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自由基清除剂依达拉奉的临床应用
药理作用依达拉奉的主要成分为3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮.药效学研究及动物实验证实依达拉奉是一种强效的羟自由基清除剂和抗氧化剂,能清除缺血周边和缺血再通部位产生的大量OH-,从而抑制神经细胞功能障碍.依达拉奉作为自由基捕获剂能抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶的活性,刺激前列环素的生成,减少炎症介质白三烯的生成,降低羟自由基的浓度,缩小缺血半暗带发展成梗死的体积,并抑制迟发性神经元死亡[1].
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胆红素清除自由基作用的顺磁共振研究
本研究利用顺磁共振(ESR)和自旋捕集技术,测定了胆红素清除活性氧自由基的作用,以此来探讨其抗氧化机制。利用ESR和自旋捕集技术,测定胆红素对Fenton体系[产生羟自由基(*OH)的化学反应体系]产生的*OH的清除作用、对次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧自由基(O(*)/(2))的清除作用以及对亚油酸脂质过氧化体系产生的脂质自由基(L*)的清除作用。实验以维生素C、E(VC、VE)作为对照样品。
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水蛭的高效液相指纹图谱研究
目的 以黄嘌呤和次黄嘌呤为对照品,系统的完成水蛭指纹图谱的建立.方法 采用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相 0.01 mol/L磷酸二氢钾-甲醇梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.8 ml/min,柱温25 ℃,进样量20 μl.结果 10批水蛭药材的色谱指纹图谱得到10个共有峰,其中两个为黄嘌呤和次黄嘌呤的色谱峰.利用药典委员会颁布的<中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A>进行评价,高效液相指纹图谱的相似度在0.669~0.994之间.结论 所建立的高效液相指纹图谱可有效地鉴定水蛭,该方法为水蛭药材的质量评价提供了实验数据基础.
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泄浊除痹汤对高尿酸血症小鼠血尿酸的影响
目的:观察泄浊除痹汤对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响.方法:采用尿酸生成的前体物质次黄嘌呤(Hypoxanthine)为模型药物,制备高尿酸血症动物模型,并观察泄浊除痹汤(由中药土茯苓、萆薢、生薏苡仁、威灵仙、木瓜、泽兰、王不留行、牛膝、生蒲黄、泽泻、车前草、山慈菇等药物组成)的作用.结果:口服泄浊除痹汤与别嘌呤醇均能显著地减少高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,具有一定的量效关系.结论:泄浊除痹汤对高尿酸血症小鼠具有明显降低血清尿酸水平作用.
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HPLC测定芩百清肺浓缩丸中次黄嘌呤
目的:建立芩百清肺浓缩丸中次黄嘌呤的高效液相含量测定法.方法:采用HPLC-DAD法,色谱柱Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相甲醇-水(2∶98),检测波长254 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:次黄嘌呤在1.94~31.04μg呈良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.14%,RSD 1.28%.结论:方法操作简便、灵敏度高、准确性和重复性好,可作为芩百清肺浓缩丸的质量控制方法.
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HPLC测定水蛭仿生酶解有效部位中次黄嘌呤及尿苷
目的:测定水蛭仿生酶解有效部位中次黄嘌呤及尿苷的含量,为其质量控制提供科学依据.方法:采用SinoChrom ODS-BP液相色谱柱,以甲醇-水为流动相,测定波长254 nm.结果:次黄嘌呤在0.88~14.08 g·L-1呈良好线性关系(r=0.999 7),平均加样回收率为99.69%,RSD 1.23%;尿苷在2.12~33.92 g·L-1呈良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为99.20%,RSD 1.17%.结论:该法操作简便,结果可靠,为水蛭仿生酶解有效部位的质量研究提供有效的方法.
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水蛭炮制前后质量比较
目的:讨论炮制方法对水蛭的影响.方法:以热浸法测定水溶性浸出物与醇溶性浸出物的含量;以凝血酶法测定水蛭素的含量;以HPLC测定次黄嘌呤的含量.结果:生水蛭的含水量,水溶性浸出物含量,醇溶性浸出物含量,水蛭素含量,均高于制水蛭的含量,而制水蛭的次黄嘌呤含量则高于生水蛭的次黄嘌呤含量.结论:滑石粉炒水蛭使水蛭药性峻烈的活性成分含量降低,从而降低毒性,缓和其破血通经之性.
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活性氧致精子运动参数变化的观察
我们采用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶反应体系产生活性氧(ROS),在体外与具有正常生理功能的精子作用,观察精子运动参数的变化,报告如下.
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HPLC同时测定人尿中假尿苷次黄嘌呤含量
目的建立一种同时检测人尿中假尿苷、次黄嘌呤含量的高效液相色谱方法(HPLC).方法色谱条件:Spherigel-C18色谱柱;流动相:0.02mol/L KH2PO4缓冲液;流速:1ml/min;UV:254nm.结果本法假尿苷线性范围为1mg/L~16mg/L,相关系数r=0.9986,平均回收率96%,低检测浓度0.2mg/L;次黄嘌呤线性范围为1mg/L~20/L;相关系数r=0.9902;平均回收率97%;低检测浓度为0.3mg/L.结论本法具有样品处理简单、稳定性高等特点,经临床验证具有较好的实用性.
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高效液相色谱法假尿苷次黄嘌呤含量测定
目的建立一种同时检测人血清中假尿苷、次黄嘌呤含量的高效液相色谱方法.方法色谱条件:Spherigel-C18色谱柱;流动相:含0.2%乙腈的0.02mol/LKH2PO4缓冲液;流速:1ml/L;UV:254nm.结果本法假尿苷线性范围为1mg/L~16mg/L,相关系数r=0.9986,平均回收率96%,低检测浓度0.5mg/L;次黄嘌呤线性范围为1mg/L~20mg/L;相关系数r=0.9902;平均回收率97%;低检测浓度为0.3mg/L.结论本法具有样品处理简单、稳定性高等特点,经临床验证具有较好的实用性.
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HPLC法测定低温粉碎胎盘粉中次黄嘌呤的含量
目的 研究超低温粉碎胎盘粉质量控制的方法.方法 采用HPLC法,以次黄嘌呤为指标性成分,对低温粉碎紫河车的成分进行含量测定.结果 样品中次黄嘌呤含量为0.0111%.结论 本实验采用的方法简便易行且稳定,为紫河车的精制提供依据.
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改变病情的抗风湿药物(二)
吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)本药可以选择性、非竞争性、可逆性地抑制次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶(IMPDH),进而抑制鸟嘌呤核苷酸的从头合成,导致鸟嘌呤核苷酸缺乏,DNA合成受阻,使细胞静止于G1期.
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次黄嘌呤与氧嗪酸钾不同剂量配伍制备高尿酸血症大鼠模型
目的 确定次黄嘌呤与尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾(OAPS)伍用制备高尿酸血症大鼠模型的合适剂量,为制备持续性高尿酸血症及痛风大鼠模型提供实验依据. 方法 给大鼠不同配伍剂量的次黄嘌呤(ig)与OAPS(sc)制备代谢性高尿酸血症大鼠模型,于造模后不同时间观察模型大鼠血清尿酸、尿素氮和肌酐水平. 结果 次黄嘌呤分别为125,250和500 mg·kg-1,OAPS以25,50和100 mg·kg-1与每个剂量的次黄嘌呤伍用造模.造模后3 h血清尿酸和肌酐浓度均有所升高,造模后9 h血清尿素氮浓度明显升高.在次黄嘌呤为500 mg·kg-1,OAPS为100 mg·kg-1时,造模后3,9和12 h模型大鼠血清尿酸浓度分别为(781±167),(627±291)和(366±196)μmol·L-1,明显高于正常对照组(86±10),(75±16)和(80±15)μmol·L-1;造模后24 h,血清尿素氮和肌酐水平[(199±96)mg·L-1和(55±16)μmol·L-1]均明显高于正常对照组[(61±5)mg·L-1和(21±2)μmol·L-1]. 结论 次黄嘌呤500 mg·kg-1和OAPS 100 mg·kg-1伍用制备的代谢性高尿酸血症大鼠模型具有血清尿酸浓度高和维持时间长的特点.
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HPLC法测定花鹿茸饮片中尿嘧啶及次黄嘌呤的含量
目的:研究花鹿茸饮片中尿嘧啶及次黄嘌呤的定量方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱:Diamonsil NH2(250×4.6mm 5μm);流动相:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液-0.1mol/L氯化钠缓冲液;检测波长:262nm.结果:尿嘧啶的线性范围为0.0097~0.13095μg(r=0.9996,n=5),次黄嘌呤的线性范围为0.00738~0.09963μg(r=0.9999,n=5),尿嘧啶平均加样回收率为100.0%,RSD=1.10%,次黄嘌呤平均加样回收率为99.0%,RSD=1.84%.结论:本法简便、灵敏、准确,可用于鹿茸饮片的质量控制.
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HPLC法测定脑苷肌肽注射液中次黄嘌呤含量的方法研究
目的:应用高效液相色谱法测定核酸中次黄嘌呤的含量以代替核酸的含量测定.方法:色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为0.001 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH6.9);流量1.0 mL·min-1;检测波长260 nm.结果:次黄嘌呤的浓度在2.1036~18.9320 mg·L-1的范围内线性关系良好,回归方程Y=69264.9X+6112.3(r=0.9990).平均回收率为94.0%,RSD为2.5%.结论:本方法简便、灵敏、准确.
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HPLC法测定广地龙中次黄嘌呤的含量
目的:建立准确、稳定的含量测定方法,有效地控制药材质量.方法:用稀乙醇浸泡广地龙粉,超声处理,采用HPLC法测定次黄嘌呤的含量.结果:测得线性范围为2~50μg,r=0.9999,平均回收率为99.5%,RSD为1.5%(n=9).
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高效液相色谱法测定蛴螬中7个成分的含量
目的 建立蛴螬中尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷含量的HPLC方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters HSS T3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)和水(B)进行梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1.0mL·min-,柱温为30℃.结果 7种成分线性回归方程的相关系数为0.999 1~1.000 0;平均回收率(n=6)在91.2%~97.4%,RSD在1.5%~2.3%.结论 该方法简便、准确、可靠,可为蛴螬的质量控制提供参考.
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高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的浓度
麦考酚酸酯(mycophenolate moftil,MMF)为麦考酚酸(mycophenolic acid,MPA)2-乙基酯类的衍生产物.MMF经病人口服后迅速大量吸收,并代谢为活性成分MPA.MPA是一种高效、选择性、非竞争性、可逆性的次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶抑制剂,可抑制鸟嘌呤核苷酸的合成途径.临床主要用于预防肾移植病人的排斥反应及治疗难治性排斥反应,可与环孢霉素和肾上腺皮质激素配伍应用.为配合临床合理用药,提高治疗效果,减少不良药物反应,参考国外HPLC [1~4],对人血浆中MPA的含量测定方法进行了研究.
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HPLC法测定紫河车中次黄嘌呤的含量
用高效液相色谱法测定紫河车中次黄嘌呤的含量.采用Kromasil-C18色谱柱,流动相为甲醇-水(10∶90),柱温35 ℃,流速0.6 mL·min-1,检测波长254 nm.次黄嘌呤线性范围为0.01276~0.1595 μg(r=0.9999),平均回收率99.5 %(RSD=1.2 %,n=5).本法操作简便、快速、准确,可用于紫河车中次黄嘌呤的含量测定.
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HPLC测定地龙中次黄嘌呤的含量
用高效液相色谱法测定地龙中次黄嘌呤的含量.采用Kromasil-C18色谱柱,流动相为甲醇-水(10:90),柱温35℃,流速0.6ml·min-1,检测波长254nm.次黄嘌呤线性范围为0.01932~0.2415μg(r=0.9997),平均回收率99.4%,RSD=1.8%(n=5).本法操作简便、快速、准确,可用于地龙中次黄嘌呤的含量测定.