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变异链球菌F-ATPase亚基β基因多态性及表达研究
目的 研究变异链球菌(Streptococcus mutans,简称变链菌)临床分离株耐酸因子F-AT-Pase亚基β结构基因uncD的遗传多态性和mRNA表达水平差异,探讨其与细菌耐酸力的关系.方法 实验株包括18株高耐酸和20株低耐酸变链菌临床株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncD,行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和测序比较;应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件,对20株不同基因型和不同耐酸力变链菌uncD基因的mRNA表达水平进行评价和比较.结果 AluⅠ-RFLP产生A、B基因型,测序证实导致多态出现的基因变异不在uncD的功能区和催化结构域;这两种基因型在不同耐酸力菌株的分布不同(P＜0.05),高耐酸性菌株中A型基因uncD的检出高于低耐酸力菌株.不同耐酸力菌株uncD的mRNA表达水平不同(P＜0.05),但A、B两基因型菌株uncD的mRNA表达差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 F-ATPase的β亚基基因具有明显的遗传多态性,基因型和mRNA表达水平的多态性与菌株的耐酸力有一定的关系,虽然β亚基基因功能区高度保守,但在酸耐受适应中,仍表现为F-ATPase较活跃上调的亚基基因.
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变形链球菌临床株F-ATPase亚基基因uncEBF在mRNA水平的表达
目的:研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase c、a、b亚基联合基因uncEBF在mRNA水平的表达差异,探讨基因表达水平与细菌耐酸力以及uncEBF基因型的关系.方法:应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对18 株来自不同基因型和不同耐酸力变链菌的uncEBF基因表达水平进行评价,以SPSS 11.0软件分析和比较mRNA表达的差异.结果:不同基因型及不同耐酸力菌株uncEBF的mRNA表达水平不同(P<0.05), 表现为A基因型uncEBF表达高于B基因型,高耐酸力菌株uncEBF表达高于低耐酸力菌株.结论:变链菌不同基因型uncEBF基因的表达水平不同,表达水平高低与菌株的耐酸力相关.
