中华临床实验室管理电子杂志
Chinese Journal of Clinical Laboratory Management(Electronic Edition)
- 主管单位: 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 020-28078315,020-28078296
- 国内刊号: 28
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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FAK突变体的亚细胞定位及生物学特性
目的:探讨外显子33缺失型黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)突变体(FAK-Del33)的亚细胞定位及生物学特性。方法采用基础实验研究设计。将野生型FAK以及突变型FAK-Del33分别构建到pEGFP表达载体,并转染乳腺癌细胞株,以研究分析其细胞表达和定位情况。另构建过表达FAK或FAK-Del33的MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株,研究评价其细胞表达和体外克隆形成能力。结果构建FAK-GFP融合蛋白表达载体转染MDA-MB-468后的细胞定位显示,野生型FAK在胞浆中弥散分布,而FA K突变体蛋白在胞浆中呈点状不均匀分布,并聚集成簇。经限制性内切酶酶切分析与测序分析,成功构建出过表达FAK的慢病毒载体,以293T细胞包装的重组慢病毒能够高效感染乳腺癌细胞;经抗生素puromycin筛选和荧光定量PCR鉴定,成功筛选到稳定表达FAK的细胞株。在软琼脂克隆形成实验中,FAK野生型的克隆形成数为(335±48)/1000个,FAK突变体为(735±91)/1000个,后者对MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株的增殖能力高于前者(t=9.437, P<0.01)。结论初步研究表明外显子33缺失可改变FAK的亚细胞定位;并能增强肿瘤细胞株的体外克隆形成能力,这种FAK突变体可能参与肿瘤的发生发展。
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八项骨转换指标与男性2型糖尿病患者并发骨质疏松的相关性
目的:探讨男性2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)患者骨质疏松与骨转换标志物的相关关系。方法采用回顾性病例研究设计。用双能X线骨密度仪分别测定男性102例T2DM患者腰椎骨密度,并将之分为骨质疏松组(50例)和非骨质疏松组(52例)。然后,测定其血清骨标志物总I型前胶原氨基端前肽(N-terminal peptide of typeⅠprocollagen,TPINP)、β-胶原降解产物(β-C-terminal telopeptide of type I collagen,β-CTX)、N端骨钙素(N-MID Osteocalcin,N-MID)、25羟维生素D3(25(hydroxyl)vitamin D3,25-(OH)VD3)、血清钙(Ca)、血清磷(P)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、肌酐等相关生化指标。同时,用Pearson相关分析分析8项骨转换指标与T2DM患者发生骨质疏松的相关性。结果骨质疏松组腰椎(L1~L4)和脊柱的总密度骨密度(0.91±0.10、0.96±0.12、1.04±0.10、1.03±0.10、0.98±0.08)显著低于非骨质疏松组(1.21±0.12、1.30±0.13、1.37±0.16、1.39±0.14、1.33±0.15;t值分别为13.688、13.710、12.542、14.988、14.566, P均<0.01),骨质疏松组的TPINP、β-CTX、HbA1c[(49.16±17.94)μg/L、(615.63±131.24) ng/L、(9.81±2.37)%]高于非骨质疏松组[(35.44±2.97)μg/L、(532.00±119.23)ng/L、(8.22±0.41)%;t值分别为-4.412,-3.371,-4.687,P均<0.01],而25-(OH)VD3低于骨质疏松组[(17.23±4.88)μg/L比(20.02±5.53)μg/L, t=2.696,P<0.01]。T2DM患者骨质疏松组的T-PINP、β-CTX和HbA1c与腰椎和脊柱骨密度呈负相关(r分别为-0.720、-0.615、-0.768,P<0.01),而25-(OH)VD3与腰椎和脊柱骨密度呈正相关(r=0.808, P<0.01)。结论男性T2DM患者存在不同程度的骨密度下降,TPINP、β-CTX、25-(OH)VD3和HbA1c指标有助于对T2DM患者合并骨质疏松症进行早期诊断。
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Caprini风险模型与九项血栓风险标志物诊断静脉血栓栓塞的相关性
目的:研究住院患者Caprini血栓风险模型与9项血浆血栓风险标志物的相关性,评价2种方法诊断静脉血栓栓塞(venous thromboembolism,VTE)风险的价值。方法采用回顾性队列分析研究设计。选择天津医科大学总医院2009—2012年间收治的1066例住院患者,男685例,女381例,年龄19~81岁。采用IL ACL TOP 700型血液凝固仪、Sysmex CA7000血液凝固仪和Vidas荧光免疫分析仪测定待检者血管性血友病因子抗原含量(vWF:Ag)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦ:A)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:A)、抗凝血酶活性(AT:A)、蛋白C活性(PC:A)、游离蛋白S含量(FPS:Ag)、纤溶酶原激活抑制物活性(PAI:A)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA:A)、D-二聚体(D-D)水平。采用受试者工作特征(receptor operating characteristic,ROC)曲线评价血栓风险标志物的诊断效能,采用Spearman相关分析血栓标志物水平与Caprini风险模型的相关性,用Kaplan-Meier曲线进行生存分析。结果 Caprini风险模型5组间的各项血栓风险标志物水平差异均有统计学意义(D-D、t-PA:A、PAI:A的H值分别为7.530、3.221和4.974,vWF:Ag、FⅦ:A、FⅧ:A、PC:A、FPS:A、AT:A的F值分别为6.395、3.887、4.062、2.905、3.218、5.469,P均<0.01),且与不同分值Caprini风险模型呈显著相关(D-D、vWF:Ag、FⅦ:A、FⅧ:A、PC:A、FPS:Ag、AT:A、t-PA:A、PAI:A的r分别为0.805、0.781、0.433、0.509、-0.244、-0.496、-0.263、0.692,P均<0.01或0.05)。经ROC曲线分析,D-D和vWF:Ag对极高危风险和VTE患者的诊断效能优于其他标志物(D-D敏感度和特异度分别为82.1%和53.9%、94.7%和51.7%;vWF:Ag分别为71.4%和60.9%、81.3%和61.0%)。极高危组(1组与2组)和血浆D-D水平高于临界值(1024μg/L)的患者在30 d内有更高的VTE累积风险(Log-rankχ2分别为65.092和20.785,P均=0.000)。结论9项血栓风险标志物与Caprini风险分层具有相关性,D-D诊断VTE和Caprini极高危风险的效能优于其他8项指标,血栓标志物能敏感反映患者隐匿性凝血紊乱,且与Caprini风险模型在临床应用中具有互补性。
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21-羟化酶缺乏症患儿基因突变分析
目的:分析21-羟化酶缺乏症(21-hydroxylase deficiency,21-OHD)患儿和家系基因突变特征及突变基因型与临床表型的关系。方法采用病例试验诊断研究设计。收集2011年12月至2013年5月期间就诊于上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心的16例21-OHD患儿及父母外周静脉血,抽提基因组DNA。根据细胞色素P450c21(Cytochrome P450c21,CYP21A2)基因与其假基因间序列的差异,用高特异性引物扩增该基因10个外显子及内含子序列,用PCR扩增产物直接测序法对21-OHD患儿及其家系进行基因分型。结果用PCR产物直接测序法检测与分析16例21-OHD患儿的突变基因型,共检出6种CYP21A2基因突变,其中IVS2-13A/C>G[50%(16/32)]、p.I172N[25%(8/32)]为常见的2种类型,c.1451_1452delinsC[3%(1/32)]及p. R149P[3%(1/32)]均为罕见突变,除2例患儿未获得父母标本外,其余患儿基因突变均来自父母。失盐型患儿中常见的突变类型为IVS2-13A/C>G[75%(15/20个等位基因)],而单纯型患者中常见的突变为p.I172N[67%(8/12个等位基因)],患儿基因型与临床表型间具有很高一致性。结论 PCR产物直接测序法能较特异地检出21-OHD基因突变位点,并可为疾病确诊及临床表型预测提供可靠依据。
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B淋巴细胞刺激因子及其受体与非霍奇金淋巴瘤的关联性
目的:探讨B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulating factor,BLyS/BAFF)及其受体在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL)中的表达及其与NHL的关联性。方法采用成组配对试验诊断研究设计。用ELISA和实时荧光定量PCR测定47例NHL患者及20名健康人血清BAFF及其受体含量和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中BAFF mRNA含量;并用配对t检验比较分析两组血清BAFF及其受体蛋白或BAFF mRNA表达水平差异,同时分析其与乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、β2微球(β2-microglobulin,β2M)间的相关性。结果NHL组PBMC中BAFF mRNA含量(0.48±0.02)显著高于健康对照组(0.25±0.02,t=17.75,P=0.000);NHL组血清BAFF及其受体TACI、BCMA、BAFF-R表达水平[(19.18±1.29) ng/ml、(212.74±7.98) pg/ml、(102.98±6.18) pg/ml、(2.95±0.19) ng/ml]也均较健康人明显增高[(10.94±1.56) ng/ml、(139.00±12.51) pg/ml、(59.66±7.06) pg/ml、(1.34±0.26) ng/ml,t值分别为7.05、8.61、7.99、8.66,P均<0.01]。NHL患者中LDH升高组[(310.96±108.00)U/L]显著高于LDH正常组[(142.65±36.00) U/L],且两组间差异有统计学意义(t=4.697,P<0.05)。LDH升高组NHL患者血清BAFF、BCMA蛋白水平、BAFF mRNA表达水平与LDH正常组的差异均有统计学意义(t值分别为21.060,7.254,6.658;P均<0.05)。但NHL组BAFF mRNA、血清BAFF及其受体蛋白表达水平与β2M、LDH含量间无直线相关性(r值分别为0.026、0.014、0.127、0.001、0.003与0.201、0.093、0.015、0.031、0.169;P均>0.05)。结论NHL患者PBMC中BAFF mRNA和血清BAFF及其受体蛋白表达水平均升高, BAFF及其受体可能是参与NHL发病的因素,其表达水平与疾病的活动性有关。
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定量检测抗-CCP抗体诊断类风湿关节炎关节侵蚀程度的临床意义
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种严重的病因不清的全身性自身免疫性疾病,临床以滑膜、关节的炎症为特点,进行性侵蚀关节,终导致残疾和丧失劳动力[1]。已证实RA的关节损伤和慢性炎症有关联,且与炎性指标红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)有关。但部分研究发现RA在炎症活动度下降的情况下,也可能出现关节损伤,无明显炎症症状的患者病情也可能进展到关节侵蚀阶段[2]。因此,早期、可靠地诊断非炎症体征的RA关节损伤非常重要。抗环瓜氨酸多肽(cyclic critrullinted polypeptide, CCP)抗体在诊断RA中有较好的特异度(81%~100%)和一定的敏感度(40%~80%),以及较好的阳性预测值和阴性预测值[3-4],且可预测早期RA关节损伤[5]。但既往主要为RA的抗-CCP抗体的定性研究,定量研究甚少。我们选择关节侵蚀和非关节侵蚀的RA患者,通过定量测定其抗-CCP抗体水平,并比较分析其和RF、ESR、CRP与关节损伤的关系,探讨其诊断RA关节炎侵蚀的临床意义。
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住院患者血标本分析前质量控制与不合格标本原因分析
目的:对住院患者血标本进行分析前全程监控和定期分析,探讨不合格标本发生原因,为制定改进措施提供依据,以提高分析前检验质量。方法采用调查性研究设计。以血标本唯一性条形码建立全程监控标本流程的信息系统,比较分析2012年1至6月与实施全程监控的2013年同期浙江大学医学院附属第二医院检验科收集的本院住院患者血标本的丢失率、标本超时送检率、标本不合格率,并对科室分布情况及其原因进行分析与评价。结果2013年1至6月共收到501135份住院患者血标本,标本丢失0.006‰(3/501135份),标本超时送检率1.64%(8195/501135份),标本不合格率为3.676‰(1842/501135份);而未采取监控措施的2012年同期共收集血标本为450463份,标本丢失率为0.053‰(24/450463份),标本超时送检率为6.50%(29280/450463份),标本不合格率为7.830‰(3527/450463份),两年同期数据比较,差异均有统计学意义(χ2值分别为18.7、14839.9、729.7;P均<0.01)。标本凝块[28.3%(521/1842份)]、标本溶血[27.6%(508/1842份)]及标本量少[24.8%(456/1842份)]是标本不合格的三大主要原因。不合格标本主要分布在中心ICU1、2病区,外科ICU、脑科ICU、急诊ICU和心内科ICU 6个监护病房。2013年1至6月,6个科室不合格标本数占全院不合格标本总数的比例分别为32.6%(118/362份)、39.3%(87/221份)、35.0%(112/320份)、32.7%(113/354份)、32.2%(98/306份)和22.5%(63/279份)。结论专职部门运用信息系统对标本分析前阶段全程监控,及时追踪可有效提高标本送检及时率、减少标本丢失率;对不合格标本发生原因及分布科室进行分析,可与临床进行有效沟通,有助于提高分析前血标本检验质量。
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检验突发事件应急预案再造与效果评价
随着检验工作方式的不断改善、检验仪器自动化程度的日益提高、计算机网络技术的应用、检验数据的自动传输、自动筛查软件[1]以及自助取报告单系统[2]在实验室检验流程中的广泛地应用,使检验人员对电力、检验自动化仪器及信息系统的依赖程度越来越高,这在给医院和检验科带来了巨大的经济效益、社会效益以及便捷实验室操作的同时,也给实验室管理者长效管理能力和检验工作人员日常维护能力提出了更高的要求。因为,一旦发生仪器故障、网络故障或生物安全事件等各种类型的突发事件,势必使正常检验秩序陷入混乱,甚至需要完全依靠现场手工操作来完成日常使用自动化信息系统才可完成的患者信息输入操作、检验标本采集、已采集标本排样检测、检验报告打印等操作流程。然而,手工操作速度慢、差错率高,不仅使标本检验结果回报时间(turn around time,TAT)延长,而且检验报告单的可靠性也大幅降低,终导致患者抱怨、投诉,甚至发生医疗事故等。
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石家庄市区30家医院单盲检测全血细胞计数结果的可比性分析
目的:分析探讨石家庄市区30家医院门诊实验室全血细胞计数检测(compete blood count,CBC)结果的可比性,为河北省实施临床检验结果互认提供可行方法。方法采用CBC单盲检测调查研究设计。2013年4月9日,由河北省临床检验中心(以下简称“中心”)采集1名健康人新鲜晨血62 ml,用乙二胺四乙酸抗凝,并分装为31管,每管2 ml。采血后3 h内,将其中1份标本送至卫生部临床检验中心,用血细胞分析校准系统将该新鲜血定值后,作为调查标本真值(可溯源至血细胞分析参考方法)。其他30份标本分别送至石家庄市区30家医院(三级医院11家、二级医院15家及未分级医院4家)门诊检验科,3 h内检测后带回检测结果。然后,选择白细胞计数(white cell count, WBC)、红细胞计数(red cell count, RBC)、血红蛋白(hemoglobin, Hb)、红细胞比容(hematocrit, HCT)、血小板计数(platelet, PLT)5项指标,计算30家医院实验室单盲检测CBC结果与真值的偏差,采用成组t检验评价分析三级医院与二级医院CBC检测结果间的可比性。同时,调查分析各实验室使用仪器和室间质量评价(external quality assessment,EQA)信息,探讨CBC检测不合格的原因。结果按美国临床实验室改进法案(clinical laboratory improvement amendments,CLIA)规定的可接受生物变异范围,分析30家医院5项CBC检测项目结果,不合格医院分别为RBC 2家[6.7%(2/30)]、Hb 3家[10.0%(3/30)]、HCT 8家[26.7%(8/30)]。11家三级医院5项CBC指标的参数范围为WBC(5.0~5.6)×109/L、RBC(5.3~5.6)×1012/L、Hb(156.7~169.1)g/L、HCT(46.1~52.1)%、PLT(238.0~286.0)×109/L,15家二级医院CBC检测结果的参数范围为WBC(4.5~5.6)×109/L、RBC(5.0~5.9)×1012/L、Hb (150.0~171.0) g/L、HCT 42.0%~52.0%、PLT(215.0~296.0)×109/L,两者间差异均无统计学意义(t值分别为1.44、0.01、0.91、1.93、0.20,P均>0.05)。各实验室检测CBC的仪器,使用Sysmex公司仪器进行检测的实验室多[占57%(17/30)],其他分别为迈瑞公司血球仪23%(7/30)、法国ABX公司血球仪10%(3/30)、Beckman Coulter公司7%(2/30)和Thermo Fisher Scientific公司3%(1/30)。不合格实验室所用仪器种类无集中趋势,推测导致实验室不合格原因可能不是其检测系统的差别。调查30家医院CBC项目2012年EQA成绩仅2家不合格,与本调查结果不合格单位分布也不一致。结论石家庄市内二、三级医院间CBC检测结果具有很好的一致性。单盲调查有助于进一步发现临床实验室实际存在的一些问题,对了解本地区实行实验室间检验结果互认有积极作用。
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葡萄球菌对利奈唑胺耐药的现状及主要耐药机制
利奈唑胺是第一个噁唑烷酮类抗菌药物,通过与细菌核糖体50S亚单位作用,抑制起始复合物的形成,而抑制细菌蛋白质合成。对葡萄球菌、链球菌、肠球菌等革兰阳性菌有很强的抗菌作用。目前,国内外已出现耐药葡萄球菌,耐药情况且呈上升趋势,特别是凝固酶阴性的葡萄球菌值得重视。耐药机制主要是细菌核糖体23S rRNA第V功能区基因突变,CFR基因的获得,编码50S核糖体蛋白L3、L4、L22的rplC、rplD、rplV的基因突变,23S rRNA修饰改变导致的耐药,LmrS多药外排泵,ABC蛋白过度表达等。
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血标本中的肿瘤靶点检测
随着肿瘤个体化治疗的发展,基于分子靶点精确检测的相关靶向治疗显得愈发重要。分子靶点检测的理想标本往往来自患者肿瘤组织,然而,检测血标本中的肿瘤标志,因取材简易,方法便捷、灵活等更具优势。相信随着筛选手段和技术的不断发展,检测血标本中的肿瘤标志方法一定能更好地被应用于临床。
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小儿先天性心脏病的遗传机制及研究进展
先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)是一种为常见的出生缺陷,遗传因素对CHD的发生、发展具有重要作用。至今,人类已发现的与CHD发生有关的基因包括心脏形成过程中的转录因子和调节因子基因、发育信号通路分子基因、心脏结构基因、循环中多种配体以及心脏细胞膜表面受体-配体等。涉及这些基因的染色体结构变异及点突变均是CHD的重要发病机制。这些变异通过单倍体剂量不足或降低基因编码蛋白表达量进而干扰心脏正常发育。尽管CHD的遗传基础研究已取得很大进展,但已发现的所有遗传因素仍仅能解释很少一部分CHD病例。进一步鉴定CHD相关基因,确定不同类型遗传变异在疾病发生中的贡献度仍是阐明CHD遗传机制的重要领域。
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临床微生物实验室自动化现状与进展
随着微生物检验技术的发展,特别是基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术以及微生物标本液体转运技术的运用,使微生物实验室自动化愈加可行。人们期盼的成功的自动化系统设计灵活,能将实验室人员从一些技术要求较低的、能由仪器完成的工作中解脱出来,从而提高标本处理效率,并减少资源浪费。目前,研发和使用的微生物实验室自动化系统可分为三大部分,第一部分为标本处理系统,第二部分为能提供全微生物实验室自动化解决方案的系统,包括为达到不同级别自动化程度的各种模块,第三部分为各种微生物自动化鉴定和药敏系统。现在,临床微生物检验流程已进入革新时代,虽然大量的评估工作还有待完成,但微生物自动化系统必将对临床微生物实验室工作水平的提高与技术发展产生深远的影响。
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中华临床实验室管理电子杂志稿约
中华临床实验室管理电子杂志为中华医学会主办的中华医学会电子版系列杂志之一,国内外公开发行。本刊采用图文声像多媒体传播形式,报道临床实验室管理的理论和技术方法等,为临床检验及相关医务工作者提供学术信息和研究成果的交流平台,促进临床检验服务质量和实验室管理水平的提高。本刊贯彻党和国家的卫生工作方针政策,贯彻理论与实践、普及与提高、信息化与标准化相结合的办刊方针,倡导百花齐放、百家争鸣、推陈出新的办刊理念。中华临床实验室管理电子杂志实行严格的同行专家审稿制度,依据稿件学术质量,公平、客观地取舍稿件。
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实验室全面自动化:细菌与真菌实验室面临的机遇与挑战
近年来,公众对医疗服务需求日益增加。细菌、真菌实验室标本送检量逐年攀升,使临床微生物实验室面临着极大的挑战,现有的检验观念、方法、流程已不能满足未来临床需求。随着人们认知的更新,以及新设备、新技术、新方法不断投入使用,临床微生物实验室全面自动化已经不再是梦想。这将对细菌、真菌检验领域的迅猛发展产生巨大的推动作用。