sTfR、EPO的检测对孕妇缺铁性贫血诊断价值分析

目的 探讨可溶性转铁蛋白受体(sTfR)和促红细胞生成素(EPO)在不同孕周妊娠期缺铁性贫血(IDA)中的诊断价值.方法 选取2016～2017年我院产科产前门诊建档定期产检的妊娠＜13周、13～28周、＞28周孕妇各100例分别作为早孕组、中孕组和晚孕组,选取同期体检中心体检健康女性100例作为对照组,检测并比较各组血红蛋白(Hb)、血清铁蛋白(SF)和sTfR、EPO水平,以《2014年妊娠期铁缺乏和缺铁性贫血诊治指南》中对缺铁性贫血的诊断标准为依据,比较sTfR、EPO在不同孕周孕妇中对IDA诊断价值.结果 对照组和早孕组Hb、SF水平均高于中孕组和晚孕组(P＜0.05);对照组、早孕组、中孕组、晚孕sTfR、EPO水平依次升高,各组间比较均有统计学意义(P＜0.05).普通标准在早孕组、中孕组、晚孕组IDA中诊断率低于sTfR、EPO诊断,sTfR在中孕组、晚孕组IDA中诊断率低于EPO诊断(P＜0.05).结论 sTfR、EPO水平在不同孕周IDA中具有有较高诊断或筛查价值.

急性白血病患者血清促红细胞生成素变化及其与化疗的关系

目的 分析急性白血病患者血清促红细胞生成素(Epo)水平及其与血红蛋白(Hb)的关系,以及化疗对其的影响.方法 应用ELISA法检测急性白血病患者血清Epo水平,并观察化疗后Epo变化.结果 32例急性白血病患者化疗前Epo水平(49.58±14.87mIU/mL)高于健康对照者(11.96±4.78mIU/mL)(P＜0.01);Epo水平与Hb水平存在负相关(r =-0.541,P＜0.01);化疗2疗程和4疗程后,Epo水平分别为52.12±15.16mIU/mL和63.15±16.42mIU/mL,与化疗前比较,差异有统计学意义(F =4.547,P＜0.01);化疗2疗程和4疗程后一周,Hb分别为62.0±12.3g/L和56.8±11.1g/L,与化疗前Hb(78.0±14.9g/L)比较,差异有统计学意义(F=4.007,P＜0.01).结论 急性白血病患者Epo合成机制完整,虽然贫血,但EPO水平是增高的,化疗抑制期内随着贫血加重,Epo水平升高.

促红细胞生成素抑制大鼠体外循环术致急性肾损伤时NF-κB P65和ICAM-1表达

目的 研究大鼠体外循环(CPB)术致急性肾损伤时肾脏核转录因子-κB(NF-κB) P65和内皮细胞表面黏附分子-1(ICAM-1)表达水平变化及促红细胞生成素(EPO)对其的抑制作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组(每组n=10):sham、CPB和EPO组,sham组建立CPB模型,不行体外转流,其余2组行体外转流,EPO组于转流前在预充液中加入3 000 U/kg的EPO.分别于肝素化后转流前(T0)和转流结束后(T1)、术后0.5(T2)、1(T3)、2(T4)和24 h(T5)检测血清肌酐水平,术后24 h取肾脏组织,HE染色观察组织形态,并分别采用免疫组化和West-ern blot法检测肾组织中NF-κB P65和ICAM-1表达.结果 术后CPB组各时间点与sham组比较血清肌酐水平均明显升高(P＜0.05),与CPB组相比,EPO组的肌酐水平明显下降(P＜0.05)；CPB组肾组织中NF-κB P65及1CAM-1表达水平均明显高于sham组(P＜0.05),EPO组NF-κB P65及ICAM-1表达水平均低于CPB组(P＜0.05)；病理学检查显示,EPO组的肾小管上皮细胞肿胀、胞质内空泡形成、间质出血明显减轻.结论 EPO可抑制大鼠体外循环后肾脏NF-κB P65及ICAM-1表达,从而减轻大鼠体外循环引起的肾脏损伤.

HBSP抑制缺氧复氧心肌H9C2细胞Omi/HtrA2胞内转位及细胞凋亡

目的 探讨促红细胞生成素衍生肽(HBSP)对缺氧复氧心肌细胞Omi/HtrA2胞内转位及细胞凋亡的影响.方法 将乳鼠心肌细胞(H9C2细胞)分为对照(Ctrl)组、缺氧复氧(H/R)组、HBSP组和EPO组.培养结束后MTS法检测细胞存活率,酶标仪检测细胞上清液中LDH释放率,Western blot检测细胞内cleaved caspase-3表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡;分离H9C2细胞胞质及线粒体,Western blot分别检测线粒体及细胞质Omi/HtrA2表达.结果 与Ctrl组相比,H/R组细胞存活率下降(P＜0.05),LDH释放、cleaved caspase-3表达、心肌细胞凋亡及Omi/HtrA2胞内转位均明显上升(P＜0.05);与H/R组相比,EPO组的细胞存活率升高(P＜0.05),LDH释放降低、cleaved caspase-3表达减弱、心肌细胞凋亡减少、Omi/HtrA2线粒体转位明显减少(P＜0.05);随着HBSP浓度的增加,各组细胞存活率逐渐上升,LDH释放、cleaved caspase-3表达、心肌细胞凋亡及Omi/HtrA2胞内转位率逐渐下降(P＜0.05).结论 HBSP具有与EPO类似的保护作用,可抑制经H/R诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能是通过减少Omi/HtrA2蛋白的胞内转位,抑制caspases通路激活,进而发挥细胞保护作用.

促红细胞生成素对横纹肌溶解大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)能否通过减轻内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达以及减轻横纹肌溶解致急性肾损伤.方法 将SD大鼠随机分为4组:对照组(control,n=6)、单纯EPO组(EPO,n=18)、急性肾损伤组(AKI,n=18)和EPO干预组(AKI+ EPO,n=18),EPO组、AKI组和AKI+ EPO组又分为3个亚组,即l,6和24 h组(均为n=6).在各自的时间点留取标本,检测血中尿素氮、肌酐和肌红蛋白水平;HE染色法观察肾脏病理;免疫组化观察GRP78和CHOP蛋白表达,实时荧光定量PCR检测GRP78和CHOP mRNA的表达.结果 与对照组比较,AKI和AKI+ EPO组大鼠尿素氮、肌酐和肌红蛋白水平升高,GRP78和CHOP蛋白及mRNA表达水平均显著上调(P＜0.05);AKI组肾脏结构出现损伤;与AKI组比较,AKI+ EPO组6和24 h血肌酐水平,GRP78、CHOP蛋白和mRNA表达水平较同期均下降(P＜0.05).结论 EPO可以通过影响横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的表达,发挥肾脏保护作用,其机制可能与调节未折叠蛋白反应有关.

促红细胞生成素减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨促红细胞生成素在心肌缺血再灌注损伤中对细胞外基质代谢的调节作用及其机制.方法 构建Langendroff大鼠离体心脏缺血再灌注模型,结合Western blot观测在促红细胞生成素及相应信号传导通路阻滞剂干预下,左室舒张末压(LVEDP)、梗死面积、MMPs及胶原Ⅰ/Ⅲ表达的变化.结果 促红细胞生成素可改善LVEDP[(19.8±0.2)mmHg vs (35.9±0.2)mmHg,IR组 vs EPO+IR组,P＜0.05],减少梗死而积(35.26%±7.1% vs 62.70%±7.2%,EPO+IR组 vs IR组,P＜0.05).在缺血再灌注损伤的过程中MMP2及MMP9表达均显著升高,而TIMP-4则显著减低.外源性EPO可逆转MMPs的激活.此外EPO则可促进胶原Ⅲ、Ⅰ的表达,并且这一保护作用可被MEK-Erk信号通路阻滞剂所阻断.结论 EPO通过MEK-Erk信号传导通路促进胶原Ⅰ/Ⅲ的合成,抑制MMPs的激活,抑制细胞外基质降解,在一定程度上减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.

促红细胞生成素抑制TGF-β诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖

目的 探讨促红细胞生成素在大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖中的作用.方法 培养大鼠CFs.实验分为对照组(control)、TGF-β刺激组(TGF-β终浓度为5μg/L)和重组人促红细胞生成素(rhEPO,5 000 U/L)干预组:1h后加入TGF-β.24 h后计数细胞并采用MTT法观察细胞增殖;免疫细胞化学及Western blot法检测α-SMA表达,观察细胞转化;羟脯氨酸定量检测细胞胶原含量;Western blot法检测细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及MMP-2、MMP-9表达.结果 与对照组比较,TGF-β使细胞明显增殖(P＜0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成(P＜0.05)、α-SMA表达(P＜0.05)、细胞MMP-2、MMP-9表达增多(P＜0.05).使用重组人促红细胞生成素(rhEPO)干预后,CFs增殖、α-SMA表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成较TGF-β组均显著降低(P＜0.05),MMP-2、MMP-9表达进一步增多(P＜0.05).结论 生理剂量EPO可抑制TGF-β诱导的大鼠CFs增殖、转化及胶原的合成,促进胶原降解.

促红细胞生成素抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大及其可能的信号通路

目的 观察促红细胞生成素(EPO)对新生大鼠心肌细胞肥大中信号通路蛋白表达的影响.方法 用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,10-6mol/L)诱导心肌细胞肥大,分别以EPO(2×104U/L)或/和P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580(15 μmol/L)进行干预,检测心肌细胞表面积、蛋白合成、胚胎基因ANF及β-MHC表达,Real-time-Q-PCR检测转化生长因子β(TGF-β)1及P38MAPK mRNA表达;Western blot法检测TGF-β1、TGF-β激活性激酶1(TAK1)、phospho-TAK1、P38MAPK和phospho-P38MAPK蛋白的表达.结果 EPO能有效抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大(P＜0.05),抑制TGF-β1、TAK1、phospho-TAK1、P38MAPK和phospho-P38MAPK表达(P＜0.05);SB203580能增强EPO抑制心肌细胞肥大的作用.结论 EPO能减轻AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其可能与TGF-β1-TAK1-P38 MAPK信号通路有关.

缺血再灌注大鼠脑内促红细胞生成素表达的变化

探讨缺血再灌注大鼠脑内促红细胞生成素(erythropoietin,Epo)表达的变化,揭示短暂性脑缺血时神经系统发生内源性脑保护的机制.采用线栓法制作大鼠局灶性缺血再灌注模型,以免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测缺血再灌注不同时间脑内Epo的表达变化.脑缺血再灌注不同时间Epo蛋白在脑内表达广泛,主要分布在缺血侧基底节区、海马和部分皮层.在缺血再灌注1 h和6 h,基底节区Epo蛋白和mRNA表达较高,再灌注12 h,基底节区Epo表达减少,额顶皮质Epo表达增加,再灌注24 h,额顶皮质Epo表达达到高峰,48 h开始下调.因此,促红细胞生成素在缺血再灌注大鼠脑内表达的变化,可能是机体发生内源性脑保护的机制之一.

病毒上清液促进体外培养INS-1细胞系胰岛素分泌

信号传导与转录激活因子(signal transducer and activitor of transcrrption,STATs)是一类通过酪氨酸磷酸化激活的转录因子家族.STAT5是这一家族的重要成员,有STAT5A和STAT5B两种异构体,两者具有高度同源性,它们可以在接受生长激素、催乳素、干扰素以及促红细胞生成素等多种激素或细胞因子刺激后,通过酪氨酸磷酸化偶联形成二聚体,获得进入细胞核的能力,影响目的基因的转录,从而广泛参与细胞的增殖和分化,调节细胞的凋亡.

红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用

目的 观察红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液(EACM)对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用. 方法 原代培养神经干细胞和1型星形胶质细胞,收集红细胞生成素(EPO)刺激的星形胶质细胞上清液,用于神经干细胞分化实验的研究.对分化后的细胞进行免疫细胞化学染色,计算其分化为神经元的比率;同时利用FeSO4和H2O2制造细胞损伤模型,用EACM继续培养48h,然后检测细胞活性和存活细胞数.结果 EACM组神经干细胞分化明显,神经元比率较星形胶质细胞上清组和对照组均有明显增加.分化后的细胞中加入H2O2后,继续用EACM培养的实验组吸光度(A)值和细胞存活百分比均较对照组高. 结论 红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞有促其向神经元分化的作用,并对分化后的细胞有保护作用.

慢性低氧时牦牛和迁饲黄牛颈动脉体组织形态的比较

目的 对牦牛、迁饲黄牛及低海拔黄牛颈动脉体(CB)形态及CB中低氧相关因子的表达进行比较,探讨高原土生或迁饲动物CB适应慢性低氧的模式.方法 采集青海地区海拔3000 ～4000m的9头牦牛、2500m的9头高山迁饲黄牛及甘肃平原海拔1300米的12头低海拔黄牛的CB,固定、切片、染色后行光学显微镜和电子显微镜比较观察,并对CB中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、一氧化氮合酶(NOS)、瘦素受体(LEPR)、促红细胞生成素(EPO)等低氧相关因子的表达进行免疫组织化学观察.结果 相比黄牛,牦牛CB体积较小,不同海拔牦牛的CB大小、形态及主细胞数量差异无显著性,而迁饲黄牛CB体积较低海拔黄牛大.牦牛CB主细胞中明细胞、暗细胞和固缩细胞的数量百分比比例为67.1％∶28.2％∶4.7％,迁饲黄牛为78.5％∶18.6％∶2.9％,低海拔黄牛为87.3％∶10.2％∶2.5％;与低海拔黄牛相似,牦牛CB少部分明细胞胞质透亮,暗细胞胞核染色质较致密并呈粗颗粒状,而迁饲黄牛CB大部分明细胞胞质透亮,暗细胞胞核染色质致密,颗粒稀少.3种牛支持细胞形态差异无显著性.与低海拔黄牛相比,迁饲黄牛CB主细胞的少数核异染色质增多,个别形态异常,胞质内多数细胞器肿胀溶解,残留少量细胞器和致密核心囊泡.3种牛CB中均有不同程度的HIF-1a、NOS、LEPR、EPO的蛋白表达,其中牦牛CB中EPO蛋白表达阳性率较低海拔黄牛明显降低(P＜0.05).结论 海拔高度不是影响牦牛颈动脉体大小和主细胞数量的主要因素.迁饲黄牛CB主细胞中细胞类型的比例与牦牛有趋同性改变,但缺氧时行使功能的I型细胞功能系统受损,尚处于低氧环境下的习服阶段.慢性低氧可能主要影响牦牛和迁饲黄牛CB中EPO蛋白表达.

促红细胞生成素介导的脑缺血保护

促红细胞生成素在低氧预适应中的神经保护作用

促红细胞生成素（EPO）是体内一种重要的糖蛋白激素，主要由胎肝和成人的肾脏产生。EPO 的表达除受到转录因子的调控之外，还受到表观遗传学的调控。研究发现，EPO 及其受体（EPOR）在中枢神经系统中广泛表达，提示其对中枢系统具有神经保护作用。低氧预适应是机体抗缺氧或缺血的一种内源性保护机制，它可以促进 EPO 表达，减轻低氧／缺血引起的神经元损伤。EPO 主要通过激活一系列信号转导通路及多种可能的机制发挥神经保护作用。

C反应蛋白对促红素治疗维持性血透病人贫血的影响

目的探讨不同浓度C反应蛋白对促红细胞生成素治疗维持性血透病人贫血的影响.方法选择56例CRF维持性血液透析病人,根据CRP浓度分为高CRP组(>20mg/L)和低CRP组(<20mg/L),接受8个月的rHuEpo治疗及常规治疗,分析了Epo用量、血HCT、血Hb、Kt/Vurea、血铁蛋白、血清铁、血清转铁蛋白饱和度、血甲状旁腺素和血白蛋白等指标.结果血CRP浓度与Epo治疗剂量成正相关;血清铁和血白蛋白与血CRP和Epo治疗剂量负相关.结论血CRP升高可致贫血的维持性血透病人对Epo表现为低反应性.

肿瘤患者体内促红细胞生成素浓度测定

目的了解肿瘤患者其内源性促红细胞生成素(erythropoietin,E PO)的变化.方法　我们采用酶联免疫法(ELISA)测定了46例次肿瘤患者血浆EPO水平,同时测定16例正常人为对照.结果肿瘤患者血浆EPO水平为48.96±67.29mU/ml,正常人血浆EPO水平为8.44±4.62mU/ml(±s ),(p<0.01).患者EPO水平与红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(Hct)、平均红细胞容积(MCV)均呈负相关,r值分别为-0 .464、-0.506、-0.555、-0.105.结论肿瘤患者EPO水平比正常人显著升高,但由于其含量相对不足是导致肿瘤性贫血的一个因素.

重组人红细胞生成素对人多发性骨髓瘤患者铁调节蛋白Hepcidin mRNA表达的影响

本研究探讨人多发性骨髓瘤血清对肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞铁调节蛋白hepcidin表达的影响,及白介素-6(IL-6)单克隆抗体或重组人红细胞生成素(rhEPO)对其的抑制作用.在Hep-3b细胞培养液中按10%终浓度加入人多发性骨髓瘤患者血清,共培养后用逆转录聚合酶链式反应半定量方法检测Hep-3b细胞hepcidin mRNA的表达水平.在上述培养体系中,加入人IL-6单克隆抗体或rhEPO观察hepcidin mRNA表达的变化.结果表明,未治疗的多发性骨髓瘤组hepcidin mRNA表达量高于正常对照组及缺铁性贫血组,这种升高作用能被IL-6单克隆抗体或rhEPO完全抑制.对多发性骨髓瘤患者短期随访中,规律治疗能稳定血红蛋白,降低患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响.结论:未治疗的多发性骨髓瘤患者血清能促进肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞hepcidin表达,这种促进作用可被人IL-6单克隆抗体拮抗,提示IL-6可能导致Hep-3b细胞hepcidin表达量升高,从而造成慢性病性贫血(anemia of chronic disease,ACD).这种促进作用也能被rhEPO抑制,提示rhEPO可能对ACD有治疗作用.在多发性骨髓瘤患者短期随访中,血红蛋白水平稳定,患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响减小,这表明治疗使病情稳定,改善了ACD.

生长因子刺激的间充质干细胞释放具有很强促血管新生功能的外泌体

目的:探讨脐带间充质干细胞(MSC)经红细胞生成素(EPO)和血小板衍生生长因子(PDGF-BB)刺激所释放的外泌体促血管新生的活性变化.方法:接种人脐带MSC,贴壁过夜后换用含EPO (1 U/ml)和/或PDGF-BB(50 ng/ml)的α-MEM培养,72 h后应用超高速离心法收集培养上清中外泌体,流式细胞术测定外泌体的表面分子以确定其来源,透射电子显微镜观察其形状及大小.将不同来源的外泌体(10μg/ml)加入脐静脉内皮细胞培养体系中,应用MTT法测定细胞增殖状态,Matrigel培养技术观察网状结构形成情况,并计网状结构数量.结果:流式细胞术分析结果表明,人脐带MSC释放的微粒表达CD9、CD63和CD81,符合外泌体的表面分子特征.在透射电子显微镜下,外泌体呈囊性结构,直径为80 nm左右.未刺激组、EPO组、PDGF-BB组和EPO/PDGF-BB组外泌体蛋白含量,分别为256±124 μg/108细胞、1021±392 μg/108细胞、830±265 μg/108细胞和2207±733μg/108细胞,经EPO或/和PDGF-BB刺激后,人脐带MSC释放外泌体的数量显著增加(P＜0.01).MTT实验结果显示,经过EPO和PDGF-BB刺激的MSC释放的外泌体,可明显促进人脐带内皮细胞的体外增殖.Matrigel实验发现,未刺激组、EPO组、PDGF-BB组和EPO/PDGF-BB组每视野网状结构数量分别为2.6±0.84、4.6±1.57、4.2±0.78和6.3±1.34,在细胞生长因子处理组均显著高于未处理组(P＜0.01),而且在混合因子处理组均高于单因子处理组(P＜0.01).结论:EPO和PDGF-BB可刺激脐带MSC释放外泌体,而且这种外泌体具有更强的促血管新生功能.

血清红细胞生成素水平在缺铁性贫血中的临床意义

目的:了解血清红细胞生成素(EPO)水平在缺铁性贫血患者治疗前后的变化及其临床意义.方法:采用酶化学发光法和电化学发光免疫分析法(ECLIA)分别检测37例初诊缺铁性贫血患者治疗前及治疗1个月、2个月和3个月血清EPO的水平及铁蛋白的含量.以30例健康体检者作为正常对照.结果:①缺铁性贫血患者治疗前组、治疗1个月组及治疗2个月组血清EPO水平均高于正常对照组(P＜0.05),治疗后各组的sEPO水平均低于治疗前组,随着贫血情况的纠正血清EPO水平逐渐降低,而治疗3个月组与正常对照组sEPO水平差异无统计学意义(P＞0.05);缺铁性贫血患者治疗前后的铁蛋白含量均较正常对照组降低(P＜0.05),治疗后各组的血清铁蛋白含量均较治疗前组增高,而治疗后各组间血清铁蛋白含量相比差异无统计学意义(P＞0.05);②缺铁性贫血患者治疗前后logEPO与血红蛋白呈显著负相关,而缺铁性贫血患者的血清铁蛋白含量,仅在治疗前与血红蛋白含量呈正相关(r =0.449,P=0.005),治疗后各组及正常对照组的铁蛋白含量与血红蛋白均无相关性;③重度贫血组的血清EPO水平明显高于轻、中度贫血组,随着贫血的加重血清EPO水平逐渐升高.结论:EPO参与了红系造血过程,能反映贫血程度,其对贫血的敏感性高于血清铁蛋白,对缺铁性贫血患者评估病情、观察疗效、判断预后均有重要的临床价值.

黎族地中海贫血患者血清促红细胞生成素和转铁蛋白受体水平的研究

为研究地中海贫血患者与血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)和红细胞生成素(EPO)的关系,并估计地中海贫血骨髓红系增生程度,应用酶联免疫法检测50例地中海贫血患者和50例正常人对照的sTfR和EPO水平.结果显示,β-重型地中海贫血患者血清EPO和sTfR水平均明显高于正常对照组(P＜0.05),而轻型患者与正常人无显著差别.结论:黎族地中海贫血患者血清中EPO和sTfR水平升高与地中海贫血的类型有关.