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真皮替代物移植后的血管化过程及组织学变化的实验研究
目的了解不同种类真皮替代物移植后的血管化过程及组织学变化. 方法将21只SD大鼠根据其皮下埋植不同的真皮替代物分为猪脱细胞真皮基质(sADM)组、人脱细胞真皮基质(hADM)组及人工真皮(Integra)组.于埋植后2、3、4、7、10、14、21、30、60、90、120、150、180 d行移植物大体观察,采用免疫组织化学法观察移植物的血管化过程及组织学变化. 结果大体观察:术后各组大鼠创口周围皮肤无明显红肿及炎性反应,切口愈合良好,移植物与创面接触紧密.90 d后各组移植物不易从体表触及.180 d时,部分移植物面积缩小、厚度变薄甚至难以辨认.组织学观察:移植术后2 d起可见成纤维细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等侵入移植物内,3 d时与受床组织连接处可见长入的新生毛细血管芽.30-60 d,移植物内形成丰富的血管网.150 d后近似正常真皮结构.180 d后部分移植物有不同程度吸收退化. 结论 3种真皮替代物移植后均能很快建立与受床组织的血液循环,并长时间存留于创面,但有一定程度的吸收退化.
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成纤维细胞-无细胞真皮替代物的生物学活性及移植实验
目的研究含成纤维细胞的无细胞真皮替代物的生物学活性及真皮支架作用.方法 将成纤维细胞种植于无细胞真皮表面培养,形成活性真皮替代物.采用ELISA法和RIA法测定培养上清中IL-6、IL-8、TGF-β1及细胞外基质层粘连蛋白、透明质酸的分泌.并将真皮替代物植入BALB/c-nu小鼠(裸鼠)全层皮肤缺损创面,观察血管化速度、创面收缩率. 结果成纤维细胞种植于无细胞真皮表面生长良好,可形成单层细胞膜片,并分泌多种细胞因子和细胞外基质成份.活性真皮替代物植入创面后,与单纯无细胞真皮移植相比,血管化速度加快,收缩率减小.结论无细胞真皮上种植成纤维细胞后具有较强的生物学活性,可作为较好的真皮替代物.
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复方壳多糖组织工程真皮促血管生成活性的研究
组织工程皮肤作为皮肤替代物覆盖创面,能否有效促进血管形成一直是学术界关注的重点.为了解复方壳多糖组织工程真皮的促血管生成活性,笔者采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法,对复方壳多糖组织工程真皮条件培养基促内皮细胞增生的能力进行了观察,拟为组织工程皮肤血管化的进一步研究提供实验依据.
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利用胎儿表皮干细胞构建组织工程皮肤修复裸鼠全层皮肤缺损创面
1 材料与方法1.1 主要试剂DMEM培养基、角质形成细胞无血清培养基、重组人表皮生长因子、霍乱毒素、dispase酶(美国Gibco公司),小鼠Ⅳ型胶原、L-谷氨酰胺、纤维蛋白、牛胰岛素(美国Sigma公司),角蛋白14单克隆抗体、角蛋白19、整合素β1(美国ADI公司),重组人成纤维细胞生长因子2(FGF2,珠海亿胜生物制药有限公司),凝血酶(奥地利Immuno AG公司),聚乙醇酸(PGA,日本Synthecon公司,纤维直径10~14 μm),6~7周龄的雄性BALB/cA裸鼠5只(第四军医大学实验动物中心).
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组织块HE染色法观察脱细胞真皮基质上接种细胞的生长情况
在组织工程皮肤的体外构建中,及时观察脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)表面接种的表皮细胞或成纤维细胞的形态和密度,对判断细胞存活情况、生长速度及融合程度具有重要意义.但由于真皮组织不透明,在相差显微镜下无法直接观察接种细胞的生长情况[1].笔者拟利用组织块HE染色技术进行相应改进.
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组织工程皮肤中感觉神经再生的研究进展
严重的皮肤损伤不仅会造成大量的组织缺损,还会导致各种感觉功能丧失.组织工程皮肤为创面高质量修复提供了新途径,但在感觉功能恢复方面仍存在诸多问题,如痛觉、触觉、温度觉的异常甚至丧失.因此,在应用组织工程皮肤促进创面愈合的同时,感觉神经的再生和功能恢复越来越受到关注.本文介绍了皮肤感觉神经的种类、分布、再生及其影响因素,并从组织工程皮肤的真皮支架、种子细胞、神经营养因子等方面探讨促进感觉神经再生的策略.
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三维生物打印在皮肤组织工程中的应用研究进展
Deep skin wounds require skin grafts for coverage.Current treatments such as tissue engineered skin or skin substitutes can not meet the needs of clinical application due to the technical problems involving preservation,transportation,and a lengthy preparation process.In comparison with traditional methods such as freeze-drying,three-dimensional bioprinting can precisely dispense living cells,nucleic acid,growth factor,and phase-changing hydrogels according to the wound form,while maintaining high cell viability.Besides,it has excellent performance in high resolution,flexibility,reproducibility,and high throughput,showing great potential in the fabrication of tissue engineered skin.This review mainly introduces the common techniques of three-dimensional bioprinting,and their application in skin tissue engineering,focusing on the latest research progress,and summarizes the current challenges and future development of three-dimensional skin printing.
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水凝胶在三维生物打印中的应用研究进展
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天然高分子材料及其衍生物制备组织工程真皮支架的研究进展
Natural polymeric materials and their derivatives are organic macromolecular compounds which exist in plants,animals,and micro-organisms.They have been widely used in the preparation of scaffolds for skin tissue engineering recently because of their good histocompatibility and degradability,and low immunogenicity.With the improvement of tbe preparation technics,composite materials are more commonly used to make scaffolds for dermal tissue engineering.This article summarizes the classification and research status of the commonly used natural polymer materials,their derivatives,and composite scaffold materials,as well as makes a prospect of the research trends of dermal scaffold in the future.
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胶原蛋白在三维生物打印中的应用研究进展
As a new industrial technology with characteristics of high precision and accuracy,the application of three-dimensional bioprinting technology is increasingly wide in the field of medical research.Collagen is one of the most common ingredients in tissue,and it has good biological material properties.There are many reports of using collagen as main composition of " ink" of three-dimensional bioprinting technology.However,the applied collagen is mainly from heterogeneous sources,which may cause some problems in application.Recombinant human source collagen can be obtained from microorganism fermentation by transgenic technology,but more research should be done to confirm its property.This article reviews the advances in the research of collagen and its biological application in three-dimensional bioprinting.
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三维技术在烧伤面积诊断及治疗中的应用
Accurate area assessment of a burn injury and its treatment according to its depth of injury are the foundation of burn treatment due to its complexity,and various techniques and methods have been employed to solve these problems for many years.As the demand of modern medicine calls for individualized and precise therapeutic measures,it is clear that the traditional diagnostic and treatment measures are insufficient.The flourishing development of three-dimensional (3D)technology seems to provide new research approaches and technical opportunities for burn surgery.A series of techniques such as 3D model,3D scanning,and 3D printing may be promising in advancing burn surgery through basic research to achieve rational clinical applications in the future.In this paper,the applications and achievements of 3D technology in burn surgery in recent years are summarized.
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组织工程促血管化策略的研究进展
随着组织工程的不断发展,已有多种工程化组织或器官如皮肤、骨、软骨等被成功研发并应用于临床,但血管化问题仍是组织工程发展和应用所面临的主要挑战之一.为了实现快速血管化的目标,各国学者对血管化进程、影响因素及相关机制进行了深入研究.目前促进血管化的方法主要包括细胞策略和支架策略,涉及(干)细胞应用、生物材料支架构建与修饰、生物活性因子运用等诸多方面.本文就组织工程促血管化策略作一综述.
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组织工程血管化研究进展
理想的组织工程组织或器官需要有足够的微循环结构来保证其存活,缺乏足够的血管网是组织工程组织发展相对落后的主要原因之一,也是商品化组织工程产品临床应用效果不太理想的关键因素之一.
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组织工程皮肤的应用研究
目前,人们对人工活性皮肤替代物(细胞工程或组织工程人工皮肤)的研究已进行了约半个世纪.将表皮细胞培养于经辐照的鼠成纤维细胞(Fb)滋养层,是组织工程皮肤治疗大面积烧伤的里程碑[1].由于培养基的改良与商品化,促使角质形成细胞的无血清层和无滋养层培养成功,结合早期切痂和应用临时皮肤覆盖物,无论多大面积的烧伤创面,理论上均可在伤后3~4周被覆盖,但现实情况距之甚远.
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组织工程血管化的研究进展
组织工程是21世纪生命科学的研究热点之一,其方法是将种子细胞种植到支架材料上组成有活性的复合体,终建立组织学及功能、特性近似于人体的组织和器官替代物.目前的组织工程皮肤在临床应用受限、移植成功率不高的一个重要原因是缺乏血管结构,移植早期不能及时建立血运[1].因此,要成功构建复杂的组织工程化组织和器官,血管化是必需的.目前关于血管化的研究主要以组织工程皮肤为对象.本文对组织工程组织血管化的研究方法和策略作一综述.
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皮肤组织工程进展
组织工程一词,认可于1987年华盛顿国家科学基金会生物工程会议,它是运用工程学和生命科学的原理和方法,对组织替代物的恢复、维持和功能改善进行开发研究的一门学科[1].皮肤是人体大、易受损的器官,且皮肤组织工程研究开展较早,本文就近年来皮肤细胞培养及皮肤类似物的研究进展作一综述.
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创面敷料的发展趋势
理想的创面敷料应包括保温保湿、防治感染、促进愈合等作用,但目前临床上尚无完全理想的敷料.未来敷料发展趋向于具有多重功能,适应多种创面;利用组织工程技术,将自体或者异体活体细胞与生物敷料有机组合,达到良好的组织相容性和永久性覆盖创面的目的.智能化敷料的应用,利于实施更加个性化医疗,使创面治疗更为有效、优化和便捷.
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进一步重视慢性难愈性创面成因分析与非手术治疗
There are many pathogenic correlation factors of chronic refractory wound.Due to the complexity and particularity of the causes of wounds and lack of a standard diagnosis guide,it is hard to treat this kind of wound.Based on our recent scientific research data and the relative research at home and abroad in the present,we systematically analyze and summarize the causes and non-surgical treatment of chronic refractory wound in this article.
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完美与遗憾梦想与现实--组织工程在创面修复中的现状与未来
曾听一位严重烧伤患者的母亲这样说道:"尊敬的大夫,我由衷地感谢您用高超的医术把我儿子从烧伤的死亡线上挽救回来.但我将诅咒你们一辈子,因为我儿子的严重瘢痕和畸形使他生不如死,为此我们母子将煎熬终生!"这段话是对我们医务工作者的赞美还是指责,是我们无力创造健康幸福还是在无意中制造痛苦?此时此刻,深感科学的肤浅与无奈.
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第一届中欧创面修复学术会议成功召开
由中华医学会创伤学分会组织修复专业学组、欧洲创面技术学会共同主办,上海市烧伤研究所、国家干细胞技术工程研究中心等协办,上海交通大学医学院附属第九人民医院承办的第一届中欧创面修复学术会议于2011年4月9-11日在上海成功召开。来自英国、法国、德国、意大利、荷兰、丹麦、美国、印度、日本、新加坡、中国的逾200位代表参加了本次会议。会议围绕“创面修复的转化医学实践”这一主题展开了热烈的研讨。大会特邀专家就国内外创面修复领域从基础研究到临床转化实践的新进展作精彩学术报告:(1)第三军医大学大坪医院王正国院士概述了“组织损伤与修复”领域的新进展,对组织工程、汗腺再生、生长因子及相关介质、促愈方案等热点研究内容进行了精彩点评。(2)解放军总医院第一附属医院付小兵院士向大会介绍了中国慢性难愈合创面流行病学的新研究成果,系统分析所面临的机遇和挑战并提出了应对策略。