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  • 卵巢浆液性和粘液性交界瘤的临床病理分析

    作者:钟传庆;于晓红;张佳立;魏宝秀;罗兵;孙丽萍;张南;付秋风

    目的观察卵巢交界瘤的临床病理学特点,探索肿瘤不同组织学改变的意义.方法对45例卵巢浆液性和粘液性交界瘤进行回顾性分析.肿瘤分期按国际妇产科联合会(FIGO)标准,Ⅰ期34例,Ⅱ期4例,Ⅲ期7例.结果 45例卵巢浆液性和粘液性交界瘤占同期卵巢上皮恶性肿瘤的25.4%,浆液性同粘液性交界瘤的比为1∶1.3,11例生长于卵巢表面的浆液性交界瘤中,9例出现腹膜种植,2例为浸润性种植,7例为非浸润性种植.2例浆液性交界瘤和1例粘液性交界瘤分别于术后5、4和1年复发.33例交界瘤经2~9年随访,按Kaplan-Meier法5年生存率为100%.结论卵巢浆液性交界瘤预后较好,卵巢表面生长的浆液性交界瘤常伴有腹膜种植.

  • CT引导下建立兔背部肌肉VX2肿瘤动物模型

    作者:何晓锋;肖越勇;张肖;杜鹏;张欣

    目的 探讨CT引导下建立兔双侧背部肌肉内VX2肿瘤动物模型的可行性.方法 CT引导下用套管针将VX2肿瘤悬浮液注入5只新西兰大白兔腿部肌肉,作为肿瘤兔;选取20只兔,在CT引导下用穿刺活检法将肿瘤兔腿部肿瘤接种于其双侧背部肌肉内.接种后每周行CT增强扫描检查,观察肿瘤成活率、大小、种植部位满意度、影像学表现,并于14天后行穿刺活检病理学检查.结果 20只兔全部接种成功,定期增强扫描显示两侧背部孤立肿瘤逐渐变大,周边强化明显,接种后21天肿瘤内出现明显低密度液化坏死区;光镜下见组织内多灶浸润性癌巢,瘤组织间见坏死瘤细胞形态不规则,胞浆丰富,异型性明显,并可见核分裂象.种植兔未出现腹腔种植转移等并发症.结论 CT引导下新型双侧背部肌肉内VX2肿瘤动物模型成瘤率高,接种后肿瘤生长速度快,可为肿瘤微创治疗基础研究提供新型适用动物模型.

    关键词: 模型 动物 肿瘤种植
  • 动态增强MR定量监测血管靶向药物治疗结肠癌移植瘤

    作者:熊青青;段玉梅;杨朝炳;王云玲;贾文霄

    目的 应用动态增强MR(DCE-MRI)参数定量监测血管靶向类药物治疗结肠癌移植瘤的早期效果.方法 将36只接种人结肠癌HT-29细胞的裸鼠按随机数字法等分为3组,并分别腹腔注射贝伐单抗(抗血管生成药物组,10 mg/kg体质量)、考布他汀(血管破坏剂组,100 mg/kg体质量)和0.9%氯化钠溶液(对照组,100 mg/kg体质量).分别于给药前和给药后1、24、48h对实验动物行DCE-MRI扫描,分析传输常数(Ktrans)、回流常量(Kep)、血管外细胞外容积分数(Ve)和增强曲线下初始面积(iAUC).每次扫描完成后各组随机处死2只裸鼠,行HE染色及免疫组织化学染色检测瘤体微血管密度(MVD).DCE-MRI参数组间及组内不同时间的比较行方差分析;DCE-MRI参数与MVD间的关系行Pearson相关性分析.结果 裸鼠皮下结肠癌移植瘤瘤体边缘区域DCE-MRI呈显著的渐进性强化,呈高灌注,中心区域强化幅度较低,呈现低灌注改变;抗血管生成药物组和血管破坏剂组不同时间点Ktrans及Kep值差异均有统计学意义(P均<o.05);对照组肿瘤的Ktrans值差异无统计学意义(P=0.60),Kep值差异均有统计学意义(P=0.01);Ktrans和Kep值治疗前组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05).治疗后1、24、48h,相同时间Ktrans和Kep值3组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05);不同时间点抗血管生成药物组Ve值差异有统计学意义(P=0.03),治疗后24h组间比较Ve和iAUC值差异均有统计学意义(P均<0.05);抗血管生成药物组和血管破坏剂组坏死较对照组明显,血管内皮较对照组稀疏.MVD计数与Ktrans和Kep值呈正相关(r=0.66、0.71,P均<0.05).结论 DCE-MRI参数Ktrans和Kep能及时准确地监测到肿瘤血管靶向药物治疗后的效果,或可指导临床方案的制定.

  • 腹腔镜肝癌切除术技术评价

    作者:李立新;贺强

    自从1991年Reich首先报道腹腔镜肝脏肿瘤切除以来,随着腹腔镜肝脏手术经验、操作技术的提高,新的腹腔镜设备的出现,腹腔镜肝切除术(laparoscopic hepatectomy)正在被更多应用于原发性肝癌治疗中,并显示出良好的疗效[1].很多临床资料显示腹腔镜肝癌切除术较开放性手术有很多优点如具有腹壁切口小,术后疼痛轻,可以早期下床活动,对肠道功能影响小,提高了生活质量.同时由于局部创伤小,对肝脏的挤压也较轻,减少了手术中的肿瘤种植,术中肿瘤血运转移或种植转移的机会也相对减少[2].尤为重要的是腹腔镜肝切除术后对免疫功能影响较小,加快了患者的手术后恢复.由于腹腔镜肝切除术中能够获得更加清晰的视野,因此就可以对肝门结构与肝实质断面进行精细解剖分离,减少了误损伤和出血.然而由于肝脏手术的特殊性和传统腹腔镜的局限性,腹腔镜肝切除尤其是完全腹腔镜下的广泛肝切除仍被认为是难度大、风险高的手术,有一定的死亡率和并发症发生率.当然随着机器人辅助腹腔镜技术如达芬奇手术系统的出现为腹腔镜技术带来一次革新[3],在肝脏外科中的应用可能会对腹腔镜的局限性有所弥补.本文就腹腔镜肝癌切除术的操作技术特点及疗效进行综述评价.

  • 老年女性交界性卵巢上皮性肿瘤预后及复发原因分析

    作者:王东红;孙丽君;肖雁冰;安强;王明阳

    目的 探讨影响老年女性交界性卵巢上皮性肿瘤预后及复发的因素.方法 回顾性分析在我院治疗的老年女性交界性卵巢上皮性肿瘤102例临床资料和随访资料,采用单因素及多因素Logistic回归分析影响预后及复发的相关因素.结果 单因素分析显示,5年生存率与术后辅助治疗、腹膜种植及淋巴结转移有关(χ2值分别19.311、11.054、18.559,均P<0.01);手术方式、腹膜种植、淋巴转移及微浸润对复发的影响差异有统计学意义(χ2值分别23.606、23.583、25.774、23.583,均P<0.01).多因素Logistic回归分析结果显示,术后辅助治疗(OR=0.060,P<0.01)、腹膜种植(OR=35.319,P<0.01)是5年生存率的独立危险因素.手术方式(OR=0.001,P<0.05)、腹膜种植(OR=60.952,P<0.05)、微浸润(OR=88.874,P<0.01)是复发的独立危险因素.结论 早期规范治疗老年女性交界性卵巢上皮性肿瘤可获得良好的预后,但存在复发的风险,应重视腹膜种植、淋巴转移和微浸润患者的随访.

  • 丙戊酸钠对人胆管癌细胞生长抑制作用及其机制

    作者:王兵;李红波;杨杰;邹声泉

    目的 探讨丙戊酸钠对人胆管癌细胞生长抑制作用及其机制.方法 分别以0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L浓度的丙戊酸钠作用于人胆管癌TFK-1细胞l、3、5d,另设对照组和空白组.采用CCK-8法检测丙戊酸钠对人胆管癌细胞生长抑制作用,流式细胞术检测丙戊酸钠对细胞凋亡率及细胞周期的影响.采用裸鼠TFK-1细胞皮下种植瘤模型,设立实验组和对照组,观察丙戊酸钠对瘤体生长的影响.两组实验数据比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果 丙戊酸钠对人胆管癌TFK-1细胞的生长抑制作用呈浓度和时间依赖性.随着药物浓度的增加,细胞凋亡率和G2/M期细胞比率明显增加.8.0 mmol/L实验组3d时细胞凋亡率(57.5±6.2)%较对照组的(8.6±2.3)%明显增加,G2/M期细胞比率(42.5±5.4)%较对照组的(12.0±2.6)%明显增加(LSD-t=17.557,12.465;P<0.05).第一次治疗后31d,实验组肿瘤体积(338±11) mm3较对照组的(426±14) mm3明显减少(t=-15.630,P<0.05).结论 丙戊酸钠对人胆管癌细胞的生长有明显的抑制作用,其机制包括细胞周期阻滞和细胞凋亡.

  • 小鼠肝切除术后肝种植瘤模型的建立

    作者:张俊斌;汪根树;周静;冯智英;刘慧玲;谌小龙;李慧;王励;李势辉;杨建旭

    目的:探讨肝癌组织块种植法小鼠肝切除术后肝种植瘤模型的建立。方法小鼠H22肝癌细胞接种至2只BALB/c(nu/nu)裸鼠肩胛部,2周后成瘤。按照随机数字表法将18只裸鼠分为无肝切除组(A组),30%肝切除组(B组)和70%肝切除组(C组),每组6只。建立裸鼠肝切除模型,A组裸鼠游离肝左外叶及中叶,B组结扎切除肝左外叶组织,C组结扎切除肝左外叶及中叶组织。取肩胛部肿瘤组织接种至3组裸鼠肝脏。比较3组成瘤率和种植瘤体积。成瘤率比较采用Fisher确切概率法。3组种植瘤体积比较采用Kruskal-Wallis秩和检验及Bonferroni法。结果2周后A、B、C组的成瘤率分别为6/6、6/6、5/6,差异无统计学意义(P=1.000);A、B、C组的种植瘤体积中位数分别为19(6~33)、22(8~44)和150(58~186)mm3,C组明显大于A组和B组(Z=9.03,7.12;P<0.0167)。组织病理学检查证实3组种植瘤均为肝细胞癌,伴有不同程度的坏死和炎症细胞浸润。结论肝癌组织块种植法可以建立理想的小鼠肝大部分切除术后肝种植瘤模型,具有实验周期短,成瘤率高以及稳定性好等优点。

  • 腔镜甲状腺手术标本破碎导致误诊及皮瓣下肿瘤种植1例

    作者:朱励民;钱毓贤;陆鉴

    腔镜甲状腺手术逐渐增多,有关腔镜手术特有的并发症值得关注.我科于2010年3月收治1例腔镜甲状腺肿瘤切除术中肿瘤标本破碎导致误诊及颈阔肌下肿瘤种植病例,现报道如下.

  • CO2气腹对胃癌细胞腹腔种植转移影响的动物实验研究

    作者:郝迎学;钟华;石彦;曾冬竹;唐波;饶芸;余佩武

    目的 比较不同压力CO2气腹处理的人胃癌MKN 45细胞在裸鼠腹腔内的成瘤数量、重量及裸鼠生存时间,探讨CO2气腹对胃癌细胞侵袭转移能力的影响. 方法 实验分为4组(对照组和5、10、15 mm Hg CO2气腹组),即将胃癌细胞在5%CO2 37 ℃条件下或5、10、15 mm Hg 100%CO2 37 ℃条件下培养4 h,然后收集细胞并将2×106个细胞注射入裸鼠腹腔,建立胃癌腹腔转移动物模型.4周后处死裸鼠,观察其腹腔成瘤率、成瘤数量和重量以及裸鼠生存时间. 结果 各组裸鼠腹腔成瘤数量、肿瘤总重量和生存时间均无显著差异(P>0.05). 结论 在气腹压力≤15 mm Hg时CO2对胃癌MKN 45细胞在裸鼠腹腔内的种植转移无显著影响.

  • 保持人肝癌生物学特性的人肝癌组织裸鼠肝内种植模型的建立

    作者:郜永顺;陈孝平;李开艳;吴在德

    目的建立保持人肝癌特性的裸鼠肝内种植模型.方法用新鲜的人肝癌组织种植于裸鼠肝脏;B型超声观察种植瘤的体积变化;解剖及显微镜下观察种植瘤的转移情况及组织细胞病理特征;免疫组化和RT-PCR法测定其MDR1和LRP;SPECT检测荷瘤鼠骨转移情况.结果第1代种植8只裸鼠,2 w后种植瘤100%存活,并分泌AFP;8~10 w内有肝内转移的占75.0%,骨转移占37.5%,10 w末处死模型鼠,有肺转移的占37.5%;种植瘤的病理特征与瘤源患者肝癌一致;种植瘤与原肿瘤源组织MDR1、LRP蛋白及其mRNA表达差异均无显著性(P>0.05).第2和第3代模型鼠各8只,种植后2w 100%存活;10~14w裸鼠出现衰竭症状后其肝内、肺和骨均有转移.结论该模型保持了人肝癌生物学特性,可用于体内研究人肝癌的模型.

  • survivin反义RNA对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用

    作者:史惠蓉;兰莉;乔玉环;李克虹;侯丽娟;刘鸿霞

    目的观察survivin反义RNA对卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用及其对裸鼠皮下种植瘤成瘤能力的影响.方法构建能在真核细胞中稳定表达survivin反义RNA的载体pcDNA3-SVVas,应用基因重组技术,将pcDNA3-SVVas经脂质体lipofectamine 2000介导转染卵巢癌细胞株SKOV3(SKOV3/SVVas),同时以空载体pcDNA3转染SKOV3细胞(SKOV3/neo)作为对照;绘制细胞生长曲线,采用免疫组化、RT-PCR和流式细胞仪检测SKOV3/SVVas、SKOV3/neo和SKOV3细胞survivin mRNA及蛋白的表达和细胞凋亡率.将24只裸鼠随机分为3组,每组8只,分别将SKOV3/SVVas、SKOV3/neo、SKOV3细胞接种于裸鼠皮下,观察成瘤情况及肿瘤体积变化.结果与SKOV3细胞比较,SKOV3/SVVas细胞增殖能力明显降低;SKOV3/SVVas细胞survivin蛋白阳性细胞率及survivin mRNA表达量分别为(37.5±1.0)%、0.407±0.022,与SKOV3细胞的(81.2±0.4)%、0.793±0.042和SKOV3/neo细胞的(80.4±0.8)%、0.734±0.039比较,差异均有统计学意义(P<0.01);SKOV3/SVVas细胞凋亡率显著增加,为(27.4±9.6)%,与SKOV3和SKOV3/neo细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05).SKOV3/SVVas组裸鼠成瘤率降低,出现目检可见肿瘤的平均时间延长为(14.0±1.0)d,与SKOV3/neo组的(6.1±0.8)d和SKOV3组的(5.8±0.9)d比较,差异有统计学意义(P<0.01);与SKOV3、SKOV3/neo组比较,SKOV3/SVVas组裸鼠肿瘤生长速度缓慢,肿瘤体积的差异均有统计学意义(P<0.01).结论稳定表达的survivin反义RNA能够有效抑制SKOV3细胞生长,降低survivin的表达,诱导SKOV3细胞凋亡;转染survivin反义RNA的SKOV3/SVVas细胞在裸鼠皮下的成瘤能力降低.

  • 卵巢交界性上皮性肿瘤的临床病理分析

    作者:李艺;崔恒;沈丹华;赵彦;魏丽惠;钱和年

    目的探讨影响卵巢交界性上皮性肿瘤预后的临床及病理因素.方法回顾性分析我院1973年1月~2000年12月收治的34例卵巢交界性上皮性肿瘤及30例Ⅰ期卵巢上皮性癌(卵巢癌)患者的临床病理资料,并按1999年WHO的组织学标准核对诊断.结果 64例患者中,符合卵巢交界性上皮性肿瘤诊断者37例,其中6例微浸润的卵巢交界性上皮性肿瘤曾被误诊为Ⅰ期卵巢癌,1例卵巢交界性上皮性肿瘤为非浸润性腹膜种植.卵巢癌组织学类型以黏液性和浆液性为主,95%为国际妇产科联盟(FIGO)临床分期的Ⅰ期.患者均行手术治疗,其中11例行保守手术者复发率为9%;26例肿瘤细胞减灭术后给予环磷酰胺+阿霉素+顺铂(CAP)方案为主的化学药物治疗(化疗).已随访5年、10年患者的生存率均达100%.经多因素相关分析显示,组织学类型和是否化疗是影响预后的因素(P<0.01).结论卵巢交界性上皮性肿瘤患者以手术治疗为主,应适当辅以化疗.

  • 腹腔冲洗液L3-PP和整合素α5β1检测对胃癌腹膜种植转移预测价值分析

    作者:王华毅;谢先木;付德琴;王虹

    目的:探讨检测腹腔冲洗液中L3-PP和整合素α5β1对于预测胃癌腹膜种植转移的意义.方法:收集96例胃癌患者腹腔冲洗液,用RT-PCR方法测定冲洗液中游离细胞L3-PP、整合素α5β1及CEA mRNA的表达情况,同时作冲洗液细胞学检查(PLC).结果:腹腔冲洗液中的L3-PP、α5β1和CEA mRNA的阳性率分别为74.0%(71/96)、65.6%(63/96)和62.5%(60/96),均高于腹腔冲洗液细胞学21.9%(21/96),差异均有统计学意义,x2值分别为52.174、37.333和32.480,P值均<0.01.L3-PP、α5β1及CEA mRNA的阳性率与肿瘤的浸润深度(x2=7.898,P=0.046;x2=10.692,P=0.014;x2 =7.897,P=0.048)、TNM分期(x2=21.960,P<0.01;x2 =29.266,P<0.01;x2 =22.291,P<0.01)、腹膜转移(x2=13.919,P<0.01;x2=16.627,P<0.01;x2 =9.089,P<0.01)等密切相关.对CEA-组和CEA+组的生存分析发现差异均有统计学意义(Log-rank test=8.349,P=0.039;Log-rank test=10.864,P=0.012).结论:用RT-PCR联合检测腹腔冲洗液中L3-PP和整合素α5β1 mRNA可作为预测胃癌腹膜种植转移的方法,为临床医生选择合适的治疗方案提供依据.

  • 宫颈癌术后切口种植一例报告

    作者:魏萍;盛修贵

    1 病例报告患者女,45岁.因宫颈癌术后7个月,腹壁肿物切除术后4个月,放化疗后2个月余于2007-12-03入院.

  • 生长抑素类似物对裸鼠人胃癌种植瘤Hpa和bFGF表达的影响

    作者:季永胜;王承党

    目的:研究生长抑素类似物奥曲肽对裸鼠人胃癌种植瘤Hpa和bFGF表达的影响并探讨其作用机制.方法:采用SGC 7901人胃癌细胞株建立裸鼠人胃癌种植瘤模型,分别给予奥曲肽、5-FU、奥曲肽+5-FU、生理盐水干预6周后,免疫组化测定种植瘤组织内Hpa、bFGF的表达.结果:Hpa在奥曲肽组、5-FU组、联合治疗组和对照组中的弱阳性表达率分别是25%、41.7%、25%和16.7%;强阳性表达率分别是16.7%、33.3%、8.3%和75%.曲肽组和联合治疗组的阳性率均显著低于对照组,x2值分别为9.32和12.42,0.025<P<0.05和0.005<P<0.01;5-FU组的阳性率与对照组(χ2=2.61,0.25<P<0.5)及联合治疗组(χ2=3.64,0.25<P<0.5)比较,差异无统计学意义.bFGF在奥曲肽组、5 FU组、联合治疗组和对照组中的弱阳性表达率分别是33.3%、25%、25%和16.7%;强阳性表达率分别是16.7%、25%、8.3%和83.3%.曲肽组、5-FU组和联合治疗组的阳性率均显著低于对照组,χ2值分别为10.46、9.10和15.60,0.01<P<0.025、0.025<P<0.05和P<0.005.相关分析显示,Hpa与bFGF之间存在强的正相关,r=0.893,P=0.000.结论:奥曲肽能够抑制裸鼠人胃癌种植瘤的侵袭和转移,奥曲肽联合5-FU具有协同作用,其机制可能与下调Hpa和bFGF的表达有关.

  • KM-HL近交系小鼠对肿瘤细胞敏感性的研究

    作者:沈秀;周则卫;王映兰;王文;阎玉均;洪阁

    目的:探讨昆明鼠的遗传变异鼠-昆明-无毛(kun ming hairless, KM-HL)鼠对肿瘤细胞的几项生理指标与其他小鼠的区别,为将KM-HL鼠作为肿瘤实验模型用鼠提供理论依据.方法:用TNF-α ELISA酶免试剂盒测试KM-HL鼠血清的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF);将KM-HL鼠接种白血病瘤株(L1210)后,测定TNF-α并计算脾系数、胸腺系数等生理指标;用IL-2 ELISA酶免试剂盒测试KM-HL鼠血清的白细胞介素2(interleukin, IL-2);以上两种酶免试剂盒测试方法均用酶标仪在450 nm处测定OD值;将KM-HL、KM(昆明种)及ICR鼠接种肝癌H22肿瘤细胞,10 d后取肿瘤、肝脏、脾脏及胸腺称质量,计算脾系数和胸腺系数.结果:正常KM-HL鼠的TNF-α为0.144±0.017,比ICR鼠的0.170±0.04低;正常KM-HL鼠接种L1210后血清中的TNF-α为0.176±0.028,比空白KM-HL鼠的0.144±0.017高,P<0.05.KM-HL鼠IL-2为0.137±0.025,与ICR鼠的0.155±0.077基本相似,差异无统计学意义.在肝癌H22肿瘤模型实验中,KM-HL鼠的肿瘤[(2.966±0.94) g]比ICR鼠[(1.262±0.61) g]的肿瘤生长快,差异有统计学意义,P<0.01;KM-HL鼠[(10.461±2.69) mg/g]比KM鼠[(14.959±4.154) mg/g]、ICR鼠[(18.826±4.28) mg/g]的脾系数小,KM-HL鼠[(1.212±0.49) mg/g]比KM鼠[(3.315±0.901) mg/g]、ICR鼠[(2.914±1.28) mg/g]的胸腺系数也小,差异有统计学意义,P值均<0.01.结论:KM-HL鼠对于肿瘤细胞具有易感性,且肿瘤生长均一性好易统计,适合作为肿瘤实验模型用鼠用于抗肿瘤药物的筛选.

  • 膀胱原发性黏液腺癌术后复发伴腹壁切口种植转移一例报告

    作者:曲文书;王琳;龚新雷

    1 病例报告患者,男,48岁,因间隙性无痛性肉眼全程血尿2周,于2008 08-10人院查腹部彩超、CT均提示,膀胱前壁占位.进一步行膀胱镜检查见膀胱前壁有大小约1.5 cm×1.0 cm肿块,呈乳头状,质脆,触之易出血.活检病理示,膀胱前壁黏液腺癌.2008-09-16在全身麻醉下行膀胱肿瘤切除术.术中见膀胱顶部肌层外有大小约3.0 cm×2.0 cm包块,上覆腹膜,小部分呈菜花状突人膀胱腔内.术后病理示,膀胱黏膜下见大片黏液腺癌,癌组织浸润膀胱肌层全层(图1A和图1B).术后予TP方案辅助化疗4个周期,紫杉醇[紫杉醇注射液,百时美施贵宝公司,5 mL/(30mg·支),批号:1D00448] 175 mg/m2,静脉滴入,d1;顺铂[利艾康,云南个旧生物药业有限公司,6 mL/(30 mg·支),批号:1060192DB] 25 mg/(m2·d),静脉滴人,d1 ~d3.化疗过程顺利,随后定期随访.2010-04-10患者再次出现无痛性血尿.

  • 空芯针活组织检查术后乳腺癌细胞针道种植的研究进展

    作者:董建宇;延艳;刘民锋;郭昭泽;郭婧昀;叶长生

    空芯针活组织检查在乳腺疾病的诊断中已得到广泛应用。在活组织检查过程中可能出现肿瘤细胞针道种植,进而影响患者预后。笔者就乳腺空芯针穿刺活组织检查术后肿瘤细胞针道种植的发生率、相关影响因素及针道种植对患者局部复发和OS的影响进行简要综述。

  • 表达乙型肝炎病毒抗原的种植性肝脏肿瘤动物模型的建立

    作者:汪颖;吴志远;任书荣;魏勇;张昆;曲春枫

    目的 构建持续稳定表达乙型肝炎病毒(HBV)抗原的肿瘤细胞,建立持续表达HBV抗原的种植性肝脏肿瘤动物模型.方法 以含有2倍体HBV的逆转录病毒载体质粒转染黑色素瘤细胞系B16,获得稳定表达HBV表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBcAg)的B16细胞(B16/HBV),分别按每只小鼠100、1000和5000个细胞接种到具有相同遗传背景的C57BL/6J小鼠肝脏被膜下,每组5只小鼠.注射后每周采血,进行血清HBsAg、乙型肝炎表面抗体(抗HBs)检测.采用小鼠腹部超声观测其成瘤情况,计算存活时间.对死亡小鼠肝脏进行病理分析,并检测肿瘤组织中HBsAg和HBcAg的表达.结果 转染HBV病毒的肿瘤细胞B16/HBV传代20次以上后,细胞上清中有持续稳定的分泌型HBsAg表达,2×104个细胞在24h内的HBsAg表达量可达到110 ng,并随时间延长而逐渐累积.未能检测到细胞上清中有HBeAg的表达.免疫组化结果显示,转染细胞中存在稳定的HBcAg表达,主要分布在细胞核中.每只小鼠注射100个B16/HBV细胞,小鼠肝脏成瘤率为80.0%;注射1000和5000个B16/HBV细胞,成瘤率为100%.注射后第4周,注射1000个B16/HBV细胞小鼠的腹部超声检测结果提示,肝脏内有异常回声,不均质回声面积为62.18 mm2.剖腹检查显示,在肝脏中所形成的肿瘤大体呈圆形,血运丰富,瘤组织质软,并有多个转移灶.在成瘤小鼠血清中,可检测到持续表达的HBsAg和抗HBs;所形成的肿瘤组织细胞中有均匀一致的HBsAg和HBcAg表达.结论 HBV逆转录病毒载体质粒转染的B16/HBV细胞可稳定表达HBsAg和HBcAg.通过在肝脏被膜下注射B16/HBV细胞,建立了能持续分泌表达HBV抗原的种植性肝脏肿瘤小鼠模型.

  • 腹腔镜行胆囊切除后致癌瘤腹腔种植转移一例

    作者:车旭;胡敬群;蔡建强

    患者男,56岁。1998年11月因发现胆囊结石在当地医院行腹腔镜胆囊切除术,术后病理示胆囊癌。经治医生因考虑已完整切除胆囊,故未行辅助治疗。术后3个月扪及上腹伤口处有一硬币大小硬结,无触痛,逐渐长大。术后9个月入院,查体:浅表淋巴结未扪及肿大,腹平软,于剑突下可扪及7 cm×6 cm×5 cm大小质硬肿物,有轻压痛,中心皮肤可见1 cm长腹腔镜手术瘢痕。腹部CT示右腹直肌肿物达腹膜,考虑为种植转移瘤。针吸细胞学示发现癌细胞。于1999年9月5日行腹壁肿物切除术,加大网膜及胆囊床肿物切除。术中见腹膜、肝表面、部分大网膜及右侧肝膈面密布粟粒样结节,胆囊管残端处有3 cm×3 cm×3 cm大小肿物,压迫胆总管。术中仔细分离,保护肝门三大件,将转移瘤切除。术中行卡铂50 mg及5-氟尿嘧啶500 mg放置腹腔化疗。术后病理检查:(1)腹壁肿物:纤维脂肪及横纹肌组织中见腺癌

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