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  • 脱细胞真皮基质及其临床应用

    作者:付晋凤;陈斌

    脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix, ADM)作为一种永久性真皮支架已成功用于皮肤创面修复、组织充填、重建及美容整形领域.由于ADM去除了皮肤组织中的细胞成分和部分可溶性蛋白,使其免疫原性显著降低,并且提高了组织相容性,被广泛应用于烧创伤所致的皮肤缺损以及口腔黏膜修复、腹壁缺损修补、硬脑膜修补、软硬组织充填及乳房重建等领域,此外,作为人工真皮的支架材料还被应用于组织工程皮肤的构建.

  • 脱细胞异种真皮支架与自体薄皮片治疗烧伤55例

    作者:李培福;杨敏杰;潘银根;吴德华;冯祥生;邵强

    1998~1999年,我院用江苏启东市医疗用品研究所研制的脱细胞异种真皮支架与自体薄皮片复合移植治疗深Ⅱ度、Ⅲ度烧伤切削痂创面及瘢痕切除创面55例,效果满意.

  • 组织工程皮肤用真皮支架细胞相容性的比较研究

    作者:程树军;黄锦桃;李海标

    目的研究几种真皮支架的细胞相容性,为构建组织工程皮肤提供资料.方法取胶原海绵、明胶海绵、PLGA和PHBV共4种真皮支架,与小鼠成纤维细胞和ES源表皮样干细胞体外培养,观察前者对后者粘附率的影响,及对成纤维细胞增殖的影响,评价真皮支架的细胞相容性.结果成纤维细胞和ES源表皮样干细胞在4种支架材料上均能粘附存活,成纤维细胞能增殖,但在胶原海绵、PHBV和PLGA支架上的增殖率明显高于明胶海绵.结论几种真皮支架的细胞相容性较好,可用于新型组织工程皮肤的构建.

  • 人血浆作为真皮支架对自体皮肤增殖的影响:组织学和免疫组织化学试验

    作者:Stefano Negri;Giada Federici;Sara Farinato;Chiara Fila

    背景:组织工程是一个多学科研究的交叉学科,其目标是使人体损伤的组织和器官再生,通过这种假设,几乎所有的动物组织都可以在实验室进行培养.一般的方法是从需要移植的患者身上提取干细胞,在一定的支持条件下允许其生长、增殖、生产为可替换的组织.另一方面,寻找细胞能够互相联结并形成分层结构的合适的支持条件,如基质或支架等非常必要.目前用于烧烫伤治疗的材料有很多种.如胶原,透明质酸、纤维蛋白和聚乳酸及其共聚物.目的:讨论以新型的生物材料自体血浆为支架对自体成纤维细胞和角质化细胞生长、扩张、增殖的影响.设计:建立一种真皮再生的方法,将自体成纤维细胞浸于人血浆基质中,排除各种影响样本安全性和排斥反应的问题,应用同样的方法在新的真皮上获取角质化细胞.时间及地点:实验于2008年在意大利曼多瓦C.Poma医院动物工厂完成.材料:人角质化细胞和成纤维细胞取自1例58岁乳房切除患者的皮肤碎片.实验得到C.Poma医院独立伦理委员会批准,患者知情同意.方法:从自体活组织皮肤样本中分离人角质化细胞和成纤维细胞,置于培养瓶中增殖,随后将自体血浆作为皮肤移植形成构造的支架,免疫和免疫组织化学特征显示与正常皮肤相似.主要观察指标:将血浆样本用甲醛固定,埋入石蜡,苏木精一伊红染色,用显微镜进行细胞计数.所有样本均经免疫组织化学评估.结果:在血浆基质上获得了多层规则形状的角质化细胞和成纤维细胞,基底膜的形成说明自体血浆是角质化细胞和成纤维细胞的生长、分化、扩展的良好支架,真皮和表皮细胞联结重建皮肤移植与正常皮肤无异.结论:血浆作为角质化细胞和成纤维细胞分化、扩展的支架表现出良好的性能,同时实验还特别发现成纤维细胞浓缩血浆可以暂时替代皮肤,也是角质化细胞生长的强有力的支架.此外血浆还具有廉价,易于制各等优点.自体角质化细胞和成纤维细胞及自体血浆的应用,可以避免血种类型的免疫排斥反应.这种治疗方法给有慢性缺损并且需要连续移植的患者带来了希望.

  • 猪胶原基真皮支架成纤维细胞生长特性的观察

    作者:张爱君;宋国栋;曹成波;汪运山;卞东会

    目的:观察成纤维细胞在一种新型的猪胶原基真皮支架(PCDM)上的粘附生长特性,探讨提高异种真皮支架细胞相容性的方法.方法:分别在PCDM乳头层面和网状层面种植人皮肤成纤维细胞,于接种后1、7、14 d通过HE染色,扫描和透射电镜下观察成纤维细胞在PCDM上的生长情况.结果:人皮肤成纤维细胞早期在乳头层真皮面的粘附优于网状真皮面,而晚期更多的网状真皮面可见到细胞形成复层并长入基质内部.结论:PCDM具有良好的细胞相容性,是与异体真皮为接近的天然真皮支架,改良生产工艺以及去除基底膜和真皮乳头层可提高其细胞相容性.

  • 真皮支架材料的组织相容性研究

    作者:刘爱军;黄锦桃;李海标

    目的 探讨不同真皮材料的体内组织相容性,筛选合适的真皮支架材料.方法 将胶原、硫酸软骨素、透明质酸和甲壳糖按一定比例制备成复合凝胶,将其同胶原海绵、明胶海绵3种真皮支架材料埋植入129小鼠皮下,术后3,7,10 d;2,3,4,5,6周取材,形态学观察材料在体内的反应、血管化进程和降解速度等,评价其组织相容性.结果 复合凝胶和胶原海绵体内引起轻微的炎症反应,以创伤性修复为特征,约4周降解.明胶海绵的组织反应以淋巴细胞和巨噬细胞浸润为主,降解周期约5周.结论 3种材料均无明显毒性,组织反应低,易于血管化,相容性好.

  • 胶原基真皮再生支架的微结构控制

    作者:马列;高长有;沈家骢

    综述了影响胶原基真皮再生支架微结构的各种因素及其控制方法.胶原基真皮支架的生物活性和修复创面的能力受到诸如除胶原外的其它主要材料(第二组分)、支架的孔径和孔隙率、支架厚度、生物活性因子以及交联度等多方面因素的综合影响.从材料学、生物学和医学的角度综合地应用物理、化学和生物学的手段探索各种影响因素的控制方法是组织工程皮肤研究的重点.

  • 几丁质-胶原蛋白膜的制作及皮下埋植实验

    作者:王永胜;侯春林;肖仕初;刘志国;杨珺

    目的探讨几丁质-胶原蛋白膜作为真皮支架的可行性.方法以酸溶法制备胶原溶液,添加一定比例的脱乙酰化几丁质,冻干成膜,0.05%戊二醛溶液浸泡交联,行体外酶降解实验,检测其耐受酶降解能力;将制备的几丁质-胶原蛋白膜包埋于36只SD大鼠皮下,术后3、5天,1、2、3、4、6、8和12周取材,检测其组织相容性、血管化能力及材料在体内降解情况. 结果制备的几丁质-胶原蛋白膜,呈微黄、半透明状,纤维排列呈网状,一侧较光滑,孔小,另一侧孔稍大,孔径大小保持在50~250 μm之间,其体外降解缓慢.皮下埋植实验术后5天~2周显示材料具有良好的组织相容性,无明显炎性反应,血管化早,体内降解缓慢;8周后经改建可形成纤维排列较规则的类真皮样结构. 结论几丁质-胶原蛋白膜具有较好的物理及生物学性能,组织相容性好,血管化能力强,体内、外降解缓慢,具有良好的真皮替代功能.

  • 异种脱细胞真皮与自体皮片复合修复四肢皮肤缺损

    作者:徐惠玲;江长青;吴兆亚;方云德;钱尼文;潘银根

    自1998年以来,我们用猪真皮经特殊处理后,研制成异种脱细胞真皮支架,并与自体皮片复合移植,临床应用22例,复合皮全部成活,创面愈合平坦,柔软,外观近似正常人皮肤,为四肢皮肤缺损创面的修复提供了一种新方法。1 材料 健康白色小猪,50 kg。剃毛洗净皮肤并剥皮取0.3~0.4 mm厚度的去表皮断层皮片,制成大小不同规格,洗必泰液消毒后用戊二醛对皮片的细胞外基质进行交联,用胰蛋白酶、DNA及EDTA鳌合剂等对皮片进行处理,完整保护细胞外基质的形态和成份,用特制的制网机制成细网,PVC塑料袋包装,常温下保存备用,材料均通过国家质量检测。

  • 组织工程皮肤中感觉神经再生的研究进展

    作者:朱志康;吴攀;王新刚;韩春茂

    严重的皮肤损伤不仅会造成大量的组织缺损,还会导致各种感觉功能丧失.组织工程皮肤为创面高质量修复提供了新途径,但在感觉功能恢复方面仍存在诸多问题,如痛觉、触觉、温度觉的异常甚至丧失.因此,在应用组织工程皮肤促进创面愈合的同时,感觉神经的再生和功能恢复越来越受到关注.本文介绍了皮肤感觉神经的种类、分布、再生及其影响因素,并从组织工程皮肤的真皮支架、种子细胞、神经营养因子等方面探讨促进感觉神经再生的策略.

  • 天然高分子材料及其衍生物制备组织工程真皮支架的研究进展

    作者:李冉;汪虹;冷崇燕;王宽;解英

    Natural polymeric materials and their derivatives are organic macromolecular compounds which exist in plants,animals,and micro-organisms.They have been widely used in the preparation of scaffolds for skin tissue engineering recently because of their good histocompatibility and degradability,and low immunogenicity.With the improvement of tbe preparation technics,composite materials are more commonly used to make scaffolds for dermal tissue engineering.This article summarizes the classification and research status of the commonly used natural polymer materials,their derivatives,and composite scaffold materials,as well as makes a prospect of the research trends of dermal scaffold in the future.

  • 生物合成支架材料的研究进展

    作者:田建广;夏照帆

    皮肤组织工程就是应用组织工程学技术的基本方法,将组织细胞(表皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞等)经体外培养扩增后,黏附于一种生物相容性良好并可被人体逐步降解吸收的真皮支架上,进行人工皮肤构建和培养.其中,真皮支架为细胞的增殖、繁衍提供三维空间,使之进行营养和气体交换、排除废物,因此真皮支架材料的性能直接影响着体外构建人工皮的质量和移植后的创面愈合质量.目前,用于制备真皮支架的材料种类较多,难以明确分类,一般多根据材料的来源大体分为天然生物材料和合成生物材料两大类.

  • 移植不同人工真皮支架对猪Ⅲ度烧伤创面血管化及瘢痕形成的影响

    作者:滕建英;郭瑞;谢菁;孙东杰;沈明强;徐少骏

    目的 了解移植3种人工真皮支架对Ⅲ度烧伤创面血管化及其瘢痕形成的影响.方法 采用随机数字表法将18只广西巴马小型猪分成壳聚糖支架组、磺化羧甲基壳聚糖支架组、ADM支架组,每组6只,在每只猪背部制作Ⅲ度烫伤(下称烧伤)创面4或8个,共96个.伤后48 h切痂后,前2组创面分别移植胶原-壳聚糖/硅橡胶双层人工皮、胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶双层人工皮,ADM支架组创面移植ADM,每组创面24个;剩余24个创面作为油纱对照组,直接覆盖油纱.于支架移植或油纱覆盖后l、2、3、4周(“4周”指植入支架或覆盖油纱后2周+移植表皮后2周),观察各组创面的大体情况;取创面中央部位组织,采用生物素-链霉亲和素-过氧化物酶染色法观察CD31、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、TGF-β3表达阳性的血管或细胞,并计数.对数据行单因素方差分析和LSD检验. 结果(1)大体观察可见,磺化羧甲基壳聚糖支架组创面血管化程度明显优于其余3组.(2)移植或覆盖后1~3周各组创面组织CD31阳性血管数持续增多,第4周时3个支架组均减少.各时相点4组间比较,F值分别为24.005、38.822、25.274、3.856,P<0.05或P<0.01;磺化羧甲基壳聚糖支架组l~3周明显多于其余3组(P值均小于0.05).(3)移植后1~3周,3个支架组创面组织α-SMA阳性血管数均持续增多,4周时下降;油纱对照组覆盖后1~4周持续增多.各时相点4组间比较,F值分别为22 637、28.087、62.651、18.055,P值均小于0.01.磺化羧甲基壳聚糖支架组各时相点均明显多于其余3组(P值均小于0.05).(4)移植或覆盖后1~4周每400倍视野下TGF-β1阳性细胞数:壳聚糖支架组分别为(127±8)、(167±19)、(170±18)、(144±10)个,磺化羧甲基壳聚糖支架组为(171±17)、(207±25)、(130±30)、(69±16)个,ADM支架组为(106±8)、(159±17)、(171±11)、(145±11)个,油纱对照组为(100±20)、(150±18)、(200±14)、(172±20)个;各时相点4组间比较,F值分别为29 675、9.503、13 107、54.515,P值均小于0.01.1、2周时磺化羧甲基壳聚糖支架组明显高于其余3组(P值均小于0.05),3、4周时其表达量下降,明显低于其余3组(P值均小于0 05).(5)移植或覆盖后1~3周,各组创面组织每400倍视野下TGF-β3阳性细胞数持续增多,4周时下降或继续升高;各时相点4组间比较,F值分别为140.612、945 850、714.037、119.147,P值均小于0.01.磺化羧甲基壳聚糖支架组各时相点明显高于其余3组(P值均小于0 05). 结论 胶原-磺化羧甲基壳聚糖真皮支架在烧伤创面愈合过程中可快速诱导血管生成和成熟,有利于创面早期修复和抑制瘢痕增生.

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