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辣椒红:提高质量是关键
辣椒红是从辣椒中提取的类胡萝卜素系色素,它是辣椒色素(辣椒红色素、甜椒红色素和辣椒橙色素)中应用较广的一种.辣椒红的主要成份为属于叶黄素类的辣椒红素(C40H56O3)、辣椒玉红素和β胡萝卜素.辣椒红不溶于水,但易溶于油脂;有较好的耐酸性和耐热性(160℃加热2h几乎不褪色),但耐光性略差;着色力强,并且因稀释浓度不同,色调可由红色至浅黄色再至橙黄色.辣椒红有油状和粉状之分,主要用于食品(罐头、冰淇淋、雪糕、饼干、熟肉制品等),药品,化妆品的着色.
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变形链球菌耐酸性缺陷株的构建
变形链球菌(简称变链菌)是主要的致龋菌,耐酸性是其关键的毒力因子,但对其基因调控机制并未明了.本实验欲用转座子Tn917随机诱变变链菌野生株UA159,筛选耐酸性变异的突变株,以便于找到一个与耐酸性相关的调控基因.
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变异链球菌F-ATPase亚基β基因多态性及表达研究
目的 研究变异链球菌(Streptococcus mutans,简称变链菌)临床分离株耐酸因子F-AT-Pase亚基β结构基因uncD的遗传多态性和mRNA表达水平差异,探讨其与细菌耐酸力的关系.方法 实验株包括18株高耐酸和20株低耐酸变链菌临床株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncD,行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和测序比较;应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件,对20株不同基因型和不同耐酸力变链菌uncD基因的mRNA表达水平进行评价和比较.结果 AluⅠ-RFLP产生A、B基因型,测序证实导致多态出现的基因变异不在uncD的功能区和催化结构域;这两种基因型在不同耐酸力菌株的分布不同(P＜0.05),高耐酸性菌株中A型基因uncD的检出高于低耐酸力菌株.不同耐酸力菌株uncD的mRNA表达水平不同(P＜0.05),但A、B两基因型菌株uncD的mRNA表达差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 F-ATPase的β亚基基因具有明显的遗传多态性,基因型和mRNA表达水平的多态性与菌株的耐酸力有一定的关系,虽然β亚基基因功能区高度保守,但在酸耐受适应中,仍表现为F-ATPase较活跃上调的亚基基因.
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幼儿龋和无龋牙菌斑中白色念珠菌临床分离菌株的致龋性
目的 探讨幼儿龋(early childhood caries,ECC)和无龋(caries-free,CF)牙菌斑中白色念珠菌临床分离菌株导致幼儿龋的差异性.方法 将前期研究中保存的3～6岁幼儿牙菌斑白色念珠菌临床分离菌株,其中来源于幼儿龋牙菌斑为26株(dmft≥1),纳入ECC组;来源于幼儿无龋牙菌斑为24株(dmft=0),纳入CF组.将两组菌株分别接种至不同 pH 值的葡萄糖沙氏液体培养基中,37℃培养48 h后,测定上清液终末pH值以评价产酸能力;分别将两组菌株沉淀用PBS液重悬,采用紫外分光光度仪测定波长540 nm处的吸光度(absorbance 540,A[540])值以评价其耐酸能力.同时将菌液分别接种至羟基磷灰石表面,37℃培养48 h后,对黏附至羟基磷灰石表面白色念珠菌进行平板培养,采用菌落形成单位计数法评定其黏附能力.结果 当葡萄糖沙氏液体培养基初始pH值≥4.5时,ECC组和CF组白色念珠菌株的产酸和菌株生长能力比较,差异无显著意义(P>0.05);当初始 pH 值为4.0时,ECC组的产酸和生长能力较CF组强,两组比较,差异有显著意义(P<0.05).ECC组和CF组白色念珠菌的黏附能力比较,差异无显著意义(P>0.05).结论 幼儿龋和无龋牙菌斑中白色念珠菌临床分离菌株致龋能力的差异,主要体现在耐酸能力方面.强耐酸性白色念珠菌临床分离菌株可能起到促进幼儿龋齿发展的作用.
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变形链球菌耐酸性相关基因的初步研究
目的寻找一个新的与变形链球菌耐酸性相关的基因.方法 Tn917随机诱变变形链球菌UA159,筛选在pH值为5.0不能生长的突变株,对比其与野生株在不同pH值时的生长、糖酵解耐酸性和致死性pH值.不对称PCR法获得Tn917插入位点附近的基因片段,测序并分析. 结果筛选出一株耐酸性缺陷株b23.b23在低pH值的生长及糖酵解耐酸性均低于UA159,致死性pH值高于UA159.Tn917插入位点在UA159的第996 123个碱基处.结论构建了一株变形链球菌耐酸性缺陷株b23,发现了一个新的与其耐酸性相关的基因.
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放射性龋患者唾液中变形链球菌的产酸性及耐酸性
目的 探讨放射龋患者与健康无龋者唾液中变形链球菌致龋性的差异.方法 从放射性龋患者(实验组)及健康无龋者(对照组)唾液中分离培养的变形链球菌各20株,将其接种至不同pH值(以0.5为间隔,pH.4.0～7.0)的PYG液体培养基中,37℃、厌氧(80% N2、10% H2、10% CO2)条件下培养48 h.pHS-25型精密酸度计测定培养物上清的终末pH值,比较产酸能力(△pH值);将菌沉淀用PBS液重悬,紫外分光光度计测定600 nm处吸光度A值,比较细菌的生长情况.结果 初始pH>5.5时,实验组组和对照组的△pH值及生长情况无统计学差异(P>0.05);pH=5.0时,实验组和△pH值及生长情况明显高于于对照组(P<0.05);pH<5时,所有的变形链球菌分离株均不能生长.结论 放射性龋者唾液中变形链球球菌临床分离菌株具有较强的产酸性和耐酸性.
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htrA、clpP基因缺失对变异链球菌耐酸性的影响
目的 探讨htrA、clpP基因缺失对变异链球菌耐酸性的影响.方法 变异链球菌标准株及htrA缺陷株、clpP缺陷株培养至对数中期分成两组,一组作为实验组进行5 h预酸化处理(pH:5.5),一组作为对照组在普通乳酪消化胨酵母(TPY)培养液中处理5 h,然后将两组菌株在致死性酸环境(pH:3.0)处理3 h,每隔1 h取菌液采用平板活菌计数法测定活菌数,计算得到生存率,统计学分析.结果 3 h内.未经预酸化处理三种菌株生存率相比差异无统计学意义(P>0.05),预酸化处理后,与标准株相比htrA缺陷株和clpP缺陷株生存率都有下降(P<0.05),两种缺陷株相比生存率差异无统计学意义(P>0.05),预酸化处理的标准株和htrA缺陷株生存率均明显高于未经预酸化处理(P<0.05),预酸化处理对生存率的影响大于两种基因分别缺失(P<0.05).结论 与变异链球菌标准株相比,htrA缺陷株和clpP缺陷株耐酸能力有不同程度的下降.
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老年人高龋患者牙菌斑中变形链球菌临床分离株耐酸能力的研究
目的:分析老年人高龋患者牙菌斑中,变形链球菌临床分离株(血清型C)在酸性条件下生存的耐酸能力.方法:体外培养从老年人高龋患者、无龋者牙菌斑中分离的101种不同基因型变形链球菌株临床分离株(血清型C),检测菌株在不同的pH条件下的耐酸能力.结果:老年人高龋患者口腔中分离出的变形链球菌临床分离株耐酸能力明显高于无龋组,与国际参考菌株无明显的统计学差异.同时研究发现,在老年人高龋患者同一个体的口腔中,变形链球菌临床分离株耐酸能力存在明显差异.结论:老年人高龋患者牙菌斑中变形链球菌临床分离株(血清型C)的高致龋性,与其携带有耐酸能力强的菌株关系密切.
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酸性条件下变异链球菌临床株表面相关蛋白表达差异分析
目的：探讨变异链球菌临床株在pH7.0和pH5.0条件下的表面相关蛋白表达差异，进一步了解龋病发生和发展过程。方法采用Homer法提取593和18号（593号菌株分离于高发龋患者，18号菌株分离自无龋健康人）临床分离株在pH7.0和pH5.0条件下的表面相关蛋白，经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和二维电泳确定蛋白表达的差异条带及位点，差异位点由基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析，并结合数据库进行检索和鉴定蛋白质。结果经过对电泳图谱的分析发现，两菌株在pH7.0条件下存在4个高表达位点和2个特异位点；在pH5.0条件下存在2个高表达位点和2个特异位点。593号菌株蛋白表达又发生了特殊的变化，即在pH5.0条件下，存在3个高表达位点和6个特异位点，其中双组分信号传导系统组氨酸激酶Lyts和3-磷酸甘油醛脱氢酶高表达，NADH氧化酶特异表达。结论两菌株在酸性变化下均出现了某些蛋白的高表达和特异表达，可能两菌株耐酸反应中存在相似之处；两菌株间蛋白表达差异可能是耐酸性存在差异的原因。
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变形链球菌的适应性耐酸能力
目的研究变形链球菌的适应性耐酸能力及其相关生理变化.方法通过测定在各种酸性pH值培养基中预酸化两小时后,能否使变形链球菌UA159抵抗致死性pH值的杀伤而存活及存活率,来测定适应性耐酸能力的有无及大小;氯霉素对该能力的影响可用来判断有否新蛋白的产生;用pH下降实验来测定产酸的改变.结果变形链球菌UA159属强适应性耐酸能力类菌株,大生存率(9.89%)出现在pH5.5预酸化组.适应性耐酸能力的产生与蛋白质的合成密切相关.酸适应能增加细菌的产酸能力.结论在亚致死性pH值中生长能引发链球菌的某些生理变化,产生适应性耐酸能力,抵抗酸性环境的杀伤作用.
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克拉霉素的临床应用
克拉霉素是红霉素结构改造的衍生物,是新一代14元环半合成的大环内酯类抗生素.大环上第6位的特殊结构,决定其具有良好的药效学和超群的药代力学特性,不仅克服了红霉素副作用和耐受性差的缺陷,而且使其抗菌性、抗菌谱得到改善,其耐酸性是现有大环内酯类药物中强的,因此临床适用性显著提高.
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温度和渗透应激对植物乳杆菌稳定性的影响
在植物乳杆菌对数期后期,高温(43～47℃)、低温(15～25℃)及10～30 g/L NaCl等应激处理60min均可使植物乳杆菌耐热性和耐酸性得到较大的提高.其中,尤以高温应激45℃应激处理效果好,细胞耐热残存率和耐酸残存率较对照分别提高124%和56.8%.
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真正的纳豆不仅仅是溶栓
真正的纳豆除了纳豆激酶还应含有其它营养成分,如纳豆菌、大豆异黄酮、皂甙等多种有效成分.纳豆的神奇离不开它们,下面我们就针对纳豆中的一些其它主要成分及功能做一个简单介绍.首先,我们来了解一下纳豆菌.纳豆菌和一般益生菌大的不同是耐酸性,可以顺利通过胃液到达肠内,增强以厌氧菌为优势菌群的肠道正常菌群的生长.抑制有害需氧菌的生长,使肠道内的菌群达到一个有利于健康的动态平衡,改善便秘、肠炎、腹泻等肠道问题.纳豆菌还可以产生多种酶类,促进身体对营养物质的吸收,增强机体免疫功能;纳豆菌还能产生多种营养物质,如维生素、氨基酸、促生长因子等,参与机体的生长代谢.
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ffh基因沉默对变形链球菌耐氟菌株耐酸性的影响
目的:分析ffh基因沉默对变形链球菌耐氟菌株体外耐酸能力的影响.方法:利用电穿孔法,将siRNA转入UA 159-FR,使其与ffh基因靶向位点结合,筛选出含ffh基因沉默的变形链球菌耐氟菌株,与UA159-FR的标准菌液分别在不同pH值(以0.5为间隔,pH为3.5～7.5)的BHI液体培养基中37℃微需氧(95％N2、5％CO2)培养24 h,离心,采用pH计测定培养物上清的终末pH值;5 mL生理盐水稀释细菌沉淀,用紫外分光光度计测定600 nm处的吸光度,采用SPSS 17.0软件包对所得数据进行统计学分析.结果:原菌株UA159-FR与ffh基因沉默的变形链球菌UA 159-FR相比,△pH差异显著(P＜0.05),且前者高于后者.两者比较pH=3.5～5.0时,OD600有显著差异(P＜0.01);pH=5.5～7.5时,OD600有显著差异(P＜0.05),且两者生长趋势相似.结论:ffh基因沉默对变形链球菌耐氟菌株的耐酸性有一定影响.
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变形链球菌耐氟菌株与亲代菌株质子移位膜ATP酶活性的比较
目的:通过测定并比较变形链球菌耐氟菌株及其亲代菌株体内质子移位膜ATP酶的活性,以阐明耐氟菌株耐酸能力提高的原因.方法:将变链菌株Ingbritt及其耐氟突变株Ingbritt-FR通过甲苯处理,2个循环的液氮冷冻和37℃解冻,制成透性细胞.将透性细胞悬液加到含有10mmol/L MgSO4的50mmol/L Tris-maleate测试缓冲液中(pH6.0),加温至37℃,再加入5mmol/L ATP(pH 6.0)起动反应.分别于10、20、60min取样,测定样品中水解ATP所释出的无机磷量.采用磷钼酸比色法在紫外分光光度计上进行比色分析(660nm),所得数据采用双因素方差分析.结果:在10、20和60min时,耐氟菌株H+_ATP酶活性分别为308.48、136.67和82.80μmol Pi/g细胞干重/min,显著高于亲代菌株的相应酶活性:104.77,、64.69和30.70(P＜0.01).随时间推移,两类菌株的H+_ATP酶活性均逐渐降低,在酶的作用时间差别上有统计学意义(P＜0.01).结论:耐氟菌株ATP酶活性增高为其耐酸性增高的原因;H+_ATP酶活性及耐酸性的增高将会增加变链菌耐氟菌株的致龋潜能.
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影响异烟肼疗效的常见中药及食物
异烟肼(INH)是目前抗结核病中有效的第一线药物.一些食物及耐酸性中药可干扰或延误其吸收,产生不良反应,应当引起重视.
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HPLC法测定青霉素V钾片的含量
由于青霉素V钾片的耐酸性及口服吸收快等优点,近年来国内对其应用已日渐广泛.青霉素类的HPLC法测定国内已见报导.美国药典24版采用稀醋酸-乙腈为流动相测定青霉素V钾片的含量;中国药典二版则仍采用硫醇汞盐分光光度法进行测定,操作较繁,误差较大.鉴于此,本文建立了一种不同于美国药典的HPLC测定方法,结果令人满意.
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海藻酸钠包埋双歧杆菌制备新技术
目的：探讨海藻酸钠包埋技术制备双歧杆菌微胶囊的耐酸性及活菌存活率。方法以黄原胶包裹菌体形成耐酸保护层，再用海藻酸钠进行外层包埋，采用挤压固化法制备双歧杆菌微胶囊，评估包埋后双歧杆菌经人工胃液处理30 m in的存活率。通过正交试验，确定双歧杆菌微胶囊化的效果。结果黄原胶浓度为5．0％，海藻酸钠浓度为1．5％，氯化钙浓度为2．5％，固化时间为30 min时，人工胃液处理30 min后双歧杆菌存活率为64．6％。结论以黄原胶和海藻酸钠为壁材，采用挤压法制备双歧杆菌微胶囊对活菌有保护作用，能有效提高活菌体的耐酸性和存活率。
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变异链球菌致龋性及酸性压力对其HtrA表达情况的影响
目的:探讨变异链球菌株HtrA的表达与其致龋性和耐酸性的关系.方法:收集了不同龋敏感性儿童口腔分离的变异链球菌共36株(高、低、无龋各12株),通过RT-PCR的方法对所有菌株HtrA的mRNA的表达水平进行了检测；此外,还检测了在分别含有10、20 mmol/L乳酸的培养基中生长的变异链球菌UA159菌株HtrAmRNA的表达变化.结果:高龋、低龋及无龋儿童口腔变异链球菌临床分离株HtrA mRNA表达存在差异,高龋组＞低龋组＞无龋组,差异具有统计学意义(P＜0.01)；酸性环境下变异链球菌中HtrA mRNA的表达水平也发生了明显上调(P＜0.01).结论:HtrA基因的表达与变异链球菌的致龋性和耐酸性有着一定的相关性.
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猛性龋儿童变链菌分离株耐酸性实验研究
目的:确定猛性龋儿童变链菌和远缘链球菌临床株的耐酸性.方法:采用紫外分光光度计比较猛性龋、非猛性龋、无龋儿童变链菌(各6株)和远缘链球菌(猛性龋儿童6株,非猛性龋和无龋儿童各3株)临床株在体外不同初始pH条件下的生长情况.结果:初始pH 4.5～5.5条件下,各组变链菌生长抑制程度均明显大于远缘链球菌(P<0.05).初始pH 4.5条件下,猛性龋儿童远缘链球菌分离株耐酸性明显强于非猛性龋和无龋儿童分离菌株(P<0.05).结论:远缘链球菌的耐酸性强于变链菌;猛性龋儿童远缘链球菌分离株耐酸性强.
