首页 > 文献资料
-
RAGE基因与肺癌关系的研究进展
晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)是细胞表面分子免疫球蛋白超家族成员,作为信号转导受体,与多种配体结合,激活细胞内一些关键的信号传递途径,改变细胞功能特性,参与一些病理生理过程及许多疾病的发生发展.RAGE与糖基化产物(advanced glycation end products,AGE)相互作用,可能在肿瘤发生、进展中起重要作用,因此认识RAGE结构和功能对肺癌的防治具有重要意义.
关键词： 晚期糖基化终产物受体 肺癌 信号转导 -
补阳还五汤对肺纤维化中HMGB1-RAGE信号通路的调控作用
目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤和异常修复的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycation end-product,RAGE)的表达,及补阳还五汤对HMGB1-RAGE信号通路的调控作用.方法:144只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,博莱霉素(BLM)模型组,补阳还五汤低、中、高剂量组(6.83,13.66,27.32 g·kg-1),阳性药组(强的松,4.2 mg·kg-1),动物实验采用博莱霉素气管注入法复制肺纤维化模型后,分别给予补阳还五汤高、中、低剂量和强的松灌胃,于造模后第7,14,28天分批提取样本.采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肺组织中的HMGB1,RAGE mRNA的表达;采用蛋白质免疫印记法(Western blot)检测HMGB1,α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle action,α-SMA)的表达.细胞实验采用含药血清药理学的实验方法,以5％,10％,15％,20％的补阳还五汤含药血清和空白血清来干预HMGB1诱导刺激的人肺成纤维细胞(HFL1),采用Western blot法检测α-SMA蛋白的表达.结果:动物实验中,与正常组比较,模型组在第28天显著上调HMGB1 mRNA(P ＜0.01),在第7天和第14天显著上调RAGEmRNA(P ＜0.01),在各时间点显著上调HMGB1,α-SMA(P ＜0.01);与BLM模型组比较,补阳还五汤高剂量组在第14天和第28天显著下调HMGB1 mRNA(P ＜0.01),在第7天和第14天显著下调RAGE mRNA(P＜0.01),在各时间点显著下调HMGB1和α-SMA蛋白(P＜0.01).细胞实验中,与空白组比较,20％空白血清预培养加HMGB1组显著升高α-SMA蛋白(P＜0.01);与20％空白血清预培养加HMGB1组比较,不同剂量的补阳还五汤含药血清显著下调细胞中α-SMA蛋白(P＜0.01).结论:补阳还五汤可抑制HMGB1在大鼠肺组织中和人肺成纤维细胞中所引起的RAGE,α-SMA的表达增加.提示补阳还五汤可能通过阻断HMGB1/RAGE信号通路,减少肌成纤维细胞生成,对肺纤维化的发生发展起到防治作用.
关键词： 补阳还五汤 肺纤维化 高迁移率族蛋白Box-1 晚期糖基化终产物受体 -
晚期糖基化终产物受体基因多态性与肥胖的关联研究
目的 分析晚期糖基化终产物受体(RAGE)的遗传变异与中国汉族人群肥胖的关系.方法 研究对象来自江苏省某乡镇农村地区,从18～ 62岁目标人群14 469人中抽取2 731人进行流行病学调查人群资料；选择采用连锁不平衡分析的方法,选取RAGE基因及其上游的3个tagSNPsrs 1800624、rs204993和rs184003进行关联分析.结果 rs1800624位点与肥胖的关联有统计学意义,校正年龄、性别、体力活动和收入等混杂因素后,相加模型和显性模型的比值比(OR值)及其95％可信区间(95％ CI)分别为0.807 (0.669～0.974)、0.762(0.617～0.939).进一步按性别进行分层分析,结果显示,男性人群中,携带rs1800624突变T等位基因型(AT+ TT)者肥胖患病风险增加.不同基因型之间BMI水平比较也未发现上述3个SNPs变异与BMI数量性状存在关联.结论 RAGE基因rs1800624与男性人群肥胖风险增加显著关联.
关键词： 晚期糖基化终产物受体 肥胖 BMI 关联研究 -
高迁移率族蛋白1促进原发性肝癌细胞增殖
目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(RAGE)在原发性肝癌中的表达,研究HMGB1促进肝癌细胞增殖的作用以及相关的分子机制.方法 取肝癌组织及癌旁组织各25例,免疫组化法观察组织样本中HMGB1及RAGE的表达;体外培养肝癌细胞系HepG2和正常肝细胞系L02,用Western blot检测细胞系中HMGB1及RAGE的表达.向HepG2肝癌细胞系中加入外源性重组人HMGB1蛋白(rhHMGB1),用MTT法检测处于不同浓度rhHMGB1(0、10、50和100μg/L)以及不同处理时间(0、12、24和36 h)作用下HepG2细胞的增殖率;用Western blot检测细胞中RAGE和NF-κB的表达.结果 HMGB1和RAGE蛋白在肝癌组织的阳性表达率为64％和72％,分别高于癌旁组织的20％和28％(P<0.05).随着细胞培养时间的延长,HMGB1及RAGE的表达呈上升趋势;随着rhHMGB1浓度的升高或处理时间的延长,HepG2细胞的增殖率显著提高(P<0.05),细胞中RAGE和NF-κB的表达显著上调(P<0.05).结论 HMGB1和RAGE蛋白在肝癌组织及肝癌细胞中高表达.HMGB1可能通过与其受体RAGE结合,进一步激活NF-κB信号通路,从而促进肝癌细胞增殖.
关键词： 原发性肝癌 高迁移率族蛋白1 晚期糖基化终产物受体 HepG2细胞系 细胞增殖 -
晚期糖基化终产物受体和低密度脂蛋白受体相关蛋白在慢性脑血流低灌注大鼠皮层和海马的改变
目的 研究慢性脑血流低灌注对脑内受体介导的β-淀粉样肽(Aβ)转运蛋白晚期糖基化终产物受体(RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1))含量及分布的影响. 方法采用双侧颈总动脉永久性结扎大鼠模型,应用免疫组织化学和免疫印迹方法对脑内RAGE和LRP-1进行定位和定量检测. 结果 免疫组织化学结果显示,与对照组相比,RAGE在皮层及海马组织中血管内皮细胞上的表达从低灌注10d起增多,而神经元上表达从低灌注30d起减少,且这种变化一直持续到低灌注180d;LRP-1的分布变化则与之相反.免疫印迹结果显示,皮层和海马中RAGE含量在低灌注术后10d即开始明显增加,且在缺血的不同时间点与相应的对照组比较都明显增多(P<0.05);LRP-1变化较晚,在缺血180d时明显增多(P<0.05). 结论 慢性脑血流低灌注可使RAGE、LRP-1在脑组织中的表达增高,同时在神经元、血管中的分布发生改变,这种变化可导致Aβ在脑内的聚集,可能在阿尔茨海默病(AD)早期发病过程中起重要作用.
-
晚期糖基化终产物受体在小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型中的表达
目的：探讨晚期糖基化终产物受体（ RAGE）在小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型中的表达及其与化疗药相关心脏毒性的可能内在联系。方法通过多次腹腔注射阿霉素，建立小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型，同时设立正常对照组（每组6只）。模型建立后采用超声心动图和组织病理学方法评价小鼠心脏功能及心肌损伤程度；通过免疫印迹及免疫组织化学检测小鼠心肌组织中RAGE表达变化。结果超声心动图检查显示，慢性阿霉素心脏毒性小鼠左室射血分数明显降低；病理学观察显示心肌组织中细胞损伤明显，同时伴有心室肥厚及心肌重构，提示小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型建立成功。细胞和分子生物学观察发现，损伤心肌中RAGE表达显著升高。结论RAGE在慢性小鼠阿霉素心脏毒性模型中表达升高，提示其可能参与阿霉素相关心脏毒性的发生发展。
-
晚期糖基化终产物受体的结构和功能
晚期糖基化终产物受体(RAGE)是一种膜蛋白,属于免疫球蛋白家族,由400多个氨基酸组成,分子量为35kD,分胞外段、跨膜段和胞内段,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普遍表达.RAGE作为信号转导受体介导晚期糖基化终产物(AGE)和其配体在细胞表面结合,激活细胞内多种信号转导机制,在糖尿病慢性并发症、透析相关性淀粉样变(DRA)、阿尔采末病(AD)、动脉粥样硬化等疾病发生中起重要作用.对RAGE结构和功能的认识可能为这些疾病的防治提供新的靶位,因此具有重要意义.
关键词： 晚期糖基化终产物受体 结构-功能研究 信号转导 -
高迁移率族蛋白B1对人脐血CD34+细胞迁移的影响
本研究探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)对人脐血CD34+细胞迁移的影响及其机制.用流式细胞仪检测脐血CD34+细胞表面HMGB1受体:晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced gly-cation end products,RAGE)、Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)及TLR4的表达.用磁珠分选法富集的新鲜人脐血CD34+细胞,经不同浓度的HMGB1(10、50、100、1000 ng/ml)刺激后,应用transwell小室趋化装置观察HMGB1对人脐血CD34+细胞的迁移活性,显微镜下计数,计算趋化指数,即试验孔与对照孔细胞数的比值.以未加HMGB1的培养细胞为时照组.结果表明:人脐血CD34+细胞经免疫磁珠分选富集的纯度达98%以上.HMGB1在一定的浓度范围内随浓度递增对人脐血CD34+细胞的迁移作用逐渐增强,当HMGB1浓度为100 ng/ml时迁移活性强,与对照组比较差异显著(P<0.01).抗-RAGE抗体可部分抑制HMGB1对脐血CD34+细胞的迁移作用.结论:一定浓度的HMGB1加强人脐血CD34+细胞迁移功能,此作用有可能通过RAGE介导.
关键词： 高迁移率族蛋白B1 脐血CD34+细胞 晚期糖基化终产物受体 -
RAGE在高迁移率族蛋白B1调控CD4+T细胞Th1/Th2功能性分化中的作用
目的 探讨晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)在高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)介导CD4+T细胞Th1/Th2功能性分化中的作用.方法 体外分离、培养小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,将细胞浓度调整为2× 106/L,接种至96孔培养板,0.2 mL/孔,预先加入终浓度为3μg/L的刀豆素A(ConA)刺激12 h;依据HMGB1刺激剂量随机分成4组:对照组、10 ng/mL组、100 ng/mL组和1 000 ng/mL,分别在HMGB1刺激12h、24 h和48 h时间点,利用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)法检测白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)表达;根据实验结果,在后期实验中选择1 00 ng/mL HMGB1刺激时间为24 h;将ConA刺激后的细胞细胞随机分成4组:对照组、A组(HMGB1刺激)、B组(HMGB1+PBS刺激)、C组(HMGB1 +RAGE抗体刺激).A、B、C组分别加入PBS稀释的终浓度为100 ng/L HMGB1工作液,对照组加入等容积的PBS液;其中B、C组在HMGB1刺激之前加入PBS液或PBS液1∶200稀释的终浓度为5μg/L RAGE中和抗体孵育2h;分别采用Western-blot和荧光定量PCR法测定RAGE、CATA-3的表达;ELISA法检测白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)表达,多组之间的数据比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与对照组(6.07±0.25)比较,100ng/mL HMGB1刺激24 h(4.43±0.17)、48 h(3.67±0.09),IFN-γ/IL-4显著下降(P＜0.05);而与对照组比较(6.34±0.42),10 ng/mL HMGB1刺激24h (7.65±0.19),IFN-γ/IL-4比值显著增加(P＜0.05),而100 ng/mL(5.10±0.19)和1 000 ng/mL HMGB1(3.31±0.12)刺激24 h IFN-γ/IL-4显著下降(P＜0.05);与对照组比较,A组RAGE蛋白和mRNA表达显著升高(P＜0.05);A、B组IFN-γ/IL-4比值(A组5.75±0.27;B组5.66±0.31)较对照组(7.37±0.36)明显降低(P＜0.05),GATA3mRNA显著升高(P＜0.05);而C组IFN-γ/IL-4比值(6.19±0.14)较A组升高(P＜0.05),GATA3 mRNA下降(P＜0.05),A组与B组比较差异无统计学意义(P＞0.05);与A组比较,B组RAGE的表达差异无统计学意义(P＞0.05),C组明显降低(P＜0.05),而C组较对照组RAGE的表达仍有明显增加(P＜0.05).结论 HMGB1体外介导的CD4+T淋巴细胞向Th2功能性分化至少部分是通过过度活化RAGE/GATA3途径来实现的.
-
可溶性晚期糖基化终产物受体与糖尿病慢性并发症
晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)是糖尿病血管并发症产生的关键因素之一.AGEs与血管内皮晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)结合,刺激活性氧(ROS)生成,血管内皮细胞凋亡、脱落,内皮细胞损伤,低密度脂蛋白沉积于损伤部位,导致微血管的玻璃样变;在大血管则导致血管平滑肌细胞增生,动脉粥样硬化斑块形成.所以,AGEs与RAGE结合启动一系列连锁反应是导致糖尿病微血管病变和心脑血管事件发生的原因之一;如果抑制.AGEs与RAGE结合及作用,可从源头抑制糖尿病慢性并发症(DCC)发生发展,本文就近年来可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)在糖尿病诊治中的作用机制研究进展进行综述.
-
C反应蛋白增加人内皮细胞糖基化终产物受体表达
目的 探讨C反应蛋白(CRP)及其单体(mCRP)对人脐静脉内皮细胞晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白表达及mRNA的影响.方法 将人脐静脉内皮细胞用不同浓度(5、25、50、100 μg/mL) 的CRP孵育24 h及同一浓度(50 μg/mL)CRP不同时间孵育0、6、12 、24 、48 h,采用流式细胞仪及RT-PCR方法检测RAGE蛋白及mRNA的表达水平.分析50 μg/mL CRP和mCRP孵育0 、6、24 h后对RAGE 蛋白表达的影响.结果 (1) 与对照组比较,5 μg/mL的CRP培养内皮细胞24 h显著增高RAGE蛋白的表达(175.2%±8.1%,P＜0.05),50 μg/mL时达到顶峰(527.3%±5.8%,P＜0.01);50 μg/mL CRP孵育不同时间,RAGE蛋白的表达从6h明显增高(179.8% ± 29.1%,P＜0.05 ).(2) 与对照组比较,5 μg/mL CRP即可升高RAGE的mRNA表达(135.4%±11.1%,P＜0.05),并在50 μg/mL时达到峰值(186.6%±29.0%,P＜0.05);6 h时可以检测到RAGE mRNA的升高(134.3%±22.8%,P＜0.05),在12 h为高(214.2%±33.1%,P＜0.05).(3)mCRP也会升高RAGE蛋白表达,与CRP组没有差别(P＞0.05). 结论 C反应蛋白以时间及剂量依赖的方式促进内皮细胞RAGE蛋白及mRNA的表达.CRP与其单体(mCRP)作用相似.
关键词： C反应蛋白 晚期糖基化终产物受体 内皮细胞 -
C反应蛋白对血管内皮细胞表达糖基化终产物受体和MCP-1的影响
目的 研究C 反应蛋白(C-RP)对内皮细胞(EC)晚期糖基化终产物受体(RAGE)的影响,及RAGE在C-RP促动脉粥样硬化中的作用. 方法 在不同时间用不同剂量C-RP刺激EC.用Western blot检测C-RP对RAGE蛋白表达的影响,RT-PCR研究RAGE mRNA的变化.利用特异的小分子干扰RNA (siRNA)敲低RAGE基因表达,通过ELISA方法 检测各组培养液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平变化. 结果 与对照组相比,C-RP刺激可以增加EC的RAGE蛋白和mRNA的表达(P＜0.05),并且呈浓度-时间依赖性.在干扰RAGE基因表达后,C-RP促MCP-1分泌作用消失. 结论 C反应蛋白可以增加糖基化终产物受体蛋白和mRNA表达水平,并通过RAGE促进MCP-1水平的增加.
关键词： 动脉粥样硬化 C反应蛋白 晚期糖基化终产物受体 -
晚期糖基化终产物对大鼠血管外膜成纤维细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响
目的:探讨晚期糖基化终产物(AGE)对大鼠血管外膜成纤维细胞(AF)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响.方法:用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞,用逆转录-聚合酶链反应、蛋白质印迹检测不同浓度的糖基化人血清白蛋白(AGE-HSA,分为对照组、100 μg/ml AGE-HSA组,200 μg/ml AGE-HSA组、300 μg/ml AGE-HSA组)对NADPH氧化酶p22phox亚基信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达的影响,并观察不同干预因素[分为对照组1、200 μg/ml AGE-HSA组(200 μg/ml处理组1)、200 μg/ml AGE-HSA+50 μg/ml抗RAGE中和抗体组(抗RAGE中和抗体组1)及200 μg/ml AGE-HSA+30 nmol/L坎地沙坦组(坎地沙坦组1)对AGE-HSA上调NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA和蛋白表达的影响.用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐检测不同干预因素[空白对照组、AGE-HSA 200 μg/ml组(200 μg/ml处理组2)、200 μg/ml AGE-HSA+50 μg/ml 抗RAGE中和抗体组(抗RAGE中和抗体组2)、200 μg/ml AGE-HSA+30 μmol/L夹竹桃素组(夹竹桃组),200 μg/ml AGE-HSA+30 nmol/L坎地沙坦组(坎地沙坦组2)对血管外膜成纤维细胞内活性氧表达的影响.结果:3个浓度(100 μg/ml、200 μg/ml和300 μg/ml)的AGE-HSA组均与对照组比较,血管外膜成纤维细胞NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA及蛋白的表达随AGE-HSA增加呈浓度依赖性上调;抗RAGE中和抗体组1、坎地沙坦组1比200 μg/ml处理组1的p22phox mRNA及蛋白表达降低;抗RAGE中和抗体组2、夹竹桃素组2及坎地沙坦组2比200 μg/ml AGE-HSA处理组2血管外膜成纤维细胞内活性氧相对荧光强度降低,上述比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:AGE-HSA经由RAGE影响活性氧与NADPH氧化酶p22phox亚基的表达上调,活性氧的上调与NADPH氧化酶p22phox亚基表达相关.NADPH氧化酶抑制剂及坎地沙坦可通过下调NADPH氧化酶p22phox亚基的表达减少血管外膜成纤维细胞内活性氧的产生.
-
RAGE基因多态性与冠状动脉狭窄程度相关性研究
目的 探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)基因多态性与冠状动脉狭窄病变程度的相关性.方法 回顾性分析2016年1月～2017年10月于漯河医学高等专科学校第二附属医院心内科住院的397例冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CHD)患者及48例健康受试者的临床资料.根据冠状动脉造影结果 将CHD者分为冠状动脉轻中度狭窄组(185例)、重度狭窄组(212例).采用PCR-RFLP检测-429T/C、1704G/T、G82S基因型及等位基因分布频率.结果对照组受试者、冠脉狭窄轻中度组和重度组患者RAGE基因内含子区G82S多态性基因分布频率分别为(75.0％GG,22.92％GS,2.08％SS),(62.7％GG,36.22％GS,1.08％SS),(52.83％GG,36.79％GS,10.38％SS),且冠状动脉重度狭窄组患者RAGE基因G82S多态性的S等位基因的分布频率明显高于对照组和轻中度狭窄组(P<0.05).另外,对照组受试者G-Gly-T单倍体分布频率高于其他两组CHD患者,而重度冠脉狭窄组患者G-Ser-T单倍体分布频率高于其他两组(P<0.05).经Logistic多元回归分析,单倍体G-Ser-T发生冠状动脉狭窄的危险性明显增加(P<0.05).结论 携带RAGE基因G82S多态性的单倍体型是冠状动脉发生重度狭窄的独立危险因素.
关键词： 基因多态性 冠心病 冠状动脉狭窄 晚期糖基化终产物受体 等位基因 -
内质网应激对树突状细胞表面晚期糖基化终产物受体表达的影响
目的:晚期糖基化终产物受体(RAGE)与其配体结合在炎症及免疫反应中具有重要作用.本研究探讨内质网应激(ERS)在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导树突状细胞(DC)表面RAGE上调中的作用及意义.方法:分离正常BALB/c小鼠脾脏DC进行体外培养,给予HMGB1刺激后检测DC表面RAGE表达水平及细胞ERS相关分子表达/活化水平.另外,给予不同剂量ERS特异性诱导剂衣霉素(0.1、1、10μg/ml)刺激24、48、72h,检测DC表面RAGE表达情况.结果:HMGB1刺激诱导DC中ERS相关分子表达/活化水平明显上调(P<0.05),细胞表面RAGE表达水平也明显上调;衣霉素刺激亦可诱导DC表面RAGE表达增强,且呈一定的时间依赖性,刺激时间越长,RAGE表达水平越高.结论:DC表面RAGE表达水平升高与ERS反应密切相关.
关键词： 脓毒症 树突状细胞 晚期糖基化终产物受体 内质网应激 -
高迁移率族蛋白1及晚期糖基化终产物受体在宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的 研究高迁移率族蛋白1(HMGB1)和晚期糖基化终产物受体(RAGE)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织中的表达及其与临床病理间的关系,探讨HMGB1/RAGE信号通路在CSCC转移中的作用.方法 采用荧光实时定量PCR、免疫组化及Western blot方法分别检测CSCC组织和正常宫颈鳞状上皮组织中HMGB1、RAGE基因及蛋白的表达.结果HMGB1在CSCC中的表达水平高于正常宫颈鳞状上皮组织(P＜0.05),其在CSCC组织中的表达与肿瘤分期、侵袭及转移明显相关(P＜0.05),而与肿瘤大小、分化程度无关(P＞0.05).RAGE mRNA的表达与CSCC转移明显相关(P＜0.05).转移组中的HMGB1 mRNA和RAGE mRNA表达水平呈显著相关性.结论 HMGB-1与CSCC发生、侵袭和转移相关,RAGE与CSCC转移相关,HMGB1/RAGE信号通路在CSCC转移过程中可能发挥重要作用.
关键词： 高迁移率族蛋白1 晚期糖基化终产物受体 宫颈肿瘤 鳞状细胞癌 -
高迁移率蛋白B1对食管鳞癌细胞增殖及血管内皮生长因子C表达的影响
目的 探讨高迁移率蛋白B1( HMGB1)对食管鳞癌细胞增殖和血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的影响及其可能的机制.方法 首先构建以重组腺相关病毒(rAAV)介导的、以HMGB1为靶基因的RNA干扰及阴性错配表达载体,即rAAV-siHMGB1-hrGFP和rAAV-miHMGB1-hrGFP.将rAAV-hrGFP、rAAV-miHMGB1- hrGFP和rAAV-siHMGB1 -hrGFP分别转染对数生长的人食管鳞癌KYSE150细胞,即空载体对照组、阴性错配对照组和RNA干扰组,采用实时荧光定量PCR和Western blot法观察各组细胞HMGB1 mRNA和蛋白的表达.将晚期糖基化终产物受体(RAGE)通路阻断剂可溶性RAGE (sRAGE)作用于各组,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖和VEGF-C的表达.结果 RNA干扰组细胞培养24h和48 h后,HMGB1 mRNA和蛋白的表达均明显下降,与空载体对照组和阴性错配对照组比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).当细胞培养24h后,RNA干扰组VEGF-C表达降至(502.43±13.10) pg/ml,与空载体对照组[( 686.40±10.94)pg/ml]和阴性错配对照组[(682.31 +9.61 )pg/ml]比较,差异有统计学意义(均P＜0.05)；同时,RNA干扰组细胞的增殖也明显受抑,与空载体对照组和阴性错配对照组比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).以0.2 μg,/ml sRAGE作用24h后,各组细胞增殖和VEGF-C表达均明显受抑,但差异无统计学意义(均P＞0.05)；与未加入sRAGE前相应的各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 HMGB1可通过RAGE通路促进食管鳞癌细胞增殖和VEGF-C的表达,并且HMGB1-RAGE有可能成为抗食管鳞癌细胞增殖及淋巴结转移的有效靶点.
关键词： 食管肿瘤 高迁移率蛋白B1 晚期糖基化终产物受体 血管内皮生长因子C 细胞增殖 -
晚期糖基化终产物及其受体与糖尿病相关神经系统疾病
此文概述了糖尿病状态下晚期糖基化终产物(AGEs)及其受体在神经系统中的表达和分布,AGEs对糖尿病神经系统损害及其在糖尿病神经系统并发症发生发展中的作用和机制,以及阻断晚期糖基化终产物及其受体的药物.
-
脑淀粉样血管病所致脑出血的免疫性血管病理损害初步研究
目的回顾性分析外科手术治疗的自发性脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）病理标本中脑淀粉样血管病（cerebral amyloid angiopathy，CAA）及相关免疫-血管因子共表达情况，探讨CAA-ICH的免疫性血管病理损害可能机制。
方法收集2010-2011年46例ICH患者的手术病理标本，其中男27例，女19例，平均年龄（56±15）岁。免疫组化荧光检测β-淀粉样蛋白（amyloid β，Aβ）与晚期糖基化终产物受体（glycosylation end products，RAGE）、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（low-density lipoprotein receptor related protein-1，LRP1）蛋白的共表达情况。
结果46例ICH患者中8例（男5例，女3例）确诊为CAA，占17.39%，确诊为CAA的8例患者脑组织标本均有Aβ、RAGE、LRP1蛋白的共表达（阳性率100%），而在非CAA自发性脑出血患者中均无共表达。CAA-ICH组的LRP1表达水平较非CAA-ICH组显著降低（P=0.031），而CAA-ICH组的RAGE表达水平较非CAA-ICH组显著升高（P=0.015）。
结论 CAA是ICH的重要病因之一，CAA相关的免疫-血管因子RAGE、LRP1蛋白异常表达，在ICH发病机制中可能有重要作用。 -
慢性低氧对小鼠脑微血管内皮细胞RAGE和LRP-1表达的影响
目的 研究慢性低氧状态下血脑屏障上β淀粉样蛋白(amyloid β,A β)转运体——晚期糖基化终产物受体(RAGE)及低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的变化.方法 将鼠脑微血管内皮细胞(BMVECs)分别进行正常气体培养(正常对照组)以及24 h、36 h及48 h的低氧培养,用RT-PCR法和Western Blot法分别检测细胞RAGE和LRP-1 mRNA和蛋白的表达.结果 低氧24 h组RAGE mRNA和蛋白表达低于正常对照组(P<0.05),低氧48 h组RAGE Mrna和蛋白表达高于正常对照组(P<0.05),低氧24h、36h及48 h组RAGEmRNA和蛋白表达呈时间依赖性增高(P<0.05);低氧各组LRP-1 Mrna和蛋白表达较正常对照组降低,呈时间依赖性(P<0.05);RAGE/LRP-1 Mrna和蛋白表达呈时间依赖性增高(P<0.05).结论 在慢性低氧状态下,血脑屏障BMVECs表达RAGE上调,LRP-1下调,RAGE/LRP-1比值增高,推测可能由此增加了A β的净入脑量.
