首页 > 文献资料
-
漆姑草醇提物对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡相关蛋白表达的影响
目的:研究漆姑草醇提物(HSJ)对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡相关蛋白表达的影响,探讨其诱导凋亡的分子机制.方法:采用不同浓度的HSJ作用HL-60细胞后,Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡形态变化;Western blot法检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果:HSJ作用后HL-60细胞出现浓染致密的颗粒状荧光及明显的核形态变化;与阴性对照组相比,凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达水平增高,Bcl-2/Bax蛋白的比值降低,差异具有统计学意义(Pp＜0.05).结论:HSJ能诱导HL-60细胞凋亡,其作用可能与降低Bcl-2/Bax蛋白的比值,增加Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平有关.
-
Caspase介导的Fas凋亡途径
凋亡是导致细胞死亡的调节性生理过程.Fas在各种疾病和细胞凋亡的发生中起到首要作用.Caspase为半胱氨酸蛋白酶家族,是凋亡的中心调节者,一旦Caspase-8,10被激活,引起Caspase的断裂及激活下游的Caspase-3,6,7,作用于Bcl-2家族某些成员如Bad、一些骨架蛋白和RB蛋白等并使其断裂,从而导致细胞凋亡.本文重点讨论了Caspase-3,-8的激活机制及其在Fas诱导细胞凋亡中的作用.
-
神经元凋亡与Caspase家族及细胞周期研究进展
近年来,车祸与运动造成的脊髓损伤呈现逐年升高的趋势.继发性脊髓损伤主要的病理变化之一,是神经元凋亡,而神经元凋亡受多种机制的调节.本文主要综述了Caspase家族和细胞周期对细胞凋亡的调控,其中,Caspase3通过线粒体通路及Fas介导的死亡信号途径,激活细胞的程序性死亡,引起细胞凋亡;而细胞周期分子则直接激活凋亡级联成员,并且,几种细胞周期相关通路都能够参与中枢神经系统疾病相关的神经元细胞的死亡.对于神经元凋亡机制的深入研究,可为研究神经保护与修复、减轻持续神经损伤靶向药物的开始与应用提供参考.
-
Bcl-2家族研究进展
细胞凋亡(apoptosis)是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡[1].细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,由死亡信号诱发的受调节的细胞死亡过程,是细胞生理性死亡的普遍形式.凋亡过程中DNA发生片段化,细胞皱缩分解成凋亡小体,被邻近细胞或巨噬细胞吞噬,不发生炎症.凋亡是多基因严格控制的过程.这些基因在种属之间非常保守,如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等[2].
-
aspase家族与细胞凋亡
细胞凋亡(apoptosis)或程序性死亡(programmed cell death)是自然发生的细胞死亡过程,受基因调控,在多细胞生物的发育过程起重要作用.是细胞的自稳平衡(homeostasis)机制对内外刺激因素的主动应答反应,是借助"细胞丢失,正常细胞更新,病理情况下清除异常或非法身份细胞"的生理平衡.Caspase家族是一组结构特征相似的半光氨酸蛋白酶,细胞凋亡的发生与Caspase家族成员的活化有直接关系.本文着重介绍细胞凋亡及Caspase家族在凋亡发生中的作用.
-
小RNA技术干扰p21联合环磷酰胺对HepG2细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨小RNA干扰p21表达联合环磷酰胺对HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制. 方法 将化学合成的针对p21的siRNA序列转染至HepG2细胞,将HepG2细胞分为5组:空白对照组、阴性对照组、RNA抑制组、环磷酰胺组、联合组(RNA抑制+环磷酰胺).采用MTT比色法、流式细胞术和分光光度法分别检测HepG2细胞增殖、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族成员caspase-9、caspase-3和caspase-6的活化程度. 结果 p21 siRNA转染后,相对于环磷酰胺单独处理组,联合处理组HepG2细胞增殖率显著降低,而细胞凋亡率则率明显升高(P＜0.01);caspase-9、caspase-3和caspase-6的活化程度显著升高(P＜0.01). 结论 p21靶向RNA抑制作用联合环磷酰胺处理显著促进了HepG2细胞凋亡,p21可作为肝癌基因治疗的后选新靶点.
-
姜黄素增加肺癌A549细胞对TRATL敏感性的方式研究
近年研究表明:姜黄素可通过刺激caspase3、caspase 8的活性,抑制Bel-2、NF-κB的活性,体外诱导人肺癌细胞发生凋亡,且与其他化疗药物有协同作用.
-
P53蛋白在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤和血管痉挛中的作用
p53是重要的肿瘤抑制因子,在细胞内起着抑制细胞周期、促进基因组修复和诱导凋亡等多重作用.在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后,p53在缺氧等多种因素作用下被激活,并通过其靶蛋白、Bcl-2和Caspase家族蛋白等发挥促血管内皮细胞及脑内神经元凋亡的作用,并导致SAH后早期脑损伤和后期血管痉挛的发生.应用p53特异性的抑制剂可以阻断p53的活化,显著恢复SAH后的血脑屏障功能并缓解脑血管痉挛.本文讨论了p53在SAH后的血管内皮细胞和神经元凋亡中的作用机制,并进一步探讨应用p53抑制剂拮抗p53功能以治疗SAH后早期脑损伤和血管痉挛的可能性.
-
细胞凋亡相关蛋白的研究进展
细胞凋亡是个体发育过程中由一系列蛋白调控的细胞主动死亡过程.其中,bcl-2家族、caspase家族、p53蛋白、survivin蛋白都是重要的凋亡调节因子,在细胞凋亡中相互联系,相互作用,从而调控细胞凋亡.本文探讨了bcl-2家族、caspase家族、p53蛋白、survivin蛋白对细胞凋亡的调控机制.
-
NF-kB信号通路在紫草素诱导Tca8113细胞凋亡中的作用机制
目的:探讨NF-kB信号转导通路在紫草素诱导Tca-8113细胞凋亡中的作用.方法:采用蛋白印迹法检测IkBa,磷酸化-IKBa、bcl-2及Bax蛋白的表达,采用EMSA方法检测NF-KB的DNA结合活性,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)分析Caspase 3、8、9的活性.采用SPSS12.0软件包对数据进行单因素方差分析及t检验.结果:经过紫草素作用的癌细胞,磷酸化-IkBa蛋白及NF-kB的DNA结合活性均明显降低,Bcl-2蛋白表达显著减少.Caspase 3、8、9在紫草素诱导的细胞凋亡过程中被激活.泛Caspase阻断剂Z-Asp-CH2-DCB可以明显抑制紫草素引起的细胞凋亡(P=0.021.结论:紫草素诱导口腔鳞癌细胞的凋亡作用,至少部分通过抑制NF-kB信号通路活性,继而调节其下游调亡调控分子,包括bcl-2家族及Caspase家族等来实现.应用紫草素特异性抑制口腔鳞癌中高激活状态的NF-kB通路,可望成为口腔鳞癌防治的一条新的有效途径.
-
姜黄素对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制
目的观察姜黄素对肺腺癌细胞A549生长的抑制作用,并探索其机制.方法四氮唑蓝法测定姜黄素作用于肺腺癌细胞A549的吸光值,计算细胞抑制率;流式细胞仪测定40μmol·L-1姜黄素或空白对照培养液的肺腺癌细胞凋亡率与凋亡相关蛋白Caspase-9表达;比色法测定凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-8表达;观察加用Caspase-9抑制剂后Caspase-3的表达.结果姜黄素对肺腺癌A549细胞有抑制作用,存在剂量依赖(r=0.619;P＜0.01)与时间依赖(r=0.618;P＜0.01);姜黄素对肺腺癌A549的凋亡率(30.25%)明显高于对照组(1.32%)(P＜0.001);姜黄素组肺腺癌细胞A549的凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达明显高于对照组(P＜0.001);姜黄素组加用Caspase-9抑制剂后Caspase-3表达明显下降,仍高于对照组(P＜0.001).结论姜黄素诱导肺腺癌A549细胞凋亡可能与激活Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3有关.
-
慢性铅中毒对大鼠脑神经细胞caspase家族的影响
目的 研究不同浓度醋酸铅染毒对大鼠脑细胞caspase家族表达的影响,探讨铅中毒诱导脑神经细胞凋亡的可能机制.方法 40只Wistar大鼠随机分为4组:正常组(双蒸水,A组),高铅浓度组(2 g/L,B组),中铅浓度组(1 g/L,C组),低铅浓度组(0.5 g/L,D组),各组大鼠分别自由饮用不同浓度的醋酸铅水溶液 2个月; 分光光度法检测脑组织匀浆液中caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的含量.结果 与A组大鼠比较,随染铅剂量增加B、C、D组大鼠脑组织中caspase- 3、caspase-8、caspase-9蛋白含量显著增高(P<0.001 、P<0.01、P<0.05),并出现一定的浓度依赖性.结论 铅中毒能明显增加caspase家族蛋白的表达,诱导大鼠脑神经细胞凋亡.
-
健脾消癥方诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用研究
目的 :探讨健脾消癥方对肝癌细胞HepG2凋亡的影响及机制.方法 :MTT法观察健脾消癥方对肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721增殖的影响,Hochest 33342染色、透射电镜观察健脾消癥方对HepG2细胞超微结构的改变作用,DCFH-DA探针法观察健脾消癥方对HepG2活性氧水平的影响,Western blot检测健脾消癥方对HepG2的凋亡相关半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9表达的影响.结果 :健脾消癥方作用HepG248h后,细胞形态及超微结构出现典型的凋亡特点,细胞内活性氧浓度升高,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调.结论 :健脾消癥方对HepG2有较好的诱导凋亡的作用,其作用机制可能与其增加细胞活性氧(ROS)水平及下调Caspase-3、Caspase-9蛋白有关.
-
药物延迟预处理减少在体幼兔缺血再灌注损伤后的心肌细胞凋亡
目的 在完全模拟心脏体外循环手术的在体缺血再灌注损伤幼兔模型中,验证二氮嗪介导的延迟预处理是否能够减少心肌细胞凋亡.方法 3～4周龄健康新西兰幼兔32只随机分为:对照组;缺血再灌注(I/R)组;二氮嗪(DZX)组:幼兔24 h前耳缘静脉注射DZX(1 mg/kg);DZX+PDTC组:将实验用幼兔24 h前耳缘静脉注射DZX(1 mg/kg)及二硫代氨基甲酸吡咯烷PDTC(100 mg/kg).建立在体幼兔体外循环缺血再灌注损伤模型,阻断升主动脉1 h后开放循环再灌注6 h, 而对照组仅建立体外循环,不阻断升主动脉,经历实验组相同体外循环时间.取心室壁心肌做TUNEL染色检测凋亡细胞, Caspase-3酶活性的检测, Western Blot检测心肌细胞Bax和Bcl-2的表达.结果 ① TUNEL检测结果:缺血再灌注损伤所导致的心肌细胞凋亡较对照组均显著增高(P<0.01);DZX组凋亡指数较I/R组明显减少(P<0.01);加入PDTC后,凋亡指数又较DZX组明显增多(P<0.01).② I/R组较DZX组Caspase-3活性明显升高(P<0.01).但DZX组和DZX+PDTC组Caspase-3活性并无差别(P>0.05).③与I/R组相比DXZ组幼兔心肌细胞Bcl-2/Bax显著增加(P<0.01);与DZX组相比DZX+PDTC组幼兔心肌细胞中Bcl-2/Bax显著减少(P<0.05).结论 二氮嗪介导的延迟预处理能够减少心肌细胞凋亡;NF-κB通过调控凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达在未成熟心肌的延迟预处理中起着关键作用.
-
脑缺血性程序性细胞死亡的分子机制
程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)是脑发育进程中受基因表达和蛋白合成严格控制和调节、导致神经元死亡的一过程.脑缺血导致细胞发生PCD是脑缺血及再灌注损伤的必然结果之一.近来对Caspase家族、Bcl-2家族、线粒体和其它一些分子的新研究和进展表明它们均介入到这一过程中,对它们的全面认识和了解有助于解决PCD的分子机制.
-
Fas介导的凋亡与caspase家族
Fas介导的细胞凋亡在维持机体稳态平衡方面具有极其重要的作用.Fas与Fas配体结合启动凋亡.在细胞凋亡分子机制中,caspase家族成员是Fas介导凋亡信号传导途径的关键效应分子,并参与凋亡过程的调控.凋亡调节蛋白和caspase抑制剂可通过多种途径对凋亡过程产生影响,有希望成为治疗因细胞凋亡过度所致疾病的重要分子.
-
p21基因沉默联合表阿霉素促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其机制的研究
目的：研究siRNA沉默p21基因表达联合表阿霉素对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。方法将化学合成的针对p21的siRNA序列转染至MCF-7细胞，将MCF-7细胞分为5组：空白对照组、阴性对照组、RNA抑制组、表阿霉素组、联合组（RNA沉默＋表阿霉素）。采用MTT比色法、流式细胞术和分光光度法分别检测MCF-7细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族成员Caspase-9、Caspase-3和Caspase-6的活化程度。结果 p21 siRNA转染后，相对于表阿霉素单独处理组，联合组细胞死亡率明显升高（P<0.01）；Caspase-9、Caspase-3和Caspase-6的活化程度显著升高（P<0.01）。结论 p21靶向RNA抑制联合表阿霉素处理显著促进了MCF-7细胞凋亡，p21可作为乳腺癌基因治疗的后选新靶点。
-
Caspase家族在肿瘤血管生成拟态形成过程中的作用
目的 探讨凋亡相关蛋白Caspase-3及其上游的Caspase-8、Caspase-9在肿瘤血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)中的作用.方法 建立C57BL小鼠B16恶性黑色素移植瘤模型,并随机分为Caspase-3抑制剂组、Caspase-8和Caspase-9抑制剂联合用药组、对照组,待成瘤后每日分别注射Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9抑制剂,记录肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线.通过免疫组化-PAS双染法检测并计数各组肿瘤组织VM的形成数目;通过明胶酶谱法检测肿瘤组织中MMP-2和MMP-9的活性.结果 与对照组相比,Caspase-3抑制剂组和Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组肿瘤体积的生长速度较缓慢,差异有统计学意义(P<0.05),Caspase-3抑制剂组和Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组肿瘤组织中VM的数量小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组MMP-2、MMP-9的活性强于Caspase-3抑制剂组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组MMP-9的活性强于Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Caspase家族在恶性黑色素瘤VM的形成过程中起重要作用.
-
Caspase 与视网膜细胞凋亡的研究进展
Caspase作为凋亡执行和效应过程中的关键酶，其级联活化反应是导致视网膜上光感受器细胞、神经节细胞等发生凋亡的共同途径，与多种常见眼病如青光眼、视网膜脱离、年龄相关性黄斑变性、缺血性视网膜损伤、视网膜母细胞瘤等的发生发展密切相关，有关Caspase抑制剂的实验研究近年来也备受关注，本文围绕Caspase在视网膜细胞凋亡中的作用及其相关机制进行综述。
-
Caspase家族与细胞凋亡的研究进展
近年来Caspase蛋白酶家族是细胞凋亡研究的热点,Caspase被认为是细胞凋亡的中心环节和执行者.现就Caspase蛋白酶家族生物学特性、分布、作用底物、抑制剂,以及激活机制、凋亡调控基因之间的作用等从分子机制对凋亡调控的研究现状及与肿瘤和疾病防治可能的应用前景进行综述.
