大鼠神经干细胞体外培养条件下GDNF及NGF的分泌特点

目的:探讨体外培养条件下大鼠神经干细胞(NSCs)分泌胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和神经生长因子(NGF)的特点.方法:取SD胎鼠NSCs悬浮培养,光镜观察细胞形态,使用Nestin、微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖神经鞘氨醇酶(GalC)免疫荧光法鉴定细胞.培养第3代后使用ELISA法测量其GDNF及NGF分泌量,连续测量6代.结果:光镜下第3代细胞仍保持较多NSCs特征,至第6代,大部分干细胞分化为星形胶质细胞,少部分分化为神经元或少突胶质细胞.第3代细胞GDNF的分泌量较低,但随着培养时间的延长,其分泌量逐渐增高;而第3代细胞NGF的分泌量较高,但其分泌有一个高峰期(第6代),随后逐渐下降.结论:在体外培养条件下,NSCs干细胞阶段分泌GDNF的能力较低,而分泌NGF的能力较高;进入分化阶段后,分泌GDNF的能力提高,而分泌NGF的能力有所减弱.利用干细胞移植治疗中枢神经系统损伤时应注意时程的选择.

大脑中动脉粥样硬化性脑梗死患者急性期MRI表现及其病理生理机制分析

目的:回顾性分析大脑中动脉粥样硬化性脑梗死患者急性期的MRI表现,并探讨其病理生理机制.方法:收集38例大脑中动脉粥样硬化性脑梗死患者的MRI资料, 据梗死灶的形态学表现分型并统计例数.结果:38例患者中,多发性脑梗死11例(28.9%),单发性脑梗死27例(71.1%);分水岭脑梗死或伴其他类型梗死13例(34.2%),流域性脑梗死或伴其他类型梗死8例(21.1%),纹状体内囊梗死或伴其他类型梗死6例(15.8%),半卵圆区梗死或伴其他类型梗死5例(13.2%),单发腔隙性脑梗死4例(10.5%),单发弥散性多发性点状脑梗死2例(5.3%).结论:大脑中动脉粥样硬化性脑梗死的MRI表现各异,并有其不同的病理生理机制,可根据脑梗死MRI表现初步判断其发病机制并予以相应治疗.

伴有DWI异常的短暂性脑缺血发作的临床特点

目的:回顾性分析短暂性脑缺血发作(TIA)伴或不伴DWI异常患者及脑梗死患者的临床特点,以探讨TIA患者出现DWI异常的临床意义.方法:选取TIA患者84例和同期住院的急性脑梗死患者45例(梗死组),根据DWI结果把TIA患者分为TIA1组44例(DWI正常)和TIA2组40例(DWI异常),比较3组患者的一般资料、DWI及MRA检查结果和住院期间TIA、脑梗死的复发情况.结果:3组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05);TIA2组病灶体积显著小于梗死组(1.63±2.05 cm3,10.34±11.14 cm3,P＜0.05),两组病灶间有重叠区域;梗死组颅内动脉闭塞的发生率高,多为远端大血管闭塞,而TIA2组闭塞血管多位于近心端;住院期间3组脑血管病发生率有显著差异,TIA2组高,梗死组低,并且TIA2组脑梗死发生率显著高于TIA1组和梗死组(27.5%,2.3%,2.2%,P＜0.05),而TIA1组以TIA复发为主.结论:TIA伴DWI异常可能是独立于TIA和脑梗死之外的脑缺血综合征,危险因素与TIA和脑梗死基本相同,短期内易再发脑血管病并以脑梗死为主,应予以重视并积极治疗,其溶栓治疗方案应根据新近发生的脑损伤程度来确定.

bFGF对脑出血大鼠海马组织SOD活力、MDA含量和Bax、Bcl-2转录水平的影响

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对大鼠脑出血模型出血侧海马组织中SOD活力、MDA含量和Bax、Bcl-2转录水平的影响.方法:采用脑内注射胶原酶建立大鼠脑出血模型,将模型鼠分为模型组、NS组和bFGF组各54只,模型组不作任何干预,bFGF组肌肉注射bFGF(8 μg/kg,1次/天),NS组肌肉注射等量生理盐水.各组分别于干预第1、3、7天取出血侧海马组织,检测SOD活力、MDA含量及Bax mRNA、Bcl-2 mRNA的表达水平.结果:与NS组、模型组比较,bFGF组出血侧海马组织第7天SOD活力明显增高、MDA含量明显下降(P<0.05);第3、7天Bax mRNA表达水平明显下降、Bcl-2 mRNA表达水平明显增高(P<0.05).结论:bFGF可通过促进氧自由基清除、降低Bax/Bcl-2基因的表达比值抑制细胞凋亡,从而保护脑出血后脑损伤.

Rho-ROK通路阻滞剂对小鼠缺氧神经元轴突再生和细胞活力的影响

目的:探讨Rho-ROK通路阻滞剂对小鼠缺氧神经元轴突再生和细胞活力的影响.方法:取小鼠大脑皮质神经元培养并鉴定,进行体外缺氧干预,于缺氧前后加入Rho-ROK通道阻滞剂(Y-27632,法舒地尔和胞外酶C3a),用FITC标记的鬼笔毒环肽染色观察神经元纤维状肌动蛋白(F-actin)骨架的重组变化,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测细胞活力.结果:正常神经元生长良好,轴突、树突形态清晰并交织成网,F-actin主要分布于细胞外周,形成周边肌动蛋白丝带,胞浆内应力纤维少;缺氧后,周边肌动蛋白丝带模糊,神经突起回缩,应力纤维增多,胞体膨胀,细胞趋于凋亡或破裂;缺氧前加入Y-27632、法舒地尔孵育则无此变化,缺氧后加入Y-27632、法舒地尔亦可明显逆转这一过程,而胞外酶C3a干预则无明显改善.MTT法显示Y-27632、法舒地尔能显著提高缺氧神经元再灌注24 h后的存活率(P<0.05),而胞外酶C3a无明显作用.结论:神经元缺氧可引起细胞骨架重组、生长锥塌陷、神经突起回缩,细胞趋于凋亡、破裂.于缺氧前后阻滞Rho-ROK通路均可抑制这一过程,但不同种类Rho-ROK通路阻滞剂的保护作用不同,其中Y-27632、法舒地尔作用显著,而胞外酶C3a作用不明显.

综合医院神经科门诊失眠症患者临床特点分析及心理测评

目的:探讨综合医院神经科门诊失眠症患者的临床特点和心理状况.方法:收集2005～2007年于襄樊市第一人民医院神经科门诊就诊的260例失眠症患者的临床资料,利用90项症状清单(SCL-90)测评患者的心理状况,并与国内常模比较.结果:260例失眠症患者以50～59岁者居多,且此年龄组性别间无明显差异;主要表现为混合性失眠、每晚睡眠时间少于5 h、每周失眠3～4次、病程1～9年,SCL-90各因子分及总分均明显高于国内常模(P<0.05).结论:综合医院神经科门诊失眠症患者发病有年轻化趋势,性别差异在不断缩小,因伴发不同程度心身症状而易误诊误治,临床上应予以高度重视.

小檗碱对颈动脉粥样硬化家兔颈动脉病理改变和VCAM-1转录水平的影响

目的:探讨小檗碱预防颈动脉粥样硬化形成的作用机制.方法:将24只雄性新西兰大白兔随机分为对照组、模型组和小檗碱组各8只.对照组给予普通饮食;模型组和小檗碱组给予高脂饲料喂养1周后行右侧颈动脉内膜空气干燥术,术后,前者继续高脂饲料喂养4周以制成颈动脉粥样硬化模型,后者在前者的基础上每日灌服小檗碱(100 mg/kg).第5周麻醉处死,取右侧颈动脉组织,行HE染色观察颈动脉病理改变,采用RT-PCR法测定VCAM-1 mRNA含量.结果:与对照组比较,模型组颈动脉内膜明显增生,内膜下可见大量泡沫细胞堆积,有明显粥样硬化斑块形成;而小檗碱组内膜轻度增厚,内膜下仅有少量泡沫细胞.模型组、小檗碱组和对照组VCAM-1/β-actin扩增带吸光度比值依次降低,差异有统计学意义(0.61±0.11,0.20±0.04,0.81±0.11,P<0.01).结论:小檗碱可能通过抑制VCAM-1的表达预防颈动脉粥样硬化的形成.

腔隙性脑梗死发生、进展中颈动脉斑块特点分析

目的:研究腔隙性脑梗死的发生、进展中颈动脉粥样硬化斑块的特点.方法:应用彩色多普勒超声仪对105例复发性腔隙性脑梗死患者(复发组)、83例初发性腔隙性脑梗死患者(初发组)和86例非腔隙性脑梗死患者(对照组)行颈动脉探查,观察颈动脉粥样硬化斑块的部位、数目、形态,并测量斑块处颈动脉内-中膜厚度(IMT),计算斑块积分(累加双侧颈动脉斑块大厚度).结果:3组斑块数目、IMT、斑块积分依次递减,差异有统计学意义(P<0.05);部位多见于颈总动脉分叉处且左侧多于右侧,以复发组尤为明显;复发组软斑、溃疡斑发生率明显高于另外2组(P<0.05).结论:不稳定斑块明显增加腔隙性脑梗死复发风险,应定期监测斑块并积极治疗以减少复发.

细胞因子诱导的杀伤细胞体外培养技术的评价

目的:评价采用抗CD3单抗、IL-2、IFN-γ和IL-1α四因子培养体系体外培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)的效果.方法:采集8例难治性淋巴瘤患者外周血单个核细胞培养,于培养第1天加入抗人CD3单抗、人重组IL-1α、人重组IFN-γ,第2天加入人重组IL-2,每3天换培养液并添加人重组IL-2和人重组IFN-γ以维持其浓度,培养12～14 d收获CIK细胞.于培养第1、4、7、10、13 天进行细胞计数,于培养前及培养第13天测定细胞免疫表型.结果:细胞因子共刺激3 d即出现细胞集落,13 d 后CIK细胞总数达(7～18)×109(平均12.7×109),较培养前扩增44～140倍(平均98倍),细胞存活率超过90%;具有免疫表型CD3+、CD4+、CD8+和CD3+CD56+细胞的平均值分别从培养前的(50.9±3.5)%、(29.9±1.7)%、(41.3±3.2)%、(1.6±0.2)%增加到培养第13天的(90.2±1.6)%、(40.6±5.5)%、(52.8±4.9)%、(33.1±4.0)%.结论:培养当日加抗人CD3单抗、IL-1α、IFN-γ,24 h后加IL-2,培养过程中维持IL-2和IFN-γ浓度,这种四因子培养体系制备的CIK细胞的体外扩增率高、杀瘤活性强,并综合了外周血易获得、操作简便和自体来源等优点,可以临床推广应用.

散发性阿尔茨海默病患者脑内sorLA 水平与淀粉样斑块数量的关系

目的:研究散发性阿尔茨海默病(AD)患者脑内sorLA蛋白表达水平,并探讨其与脑内淀粉样斑块数量的关系.方法:随机选择15例尸检明确诊断的散发性AD患者(AD组)和15例非AD患者(对照组),采用Western-blot测定2组颞叶皮质组织中sorLA蛋白表达水平,并分析AD组脑内sorLA水平与淀粉样斑块数量的关系.结果:2组性别、年龄、死后尸检时间等匹配.AD组颞叶皮质内sorLA蛋白表达水平较对照组下降达63%(P<0.05),线性回归分析显示AD组脑内sorLA水平与淀粉样斑块数量明显呈反比.结论:散发性AD患者脑内sorLA蛋白表达显著下降,且其表达量与淀粉样β蛋白(Aβ)的沉积量直接相关,提示sorLA可能涉及散发性AD的发病机制.

血浆半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平与脑梗死的关系

目的:探讨血浆半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(胱抑素C)水平与脑梗死的关系.方法:用颗粒增强免疫比浊法测定100例脑梗死患者(梗死组)和138例性别、年龄等匹配的非卒中患者(对照组)的血浆胱抑素C 水平,按其水平由低到高将2组患者分为五等份,用logistic 回归分析得出各五分位组与脑梗死的关系.结果:梗死组血浆胱抑素C水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05).与血浆胱抑素C第1个五分位组比较,第2、3、4、5个五分位组发生脑梗死的风险比(95%CI)分别为1.35(0.63～2.89)、1.50(0.70～3.23)、1.19(0.55～2.58)、2.31(1.09～4.88).结论:血浆胱抑素C 水平升高是脑梗死的一个危险因素.

短暂性脑缺血发作的分层管理策略

短暂性脑缺血发作(transient ischaemic attacks,TIA)的传统定义是历时短暂并反复发作的脑局部供血障碍,导致供血区局限性神经功能缺失症状,症状于24 h内完全消失.随着医师临床经验的积累及医学影像学的发展,目前公认的TIA定义是 Albers等[1]在新英格兰医学杂志上提出的,即由于局灶性脑或视网膜缺血所致的短暂神经功能障碍,典型临床症状持续时间一般在1 h以内,且没有急性脑梗死证据.若临床症状持续存在,并有与神经功能缺损相符的特征性影像学表现,则诊断为脑梗死.TIA极易复发且是卒中的危险因素,TIA患者中48 h内发生卒中者占5%,90 d内发生卒中者占10%,因此TIA二级预防极为重要,而有效的分层管理策略能很大程度上降低TIA的患病率及病死率.

胚胎干细胞向多巴胺能神经元的诱导分化调控

中脑多巴胺能神经元在自主运动、情绪行为及认知方面发挥了重要作用,这类神经元的缺失是帕金森病(Parkinson's disease, PD)的发病基础.胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)可在体外无限增殖并向多巴胺能神经元分化,被认为是PD细胞替代治疗的重要细胞来源,从而成为近几年来的研究热点.本文就多巴胺能神经元的体内发育调控和诱导非人类及人类ESC向多巴胺能神经元分化主要方法的研究进展作一介绍,并讨论其中存在的问题.

丝氨酸蛋白酶调控酸敏感离子通道及上皮钠离子通道机制研究进展

酸敏感离子通道(ASICs)属非电压门控钠离子通道,ASIC1a、2a、2b存在于中枢神经系统,ASIC1a与学习、记忆、恐惧感等海马功能密切相关,在缺血损伤等胞外酸性环境下可被瞬时激活.上皮钠离子通道(ENaC)是一种高选择性阳离子通道,分布于远端肾小管、膀胱上皮、大肠上皮、外分泌腺管以及气道上皮,由α-、β-和γ-ENaC 3种同源亚单位组成,在水钠平衡、血压及血容量的调节中起重要作用,该调节作用受多种因素(如丝氨酸蛋白酶)的影响.

脑血管病血管成形术并发症的研究进展

随着影像学、技术材料学的发展和操作技术的日益成熟,脑血管病血管成形术的成功率不断提高,并发症的发生亦不断减少.临床上应用血管成形术时应充分认识相关并发症及其危险因素,积极防治,以促进患者更好地康复.为此,本文针对脑血管病血管成形术重要并发症的研究进展综述如下.

小胶质细胞的慢性激活在多巴胺能神经元损伤中的作用

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,发病率仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD),主要表现为中脑黑质及纹状体区域多巴胺能神经元胞体及神经末梢退变,导致静止性震颤、肌肉强直、运动过慢及步态不稳等症状.尽管个别基因的突变已证实与某些家族性PD有关,但绝大部分PD的病因尚不明确.环境因素(如感染、杀虫剂、MPTP、重金属物质)可能在PD的发生过程中起关键作用.

脊髓损伤后几类促神经修复分子作用机制研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury, SCI) 后中枢神经的再生机制和修复方法学研究一直是近年来的热点.新近研究逐渐发现,成年SCI动物脊髓再生困难的原因不是神经元本身功能的丧失,而是支持神经元突起再生的微环境有所改变,包括神经营养因子的缺乏、神经元轴突生长锥抑制性因子的存在、胶质疤痕形成空间障碍等.目前有关神经轴突生长微环境的研究主要在细胞或组织移植、分子干预、免疫治疗、基因治疗和组织工程治疗等领域开展,越来越多的调控脊髓神经再生微环境的神经因子被发现、了解并研究.本文针对几类SCI后促神经修复分子作用机制的研究进展作一综述.

脊髓损伤模型的研究进展

随着建筑业及交通业的发展,急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的发病率逐年升高,损伤后神经功能恢复困难,致残率与死亡率高.合理的SCI模型是进行SCI基础研究的前提,目前常见的有挫伤型模型、气囊压迫型模型、切割型模型、光化学诱导型模型、牵拉型模型等.各种模型适用的研究方向不同,如切割型模型将脊髓全部或部分切断,可用于解剖学评价是否有轴突再生[1-3],而压迫型与挫伤型模型可较准确地模拟临床SCI病理表现,并很好地呈现SCI继发性损伤的病理变化[4].本文对上述常见SCI模型的研究进展作一综述.

中枢神经系统中小白蛋白的研究进展

Ca2+广泛存在于体内,对神经元兴奋性、神经递质释放、突触可塑性、基因表达、神经元生长、生理节律和神经内分泌等起重要调节作用[1].中枢神经系统损伤如脑缺血缺氧等常引起神经元内Ca2+超载而导致神经元兴奋性增高.小白蛋白(parvalbumin,PV)是一种早从蛙与鱼肌肉中分离出来的蛋白质,分子量低(约12 kDa),具有与白蛋白相似的溶解性,对Ca2+具有高度亲和力,与肌钙蛋白C、钙调蛋白、Calbindin、Calretinin、p86蛋白、S100蛋白等同为钙结合蛋白家族的成员.在中枢神经系统中,PV只存在于少数神经元中,具有特异性.PV能缓冲细胞内游离Ca2+,减轻Ca2+超载损伤,从而对中枢神经系统受损神经元具有保护作用.本文针对PV的分子结构、在中枢神经系统中的分布及功能、与中枢神经系统常见疾病关系的研究进展作一综述.

进行性核上性麻痹2例报道

病例1,男,58岁,因行走迟缓、言语不清进行性加重2年余入院.2年前无明显诱因出现双下肢僵硬感、行走迟缓、言语不清、低沉,之后病情渐进加重,行走时易向后跌倒,无意识障碍、晕厥、肢体震颤、抽搐等,多次在院外诊断为脑梗死、帕金森病,经血管扩张剂、金刚烷胺、美多巴等药物治疗无好转.既往无高血压、糖尿病、外伤史.查体:BP140/85 mmHg,发育正常,神志清楚,表情淡漠,定向力、计算力、理解力正常,言语缓慢、低沉、含糊不清,双眼上下运动不能、水平运动充分,双侧瞳孔等大等圆、直径约2.5 mm、对光反射灵敏,双侧鼻唇沟对称,伸舌居中,颈强直,心肺腹无异常,四肢肌力Ⅴ级,肌张力增高,双上肢呈齿轮样增高,四肢腱反射(+++),无感觉障碍,病理征阴性.

微创颅内血肿清除术治疗大量脑出血17例

1998年10月至2008年10月在淮安市楚州医院神经内科住院的大量脑出血患者17例,经头颅CT证实,其中男11例,女6例;年龄49～81岁,平均62.1岁;既往有高血压病史12例,5例无高血压病史者入院时血压均高于230/120 mmHg(1 mmHg≈0.133 KPa),有脑卒中史3例,心脏病史5例,陈旧性心肌梗死2例,糖尿病史5例;GCS评分:3～5分12例,6～8分5例.

健康教育对精神分裂症患者服药依从性的影响

2006年6～12月在洛阳市第五人民医院精神科住院的精神分裂症患者120例,均符合中国精神障碍分类与诊断标准(CCMD-3)的精神分裂症诊断标准,男88例,女32例;年龄16～60岁,平均(37.62±7.40)岁;病程1～22年,平均(7.4±4.5)年;无严重躯体疾病.将120例患者随机分为教育组和对照组各60例,2组性别、年龄、职业、文化程度、婚姻状况、病程、病情、用药情况比较差异无统计学意义.

尺神经肘部病变的神经电生理检查方法及意义

尺神经病变是常见的单神经病,其发病率仅次于腕管综合征,损害部位常见于肘部,造成手指精细运动功能障碍、前臂及手部疼痛、小指及无名指尺侧半感觉障碍、小鱼际肌和第一骨间肌萎缩无力、肘部压痛及活动受限等,严重影响劳动及生活.神经电生理检查可早期诊断,指导治疗.

《神经损伤与功能重建》杂志2009年征稿启事

《神经损伤与功能重建》杂志撰稿要求

Sulforaphane Protects Astrocytes Against Oxidative Stress and Delayed Death Caused by Oxygen and Glucose Deprivation

氧化应激是缺血再灌注后星形胶质细胞损伤和死亡的重要分子机制之一,可能成为有效的干预靶点.下述治疗策略可减轻缺血再灌注条件下产生的多种反应性氮氧化合物损伤.这种方法可通过使用化学试剂或适当条件促进转录活化因子NRF2从细胞浆转入细胞核,并与抗氧化基因反应位点结合,来诱导缺血再灌注后损伤细胞的Ⅱ期基因反应.本研究将验证如下假说:NRF2基因表达通路激活剂sulforaphane能对体外无氧无糖环境处理的培养皮质星形胶质细胞起神经保护作用.将皮质星形胶质细胞暴露于无氧无糖环境(OGD)4 h,于干预前48 h或干预后给予5 μM sulforaphane(NRF2基因表达通路激活剂)培养48 h ,两种培育条件下细胞死亡均明显减少.免疫细胞化学结果表明干预前给予sulforaphane处理,细胞中DNA/RNA氧化标志物8-hydroxy-2-deoxyguanosine的表达在恢复给氧4 h后降低,两种培育条件下胞浆内及胞核内NRF2的免疫反应均增强且NQO1(NRF2转录活化基因产物)的表达和酶活性均增强.本研究提示sulforaphane可通过激活NRF2抗氧化基因表达通路,减少体外缺氧再灌注后星形胶质细胞的死亡.