中华临床实验室管理电子杂志
Chinese Journal of Clinical Laboratory Management(Electronic Edition)
- 主管单位： 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.21
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 020-28078315，020-28078296
- 国内刊号： 28
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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食蟹猴精原干细胞分离纯化及鉴定
目的 掌握食蟹猴精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养生长特性,建立食蟹猴精原干细胞分离、纯化、培养及初步鉴定的方法.方法 经手术获取2岁14天食蟹雄猴单侧睾丸,采用三步酶消化法分离获得单细胞悬液和差异贴壁法富集精原干细胞.将细胞培养于经丝裂酶素C处理的STO细胞层上,使用添加神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、GDNF家族受体α(GFRa1)三种重要生长因子的无血清培养液体外培养,20d后采用CDH1标记分子免疫荧光染色和RT-PCR对培养的食蟹猴细胞进行SSCs初步鉴定.结果 通过差异贴壁法分离纯化富集的SSCs,接种到丝裂霉素C处理的STO饲养层细胞上,第2天开始分裂增殖.用含有生长因子的培养基培养2d细胞形成小集落,5d后细胞集落明显.培养20 d后,SSCs呈葡萄串状细胞簇,符合SSCs的形态特征,这些细胞经CDH1标记分子免疫荧光染色和RT-PCR均呈阳性表达.结论 本研究成功建立食蟹猴精原干细胞的分离纯化及鉴定体系.基于STO饲养细胞的添加GDNF、bFGF和GFRa1三种生长因子的无血清培养体系可用于食蟹猴精原干细胞培养,CDH1可作为食蟹猴精原干细胞鉴定的标志物.
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高通量酶联免疫吸附试验测定血清甲胎蛋白的方法学评价
目的 评价高通量酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)定量检测血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)的方法学性能及临床应用价值.方法 收集2013年3月至12月,青岛市中心医院住院的肝癌、肝炎、肝硬化患者新鲜血清标本170份,医院体检中心健康查体者新鲜血清标本200份.参考美国临床和实验室标准化协会EP5-A2、EP15-A2文件及相关文献,评价高通量ELISA测定血清AFP的线性范围、精密度、正确度、参考区间及其对原发性肝癌的诊断性能,并与电化学发光法比对,评价其检测准确度和临床应用价值.结果 高通量ELISA测定AFP的线性范围为0.0～200.0 μg/L.低、中、高浓度的批内变异系数(coefficient of variation,CV)分别为4.9％、3.1％、3.7％,批间CV分别为3.8％、1.5％、2.1％;总CV分别为5.0％、6.0％、5.0％.与电化学发光法比对,相对平均偏倚为7.9％.回收率为91％～109％,平均97.76％.高通量ELISA测定本实验室血清AFP的参考区间为0.00～7.20 μg/L,绘制ROC曲线,确定原发性肝癌的诊断临界值为195.7 μg/L,敏感度39.5％,特异度93.3％.结论 本研究所用的高通量ELISA定量检测血清AFP的标准操作规程,检测血清AFP结果稳定,可用于诊断原发性肝癌.
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肿瘤坏死因子α-308基因多态性与胃癌患者血清胃蛋白酶原的关系
目的 探讨胃癌患者肿瘤坏死因子α基因启动子308位点(TNF-α-308)多态性与血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)的相关性.方法 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术测定500例胃癌患者(胃癌组)和500名健康体检者(健康对照组)TNF-α-308基因型,同时检测其TNF-α和血清PG亚群(PG Ⅰ和PG Ⅱ)水平,分析TNF-α-308多态性与血清PG水平的关系.结果 胃癌组TNF-α-308的GG、GA、AA基因型和G、A等位基因频率分别为74.6％(373/500)、22.4％(112/500)、3.0％(15/500),85.8％(858/1 000)、14.20％(142/1 000),健康对照组分别为79.2％(396/500)、19.0％(95/500)、1.80％(9/500),88.70％(887/1 000)、11.30％(113/1 000),两组间差异无统计学意义(x2值分别为3.584和1.713,P均＞0.05);胃癌组TNF-α、PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ比值分别为(1.03±0.31) μg/L、(84.24±24.81) μg/L、(23.04±4.95) μg/L和3.85±1.49,健康对照组分别为(0.53±0.21) μg/L、(130.27±25.58)μg/L、(20.83±5.83) μg/L和6.45±1.09,两组间差异均有统计学意义(Z=23.614,t值分别为28.882,8.240,22.363,P均＜0.01);TNF-α、PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ比值在胃癌组不同基因型(F值分别为180.511、72.840、36.110)及其不同临床分期(F值分别为34.378、30.981、26.084)患者中的差异均有统计学意义(P均＜0.01),而与PGⅡ水平差异无统计学意义(P均＞0.05);TNF-α与PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ比值呈明显负相关(r分别为-0.748、-0.704,均P＜0.01).结论 TNF-α-308基因多态性可能不是胃癌的易感性因素,其通过调节TNF-α水平参与胃癌发生发展.TNF-α水平变化影响血清PG表达,胃癌组患者不同基因型及临床分期的PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ比值明显不同,用血清PG筛查和诊断胃癌时,应注意PG受TNF-α调控影响.
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肝细胞色素P450系统基因多态性对下肢动脉硬化闭塞症支架术后患者服用氯吡格雷的远期疗效影响
目的 探讨肝细胞色素P450系统CYP2C19基因多态性在下肢动脉硬化闭塞症(atherosclerosis obliterans,ASO)患者中的分布规律,及其与氯吡格雷治疗下肢ASO支架术后患者远期疗效的相关性.方法 选取2011年1月至2012年12月在复旦大学附属中山医院血管外科行支架植入手术的下肢ASO患者50例,按泛大西洋学会联盟(Trans-Atlantic Inter-Society Consensus,TASC) Ⅱ分级A～C,采用测序法检测影响氯吡格雷代谢活性基因(CYP2C19*2,*3,*17)的单核苷酸多态性分布.采用多普勒超声和周围血管检查随访12个月,对疑难病例用X光、CT血管造影共同评价患者支架内狭窄程度,以分析年龄、身体质量指数、性别、糖尿病、高血压、脑梗、冠心病、吸烟史等因素对支架术后患者临床预后的影响.结果 50例下肢ASO支架术后患者中,CYP2C19*2、*3等位基因突变频率分别为48.0％ (24/50)、6.0％ (3/50).CYP2C19快代谢型(*1/*1)、中代谢型(*1/*2、*1/*3)、慢代谢型(*2/*2、*2/*3)的比例分别为48.0％ (24例)、44.0％ (22例)、8.0％(4例).50例下肢ASO支架术后服用氯吡格雷患者经12个月随访,CYP2C 19代谢型和吸烟史所预示终点事件发生的风险比(Hazard ratio,HR)分别为2.688,95％CI 1.366～5.288,P=0.004;HR 2.430,95％CI 1.024～5.765,P=0.044.经Kaplan-Meier生存分析,12个月中携带1个丧失功能型(loss-of-function,LOF)、2个LOF、不携带LOF等位基因的下肢ASO患者间发生缺血性事件的差异有统计学意义(P=0.007).但CYP2C19*2和*3对下肢ASO患者缺血性事件影响的差异无统计学意义(P=0.05).结论 CYP2C19基因多态性对服用氯吡格雷治疗下肢ASO患者远期疗效有影响,携带LOF等位基因可能增加缺血事件发生的风险.但由于本研究病例数少,需扩大样本量予以进一步验证.
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不同型号血凝仪检测凝血酶原时间及部分凝血活酶时间的可比性评价
目的 探讨同一实验室内不同型号血凝仪检测凝血酶原时间(prothrombin time,PT)及部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)结果的可比性. 方法 用卫生行业标准《WS/T407-2012医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》及《WS/T406-2012临床血液学检验常规项目分析质量要求》提出的两种仪器间比对方案,对3台血凝仪(2台Sysmex CA7000和1台CA1500)所检测的PT及APTT进行比对,分析两种比对方案的可行性.结果 用WS/T407-2012比对方案,样本1在3台仪器上检测PT和APTT的相对偏差分别为7.10％和5.20％,样本2的相对偏差分别为5.74％和2.46％,均＜7.50％的比对要求.用WS/T406-2012比对方案,3台仪器分别检测20份标本,以相对偏差＜7.50％、符合率≥80％为标准,CA1500与基准仪器CA7000比较,PT及APTT的符合率分别为85％(17/20份)、80％(16/20份),CA7000-2与基准仪器CA7000比较,PT及APTT的符合率分别为85％(17/20份)、90％(18/20份).结论 按照两种方案提出的比对方法,3个检测系统测定PT和APTT的结果具有可比性,实验室可根据实际情况选择合适的方案进行仪器间比对,以保证不同检测系统间检验结果的可比性.
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深部真菌的临床分布与耐药分析
目的 分析掌握本院临床分离出的深部真菌菌群分布及耐药情况,为临床合理应用抗念珠菌药物提供依据.方法 回顾性分析青岛市第三人民医院2012至2014年9875例门诊和住院的感染患者各种临床标本中,经常规培养分离出真菌后,用VITEK-2全自动微生物分析仪鉴定到种;用丹麦Rosco抗真菌药敏纸片扩散法进行药敏试验,以确定其耐药性.结果 从9875份标本中分离出6种237株深部真菌,各类标本的真菌培养阳性率为2.4％ (237/9875份);以白色假丝念珠菌和热带假丝念珠菌为主,分别占70.9％(168/237株)、19.8％(47/237株);其余为近平滑假丝念珠菌[2.1％(5/237株)]、葡萄牙假丝念珠菌[1.3％(3/237株)]、光滑假丝念珠菌[2.5％(6/237株)]、曲霉[3.4％(8/237株)];2012至2014年深部真菌培养检出阳性率分别为1.9％(54/2 798株)、2.4％(76/3127株)、2.7％(107/3950株),分别占阳性标本的6.9％(54/781株)、8.1％(76/933株)、8.6％(107/1248株),真菌培养检出阳性率有逐年上升趋势.其中白色假丝念珠菌和热带假丝念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑耐药率较高,分别为16.1％(27/168株)、14.3％(24/168株)、14.9％(25/168株)和12.8％(6/47株)、19.1％(9/47株)、17.0％(8/47株).结论 临床深部真菌的检出率有逐年上升趋势,以白色假丝念珠菌和热带假丝念珠菌为主,二者对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑均具有较高的耐药率,应引起临床关注.
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骨髓抑制性细胞在肿瘤调节中的作用
骨髓抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)是一群异质性细胞群体,具有强大的免疫抑制活性,能够抑制T淋巴细胞活化和增殖.MDSC在感染、自身免疫性疾病、骨髓移植中呈现募集增多,同时参与免疫逃逸、免疫耐受、炎性反应等病理过程.近研究发现MDSC参与肿瘤生长、免疫耐受、免疫逃逸和肿瘤转移过程.现对MDSC在肿瘤调节中的研究进展进行阐述.
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成人斯蒂尔病发病机制和实验室检测研究进展
成人斯蒂尔病(adult onset Still's disease,AOSD)是一种病因不明的系统性炎性反应性疾病,临床表现复杂多样,常出现漏诊、误诊.因此,合理选用诊断AOSD的高特异度和敏感度的实验室检测指标尤为重要,本文对AOSD相关的发病机制和实验室检测研究综述如下,以利为临床实验室开展高效的AOSD诊治工作提供参考.
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女性抗苗勒管激素的临床应用新进展
女性抗苗勒管激素(anti-Müllerrian hormone,AMH)来源于卵泡发育早期的卵泡颗粒细胞,在卵泡成熟调控中起重要的作用.AMH是目前评估卵巢储备功能以及多囊卵巢综合症的诊断与跟踪指标之一;也可作为某些卵巢肿瘤的诊断、疗效评估和复发监测的肿瘤标志.在辅助生殖领域,AMH测定有助于卵巢超刺激的个性化给药,从而提高体外受精(in vitro fertilization,IVF)的效率和安全性.AMH在临床上的广泛应用,有助于为个性化、合理化的治疗方案提供参考.
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浅谈临床电子化信息应用于临床研究的可行性
临床研究是探索和优化临床常见病诊疗技术和方法的有效措施.临床信息、生物样本和研究结果是支持临床研究的主要资源,临床电子化病历(electronic medical record,EMR)已经成为临床研究中不可缺少的信息资源.中国拥有丰富的疾病资源,电子化病历也积累了丰富的临床信息,但其在临床研究中的应用却微乎其微,主要原因可能是信息本身的可用性较低.临床研究中的受试者招募耗费大量经费和时间成本,充分利用EMR中的临床信息可有效利用招募资源.本文从电子化临床信息的现状出发,探讨其应用于临床研究的可用性、可行性及改善的可能性,阐述如何形成一套比较完善的流程、规范和方法,作为模式探索应用和推广,改善临床信息资源,建设临床研究库,推动临床和转化医学研究.
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ISO 15189评审自动生化分析仪使用中的常见不符合项及解决方案
通过分析ISO 15189评审中的常见不符合案例,阐述目前自动生化分析仪日常使用过程中的主要问题.同时依据ISO 15189准则及相关专业领域应用说明的要求,提出了合理的纠正措施建议,以帮助临床实验室更好地使用、保养、维修和校准设备,减低故障,保证结果的准确性.同时也为深入理解ISO 15189条款提供了有益的借鉴.
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输血前和术前四种血液传播性疾病检测的意义与质量控制
对拟接受手术或输血的患者开展乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病病毒、梅毒螺旋体的筛查在避免因输血或手术可能引发的医疗纠纷,及早发现感染者,避免和防止相关感染的院内传播等方面发挥着积极的作用.然而,各医疗机构相关感染指标的检测质量却有较大差异.本文对各指标的临床意义、检测原理及效能、国内外常用检测策略等进行简要回顾,以期建立合理、有效的检测流程.
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颗粒性急性淋巴细胞白血病的实验室检查及诊断分析二例
颗粒性急性淋巴细胞白血病(granular acute lymphoblastic leukemia,G-ALL)是一种少见的ALL亚型,细胞质中可见较多的粗大颗粒.形态上极易与部分急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)及大颗粒淋巴细胞白血病(large granular lymphocytic leukemia,LGLL)相混淆.我院在近期诊断2例G-ALL,现报告和结合文献讨论,以加深对本病的认识及提高诊断水平.
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医学实验室认可与验证/确认:ISO15189:2011对验证/确认要求的改变
本文对比了第2版ISO 15189:2007和2011年第3版ISO 15189:2011对验证/确认的要求,新版对此两方面的要求做了重要修改.中国医学实验室如按新版要求进行认可,将增加不少技术工作,并要求我国体外诊断企业提供对测量系统/测量程序的完整确认研究数据.
