糖尿病大鼠视网膜双极细胞GABA受体活动增强

目的:探讨GABA受体在糖尿病视网膜病变中的作用.方法:采用链脲佐菌素诱导的糖尿病鼠模型,通过膜片钳技术,分析视网膜双极细胞GABA受体活动.结果:与正常对照组相比,糖尿病鼠视网膜双极细胞GABA受体活动上调,剂量-反应关系曲线左移.结论:糖尿病视网膜病变中,GABA受体的活动得到增强.

小鼠视网膜片层化及神经干细胞的增殖与分化

目的 通过观察小鼠视网膜神经干细胞增殖与双极细胞分化过程,研究视网膜的发生及片层化.方法 应用免疫荧光、5’-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)检测技术和HE染色法对胚胎及出生后小鼠视网膜形态结构及神经干细胞的增殖、分化进行观察,对视网膜BrdU和蛋白激酶Cα(PKC-α)阳性细胞密度进行统计.结果 1.小鼠视网膜在胚胎时期分化出色素上皮层、神经母细胞层和神经节细胞层.出生后,神经母细胞层逐渐分化出各个层,至小鼠睁眼时基本分化完全.2.小鼠视网膜干细胞在胚胎期大量增殖,出生后增殖放慢并逐渐分化为各类细胞.经统计分析发现,视网膜干细胞在胚胎时期数量逐渐增多,到出生当天数量达到大值,出生后,神经干细胞开始分化,数量逐渐减少.3.小鼠视网膜双极细胞从出生后第5天(P5)开始发育,至P20时发育完全.结论 小鼠视网膜的片层化与其功能的成熟相一致,视网膜的神经干细胞在出生后前期为分化高峰期,逐渐分化为不同类型的细胞.P10以后仅在睫状体处存在神经干细胞,可能与成年以后的修复功能相关.

孕期酒精暴露对子鼠视网膜双极细胞和水平细胞发育的影响

目的 探讨孕期酒精暴露对子鼠视网膜双极细胞和水平细胞发育的影响.方法 建立孕期酒精暴露小鼠模型;采用免疫荧光染色和DiI散射技术,观察酒精对日龄7d(P7)、P14和P30子鼠视网膜双极细胞和水平细胞的影响.结果 各年龄组中,酒精组视网膜双极细胞的密度明显低于对照组,且呈剂量依赖性和长时程效应;水平细胞的树突野及树突数也明显低于对照组,呈剂量依赖性和长时程效应(P<0.01).结论 孕期酒精暴露影响子鼠视网膜双极细胞和水平细胞的发育.

视网膜双极细胞的突触传递

双极细胞是视网膜中处于信号传递的直接通路中的中间神经元，以带型突触传递由分级电位编码的视觉信号。近年来，应用膜电容测定、钙荧光成像等技术，对双极细胞递质释放的特点及动力学特性进行了细致的研究，不仅有助于阐明这些细胞独特的生理功能，也对了解以带型突触传递信号的感觉神经元的功能特性提供了启示。

全细胞膜片钳技术在视网膜神经元电压门控离子通道研究中的应用

了解视网膜各种神经元神经电信号特点、产生机制及影响因素，对从功能角度评价视网膜神经细胞培养状态和移植效果具有重要意义。本文介绍一种先进的电生理学研究方法——全细胞膜片钳法在视网膜神经生理学中的应用，以及通过该方法对视网膜神经节细胞、双极细胞、水平细胞和无长突细胞部分电压门控离子通道进行研究所取得的进展。

哺乳动物双极细胞生理构造及功能比较研究进展

视网膜双极细胞是哺乳动物视觉系统信号通路的中间神经元,它接受光觉感受器(视锥细胞,视杆细胞)的信号输入,在整合信息后传递至无长突细胞和神经节细胞.近年来研究显示,通过免疫组化技术,以及生物物理学、药理学、膜电容测定、荧光生物传感器和双光子显微镜等技术,可以更为全面的了解视觉传导过程中涉及的神经元整个类别.在此,本文主要综述通过免疫组化等方法比较不同哺乳动物视网膜双极细胞独特生理结构和功能的特性及其突触重塑方面相关研究进展.

再论治疗黄斑裂孔的要点

黄斑中心凹是黄斑薄部位,视细胞层几乎直接处在内界膜下,使其易于接受光刺激[1].黄斑中心凹只有视锥体细胞,每平方毫米约有15万个,每个视锥体细胞仅和一个双极细胞连接,每个双极细胞又仅和一个神经节细胞连接,视觉神经要素结构直线连结是中心凹一大特点.

长期乙醇摄入致C57BL/6J小鼠胰岛素抵抗后对视网膜双极细胞的影响

目的:长期摄入乙醇诱导胰岛素抵抗对C57BL/6J小鼠视网膜双极细胞的影响.方法:选取C57BL/6J小鼠96只,建立长期乙醇暴露诱导胰岛素抵抗模型.建模成功后,利用免疫印迹检测各组小鼠视网膜胰岛素受体底物2 (IRS2)和核因子κ-B(NF-κB)的相对表达量,并利用免疫组织化学观察视网膜双极细胞变化.结果:长期乙醇暴露导致小鼠胰岛素抵抗,且具有剂量依赖性,乙醇暴露后小鼠视网膜IRS2蛋白表达量减少,而NF-κB蛋白表达量增加,有剂量依赖性.同时,乙醇暴露使得视网膜双极细胞数量减少.结论:长期乙醇暴露引起小鼠机体胰岛素抵抗,推测在视网膜中,氧化应激损伤通过降低IRS2蛋白表达量来诱导视网膜胰岛素敏感性下降,从而损伤视网膜双极神经元.

非视觉感光系统的研究进展

自从人们研究感光系统以来,对于视网膜内主要细胞的功能已经有了一定的了解,一般认为:经典感光细胞(即视杆细胞和视锥细胞)对光线敏感并且其视色素发生相应化学变化;双极细胞是联系感光细胞与视网膜节细胞(RGCs)的中间神经元;而节细胞作为视网膜的第一级输出神经元,产生可以传导的动作电位,对来源于上一级神经元的信号进行整合与传递.这些认识一直占据着主导地位,但是2002年Science杂志刊登了有关非视觉感光系统(non-visual photosensitive system, NVPS)的两篇研究论文\[1,2\],打破了传统的视网膜内各主要细胞的分工,让我们重新审视我们的眼睛以及它所具有的功能.

鲫鱼视网膜ON型双极细胞的轴突末梢中不存在ryanodine受体门控的钙库

以前结果表明,ryanodine受体(ryanodine receptors,RyRs)门控的咖啡因敏感的钙库和钙引钙释放(Ca2+-induced Ca2+release,CICR)机制存在于鲫鱼视网膜ON型双极细胞的胞体中[1].采用RyRs的免疫细胞化学方法和细胞内钙测量技术,我们进一步研究了RyRs门控的钙库是否存在于这些细胞的轴突末梢中.视网膜纵切和分离细胞的免疫细胞化学研究显示,RyRs主要位于ON型双极细胞的胞体中.咖啡因浓度升至40 mmol/L在轴突末梢不能诱导钙信号.在细胞外K+浓度升至10 mmol/L引起静息[Ca2+]i轻微升高后,咖啡因在轴突末梢也不能诱导钙信号.在forskolin或多巴胺引起细胞内cAMP浓度升高,进而cAMP依赖的磷酸化增强后,咖啡因在轴突末梢仍不能诱导钙信号.此外,50 μmol/L ryanodine对65 mmol/L K+作用1 min或2 min诱导的轴突末梢的钙信号没有产生任何效应.这些结果表明,在鲫鱼视网膜ON型双极细胞的轴突末梢中不存在RyRs门控的咖啡因敏感的钙库和CICR机制.

压眼闪光眼压计与Goldmann压平眼压计的临床比较

本研究以Goldmann压平眼压计为对照,观察压眼闪光眼压计临床应用的可靠性.材料与方法一、工作原理压眼闪光眼压计的工作原理和压平眼压计是一样的,即Imber-Fick定律:眼压与所施加压力成正比,与压平的角膜面积成反比.当力作用于眼部时,会引起视网膜变形,双极细胞和光感受器细胞就会产生压眼闪光[1].

试题与答案

1.下列关于视网膜电图的说法不正确的是:A.a波起源于光感受器内段;B.b波起源于Müller细胞或双极细胞;C.视网膜血管性疾病主要表现为振荡电位降低;D.性连锁视网膜劈裂征呈现降低的a波和b波.2.下列关于角膜营养不良的说法不正确的是:A.格子样角膜营养不良是常染色体显性遗传,发病早,10岁前即已发病;B.斑状角膜营养不良,用PAS、刚果红、Masson 3种方法染色时,3项皆呈阳性反应;C.颗粒状角膜营养不良周边部2~3 mm始终保持透明;D.大多数为双眼对称性,好发于角膜中央.

孕期酒精暴露对视网膜发育及细胞分化的影响

本文旨在研究酒精暴露对视网膜的发育和细胞分化过程所造成的影响.建立C57BL/6J小鼠孕期酒精暴露模型,用HE染色和免疫荧光技术,选取P0到P30仔鼠观察视网膜的正常发育和细胞分化过程,及酒精对其造成的影响.结果显示,孕期酒精暴露可以诱导仔鼠视网膜片层化形成延迟、水平细胞和双极细胞的数量减少(P＜0.05)和极性紊乱、视网膜增厚(P＜0.01),具有酒精剂量依赖性(P＜0.05)和酒精暴露停止后的长时程效应.以上结果提示,孕期酒精暴露可引起仔鼠视觉相关神经元的数量减少及形态异常,导致视觉系统的发育障碍.

视网膜感光细胞退变过程中内层神经元结构和功能的变化

避光饲养对小鼠视网膜视杆细胞和双极细胞发育的影响

目的:探讨避光饲养对小鼠视网膜视杆细胞和双极细胞发育的影响.方法:选取健康C57BL/6小鼠,按2:1雌雄比例进行合笼饲养,仔鼠出生后,随机分成2组.对照组自然光照下饲养,避光组采取完全暗室饲养;分别收集生后P28、P42、P56子鼠视网膜进行免疫荧光染色,比较两组各时间点视杆细胞和双极细胞数量的差异.结果:避光饲养28 d后,与对照组相比,2组小鼠外网层突触带至视杆细胞层的厚度无明显差异,而P56时,避光组外网层突触带至视杆细胞层的厚度和双极细胞的数量明显少于对照组(P＜0.05).结论:避光饲养可引起视杆细胞和双极细胞的丢失,并且影响双极细胞树突的发育.

生后小鼠不同年龄阶段视网膜片层化及胶质细胞发育特点

目的:观察小鼠视网膜片层化过程中胶质细胞增殖及与双极细胞分化的关系.方法:各个年龄小鼠共计123只.应用免疫荧光和HE染色法对各个年龄的小鼠视网膜形态结构及胶质细胞的增殖、分化进行观察.结果:星形胶质细胞按照离心型的模式发育,P0时仅在视乳头和邻近周围区域出现幼稚的星形胶质细胞,尔后细胞突起相互缠绕形成的网状联系中出现中空“管样”结构,细胞形态呈现典型的星状外形,类似血管网的脉络.P6时小鼠视网膜Müller细胞零星的表达GS,双极细胞也开始表达少量的PKC-α,尔后Müller细胞GS阳性表达逐渐增加,而PKC-α阳性细胞伸向节细胞层的轴突更加密集,树突和胞体的数量也增多,P14时双极细胞的发育过程基本完成.同时,小鼠视网膜GS和PKC-α双标记,发现Müller细胞内、外突上发出许多细小的侧突与双极细胞的胞体相接触,提示Müller细胞在双极细胞的分化、迁移过程中伴着很重要的角色.结论:在小鼠视网膜片层化过程中,胶质细胞起着关键性作用,Müller细胞在双极细胞的分化、迁移过程中起重要作用.

GABA抑制鲫鱼视网膜双极细胞的轴突末梢和胞体内的钙信号

目的：研究GABA受体的激活对于鲫鱼视网膜ON-型双极细胞的胞体和轴突末梢内高钾引起的钙信号的影响．方法：急性分离的鲫鱼视网膜细胞经fluo-3AM孵育后，用激光共聚焦显微镜检测荧光变化．结果：GABA 100 μmol／L可以完全抑制双极细胞胞体和轴突末梢内高钾35 mmol／L引起的钙信号．仅激活GABA受体的一种亚型时，轴突末梢和胞体内出现了不同的结果．当GABAA受体或GABAc受体被单独激活时，尽管胞体内的钙信号仍旧被完全抑制，但轴突末梢的[Ca2+]i逐渐升高．GABA 10μmol／L仍旧可以完全抑制胞体内的钙信号且部分抑制轴突末梢内的钙信号．结论：激活GABAA和GABAc受体能够完全抑制鲫鱼视网膜ON-型双极细胞内高钾引起的钙信号．仅激活GABAA或GABAc受体时可以完全抑制胞体内的钙信号，而轴突末梢的[Ca2+]i逐渐升高，这可能与GABAA或GABAc受体的脱敏有关．