凝胶法制备阿霉素壳聚糖纳米粒,再以高碘酸盐氧化法制备甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒.激光透射电子显微镜观察纳米粒的形态,马尔文激光粒度仪测定其粒径.RP-HPLC法间接测定纳米粒中甘草酸结合率和阿霉素包封率,并初步研究体外甘草酸的结合稳定性和阿霉素释药特性.结果:电镜显示纳米粒呈类球形,平均粒径为179.5 nm,甘草酸结合率达到80%以上,在释放介质中,12 h的甘草酸结合率仍保持(65.2±3.4)%;纳米粒中阿霉素包封率达90%以上,体外释药缓慢,无明显的"突释"现象,72 h的累计释放百分率为(28±4.6)%.结论:本方法制备的甘草酸表面修饰阿霉素纳米粒工艺简单,包封率高,且甘草酸表面结合稳定,有望提高阿霉素的肝细胞靶向性.

二氢喹唑啉类Eg5抑制剂的设计、合成及生物活性

目的:设计并合成新型的Eg5抑制剂并测定其对Eg5蛋白的抑制活性.方法:利用药物设计软件,采用碎片生长的方法获得新结构的Eg5抑制剂,用化学合成的方法进行制备,通过测定Eg5蛋白水解ATP后释放出的无机磷的量,得出化合物对Eg5蛋白的抑制活性.结果与讨论:设计并合成了未见文献报道的Eg5抑制剂12个,目标化合物结构经IR、1H NMR、MS与元素分析确证.对所有目标化合物进行了Eg5的抑制活性测试,有10个化合物对Eg5的抑制活性强于阳性对照药Monastrol.

磺苄西林钠的合成工艺改进

目的:改进磺苄西林钠的合成工艺.方法:以苯乙酸为原料,经磺化、手性拆分、酰氯化后,再与6-氨基青霉烷酸(6-APA)缩合、成盐制备磺苄西林钠.结果:对磺化反应和缩合反应进行了工艺改进.反应总收率为46%,产品结构经IR、1H NMR等数据确证.结论:本工艺操作过程简单,反应时间缩短,收率提高,适合工业化生产.

HPLC法检查米格列奈对映异构体限量

目的:建立高效液相色谱法检查米格列奈对映异构体限量的方法.方法:采用Sumichiral OA-3300(4 mm×250mm,5μm)为手性色谱柱,以正己烷-氯仿-甲醇-三氟醋酸(50∶48∶2∶0.5)为流动相,检测波长为259 nm,流速为1 mL/min.结果:米格列奈与对映异构体达到了较好的分离,其分离度为1.9,对映异构体的小检出量为30 ng;对映异构体峰面积与浓度线性关系良好,回归方程为A=2.593 4×103 c+2.672×102(r=0.999 7,n=5).结论:该法快速、准确,可用于米格列奈对映异构体的检查与控制.

不同剂型EGCG对UVB照射引起小鼠皮肤细胞凋亡的抑制作用

目的:考察不同剂型表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)照射后小鼠皮肤细胞凋亡的抑制作用及丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)和TNF-α表达的影响.方法:将BALB/c小鼠分为8组,不同剂型EGCG(丙酮溶液、乳膏及脂质体)局部外用于小鼠背部皮肤后给予UVB(180 mJ/cm2)照射1次,取小鼠背部皮肤,TUNEL法检测凋亡细胞,Western blotting法检测p38 MAPK磷酸化水平,酶联免疫吸附法检测TNF-α水平.结果:UVB照射可诱导小鼠皮肤细胞凋亡,p38 MAPK磷酸化及TNF-α表达增高,EGCG丙酮溶液可降低凋亡指数,p38 MAPK磷酸化水平及TNF-α的表达,而乳膏和脂质体则未显示此作用(P＜0.05).结论:EGCG丙酮溶液外用可在一定程度上抑制UVB照射所致的细胞凋亡作用,从而发挥对皮肤的保护作用.

归苓片血清药物化学研究(1)

目的:分析鉴定归苓片体内吸收入血化学成分.方法:建立归苓片以及大鼠口服归苓片含药血清的HPLC指纹图谱分析方法;分析归苓片全方/单味药及其大鼠含药血清指纹图谱,比对鉴定口服归苓片后大鼠血中成分、来源生药及其代谢产物.结果:从大鼠归苓片含药血清中显示出12个入血成分,其中7个为原型成分,5个为代谢产物.结论:血中成分及代谢产物可能为归苓片体内直接作用的药效成分,其分别来源于归苓片的组成药味.

药动学-药效学结合模型的研究进展及在新药研发中的应用

药动学-药效学(PK-PD)结合模型是综合研究药物在体内的动态变化过程与其药效消长之间关系的一种有力工具,它借助数学方法定量表述浓度(或剂量)、时间和效应三者之间的内在关系,对药物的研究开发及合理使用具有普遍的指导意义.PK-PD模型可按药动学与药效学联结方式的不同分成4种基本类型.近年来,神经网络技术、优设计理论推动了具有多成分多靶点作用特征的PK-PD模型的发展.本文后重点介绍了PK-PD模型在新药研发的临床前和临床阶段的应用以及当前研究热点,并对今后的发展趋势进行展望.

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银杏黄酮测定时水解条件的研究

目的:寻找水解率高、耐用性好的银杏黄酮测定的水解条件.方法:在预防氧化降解反应方面,比较不同保护措施的效果;在充分的保护措施下考察不同的加热方式、盐酸浓度、甲醇浓度、加热时间等水解条件.结果:预防氧化降解的发生能有效提高水解液的稳定性,并使密封加热在优选的条件下,测得量比回流加热水解高10%以上.结论:溶剂脱气、充氮气排除接触供试液的空气中的氧、避光等可有效防止氧化降解反应的发生;水解方式采用密封加热优于回流加热.

阿朴吗啡衍生物的合成及生物活性

目的:合成高稳定性的能提高碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)活性的阿朴吗啡衍生物.方法和结果:以左旋阿朴吗啡盐酸盐为原料,以酰氯为酰基化试剂合成阿朴吗啡酯类衍生物;以碘代烷为烷基化试剂合成阿朴吗啡醚类衍生物.产物结构经1H NMR、元素分析确证.对其中3个衍生物进行了促进FGF-2活性的试验.结论:此方法原料易得,反应条件温和,得到的产物有较明显的生物活性.

《中国药科大学学报》评价与分析比较

利用2001～2006年版《中国科技期刊引证报告》提供的各项评价数据对《中国药科大学学报》进行了统计分析和比较,运用单一指标评价法进行了横向和纵向比较和分析,同时对综合指标评价中相关计量指标进行了对比评估.结果表明:《中国药科大学学报》在药学学术期刊中占有重要地位,影响因子和被引频次在2001～2006年内始终处于前10位.