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日本血吸虫(大陆株)Sj26基因的克隆与序列分析

罗金萍;陈喜圭;沈定文;李雍龙

摘要: 目的构建日本血吸虫(大陆株)26kDa谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26)基因的真核表达载体,并测定基因序列和进行序列分析.方法用PCR的方法特异性地扩增Sj26基因,并将此基因克隆于真核表达载体pcDN3,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,阳性克隆的重组质粒DNA经酶切、PCR扩增鉴定,用双脱氧链末端终止法进行序列测定,应用BLAST方法分析Sj26基因序列并进行同源性比较..结果 PCR扩增得到特异的Sj26基因,双酶切及PCR鉴定表明获得正确的pcDNA3-Sj26重组质粒,测序结果获得的基因片段大小为651bp,编码217个氨基酸残基.基因序列同源性为99%.结论成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-Sj26.

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