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BCG-PPD与TB-PPD皮肤试验在大学生结核病筛查中的差异性分析
目的 比较卡介菌纯蛋白衍生物(purified protein derivative of BCG,BCG-PPD)与结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative of tuberculin,TB-PPD)在大学生结核病筛查中的差异.方法 回顾性分析20122013年北京市西城区3所大学2821名学生的结核病筛查数据.根据使用的PPD试剂种类进行分组,BCG-PPD组学生1386名;TB-PPD组学生1435名.对两组观察者分别进行结核菌素试验,72 h查验硬结平均直径,对强阳性者进行胸部X线检查.采用SPSS 11.5软件进行统计分析,用秩和检验对两组硬结平均直径进行比较,用x2检验对组间PPD结果分布频度及结核病筛查结果进行比较,当理论值＜1时,采用Fisher确切概率法,卡痕与PPD阳性结果间相关性分析采用logistic回归,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 中位硬结平均直径BCG-PPD组(6 mm)大于TB-PPD组(0 mm),差异有统计学意义(Z=-10.034,P＜0.05).BCG-PPD组的阳性率(54.8％,759/1386)明显高于TB-PPD组(32.7％,469/1435)(x2=139.818,P＜0.05);PPD强阳性率BCG-PPD组为6.6％(92/1386),高于TB-PPD组的3.4％(49/1435)(x2=15.425,P＜0.05);BCG-PPD组的异常反应发生率为1.9％(27/1386),高于TB-PPD组的0.4％(6/1435),差异有统计学意义(x2=14.274,P＜0.05).卡痕与PPD阳性结果相关,有卡痕者更容易出现PPD阳性结果(OR=2.046,95％CI=1.630～2.569,P＜0.05).结论 TB-PPD和BCG-PPD皮肤试验在大学生结核病筛查中的强阳性率和异常反应发生率上存在差别,有进一步探讨的必要.
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口服卡介菌对过敏性哮喘小鼠的治疗作用
目的 探讨口服卡介菌(BCG)治疗Ⅰ型超敏反应的疗效和可能机制.方法 以卵清蛋白(OA)诱导小鼠过敏性哮喘,通过口服途径给药,观察不同剂量BCG对哮喘症状的出现时间,严重程度的影响;ELISA方法和PCA方法检测特异性IgG、IgE抗体滴度;RT-PCR方法检测IL-1、2、10、12 mRNA表达的变化.结果 BCG在0.5～2.0 mg/kg剂量范围内,能够减少哮喘小鼠单位时间内的搔鼻次数,推迟攻击后哮喘发作的时间,降低肺气道阻力,较少特异性IgE抗体的生成,调节细胞因子mRNA的表达.结论 口服BCG对治疗过敏性哮喘有效,作用机制可能与特异性抗原口服免疫耐受不同.
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卡介菌影响尖锐湿疣外周血单个核细胞凋亡及CD28、CD95水平的相关性研究
目的:探讨卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣(CA)患者外周血T淋巴细胞中CD28和CD95表达水平及凋亡率的影响.方法:30例CA患者在卡介菌治疗前后和30例健康对照者,采用流式细胞仪检测外周血PBMC的CD28和CD95水平及细胞凋亡的情况.结果:CA组治疗前CD3+ CD28+的表达较对照组低(P＜0.01),CD3+ CD95+的表达较对照组高(P＜0.01),治疗后两者与对照组相比,无显著性差别(P＞0.05).凋亡率治疗前较对照组明显增高(P＜0.01),治疗后下降与对照组无显著性差异(P＞0.05).结论:卡介菌可能通过调节CD28及CD95水平调控T淋巴细胞的异常激活和凋亡,从而促进细胞免疫功能的恢复,减少复发.
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泛昔洛韦联合卡介菌治疗复发性生殖器疱疹临床效果观察
目的：分析泛昔洛韦联合卡介菌治疗复发性生殖器疱疹的临床效果。方法66例复发性生殖器疱疹患者,依据来院就诊时间分为参照组与研究组,各33例。参照组予以阿昔洛韦治疗,研究组予以泛昔洛韦联合卡介菌治疗,比对两组复发性生殖器疱疹的临床疗效。结果研究组治疗总有效率为93.9%明显高于参照组的75.8%,差异具有统计学意义(P<0.05)；研究组不良反应发生率为6.1%明显低于参照组的24.2%,差异具有统计学意义(P<0.05)；研究组止疱时间为(1.6±0.8)d、结痂时间为(4.7±1.5)d,参照组止疱时间为(3.2±1.3)d、结痂时间为(7.3±1.7)d,研究组患者止疱时间和结痂时间均明显短于参照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论复发性生殖器疱疹应用泛昔洛韦联合卡介菌治疗,效果理想,可进一步在临床上实践。
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卡介菌及其衍生制品鉴别实验用BCG DNA国家参考品的研制
目的 建立BCG DNA定性用国家参考品,供BCG菌株、卡介菌多糖核酸注射液等卡介菌衍生制品鉴别实验用.方法 以紫外分光法检测260nm和280nm的吸光度值,比较A260/280的比值,考量国家参考品BCG DNA的纯度指标;以多重PCR法检测BCG DNA 特异性缺失区RD1区是否存在,验证所制备的BCG DNA可作为定性用国家参考品,组织3家实验室对该参考品进行验证;并在不同时间,观察其稳定性.结果 所制备的BCG DNA A260/286=1.96＞1.8; BCG DNA国家参考品经多重PCR扩增BCG 缺失区RD1的产物为约200bp DNA片段,与卡介菌巴斯德株DNA结果相同,3家实验室的验证结果一致,该制品经37℃4周,4℃3个月、6个月、12个月放置后,PCR结果不变.结论该BCG DNA制品纯度高,稳定,可作为BCG DNA定性用国家参考品,在卡介苗相关制品的质量控制中,做为BCG菌株、卡介菌多糖核酸注射液等卡介菌衍生制品鉴别实验用的国家参考品.
关键词： BCG DNA 参考品 质量控制 卡介菌 卡介菌多糖核酸注射液 -
卡芥菌、多糖核酸联合化疗方案治疗复治涂阳肺结核患者疗效观察
目的 观察和评价卡介菌、多糖核酸(康达先)注射液在复治涂阳肺结核患者中的疗效.方法 将复治涂阳患者60例随机分成观察组和对照组,两组均采用标准化疗方案2H3R3Z3E3S/6H3R3E3,链霉素过敏者采用3H3R3Z3E3/6H3R3E3,治疗,观察组加用免疫调节剂卡芥菌、多糖核酸1ml隔日肌肉注射,连用2个月.观察两组的治疗效果.结果 疗程结束后观察组的痰菌阴转率96.7%、病灶吸收率86.7%、治愈率96.7%明显高于对照组的痰菌阴转率86.7%、病灶吸收率70 %、治愈率86.7%.
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卡介菌多糖核酸防治小儿哮喘病86例疗效观察
我门诊以卡介菌多糖核酸注射液,肌肉注射治疗小儿哮喘,均采取自身对比疗效观察,与用药前或与往年同期哮喘发作频率及病情程度进行疗效评定,其结果显示肌注卡介菌多糖核酸治疗小儿哮喘其有效率达86.3%,尤其对年龄小、发病时间短、病情轻、病程短、首次发病能及时就诊、早期治疗无家族史的小儿其疗效更为突出.对病程长发作频繁,且经历了多种治疗措施疗效不显著的小儿,需坚持完成疗程,否则达不到预期的疗效.
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钩端螺旋体外膜蛋白基因重组载体构建及在卡介菌中的表达
目的研制一种高效广谱的新型钩体疫苗.方法用PCR方法扩增致病性钩端螺旋体赖型017株外膜蛋白OmpLl基因,将其克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒载体pMV261和pMV361中.结果筛选到两个重组载体pBQ1和pBQ2,通过电穿孔导入卡介菌,重组体经诱导表达了相对分子质量约为35000的融合蛋白.结论卡介菌能有效表达钩体抗原蛋白.
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卡介菌基因组DNA制备工艺研究
目的摸索制备高纯度卡介菌(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin,BCG)基因组DNA(BCG-DNA)的制备工艺.方法采用超声破碎结核杆菌,加热使蛋白变性初步去除菌体蛋白,进一步经蛋白酶消化,乙醇沉淀DNA组分,再经离子交换和凝胶过滤层析,去除残余菌体蛋白和多糖,精制DNA,并进行质量检测.结果所制备的BCG-DNA片段大小介于200～250 bp之间,纯度大于95%,蛋白含量占0.1%,多糖残留占3.5%.结论此方法制备的BCG-DNA纯度较高,且无有机溶剂残留,适用于BCG-DNA制备.
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口服卡介菌治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究
目的:观察口服卡介菌对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果.方法:制备EAE大鼠模型,随机分为BCG高、中、低剂量组和PBS对照组,每组各15只,对大鼠治疗后的临床症状及病理组织学进行评估,提取脾脏淋巴细胞,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖能力.结果:BCG组EAE大鼠与对照组相比,临床症状减轻,发病时间延迟,炎性细胞浸润数减少；急性期,口服BCG各组CD4+、CD8+T细胞的数量随剂量增加而增加,缓解期CD4+、CD8+T细胞数量减少；口服BCG可促进EAE大鼠T淋巴细胞增殖能力；高、中剂量组上述变化均较其它分组明显.结论:口服BCG可很好的诱导免疫耐受,延迟EAE发病,减轻炎症反应,改善临床症状.
关键词： 多发性硬化 实验性变态反应性脑脊髓炎 卡介菌 免疫耐受 -
联合检测对痰菌阴性肺结核诊断的临床应用
自1985年以来,全球结核病疫情呈逐渐上升趋势,引起世界各国的关注.由于结核病可以治愈,因此早期诊断治疗可以显著降低病死率.依照影像学、临床和治疗观察等诊断痰菌阴性肺结核的方法,因敏感性和特异性不高,常不能满足临床与预防工作的需要.我们选择血清结核分支杆菌胞壁糖脂免疫球蛋白G(LAM IgG)、卡介菌免疫球蛋白(GPPD IgG)、结核菌素(PPD)、血沉4项检测指标,联合用于肺结核的诊断、观察和评价试验的敏感性和特异性.现将初步结果报告如下.
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卡介菌基因组DNA和卡介菌多糖核酸免疫调控活性的比较
目的:比较研究卡介菌(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guérin, BCG)基因组DNA(BCG-DNA)和卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)的免疫调控活性.方法:制备高纯度的BCG-DNA,小鼠脾细胞 (splenocyte)和人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)分别与BCG-DNA和 BCG-PSN共同培养72 h,采用ELISA方法检测细胞培养上清中IFN-γ的水平. 结果:所制备的BCG-DNA纯度较高,DNA含量达95.3%.琼脂糖电泳显示:BCG-DNA片断大小集中于200～250 bp.ELISA结果表明BCG-DNA与BCG-PSN均可显著激活小鼠脾细胞和人外周血单个核细胞,有效诱导IFN-γ的产生(P＜0.01).当浓度达10 μg/ml以上时,BCG-DNA免疫调控作用优于BCG-PSN(P＜0.01).结论:BCG-DNA 可显著诱导Th1型细胞因子IFN-γ的产生,具有较强的免疫调控活性.
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播散性卡介苗感染与遗传性白细胞介素-12/干扰素γ通路缺陷
卡介苗(BCG)是一种来自牛型结核杆菌的减毒活疫苗,BCG接种后一般不会引起严重反应,极少数情况下,卡介菌会进入血液,发生全身性播散,常可致死,称为播散性卡介苗感染.播散性卡介苗感染是严重的不良反应,有时具有家族性分布,且临床预后不良者较多.播散性卡介苗感染极其罕见,发生率为0.06～1.56/100万,死亡率约为60％[1].
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IL18与结核病
结核病虽是由结核菌感染引起的传染病,但细胞介导免疫在发病机制中有相当重要的作用,其中γ干扰素在免疫防御结核菌为一关键性角色.动物实验发现靶基因缺失而致γ干扰素缺乏的小鼠对结核菌的敏感性明显增高.γ干扰素或IL18受体缺乏者对重度感染牛型卡介菌和其它分支杆菌的敏感性亦明显增高[3].1989年NaKamura等发现有一种类似IL12的因子有诱导γ干扰素产生的活性[1].后经研究Ushio等命名该因子为IL18[2].
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成人血行播散型肺结核病诊治体会
血行播散型肺结核病又称粟粒性肺结核病,此型多见于儿童和青少年.未接种卡介菌的儿童发生机会更多,但也可见于患过原发感染后的成年人[1].本文就我院近几年来住院的28例成人血行播散型肺结核病患者,诊治体会报告如下.
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卡介菌纯蛋白衍生物制剂致过敏性休克1例
患者,男,9岁.既往无变态反应史,因颈部多个淋巴结肿大多年来我院门诊就诊.为鉴别诊断,给予卡介菌纯蛋白衍生物制剂(成都生物制品研究所生产,批号:20051219)0.1 mL,含5 Iu,于左前臂掌侧皮内注射.l min后患者出现面色苍白,随之呼之不应,脉搏细弱,四肢湿冷,测血压75/42 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),脉搏50次·min-1.
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卡介菌多糖核酸对NF-κB的活化调控
目的:探讨卡介茵多糖核酸的分子药理机制.方法:采用凝胶电泳迁移率改变分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测卡介菌多糖核酸对人外周血单个核细胞NF-κB DNA结合活性的影响.结果:卡介茵多糖核酸不但可以激活NF-κB,同时又可拮抗IL-1β激活NF-κB的作用.结论:卡介茵多糖核酸对NF-κB的激活具有双向调控作用.
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依巴斯汀与卡介菌多糖核酸联合治疗慢性荨麻疹的疗效观察
采用口服依巴斯汀与肌肉注射卡介菌多糖核酸的方法治疗慢性荨麻疹,总有效率达到87.5%,与单独使用依巴斯汀相比.疗效更显著,复发率降低,不良反应下降,具有统计学意义,值得在临床上推广.
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如何接种卡介苗
卡介苗(下以BCG表示)于1978年被纳入儿童计划免疫至今,全国已使用数亿人次.BCG是由卡介菌经培养后冻干制成的,接种后可使机体产生细胞免疫应答而起到预防结核病(TB).接种BCG时,从接种对象的确定,疫苗的吸取,部位的选取,部位的消毒,进针的角度等一系列工序,都十分严格.现浅谈笔者在接种BCG时的一点体会.
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播散性卡介菌病并慢性肉芽肿、肺部多重感染1例
患儿男,3岁5个月,因"反复发热3年余,再次发热1周"于2012年6月11日入院.患儿出生后21 d始无明显诱因发热,热型不详,无咳嗽、气促,在当地医院治疗后体温降至正常.3个月后出现肛周脓肿,予抗炎治疗后好转.7个月后再次发热,偶有咳嗽,当地医院查胸片示肺部感染,予抗感染治疗后症状无改善,转诊至上海某医院,查胸部CT示双肺感染,淋巴细胞刺激指数及PMA刺激指标结果示"中性粒细胞功能低下",诊断"慢性肉芽肿、肺部感染",予美罗培南、复方磺胺甲噁唑、伊曲康唑、重组人干扰素γ等抗感染及调节免疫等治疗,用药后复查胸部CT病灶有所吸收.
