丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡及其机制

目的研究丁酸钠诱导子宫颈癌细胞株HeLa和原代培养的人胚肺成纤维细胞凋亡情况,建立丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡模型,并探讨其诱导凋亡机制.方法倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;MTT法检测药效动力学特征;流式细胞仪检测药物作用前后细胞凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯状条带,RT-PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2转录水平.结果丁酸钠抑制细胞生长呈时效和量效关系,其对HeLa细胞的生长抑制作用较对人胚肺成纤维细胞的作用明显;亚G,峰和AnnexinV/PI、DNA Ladder结果显示,丁酸钠作用后HeLa细胞72 h后出现的凋亡率显著高于人胚肺成纤维细胞;RT-PCR结果显示丁酸钠作用前后HeLa细胞中凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达水平无明显改变.结论一定浓度的丁酸钠可以选择性诱导子宫颈癌细胞株HeLa凋亡,而对正常人二倍体细胞毒性较小,并且这种凋亡诱导作用并非通过调控Bax和Bcl-2的转录水平而实现.

促卵泡激素对顺铂诱导卵巢癌细胞株凋亡的保护作用

目的探讨促卵泡激素(FSH)对顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡的保护作用.方法 MTT比色法检测人卵巢上皮性癌细胞系OVCAR3转染FSH受体(OVCAR3-FSHR)细胞活性,流式细胞术分析细胞周期变化及细胞凋亡率.结果促卵泡激素能降低顺铂对细胞生长的抑制作用,同时降低S期的比例和凋亡率.结论促卵泡激素对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡有保护作用.

促卵泡激素抑制顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡

目的探讨促卵泡激素(FSH)对顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡的影响及其机制.方法应用DNAFragmentation梯带电泳分析,TUNEL荧光原位凋亡检测法测定对FSH敏感的卵巢癌细胞系OVCAR3(OVCAR3-FSHR)细胞凋亡状态,应用Caspase-3活性分析法检测Caspase-3活性,RT-PCR检测凋亡相关基因survivin mRNA表达,Western blot检测其Survivin及bcl-2蛋白表达.结果不论是DNA梯带电泳还是TUNEL荧光原位凋亡检测都表明促卵泡激素能抑制顺铂诱导的OVCAR3-FSHR细胞的凋亡.Caspase-3活性分析表明促卵泡激素能降低顺铂引起的Caspase-3活性增加.半定量RT-PCR结果表明FSH能增加survivin mRNA表达,Western blot结果表明FSH能增加Survivin蛋白表达而对bcl-2表达无影响.结论促卵泡激素能够抑制顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡,其作用机制可能与促进Survivin表达及降低Caspase-3活性有关.

子宫颈恶性肿瘤年轻患者的临床特点和治疗

目的分析子宫颈恶性肿瘤年轻患者的临床特点、预后及影响预后的因素,探讨年轻患者理想的治疗方案.方法回顾性分析北京协和医院妇产科17年间初治的52例≤35岁年轻的子宫颈恶性肿瘤患者(研究组)和45例≥50岁的子宫颈恶性肿瘤患者(对照组),在临床特点、治疗方式、预后方面的差别.对于保留卵巢的患者应用问卷调查结合血清激素水平测定评价卵巢功能.结果研究组患者以接触性出血和不规则出血为主要临床症状,55.8%的患者合并两种以上症状;人乳头瘤病毒(HPV)感染率为20.5%,高于对照组(P＜0.05);晚期病例(Ⅱb期～Ⅳb期)占30.8%,高于对照组(P＜0.05);组织学类型以鳞癌为主(71.2%),30岁以下患者非鳞癌比例高于对照组(P＜0.05),25岁以下患者都是非鳞癌;组织学分级为G1,G2和G3级者分别是21.2%,54.5%和24.2%;巨块型(肿瘤直径＞4cm)占27.9%,高于对照组(P＜0.05).研究组5年生存率75.7%,明显低于对照组(P＜0.05).肿瘤直径的大小和组织学类型是影响子宫颈恶性肿瘤年轻患者预后的主要因素.结论年轻患者中非鳞癌成分比例高、晚期患者多、预后差,治疗应遵循个体化和人性化原则,尽量保留生育和女性内分泌功能.

错配修复基因启动子甲基化和蛋白表达在葡萄胎的发生及恶变中的作用

目的探讨错配修复基因hMLH1和hMSH2启动子甲基化和蛋白表达在葡萄胎的发生及恶变中的作用.方法用甲基化敏感性核酸内切酶HpaⅡ酶切-PCR法,分析正常早孕人流绒毛、部分性葡萄胎(PM)、完全性葡萄胎(CM)和侵蚀性葡萄胎(IM)hMLH1和hMSH2启动子甲基化情况;免疫组化检测hMLH1和hMSH2原位蛋白表达.结果在正常早孕绒毛、PM、CM和IM组织中,hMLH1和hMSH2均表达于细胞滋养细胞,合体滋养细胞大多表达阴性,极少数为弱阳性.正常早孕绒毛组织均未发现hMLH1和hMSH2启动子甲基化,而hMLH1和hMSH2表达全部阳性,阳性率为100%,与PM、CM组织相比,启动子甲基化和蛋白表达均存在显著性差异(P＜0.05).IM中hMLH1和hMSH2启动子甲基化发生率分别为80.0%(12/15)和73.3%(11/15),与PM、CM相比无显著性差异(P＞0.05);IM hMLH1蛋白表达阳性率为54.5%(6/11),与PM、CM相比无显著性差异(P＞0.05);而hMSH2蛋白表达阳性率为36.4%(4/11),明显弱于CM,两者比较有显著性差异(P=0.044).CM和IM组织中hMSH2启动子甲基化与其蛋白表达间存在相关性(P值分别=0.001和0.039).结论hMLH1和hMSH2的高表达对正常细胞滋养细胞基因组的稳定性起着重要的作用;hMLH1和hMSH2启动子甲基化的发生和蛋白表达的缺失参与了葡萄胎的发生.

肺叶切除术治疗滋养细胞肿瘤肺转移的价值

目的评价肺叶切除术在滋养细胞肿瘤肺转移治疗中的作用.方法对45例行肺叶切除术的滋养细胞肿瘤病例进行回顾性分析,其中侵袭性葡萄胎7例,绒癌38例.结果45例患者经过一定疗程的化疗后,均进行了肺叶切除术.7例侵袭性葡萄胎患者完全缓解.绒癌Ⅲa期患者11例,平均化疗13个疗程,10例完全缓解,1例部分缓解;Ⅲb期患者17例,平均化疗14.3个疗程,11例完全缓解,3例部分缓解,3例肿瘤进展死亡;Ⅳ期患者10例,平均化疗15个疗程,6例完全缓解,4例肿瘤进展死亡.45份手术切除病理标本中,27例为出血坏死组织,其中17例患者完全缓解(63%),4例部分缓解,6例肿瘤进展死亡.16例病灶周围有纤维化,其中14例完全缓解(88%),2例部分缓解.2例病理结果为结核.结论滋养细胞肿瘤的治疗措施虽然以化疗为主,但是肺叶切除术对某些选择性病例仍是必要而且有效的治疗手段.病理结果对预后的判断具有一定的指导意义.

T淋巴瘤侵袭诱导基因在卵巢癌细胞株的表达及其意义

目的研究T淋巴瘤侵袭诱导基因1(Tiam1)在卵巢癌侵袭转移方面的作用.方法 RT-PCR检测Tiam1和Rac1 mRNA的表达;Westem blot法检测Tiam1蛋白质的表达;Boyden小室体外侵袭实验测定癌细胞迁移能力.结果Tiam1 mRNA和蛋白质及Rac1 mRNA在4株卵巢癌细胞A2780、Caov3、Skov3及SW626中均呈中高度表达;癌细胞平均迁移百分数分别为(27.67±3.2)%、(10±1.0)%、(22.67±2.5)%及(47.67±1.52)%.Tiam1及Rac1表达水平与癌细胞迁移潜能间均呈显著性相关,r分别为0.874和0.814,P=0.003和0.042.结论Tiam1/Rac1信号转导通路在卵巢癌细胞的侵袭和转移过程中起重要作用,为卵巢癌的基因治疗提供了新的靶点.

卵巢粘液性肿瘤hMLHl启动子甲基化及微卫星不稳定性

目的观察卵巢粘液性肿瘤中错配修复基因hMLHl启动子甲基化,及与微卫星不稳定性(MSI)间的关系.方法1995～2001年浙江大学医学院附属妇产科医院卵巢粘液性肿瘤组织块共107例(恶性49例,交界性35例和良性23例).选取BAT-25、BAT-26、BAT-40、D5S346、D17S250和D2S123 6个位点用PCR法进行MSl分析;限制性内切酶聚合酶链反应(PCR)法分析hMLHl启动子甲基化.结果良性、交界性和恶性肿瘤的hMLHl启动子甲基化阳性率分别为4.3%(1/23)、14.3%(5/35)和36.7%(18/49).其中恶性组与交界性、良性组之间存在显著性差异(P=0.023和P=0.004),交界性和良性组之间无显著性差异(P=0.438);良性、交界性和恶性肿瘤的MSI表型阳性率分别为4.3%(1/23)、8.6%(3/35)和16.3%(8/49),有上升趋势,但无统计学意义;75%(9/12)MSI表型阳性的肿瘤存在hMLHl启动子甲基化,MSI表型阴性的肿瘤中84.2%(80/95)不存在hMLHl启动子甲基化,MSI表型阳性和hMLH1启动子甲基化之间显著相关(P=0.000),在恶性组和交界性组中两者均存在相关性(P=0.004,P=0.047).结论卵巢粘液性肿瘤存在hMLH1启动子甲基化,且可能是造成MSI表型阳性的主要因素,两者可能在卵巢粘液性囊腺癌发生过程中起关键作用.

甲氨蝶呤单药治疗低危妊娠滋养细胞肿瘤的疗效

目的探讨甲氨蝶呤(MTX)单药治疗低危妊娠滋养细胞肿瘤的疗效和安全性.方法本院1999年10月～2002年9月共37例低危妊娠滋养细胞肿瘤患者接受MTX单药治疗,收集其临床资料,并统计患者年龄、临床分期、WHO评分、先前妊娠、治疗前血清人绒毛膜促性腺激素(hCG)水平、达到完全缓解所需要的化疗疗程和治疗期间毒副反应.结果37例患者共接受137疗程MTX单药化疗,34例达到完全缓解,完全缓解率91.9%.37例患者中29例接受MTX单药多疗程化疗,平均疗程4.4个,完全缓解26例,完全缓解率89.7%;其中Ⅰ期患者19例,均达完全缓解,完全缓解率100%;Ⅲ期患者10例,达完全缓解7例,完全缓解率70.0%,两者比较有显著性差异(P=0.03).8例计划给予MTX单药单疗程化疗患者,7例达到完全缓解,1例Ⅲ期患者追加1疗程MTX后达完全缓解.137疗程出现严重毒副反应7疗程,其发生率5.1%.经随访仅1例单疗程化疗患者在化疗结束后6个月复发,完全缓解后复发率2.7%.结论MTX单药治疗低危妊娠滋养细胞肿瘤是安全、有效的,部分患者仅单疗程化疗即可达完全缓解.

中国20世纪70年代与90年代子宫颈癌死亡率及其变化趋势

目的描述我国20世纪70年代与90年代子宫颈癌死亡率的分布情况,为新世纪我国对子宫颈癌的预防与控制策略提供科学依据.方法资料来源于中国70年代及90年代两次全国死因调查结果.计算经年龄地区调整后的子宫颈癌死亡粗率及调整率.基于年龄调整率比较两个年代的子宫颈癌的变化及趋势.结果在20年中,子宫颈癌的死亡率由70年代的10.7/10万下降至90年代的3.89/10万,下降了63.64%,构成比由15.19%下降为4.86%,在恶性肿瘤中所占的位次自70年代的第3位降至90年代的第6位.但是,下降趋势不均匀,仍然有一些高危地区(大多分布在我国中西部农村地区)子宫颈癌的死亡率下降不明显或保持不变,有些地区,如甘肃武都及山西阳城甚至达到世界高水平.尽管城乡两地均呈现出显著的下降趋势(P=0.001),但城乡之间仍存在较大的差异.90年代的资料显示在城市年轻的妇女中子宫颈癌有较陡的上升趋势.结论我国子宫颈癌在20年中呈现明显的下降趋势,但它仍然是困扰我国广大妇女,尤其是农村妇女的主要健康问题.新世纪我国预防与控制子宫颈癌的重点应放在中西部农村地区及城市中的年轻妇女.

hTERT启动子调控下HSV-tk/GCV系统对人卵巢癌细胞系Skov3的杀伤作用

目的探讨hTERT启动子驱动下的HSV-tk/GCV系统对人卵巢癌细胞系Skov3的体外杀伤作用.方法应用分子生物学方法构建hTERT启动子调控下的tk基因真核表达载体pBTdel-279-tk,并应用脂质体转染法将之转入Skov3、正常人卵巢上皮细胞(NOEC)和人胚肺成纤维细胞中,加入GCV,用MTT法和流式细胞术检测pBTdel-279-tk/GCV系统对各种细胞的杀伤作用;应用RT-PCR法检测pcDNA3-tk和pBTdel-279-tk转染前后卵巢癌细胞和正常细胞中tk基因的表达情况.结果pBTdel-279-tk/GCV对端粒酶阳性的卵巢癌细胞有明显的杀伤作用,而对端粒酶阴性的正常细胞则无;hTERT启动子系统诱导卵巢癌细胞凋亡的效能与CMV启动子近似,两者差别无显著性意义.pcDNA3-tk转染后,在Skov3细胞和NOEC中均可探测到tk基因;而pBTdel-279-tk转染后只有Skov3可探测到tk基因,NOEC中则无.结论hTERT启动子调控下的tk基因治疗是一种新的卵巢癌靶向治疗方法,具有更高的特异性和高效性.

卵巢恶性肿瘤保留生育功能手术后化疗对卵巢功能的影响

目的探讨卵巢恶性肿瘤患者接受保留生育功能的手术后化疗对卵巢内分泌功能的影响.方法卵巢恶性肿瘤患者,观察保留生育功能手术后化疗对其月经情况及血清性激素水平变化的影响.结果15例保留生育功能的手术后化疗患者中13例出现月经异常(86.7%),其中12例发生停经(80%),1例为月经减少(6.7%).发生停经的患者,化疗结束后月经恢复;月经恢复时间在化疗结束后2个月左右.发生停经的患者在停经期间血清黄体生成紊(LH)和促卵泡激素(FSH)明显升高,雌二醇(E2)明显降低;雄、孕激素无明显变化;结论年轻妇女卵巢恶性肿瘤,行保留生育功能的手术后化疗,可发生卵巢功能损害,发生率超过80%;卵巢功能损害表现为血清促性腺激素浓度升高,雌激素浓度降低,停经或月经异常;化疗导致的停经是可逆的.

卵巢癌抗独特型微抗体主动免疫治疗卵巢癌动物实验

目的用模拟人卵巢癌抗原并有满意免疫原性的抗独特型微抗体进行临床前动物实验研究.方法将已构建的抗独特型微抗体融合基因在大肠杆菌进行表达,用Western blot、竞争抑制ELISA进行微抗体活性测定.20只人淋巴细胞免疫功能重建的荷卵巢癌腹腔瘤SCID小鼠分2组,10只用微抗体免疫后取血采用间接ELISA检测Ab3.观察小鼠腹腔积液生成时间、生存期,取脾做流式细胞分析CD4+、CD8+.结果在宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功诱导表达出微抗体,Western blot结果表明微抗体可同时与COC166-9(6B11的一抗)及羊抗人的IgG1反应.竞争抑制ELISA表明微抗体可模拟原始抗原与一抗结合.微抗体免疫小鼠后可诱导产生Ab3,在末次免疫14 d时高,持续6周降至对照组水平;CD4+/CD8+在末次免疫13 d达高值.对照组和微抗体治疗组小鼠分别在(37.7±5.5)d和(48.6±14.3)d长出血性腹腔积液(P=0.04);两组小鼠生存期分别为(42.5±1.8)d和(59.4±16.8)d(P=0.011).结论微抗体保留了6B11scFv和人IgG的双重免疫学活性,达到了部分人源化的目的,并有满意的免疫原性,可诱导小鼠产生特异性体液免疫反应,抑制荷瘤小鼠腹腔积液的生成,延长生存期,或许将来可作为卵巢癌疫苗用于临床.

卵巢恶性畸胎瘤临床与预后

目的分析卵巢恶性畸胎瘤的临床、病理特点及预后相关因素.方法以本院1954年1月～2001年12月收治的84例卵巢恶性畸胎瘤患者为研究对象,所有患者均行手术治疗,中位随访146个月.以患者术后5、10及15年生存率为评价预后的指标,分析患者年龄、婚育状况、临床表现、临床分期、病理类型、组织学分级、肿块大小、手术方式及术后是否辅助化疗等因素与预后的关系.结果卵巢恶性畸胎瘤患者的平均年龄为(33.5±16.1)岁,主要临床症状为腹痛、腹胀,占86.9%.卵巢畸胎瘤恶变37例,卵巢未成熟畸胎瘤47例.单因素分析和多因素分析均显示临床分期为影响卵巢恶性畸胎瘤预后的主要因素,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的5年生存率分别为(87.20±4.52)%、(50.00±35.36)%、(30.55±9.43)%和0.00%(P=0.00).组织学分级1、2与3级患者的5年生存率逐渐下降,分别为(90.48±6.41)%、(68.75±11.59)%和(57.14±16.38)%,但差异无统计学意义(P=0.08).在31例死亡患者中27例(87.1%)于术后2～17个月内死亡.结论卵巢未成熟畸胎瘤在临床特点和生物学特性等方面不同于卵巢畸胎瘤恶变.对卵巢畸胎瘤恶变总的治疗原则是施行全面分期手术和肿瘤细胞减灭术,术后辅助PVB方案为主的足量化疗;对年轻的卵巢未成熟畸胎瘤患者应尽量保留生育功能以期提高患者生活质量,术后2年内应密切随访.

氟尿嘧啶脱氧核苷单药、联合方案治疗妊娠滋养细胞肿瘤患者的疗效

目的探讨氟尿嘧啶脱氧核苷(floxuridine,FUDR)单药、联合方案治疗妊娠滋养细胞肿瘤患者的疗效.方法对1999年4月～2002年12月本院74例妊娠滋养细胞肿瘤患者采用FUDR单药、联合方案化疗,其中侵袭性葡萄胎47例,绒癌27例;Ⅰ期33例,Ⅱ期3例,Ⅲa期31例,Ⅲb期6例,Ⅳ期1例.21例系对5-FU或MTX单药、联合方案出现耐药后而改用FUDR单药、联合方案患者.结果74例患者中,通过FUDR单药、联合方案获治愈68例(91.9%),其中21例对5-FU或MTX单药、联合方案耐药而改用FUDR单药、联合方案的患者均获完全缓解,7例Ⅲb期以上的晚期患者亦均获治愈.FUDR单药、联合方案的主要副反应为骨髓抑制和胃肠道反应,其中Ⅲ～Ⅳ度粒细胞减少占26%,Ⅲ～Ⅳ度血小板减少占6.2%,Ⅲ度恶心呕吐占57.1%,Ⅲ度腹泻占4.3%.结论FUDR单药、联合方案治疗妊娠滋养细胞肿瘤可达满意的临床效果,对其他药物耐药或晚期病例也可获得满意的疗效.

早期妇科恶性肿瘤保留生育功能的治疗

目前肿瘤患者的存活率不断上升,越来越多的患者要求保留生育功能.本文就早期妇科恶性肿瘤保留生育功能的治疗进展予以综述,并重点介绍根治性子宫颈切除术治疗子宫颈癌、激素治疗早期子宫内膜癌、早期上皮性卵巢癌的保守手术以及治疗后的助孕技术的应用.

光动力学治疗及其在妇科肿瘤中的应用

光动力学治疗肿瘤时,光敏剂选择性聚集在肿瘤组织中,给予合适波长的激光,产生光化学效应,造成肿瘤组织的损伤.光动力学治疗具有良好的肿瘤组织选择性、有效的光化学杀伤作用和较小的副作用,在妇科肿瘤的诊断和治疗中具有广泛的应用前景.目前已应用于下生殖道癌前病变、原位癌和晚期恶性肿瘤,如外阴癌、卵巢癌等的诊断和治疗.

妇科恶性肿瘤放射疗法现状

介绍妇科恶性肿瘤的放射治疗,包括其重要性、治疗方法、治疗效果以及面临的几个重要问题.

妇科肿瘤疫苗的研究进展

肿瘤疫苗是妇科恶性肿瘤免疫治疗研究的热点之一.卵巢癌疫苗均为治疗性疫苗,主要包括克隆抗原疫苗、肿瘤细胞疫苗、基因工程肿瘤细胞疫苗、树突状细胞疫苗、抗独特型疫苗.子宫颈癌疫苗包括以人乳头瘤病毒为基础的多肽疫苗、载体疫苗、融合蛋白疫苗和嵌合疫苗及树突状细胞疫苗等治疗性疫苗和人乳头瘤病毒预防性疫苗.而子宫内膜癌疫苗报道很少.

妇女宫颈涂片检查行为的影响因素

本研究通过对中国和澳大利亚3组人群的受教育程度、职业和婚姻状况,以及宫颈涂片情况的调查分析,探讨社会经济因素对宫颈涂片行为的影响.

卵巢内膜异位囊肿恶性变生物学行为的变化

为进一步了解卵巢内膜异位囊肿恶性变情况,本文分析2000～2001年在本院诊治的卵巢内膜异位囊肿恶性变11例患者生物学行为的变化.

年轻妇女子宫内膜癌的临床病理特点与预后

为探讨年轻妇女子宫内膜癌的临床病理特点与预后,将本院1979年4月～1996年12月经手术治疗的307例子宫内膜癌进行分组,A组≤40岁,共41例;B组＞40岁,共266例,将A组的临床病理特点及预后与B组作对比分析.

女性生殖道癌瘤的前哨淋巴结

为减少常规根治性妇科手术并降低病死率,在女性生殖道癌瘤中业已尝试前哨淋巴结诊治技术.前哨淋巴结确认可采用淋巴图或淋巴系闪烁造影术.外阴癌与子宫颈癌淋巴转移常顺序发生,前哨淋巴结确认能避免未发生转移患者进行不必要的根治性手术.这一新技术包括肿瘤"超分期"、多步分层切片及免疫组化染色,该技术的应用使淋巴转移的检测更为准确,阳性率更高.前哨淋巴结预测淋巴转移的准确性与切除疗效还有待长期随诊观察.

二十一世纪的妇科肿瘤

21世纪是信息的时代,是数字化的时代.随着分子生物学、临床药理学、放射治疗学、材料科学和人文科学的不断发展和渗人,妇科肿瘤学的内容将日新月异.21世纪更应重视妇科肿瘤的普查和预防,用循证医学指导临床决策,妇科肿瘤治疗应更加规范化和人性化,高新技术将不断用于诊断和治疗,并应注重医患交流的学习和研究.

外阴浸润癌的治疗

外阴癌是特殊部位的表皮癌,占女性生殖道癌的3%～5%[1].其临床疗效较好,经本院系统治疗的外阴癌患者的总5年生存率为75%[2].

晚期卵巢癌患者肺栓塞猝死临床病理讨论

患者60岁,腹部胀痛1个月,开腹手术诊断为卵巢透明细胞癌Ⅲc期,G2.在满意的肿瘤细胞减灭术后,辅以紫杉醇和卡铂联合周疗.第Ⅰ疗程后,发生脑梗死.第Ⅲ疗程后出现呼吸困难,休息可缓解;3d后夜间活动突然呼吸困难,死于呼吸循环衰竭.尸检:卵巢透明细胞癌盆腹腔广泛转移,巨块型肺动脉血栓栓塞(血栓长20cm),脑梗死.妇科恶性肿瘤患者在围手术期和化疗过程中属于静脉血栓形成和肺栓塞的危险人群,应该适当给予预防性抗凝治疗.

子宫内膜癌热点问题专家讨论会

主持人中山大学肿瘤医院妇科李孟达教授主要讨论内容1.子宫内膜癌诊断与治疗中存在的问题;

<中国医学科学院学报>稿约