莱菔硫烷对脂多糖诱导血管内皮细胞中COX-2和iNOS mRNA表达的影响及转录机制研究

目的 研究莱菔硫烷(SFN)对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞ECV304中COX-2和iNOS mRNA表达的影响及转录机制.方法 以体外培养的血管内皮细胞ECV304为研究模型;采用实时定量PCR(real-time PCR)测定COX-2mRNA的表达;采用RT-PCR测定细胞中iNOS mRNA的表达;采用Western blotting测定细胞浆中IκB-α蛋白表达;采用免疫荧光杂交法测定NF-κB核内转位情况.结果 Real-time PCR结果表明,5～20 μmol/L SFN能明显降低脂多糖诱导的COX-2 mRNA的表达,抑制率分别为24%、16%和30%;RT-PCR结果显示,SFN对LPS诱导的iNOS mRNA表达也有显著的抑制作用;SFN抑制LPS诱导的IκB-α蛋白降解及NF-κB核内转位.结论 SFN能抑制LPS诱导的血管内皮细胞炎症反应,提示SFN对心血管疾病具有预防作用.

莱菔硫烷拮抗化学损伤效应及其机制

莱菔硫烷是十字花科植物中硫代葡萄糖苷的酶解产物,具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种药理作用.本文综合分析了莱菔硫烷对重金属、神经退行性疾病和糖尿病模型毒物所致神经和生殖系统以及肝、肾损伤的拮抗效应,并归纳出可能机制:即莱菔硫烷主要是通过诱导细胞自噬、抑制细胞色素P450 2E1等Ⅰ相酶系,激活Ⅱ相解毒酶和Nrf2-ARE信号通路发挥其对化学毒物的解毒功能.

莱菔硫烷在肿瘤防治中的作用及其机制研究进展

近年流行病学的研究表明,经常食用十字花科蔬菜可以减少患一些癌症的危险.在该类蔬菜中含有一类含硫化合物,硫代葡萄糖甙(glucosinolates,GS),是重要的次生代谢产物,因其侧链基团的不同,可分为三类:脂肪类,芳香类和吲哚类硫代葡萄糖甙,定位在细胞的液泡中.当蔬菜破损时,受定位于特定蛋白体中的黑芥子硫酸苷酶(myrosinase)酶解产生异硫氰酸盐(isothiocynates,ITC)[1].异硫氰酸盐对肿瘤有化学预防作用.莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)为异硫氰酸盐衍生物,是迄今从蔬菜中发现的强的抗癌成分.

莱菔硫烷对高脂诱导肥胖大鼠肾脏线粒体复合体氧化损伤的保护作用

目的：研究高脂膳食对大鼠肾脏线粒体氧化损伤情况，并分析莱菔硫烷对高脂饮食诱导的大鼠肾脏线粒体氧化损伤的保护作用。方法将88只8周龄（体重180～200 g）雄性SPF级SD大鼠适应性喂养1周后，采用随机数字法选取8只作为基础对照组，并仅喂养基础饲料至实验结束。其余大鼠喂养高脂饲料2周后，选取体重增量≥40％的大鼠诱导肥胖模型，共32只。采用随机数字表法将肥胖模型大鼠平均分为高脂对照组，莱菔硫烷低、中、高剂量组。莱菔硫烷低、中、高剂量组灌胃的莱菔硫烷剂量分别为5、10、20 mg／kg，同时喂养高脂饲料。喂养5周后，取大鼠肾脏，检测线粒体氧化损伤的相关指标，并分析不同组间指标变化。结果高脂对照组大鼠的肾脏活性氧簇（0畅26±0畅04）和丙二醛含量[（0畅87±0畅05）U／mg ]均高于基础对照组[（0畅20±0畅02）、（0畅57±0畅08）U／mg]（t值分别为－3畅02、－4畅72，P值均＜0畅05），总抗氧化能力（T-AOC）活性[（0畅43±0畅04） U／mg]、线粒体膜电位（MMP）水平（12畅09±1畅56）均低于基础对照组[（0畅48±0畅04） U／mg、16畅08±3畅12]（t值分别为2畅06、2畅28，P值均＜0畅05）。灌胃干预后，莱菔硫烷低、中、高剂量组丙二醛含量[（0畅67±0畅05）、（0畅55±0畅05）、（0畅56±0畅07）U／mg]均低于高脂对照组[（0畅87±0畅05） U／mg]（t值分别为3畅65、5畅71、5畅60，P值均＜0畅05），T-AOC活性[（0畅49±0畅05）、（0畅55±0畅05）、（0畅54±0畅04） U／mg]、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性[（61畅07±2畅79）、（55畅95±2畅39）、（60畅26±6畅02） U／mg]、MMP水平（17畅17±2畅52、18畅24±2畅54、18畅21±3畅65）均高于高脂对照组[（0畅43±0畅04） U／mg、（47畅22±2畅43） U／mg、12畅09±1畅56]（T-AOC活性t值分别为－2畅36、－4畅83、－4畅30，T-SOD活性t值分别为－6畅37、－4畅71、－5畅99，MMP水平t值分别为－2畅90、－3畅52、－3畅50，P值均＜0畅05）；莱菔硫烷低、中剂量组谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性[（69畅12±8畅63）、（64畅43±6畅58）U／mg]均高于高脂对照组[（53畅03±5畅70）U／mg]（t 值分别为－3畅82、－2畅71，P 值均＜0畅05），高剂量组 GSH-Px 活性[（60畅02±7畅05）U／mg]与高脂对照组差异无统计学意义（t＝－1畅66，P＞0畅05）。结论高脂膳食可以诱导肾脏线粒体出现氧化损伤。莱菔硫烷对高脂饮食诱导肥胖大鼠肾脏线粒体氧化损伤及线粒体复合体活性的降低具有一定的保护作用。

莱菔硫烷对结肠癌细胞的生长抑制及诱导作用

目的探讨植物化学保护剂莱菔硫烷(SFN)对结肠癌细胞的生长抑制及诱导作用的抗肿瘤机制.方法①体外培养人结肠腺癌细胞株Caco-2,观察10-100μmol/L的SFN对Caco-2增殖动力学的影响,MTT法检测细胞生长抑制率.②采用RT-PCR及Western blot检测SFN诱导Caco-2细胞葡萄糖醛酸转移酶UGTlA及其同工型的表达,高效液相色谱法测定UGTlA的催化活性.③扫描电镜观察SFN诱导细胞凋亡的形态变化;流式细胞仪检测凋亡率.结果①30～100μmol/L的SFN对细胞增殖均有抑制作用,呈剂量和时间依赖效应.②10～35μmol/L SFN处理组UGT1AmRNA相对系数与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).UGT1AmRNA表达量与SFN的剂量呈正相关(r=0.79,P＜0.01);25μmol/L SFN处理组与对照组之间UGT1A1(P=0.006)、UGT1A8(P=0.017)、UGT1A10(P=0.008)表达的差异具有统计学意义;10～30μmol/L SFN作用于Caco-2细胞24h,随着浓度的增加,UGT1A蛋白带的灰度值比值增加.与对照组相比,P＜0.05;在SFN处理组对杂环胺N-OH-PhIP的葡萄糖醛酸结合能力明显增高.③扫描电镜观察,25μmol/L处理组无明显改变,50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L处理组发生明显的细胞形态结构变化,典型者出现凋亡小体;流式细胞仪检测结果示随着SFN浓度增高,凋亡率增加,与对照组相比差异有显著性意义(P＜0.01).结论①植物化学保护剂莱菔硫烷对结肠腺癌细胞株Caco-2的生长增殖具有抑制作用,呈剂量租时间依赖效应;②小剂量的莱菔硫烷能诱导UGT1A及其同工型UGT1A1、1A8、1A10mRNA表达,UGT1A蛋白表达增加,对杂环胺的葡萄糖醛酸结合能力增强;③大剂量的莱菔硫烷诱导结肠腺癌细胞凋亡.

莱菔硫烷对过氧化氢诱导人脐静脉血内皮细胞损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉血内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用,并进一步研究莱菔硫烷在保护内皮细胞损伤中的机制.方法 复苏由中国科学院上海细胞库提供的人脐静脉内皮细胞株,37℃、5％CO2条件下培养细胞至80％以上融合度时,分组进行干预.实验分组:①空白对照组(对照组):细胞正常培养2.5 h;②过氧化氢组(H2O2组):分别给予100、200、400、600、800μmol/L浓度培养细胞2 h,选择400μmol/L为其佳干预浓度(后续各组如未特殊注明,默认H2O2浓度为400μmol/L);③莱菔硫烷+过氧化氢组(SFN+H2O2组):不同浓度SFN(2.5、5、10μmol/L)预孵育30 min后,加入400μmol/L的H2O2继续培养2 h.收集干预后的各组细胞,用MTT法比较细胞活性,流式细胞技术测定细胞内ROS水平,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR法)测定细胞内转录因子核因子E2(Nrf2)mRNA和血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达情况.结果 与对照组相比,H2O2组MTT法测定的细胞吸光光度值(A值)降低(P<0.05),并浓度依赖性的使A值下降,SFN+H2O2组细胞吸光光度值高于H2O2组(P<0.05).H2O2组ROS水平高于对照组(P<0.05),SFN+H2O2组ROS水平低于H2O2组(P<0.05).H2O2组Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05),SFN+H2O2组Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA表达水平高于H2O2组(P<0.05).结论 莱菔硫烷对过氧化氢致HUVEC的氧化损伤有保护作用,其机制可能与莱菔硫烷在转录水平激活Nrf2/HO-1表达有关.

莱菔硫烷对阿尔茨海默病小鼠脑组织Aβ沉积和氧化应激的影响

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)对阿尔茨海默病(AD)的干预作用. 方法 将8周龄C57BL/6J小鼠按体质量随机分为3组(n=10).干预组、模型组小鼠饮用含铝水(0.4 g/100 ml)及隔日1次皮下注射200 mg/kg D-半乳糖,并每日1次分别灌胃25 mg/kg SFN和等量蒸馏水,同时设立溶媒对照组.90 d后检测血铝水平、脑组织Aβ沉积情况及大脑皮质氧化应激相关指标. 结果 模型组和干预组小鼠血铝水平高于对照组,干预组小鼠血铝水平低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,模型组小鼠脑组织Aβ沉积斑块增多,谷胱苷肽过氧化物酶活性降低,羰基含量增加(均P＜0.05);而干预组小鼠脑组织Aβ沉积斑块、谷胱苷肽过氧化物酶活性及羰基含量与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组比较,干预组小鼠脑组织Aβ沉积斑块减少(P＜0.05).各组小鼠脑组织SOD活性及总巯基含量差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 SFN可降低AD模型小鼠的血铝水平,减少脑组织Aβ斑块沉积,并对氧化应激具有一定的调节作用.

莱菔硫烷通过Nrf-2信号通路对肺癌的双重作用研究进展

十字花科植物(如西兰花、洋白菜、花茎橄榄等)含有的丰富硫代葡萄糖甙( glucosinolates,GS),被咀嚼时,经黑芥子硫酸苷酶(myrosinase)水解后产生异硫氰酸盐( isothiocyanates,ITCs),莱菔硫烷( Sulforaphane,SFN)是其水解后的主要存在形式,也是生物活性高的代谢产物之一.

莱菔硫烷对大鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的 建立大鼠同种异体异位心脏移植模型,莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)预处理受体大鼠,观察并探讨其对大鼠心肌冷缺血再灌注损伤的保护作用.方法 健康雄性Lewis大鼠140只,其中100只采用数字表法随机分为对照组、SFN0.5组、SFN0.75组、SFN1.0组和SFN25组5组,每组20只(供、受体各10只).各组受体大鼠分别于受体移植前24h经尾静脉注射等量生理盐水、SFN0.5mg· kg-1 bw-1、SFN 0.75mg·kg-·bw-、SFN 1.0mg·kg-1 ·bw-和SFN 2.5 mg·kg-1·bw-.将冷藏于4C HTK液18h的供心,移植到受体大鼠腹腔内,建立大鼠同种异体异位心脏移植模型.移植后6、24 h分别从受体鼠眼内眦静脉或腔静脉采血,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(TnT)水平;移植后24 h,取供心心肌组织,检测心肌组织中脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,应用免疫组织化学检测移植心肌组织诱导型一氧化氮合酶(inducible Nitric Oxide,iNOS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、低氧诱导因子-1oα(Hypoxia in-ducible factor,HIF-1α)的表达,电镜观察心肌超微结构变化.另外40只大鼠应用Kaplan-meier分析其生存率.结果 与对照组大鼠比较,其他4组经SFN预处理大鼠的中位生存期明显高;血清中LDH、TnT、CK-MB水平均有不同程度下降;心肌LPO含量均降低(P＜0.05);SOD/LPO比值高(P＜0.01);心肌超微结构损伤程度轻.另外,与对照组比较,SFN0.75组、SFN10组(P＜0.05)、SFN2.5组(P＜0.05)大鼠的心脏功能评分较高;移植后6、24 h,SFN0.5组心肌组织SOD活性升高(P＜0.05);SFN0.75组、SFN1.0组、SFN2.5组心肌组织iNOS表达降低(P＜0.01);SFN1.0组、SFN2.5组Caspase-3表达低(P＜0.05);SFN10组、SFN25组HIF-1α表达低(P＜0.05).结论 SFN可通过抗氧化、抗细胞凋亡机制,减轻心脏移植中冷缺血再灌注损伤引起的氧化应激和心肌细胞凋亡,从而减轻移植心脏的缺血再灌注损伤.SFN剂量增加,保护作用增强.

莱菔硫烷通过Nrf2-ARE通路减轻大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)是否通过核因子相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)通路对抗大鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤.方法 健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只随机分成3组:假手术组(Sham组,n=8),缺血再灌注组(I/R组,n=16),莱菔硫烷预处理组(I/R+ SFN组,n=16).建立大鼠异体异位心脏移植模型,将冷藏于4℃ HTK液9h的供心移植到I/R组和I/R+ SFN组受体大鼠腹腔,移植后24h取出移植心脏.Sham组开/关腹24 h后取出自体心脏.应用HE染色法、免疫组织化学法及western blot方法观察心肌组织学、核因子相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)的蛋白表达水平.结果 与I/R组比较,I/R+ SFN组心肌组织损伤减轻,心肌组织Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平显著升高(P＜0.01).与Sham组比较,I/R+ SFN组心肌组织学和心肌组织Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平仍高于正常(P＜0.01).结论 莱菔硫烷通过激活Nrf2-ARE通路,上调下游蛋白HO-1、NQO1表达,提高心肌细胞对氧化应激的防御能力,对抗移植心脏冷缺血再灌注损伤.

莱菔硫烷对乳腺癌干细胞增殖影响

目的 莱菔硫烷具有很好抑制肿瘤生长的作用,关于其抗肿瘤的机制尚不明确.本研究旨在观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对乳腺癌干细胞(cancer stem cell SUM159,CSCSUM159)增殖的影响.方法 实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)、蛋白质印迹法检测无血清培养基(serum-free medium,SFM)悬浮培养是否促进乳腺癌细胞的干性标志物Nanog、C-myc、CD44和CD133的表达;MTT、CCK8法分别检测不同浓度SFN对血清培养(serumsupplemented medium,SSM)的SUM159和SFM培养的CSCSUM159活力的影响;蛋白质印迹检测不同浓度SFN对CSCSUMI59分子标志物Nanog、C-myc、CD44、CD133以及肿瘤干细胞增殖相关蛋白PCNA、p21、Cyclin D1表达水平的影响.结果 SFM悬浮培养可以明显促进CSCSUM159干性标志物的蛋白表达水平,其中SSM和SFM组Nanog蛋白相对含量为1.00±0.02和3.00±0.08,t=-40.093,P＜0.001;C-myc蛋白相对含量为1.00±0.05和1.40±0.01,t=-14.900,P＜0.001;CD44蛋白相对含量为1.00±0.04和1.20±0.02,t=-7.105,P＜0.001;CD133蛋白相对含量为1.00±0.02和1.55±0.02,t=-35.389,P＜0.001.同时,SSM和SFM组的Nanog mRNA分别为1.02±0.23和7.00±1.07,t=-9.51,P=0.001;C-myc mRNA分别为1.00±0.01和4.93±0.50,t=-13.52,P=0.005;CD44mRNA分别为1.20±0.53和4.78±0.53,t=-8.226,P=0.001;CD133 mRNA分别为1.29±0.85和3.2±1.24,t=-3.320,P=0.045.SUM159经1×10-7、1×10-6和1×10-5 mol/L的SFN干预72 h后,MTT法检测结果显示,Control组以及不同浓度SFN处理组的细胞相对活力分别为(I00±8.91)％、(89.77±10.70)％、(70.47±9.67)％和(51.26±4.50)％,差异有统计学意义,F=36.278,P＜0.001.CSCSUM159经2、5和10 μmol/L SFN干预72 h后,CCK8法检测结果显示,乳腺癌干细胞相对活力分别为(101±5.42)％、(91.39±12.91)％、(64.96±12.46)％和(52.66±0.02)％,差异有统计学意义,F=19.008,P＜0.001.与Control组比较,SFN可明显诱导CSCSUM159细胞活力的下降,下调肿瘤干细胞分子标志物Nanog、C-myc、CD44和CD133的表达,其中Control组以及2、5、10 μmol/L SFN处理组的干细胞分子标志物的蛋白相对表达量,CD133分别为1.00±0.04、0.96±0.02、0.72±0.002和0.68±0.01,CD44分别为1.00±0.00、0.92±0.03、0.92±0.01和0.77±0.01,C-myc分别为1.00±0.02、0.94±0.00、0.68±0.02和0.45±0.01,Nanog分别为1.00±0.03、0.68±0.02、0.79±0.03和0.31±0.01.单因素方差分析结果显示,与Control组相比,差异均有统计学意义,FcD133=136.390,P＜0.001;FcD44=96.200,P＜0.001;FC-myc=944.172,P＜0.001;FNanog=481.447,P＜0.001.结果还表明,不同浓度SFN处理肿瘤干细胞后,对肿瘤增殖相关因子PCNA、Cyclin D1以及p21具有明显的调节作用,其中Control组以及经2、5、10 μmol/L SFN处理组的PCNA、Cyclin D1、p21蛋白表达量,PCNA分别为0.99±0.20、0.98±0.02、0.87±0.01和0.66±0.02;Cyclin D1分别为1.00±0.00、0.64±0.01、0.53±0.03和0.57±0.02;p21分别为1.00±0.01、2.14±0.10、5.05±0.19和4.59±0.14.单因素方差分析显示,与Control组比较,差异均有统计学意义,FPcNA=222.209,P＜0.001;FCyclinD1=389.355,P＜0.001;Fp21=662.717,P＜0.001.结论 SFN可以抑制乳腺癌干细胞的增殖,其机制可能与其下调肿瘤干细胞分子标志物Nanog、C-myc、CD44、CD133和下调PCNA、Cyclin D1,上调p21的表达有关.

莱菔硫烷抑制乳腺癌细胞的增生

莱菔硫烷对代谢性疾病的调控作用研究进展

近年来,肥胖和糖尿病等代谢性疾病成为威胁我国居民健康的主要公共卫生问题.代谢性疾病的发展过程中,高血脂、胰岛素抵抗和高血糖等代谢紊乱相互交织,导致代谢性疾病的病因及发病机制极为复杂.莱菔硫烷是一种主要存在于绿花椰菜中的植物化学物,具有抗氧化、抗肿瘤和抑菌等多种生物学功能.近期研究显示,莱菔硫烷对代谢性疾病如肥胖症、糖尿病及其多种并发症具有重要的调控作用,未来可能为代谢性疾病的防控提供新靶点.本文从调节脂肪细胞分化、脂质代谢、胰岛素分泌、葡萄糖代谢和抗氧化损伤等方面对莱菔硫烷改善肥胖、糖尿病及其并发症的作用机制进行综述.

温度、pH和光照对莱菔硫烷水溶液稳定性的影响

目的 考察莱菔硫烷水溶液的稳定性,以确定其适保存条件.方法 采用HPLC测定溶液中莱菔硫烷的含量,考察了高温、pH值、光照对莱菔硫烷溶液稳定性的影响.结果 在HPLC测定溶液中莱菔硫烷含量的平均回收率为100.45%,RSD为1.02%.若高温加热时间较长或pH偏高,莱菔硫烷含量有明显降低,降解产物含量增加.结论 莱菔硫烷溶液对热不稳定,随温度升高或加热时间的延长会逐渐分解,对光线的稳定性好.pH 3.0条件下稳定,不适宜在碱性环境中存放或使用.

莱菔硫烷通过调控Nrf2/ARE通路的神经保护作用研究进展

应用植物化学物(phytochemicals)调控Nrf2/ARE通路成为预防和治疗氧化应激相关疾病的靶点.在十字花科植物中存在的天然强抗氧化剂莱菔硫烷在体内和体外具有广泛的神经保护作用,近期研究表明,其对Nrf2/ARE通路的调控作用介导其神经保护作用.笔者就莱菔硫烷通过调控Nrf2/ARE通路的神经保护作用研究进展进行综述.

莱菔硫烷诱导p38磷酸化从而抑制前列腺癌细胞表达COX-2

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)是否经p38信号通路抑制前列腺癌细胞PC-3环氧化酶(COX)-2表达.方法 体外培养PC-3细胞,与5～20μM SFN孵育24h,RT-PCR和Western blot检测分别检测COX-2 mRNA和蛋白的表达.提取细胞总蛋白,Western blot检测p38的磷酸化情况.后用SB202190以及p38激活剂茴香霉素与SFN处理过的Pc-3细胞共同孵育,观察C0X-2蛋白的表达情况.结果 5-20μM SNF处理后,COX-2 mRNA随SNF浓度的递增而表达量逐渐降低.Western blot进一步证实COX-2蛋白水平也随之降低.不同浓度的SFN处理24h后,能显著诱导PC-3细胞p38磷酸化,SB202190处理后COX-2表达明显增高,茴香霉素处理能再次降低细胞内COX-2蛋白的水平.结论 SFN能在基因和蛋白水平抑制前列腺癌细胞系PC-3表达COX-2,其机制可能与降低COX-2表达可能与p38磷酸化有关.

莱菔硫烷对阿霉素诱导心肌毒性大鼠的保护作用

目的：观察莱菔硫烷（SFN）对大鼠阿霉素心肌损伤的保护作用，并探讨其可能的作用机制。方法SD大鼠随机分为空白对照组、阿霉素组模型组和SFN干预组。模型组采用阿霉素（15 mg/kg）分6次隔日腹腔注射，SFN组按10～50 g/kg体重给予灌胃。ELISA检测血浆脑钠肽（BNP）浓度；观察心肌组织中心肌谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果阿霉素组大鼠血浆BNP浓度明显增高（P<0.01），阿霉素组BNP明显升高，而经不同浓度SFN处理后，BNP逐渐降低。当SFN浓度达5 g/kg时，BNP含量接近对照组（79.6280±11.26）μg/L水平。此外，阿霉素组心肌组织GSH-PX、CAT、SOD活力明显降低。SFN干预组心肌组织GSH-PX、CAT、SOD活力增高。结论SFN对阿霉素心肌毒性大鼠具有保护作用，其机制可能与增高心肌组织中GSH-PX、CAT、SOD活力有关。

莱菔硫烷诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡与胞内活性氧的关系

目的 研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)在体外对人胃癌SGC7901细胞增生及凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 MTT比色法检测SFN对SGC7901细胞增生的影响,透射电镜观察SGC7901细胞形态学变化,流式细胞术检测早期凋亡率、细胞线粒体跨膜电位(△Ψm)以及胞内活性氧(ROS)水平.结果 SFN呈剂量时间依赖地抑制SGC7901细胞增生,透射电镜观察到SFN作用后SGC7901细胞典型的早期凋亡改变.SFN由0～50μmol/L作用24h,早期凋亡率明显升高(P<0.01);△Ψm明显降低(P<0.01);ROS有不同程度的升高.结论 SFN对SGC7901细胞有明显的增生抑制及诱导凋亡作用,SFN可能通过诱发细胞内活性氧水平增高,引发经线粒体途径的内源性凋亡.

自噬调节剂对莱菔硫烷诱导Caco-2细胞自噬效应及UGT1A1表达的影响

目的 观察以人结肠腺癌细胞Caco-2为模型,探讨3-甲基腺嘌呤(3-MA)及雷帕霉素(Rapa)对莱菔硫烷(SFN)诱导细胞自噬及葡萄糖醛酸转移酶1A1 (UGT1A1)的影响.方法 采用Western印迹法测定微管相关蛋白1轻链3(LC3)和UGT1A1,采用免疫荧光法观察LC3的胞内分布及核因子E2 P45相关因子2(Nrf2)的核内转位,实时荧光定量PCR法测定UGT1A1、人孕烷X受体(hPXR)的mRNA表达.结果 SFN对LC3-Ⅱ蛋白的诱导呈浓度和时间依赖性,3-MA及Rapa可分别减弱或增强LC3-Ⅱ蛋白的表达；与对照组相比,Rapa、SFN及SFN+Rapa可诱导UGT1A1 mRNA的表达增强(分别为对照组的2.4倍、4.12倍、2.41倍,均P＜0.01),且诱导UGT1A1蛋白的表达增强；对照组未见明显的Nrf2核内荧光标记,而含有SFN的处理组中可见强烈的Nrf2核内荧光标记,且SFN+Rapa更为明显；与对照组相比,Rapa及SFN+Rapa的hPXR mRNA表达增强(分别为对照组的1.82倍、1.4倍,均P＜0.01).结论 3-MA和Rapa可分别减弱或增强SFN对Caco-2细胞自噬效应的诱导；Rapa可进一步增强SFN对UGT1A1的诱导；Rapa联合SFN可能通过同时激活Nrf2和hPXR增强了对UGT1A1的诱导.

莱菔硫烷与右美沙芬联合应用对甲基汞致大鼠神经毒性的影响

目的 探讨甲基汞对大鼠神经毒性的影响及莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)与右美沙芬(dextromethorphan,DM)联合应用的保护作用,为甲基汞中毒的防治提供理论依据.方法 选取SPF级Wistar大鼠56只,按体重随机分成4组,每组14只,雌雄各半.其中对照组皮下及腹腔注射生理盐水;低、高剂量甲基汞染毒组皮下注射生理盐水,2h后分别腹腔注射4、12 μmol/kg氯化甲基汞;SFN+DM联合干预组皮下注射5.6μmol/kg SFN和13.5 μmol/kg DM,2h后腹腔注射12μmol/kg氯化甲基汞.每周一、三、五进行预处理,周一至周五染毒,连续4周.染毒结束后24 h分离大鼠脑皮质.采用冷原子吸收法测定大鼠脑皮质内汞含量,流式细胞仪测定细胞内Ca2+浓度、细胞凋亡率和活性氧(ROS)的含量,以试剂盒测定谷氨酸(Glu)、谷胱甘肽(GSH)含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力,以Real-time PCR和Western blotting法测定Nrf2、HO-1、y-GCS、NR1、NR2A和NR2B的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组比较,低、高剂量染汞组大鼠的脑皮质汞、ROS、Ca2+含量及细胞凋亡率升高,GSH含量降低,Glu含量升高,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力降低,Nrf2、HO-1、y-GCS mRNA和蛋白表达量升高,NR1、NR2A和NR2B的mRNA和蛋白表达量下降,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与高剂量染汞组比较,SFN+DM联合干预组大鼠脑皮质汞含量差异无统计学意义(P＞0.05),ROS、Ca2+含量及细胞凋亡率降低,GSH含量升高,Glu含量降低,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力升高,HO-1、γ-GCS、NR1、NR2A的mRNA和蛋白表达量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 甲基汞可引发大鼠神经毒性,SFN与DM联合应用可有效拮抗甲基汞所致神经毒性.