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ffh基因沉默对变形链球菌耐氟菌株耐酸性的影响
目的:分析ffh基因沉默对变形链球菌耐氟菌株体外耐酸能力的影响.方法:利用电穿孔法,将siRNA转入UA 159-FR,使其与ffh基因靶向位点结合,筛选出含ffh基因沉默的变形链球菌耐氟菌株,与UA159-FR的标准菌液分别在不同pH值(以0.5为间隔,pH为3.5~7.5)的BHI液体培养基中37℃微需氧(95%N2、5%CO2)培养24 h,离心,采用pH计测定培养物上清的终末pH值;5 mL生理盐水稀释细菌沉淀,用紫外分光光度计测定600 nm处的吸光度,采用SPSS 17.0软件包对所得数据进行统计学分析.结果:原菌株UA159-FR与ffh基因沉默的变形链球菌UA 159-FR相比,△pH差异显著(P<0.05),且前者高于后者.两者比较pH=3.5~5.0时,OD600有显著差异(P<0.01);pH=5.5~7.5时,OD600有显著差异(P<0.05),且两者生长趋势相似.结论:ffh基因沉默对变形链球菌耐氟菌株的耐酸性有一定影响.
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血链球菌和变形链球菌耐酸相关基因ffh的同源性分析
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口腔链球菌和变形链球菌耐酸相关基因ffh的同源性分析
目的 检测口腔链球菌中是否存在耐酸相关基因,并对口腔链球菌和变形链球菌的ffh同源性进行分析.方法 厌氧培养变形链球茵和口腔链球菌,试剂盒提取细菌基因组,根据GenBank基因库上发表的各种属ffh基因序列,从保守区设计1对聚合酶链反应(PCR) 引物,进行PCR.结果在以变形链球菌和口腔链球菌基因组为模板的PCR中,所获得的特异性片段与预期结果一致.结论口腔链球菌中存在耐酸相关ffh基因,且口腔链球菌和变形链球菌耐酸相关基因ffh同源性高.