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肝细胞体外三维培养技术进展
改进肝细胞培养技术,实现大规模体外培养活力旺盛、功能稳定的肝细胞在生物型人工肝支持系统、肝细胞移植等方面具有广泛的用途.
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骨髓间充质干细胞的三维培养
目的:研究三维培养环境下骨髓间充质干细胞的生长情况,探讨骨髓间充质干细胞复合支架构建组织工程软骨的可行性.方法:全骨髓培养法分离骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),免疫细胞化学测定其细胞表面抗原CD44、CD45,对BMSCs进行鉴定；冻干法制备壳聚糖(Chitosan,CS)支架,扫描电镜观测支架孔径；取BMSCs复合CS支架,通过三维培养观察BMSCs在CS支架上不同时段的生长情况.结果:三维培养环境下骨髓间充质干细胞生长良好,细胞在支架上分泌大量细胞外基质,并与支架黏附良好.结论:骨髓间充质干细胞可作为组织工程的种子细胞,构建组织工程软骨.
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三维动态培养构建注射型组织工程软骨远期修复效果的实验研究
目的 三维诱导自体细胞软骨分化构建注射型组织工程软骨,探讨动物模型的远期修复效果.方法 分离培养兔自体骨髓间充质干细胞,分别三维动态诱导及二维平面培养诱导,诱导软骨细胞分化并鉴定,比较分化效果.分别收获两种方法诱导后的细胞,与蛋白胶混合制备注射型组织工程软骨,注射修复兔关节软骨缺损.随机设定三维动态培养组、二维平面培养组及空白对照组3组,24、48周后,观察大体和组织学形态,组织学评分比较远期效果.结果 二维平面培养诱导后只有低水平的蛋白多糖沉积和Ⅱ型胶原等标志物表达,三维动态培养后的分化质量明显提高,大量表达蛋白多糖及Ⅱ型胶原.在动物模型中,三维动态培养组:24、48周后缺损基本修复,表面光滑坚韧,修复组织与周围软骨无界限,仍保持类透明软骨形态.二维平面培养组:24、48周后明显退化,失去软骨组织形态.空白对照组:无明显修复,缺损长期残留.结论 三维动态培养显著改善自体MSC注射型组织工程软骨的修复效果,为提高关节软骨的微创修复提供新思路.
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腺苷对人脐静脉内皮细胞三维管状结构形成的影响
目的:探讨腺苷对脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)三维管状结构形成的影响.方法:建立上、下两层内皮细胞,中间为胶原凝胶的三维培养方式.设对照和试验各3孔.对照孔不加腺苷,实验孔内加入10-4mol/L腺苷.观察并记录特定视野下芽生的管状结构数目.结果:HUVEC可以在Ⅰ型胶原凝胶中形成三维网状结构,腺苷实验组细胞生长快,出芽快,管状结构粗大,甚可形成贯穿胶原的三维网状结构.血管芽生数与对照组比较在24 h、48 h、72 h、96 h均有统计学差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:腺苷对HUVEC三维网状结构的形成有促进作用.
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AMD3100阻断SDF-1/CXCR4信号通路对白血病细胞与成骨龛黏附及耐药性的影响
目的 探讨CXCR4阻断剂AMD3100对白血病细胞与成骨龛黏附的影响及逆转白血病细胞耐药的作用.方法 在生物衍生骨上接种白血病患者骨髓来源的间充质细胞,并诱导其分化为成骨细胞,构建一种仿生性的成骨龛,并用ELISA法检测培养上清中SDF-1的表达水平;然后在成骨龛中接种FLT3-ITD突变阳性的白血病细胞株MV4-l1细胞,构建三维共培养体系,流式细胞术检测CXCR4的表达水平;在此共培养体系中加入AMD3100后,应用BCECF荧光标记测定白血病细胞的黏附率,流式细胞术分析阿糖胞苷(Ara-C)作用前后白血病细胞凋亡的变化.结果 ①白血病骨髓成骨细胞培养7、14、21d上清中SDF-1含量分别为(304± 18)、(410±28)和(396± 16)pg/ml,第14天达高峰;MV4-11细胞CXCR4表达水平为(72±16)％.②AM D3100作用 24 h,成骨龛对MV4-11细胞黏附率为(40.1±8.1)％,而不加药物的对照组为(65.6± 12.1)％,差异有统计学意义(P＜0.05).③加入Ara-C前,AMD3100作用组细胞的凋亡率为(5.6±0.8)％,对照组为(2.5±0.5)％.加入0.02、0.20、2.00 μg/mlAra-C后,AMD3100作用组细胞凋亡率增加为(10.0±2.4)％、(17.8±2.3)％和(25.1±2.4)％,明显高于对照组[分别为(6.7±1.0)％、(10.3±1.5)％、(16.2±3.1)％](P值均＜0.05).结论 AMD3100能够阻断骨髓成骨细胞龛和白血病细胞的相互作用,在逆转白血病细胞耐药中起重要作用.
关键词： 成骨龛 SDF-1/CXCR4信号通路 三维培养 抗药性 -
恶性黑色素瘤血管生成拟态的体内外实验和超微结构研究
目的:通过动物实验、细胞三维培养及电镜观察恶性黑色素瘤组织中血管生成拟态的形成过程及其超微结构特点.方法:建立恶性黑色素瘤B16移植瘤动物模型和恶性黑色素瘤细胞株LiBr的三维培养模型,研究恶性黑色素瘤组织血管生成拟态,同时用透射电镜观察人体恶性黑色素瘤组织血管生成拟态的超微结构特点.结果:动物实验证实恶性黑色素移植瘤模型内存在血管生成拟态;细胞三维培养模型结果表明恶性黑色素瘤细胞存在肿瘤细胞自身变形并与胶原蛋白粘附、肿瘤细胞彼此围成通道结构的现象,电镜观察证实了血管生成拟态的存在及其结构.结论:恶性黑色素瘤组织内存在血管生成拟态,肿瘤细胞可以通过血管生成拟态结构获得充足的血液供应.
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Dickkopf-1对结肠癌组织血管生成拟态形成的抑制作用及相关机制研究
目的：探讨结肠癌组织中Dickkopf-1（Dkk1）表达对血管生成拟态（vasculogenic mimicry，VM）的抑制作用及相关机制。方法：收集2002年1月至2004年12月间天津医科大学肿瘤医院收治的217例结肠癌患者资料，利用CD34-PAS对结肠癌组织进行双重染色及免疫组化方法检测并分析VM与Dkk1表达的关系；利用体外三维培养（three dimensional culture，3D culture）观察Dkk1对人结肠癌HCT116细胞管状结构形成能力及血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）表达的影响；建立裸鼠皮下移植瘤模型进一步明确Dkk1对肿瘤组织内VM形成的抑制作用。结果：存在VM的结肠癌组织中Dkk1表达较低（P<0.05）；Dkk1过表达的HCT116细胞形成管状结构能力明显减弱，且VE-cadherin表达降低；Dkk1可抑制裸鼠移植瘤组织中HCT116细胞形成VM。结论：Dkk1过表达可抑制结肠癌中VM形成。
关键词： Dickkopf-1 血管生成拟态 结肠癌 VE-cadherin 三维培养 -
恶性黑色素瘤细胞株LiBr三维培养及形态观察
目的:研究恶性黑色素瘤细胞株LiBr三维培养体系中肿瘤细胞生长分化及形态变化特点.方法:建立恶性黑色素瘤细胞株LiBr的二维和三维培养模型,在不同时点观察比较肿瘤细胞形态变化特点.结果:三维培养体系中肿瘤细胞形态明显不同于二维培养体系,肿瘤细胞生长增殖速度较二维培养缓慢,在营养缺乏时肿瘤细胞出现明显自身变形现象及管道化趋势.结论:细胞三维培养体系是一个较好的研究肿瘤细胞形态结构和生长演变模型.
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Apelin-13促进脐带华通胶间充质干细胞分化成血管网
目的：探索apelin-13对干细胞定向血管网分化的调控作用。方法采用组织块贴壁法从人脐带华通胶组织中分离间充质干细胞，流式细胞仪检测其免疫表型。取第3代人华通胶间充质干细胞，分别接种于4个培养瓶中，记为A1、A2、A3、A4组，用诱导液诱导7 d，每天向4组中分别加入浓度0、1×10－6、10×10－6、100×10－6 mol/L的apelin-1320μL，倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况，并对其进行血管性血友病因子（vWF）抗体免疫荧光染色及CD31流式细胞学鉴定。使用水凝胶的三维培养基对诱导后的内皮细胞进行培养，并按照原A1、A2、A3、A4组的顺序重新依次编号为S1、S2、S3、S4组。每天分别向S1、S2、S3、S4组中加入浓度0、1×10－6、10×10－6、100×10－6 mol/L的apelin-1320μL。7 d后倒置显微镜下观察细胞的形态、生长情况及在三维培养基中形成血管样结构情况。结果人华通胶间充质干细胞可以诱导分化为vWF免疫荧光染色阳性的内皮样细胞。随着apelin-13蛋白浓度的增加，CD31阳性表达率也随之升高。显微镜下观察到内皮样细胞在水凝胶的三维培养基中能够形成血管样结构。结论证实apelin-13参与并调控人脐带华通胶间充质干细胞分化形成血管网。
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牙髓干细胞体外三维培养及生物学特性的研究
目的 建立大鼠牙髓干细胞(DPSC)体外培养体系及分析研究细胞因子骨形成蛋白(BMP-2)对其生物学特性的影响.方法 利用一步离心法形成细胞团块或聚集物建立DPSC三维球状培养体系,观察细胞在培养过程中形态和细胞基质合成的变化,并分析研究细胞因子BMP-2对于三维培养DPSC增殖和分化的影响.结果 三维培养的DPSC数目无明显增加,细胞基质沉积,ALP的含量增加,活性增高;在三维培养体系中,BMP能够增加ALP含量,且呈浓度依赖性.结论 三维培养体系中形成的细胞外基质作为天然的支架,由BMP-2持续释放和保留,对今后的龋齿和牙髓治疗的临床应用有一定价值.
关键词： 牙髓干细胞 三维培养 骨形成蛋白(BMP-2) 碱性磷酸酶ALP -
三维培养人牙髓细胞细胞增殖能力的研究
目的：检测普通贴壁培养和三维培养的牙髓细胞在一定时间的增殖能力。方法用U底铺有琼脂糖的96孔板作为非黏附表面,每孔接种104个牙髓细胞形成三维培养体系,诱使牙髓细胞发生 nemosis。以普通贴壁培养牙髓细胞作为对照组,分别在细胞接种20,40,60,80 h加入CCK8试剂,450 nm校正波长测量光密度(OD)值。结果随着培养时间的延长,普通贴壁培养牙髓细胞OD值逐渐增多；三维培养不同时间点的OD值不同,其中三维培养20-60 h OD值变化不大,80 h较60 h OD值显著减少；并且在不同的时间点,三维培养的牙髓细胞的OD值均小于普通贴壁培养的牙髓细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论随着培养时间的延长,三维培养的牙髓细胞细胞增殖能力均小于贴壁培养的牙髓细胞。
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纤维蛋白支架三维培养人羊膜细胞的生物学特性
背景:未足月胎膜早破是产科常见的妊娠期并发症,三维培养可使组织缺损恢复解剖学上的完整性,使得细胞培养成为更有实用价值的技术.目的:通过观察人羊膜细胞在纤维蛋白支架上三维培养后的生物学特性变化,探讨细胞/支架复合物模拟体内羊膜组织用于未足月胎膜早破破口修复的可能性,并与普通平面二维培养结果进行比较.设计、时间及地点:细胞～支架学体外观察,于2007-12/2008-11在重庆医科大学基础研究所完成.材料:剖宫产孕妇的羊膜组织,由重庆医科大学附属第一医院妇产科提供.纤维蛋白原为Sigma公司产品.方法:将酶消化法和反复贴壁法相结合,体外分离培养并纯化羊膜上皮细胞和羊膜问质细胞.纤维蛋白原聚合后,取处于对数生长的上皮细胞,接种于纤维蛋白支架表面,模拟胶上型二维立体培养;在纤维蛋白原聚合前,将处于对数生长的间质细胞和纤维蛋白溶液混合,模拟胶内型三维立体培养.同时将上皮细胞年间质细胞接种于24孔板中,进行普通平面二维培养.主要观察指标:倒置显微镜及电镜下观察细胞的形态学特征,不同培养条件下间质细胞的增殖情况,间质细胞和支架的相互作用.结果:在纤维蛋白支架表而,上皮细胞形态较平面培养圆润,细胞间可见伪足伸出,表面微绒毛丰富;在纤维蛋白胶中,间质细胞呈梭形,沿支架伸展,可见细胞在不同平面形成刚络状.三维立体培养下,间质细胞增殖活性平稳,但增长幅度较平面培养缓慢.在胶内型三维立体培养中,随时间的延长纤维蛋白胶发生收缩,凝胶厚度逐渐降低,至第5天纤维蛋白胶厚度占原厚度的40%左右,第15天收缩到原厚度的10%左右.结论:羊膜上皮细胞和羊膜间质细胞能够在纤维蛋白支架上立体生长,增殖活性平稳:在细胞-纤维蛋白支架复合物中,可观察到纤维蛋白胶随着时间推移而发生收缩的现象,提示羊膜细胞-纤维蛋白支架复合物可模拟体内组织,作为胎膜早破破口修复的生物学材料.
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三维培养条件下胚胎鼠唾液腺上皮细胞的自组装
背景:对唾液腺胚胎细胞在体外自组装及形态发生过程的理解,将有利于在体外构建唾液腺器官样组织的研究.目的:探讨三维培养条件下SD大鼠胚胎鼠下颌下腺上皮细胞的自组装机制.方法:将胚胎期15 d鼠的下颌下腺上皮细胞分为实验组(加入抗E-cadherin及抗β-catenin)和对照组(常规培养),在Matrigel中三维培养.结果与结论:获得的胚胎鼠下颌下腺上皮细胞均表达CK19.实验组细胞未见分枝状及腺泡样结构出现;E-cadherin 和β-catenin荧光表达弱.对照组细胞在12 d出现上述结构;胞浆中E-cadherin、β-catenin荧光表达强表达.MOD值为实验组<对照组(P < 0.01).提示E-cadherin,β-catenin在细胞的自组装过程中有重要作用.
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自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ水凝胶在肿瘤细胞三维培养中的应用
背景:已有研究表明培养在三维环境中的细胞,其基因表达模式和生物学活动更接近生命有机体.目的:拟采用自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ水凝胶建立乳腺癌细胞MDA-MB-231的三维培养体系以揭示自组装纳米短肽在肿瘤细胞三维培养中的作用.设计,时间及地点:体外观察实验,于2006-09/2007-12在四川大学华西医院纳米生物医学技术与膜生物学研究所细胞学实验室完成.材料:RADA16-Ⅰ由美圈BD公司提供:人乳腺癌细胞株MDA-MB-231由中国科学院上海细胞生物学研究所提供.方法:利用圆二色谱仪、原子力显微镜、流变仪对三维培养基质RADA16-Ⅰ水凝胶进行材料表征.通过F-肌动蛋白及细胞核的荧光复染来揭示细胞在三维环境中的细胞形貌.利用钙黄绿素AM对活细胞进行荧光染色,观察细胞在三维基质中的存活力.主要观察指标:①RADA16-Ⅰ的二级结构,纳米纤维网络,凝胶流变性质.②MDA-MB-231在三维培养中的细胞表型,细胞活性.结果:①自组装短肽RADA16-Ⅰ形成了纳米纤维网络结构,纤维直径20～50 nm,具有类似体内细胞外基质的结构,形成基质凝胶后可模拟体内的细胞微环境,用于细胞的三维培养.②MDA-MB-231细胞在三维基质中生长呈现出纺锤状的细胞形貌,在基质中的生存状态均较好,细胞与材料具有较好的生物相容性.结论:自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ有良好的结构与性能,能充分支持MDA-MB-231细胞的三维培养.
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三种不同培养条件下兔关节软骨细胞增殖速率的差别
目的:观察兔关节软骨细胞在3种不同培养条件下增殖速率的差别.方法:实验于2004-10/2006-10在上海长海医院血管外科实验室完成.取4周龄新西兰雄性兔6只,利用机械与酶消化的方法获得均一性兔关节软骨细胞,在单层培养条件下增殖至第2代;将第2代细胞在高密度条件下转入藻酸盐凝胶24孔培养介质,进行三维培养.根据实验目的,将24孔培养板分为单层培养对照组,三维培养组(培养液不含胰岛素样生长因子Ⅰ),含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组(培养液含50 μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ),每日在倒置相差显微镜下观察软骨细胞的生长状态,进行细胞计数1周,绘制细胞生长曲线,比较3种不同培养条件下兔关节软骨细胞的增殖速率.结果:①单层培养细胞24 h后开始贴壁生长,细胞形态呈多角形、星形、圆形,72 h后,倒置显微镜下观察细胞增殖数目明显增多,细胞增殖呈片状;三维培养条件下的软骨细胞,刚接种至藻酸钠凝胶时,细胞形态为圆形;三维培养(含胰岛素样生长因子Ⅰ)体系中的软骨细胞从转入三维培养的第3天起,发现细胞出现分裂增殖,局部有细胞团族形成,第7天,凝胶中开始有大量的细胞团族形成.在培养过程中,三维培养软骨细胞形态始终保持圆形.②1周内,单层培养条件下的软骨细胞增殖速率要明显高于三维培养组;含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组的软骨细胞增殖速率明显高于不含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组.结论:单层培养方法短期内(1周)对软骨细胞的增殖作用要优于三维培养方法;胰岛素样生长因子Ⅰ对三维培养条件下关节软骨细胞具有促进增殖的作用.
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海藻酸钠三维培养SW1353人软骨瘤细胞株:表型标志物Ⅱ型胶原的生物动力学特征及超微定位
背景:软骨细胞在体外单层培养的去分化改变及其来源困难是目前软骨细胞研究领域中的两大难题,目前关于SW1353人软骨瘤细胞表型和生物学特点及三维培养的相关报道较少.目的:观察SW1353人软骨瘤细胞在海藻酸钠三维培养体系中表型标志物Ⅱ型胶原的生物动力学及超微定位特点.设计、时间及地点:材料-细胞学体外观察,于2004-08/2006-01在中南大学湘雅医学院完成.材料:SW1353人软骨瘤细胞株由ATCC公司提供.方法:细胞复苏后接种,加入含胎牛血清、维生素C的DMEM培养基进行单层贴壁培养.离心后将细胞团块悬浮于低黏性海藻酸钠溶液中,细胞终浓度为2×10~9 L~(-1),滴入凝胶溶液,聚化获得细胞凝珠,每个凝珠约含20 000个细胞.藻酸盐凝胶三维体系培养8周后,柠檬酸钠分解凝胶,收获培养的软骨细胞及上清,并与单层培养的细胞进行比较.主要观察指标:细胞形态及表型变化,细胞生长曲线,细胞上清和海藻酸钠基质中Ⅱ型胶原的表达,细胞超微结构及Ⅱ型胶原的定位,同位素脉冲追踪活细胞Ⅱ型胶原的合成分泌.结果:①单层培养时,细胞由1周时的多角形变为8周后的条梭状或不规则形,三维培养条件下细胞形态始终以多角形为主.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色结果显示,单层培养1周时均呈强阳性表达,8周后转为弱阳性,而三维培养8周后仍均呈强阳性表达.②三维培养条件下细胞生长曲线无明显增殖高峰,单层培养的细胞第8~10天达增殖高峰.③ELISA检测结果显示,单层培养8周后细胞上清中Ⅱ型胶原的表达明显高于第1周(P<0.05),同时也明显高于三维培养条件下细胞上清及海藻酸钠基质中Ⅱ型胶原的表达(P<0.05).④透射电镜下细胞超微结构基本正常,免疫电镜下可见细胞内Ⅱ型胶原主要定位于粗面内质网膜内,少数分布在线粒体.⑤~(14)C标记的脯氨酸干预后180 min,是细胞内合成及向细胞外分泌Ⅱ型胶原的高峰期.结论:SW1353人软骨瘤细胞在体外长期单层培养会发生细胞表型改变,其在藻酸盐凝胶三维培养体系中生长状态良好,细胞内软骨细胞标志物Ⅱ型胶原表达丰富,提示SW1353可以作为软骨细胞功能研究的良好模型.
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脱细胞支架在肿瘤组织工程中的应用
背景:脱细胞技术的日益发展为肿瘤组织工程提供了新的培养平台,它充分模拟肿瘤在体内生长的微环境,可以为肿瘤研究领域提供新的手段.目的:综述肿瘤组织工程中脱细胞支架的应用.方法:以"tumor engineering;biomaterials;scaffold;3D culture;decellularized;tumor microenvironment;ECM"为关键词,检索PubMed数据库1995至2017年相关文献.结果与结论:利用脱细胞技术保留的细胞外基质支架是一个无论在生理生化、几何空间结构方面都很理想的研究细胞培养的平台,它不仅含有基本的细胞外基质结构成分――蛋白质和多糖,以及特定的生长因子和细胞因子,还保留了完整而特定的脉管结构,这使得它可以通过灌注装置等生物反应器来模拟体内营养交换的机制,这为肿瘤研究提供一个非常接近体内真实情况的研究平台.近年来,随着组织工程的发展,这种三维立体培养逐渐成为肿瘤生物学领域研究的热点,在体外建立细胞间以及细胞与细胞外基质之间的相互联系,模拟真实肿瘤微环境,再造体外肿瘤模型中得到了极大的应用.随着脱细胞技术的广泛应用和不断完善,将成为研究肿瘤生物学行为、药物筛选及靶向治疗等方面研究的有效工具.
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力学因素对间充质干细胞神经向分化的影响
背景:目前,通过对细胞施加机械力学刺激或改变细胞所处的微环境来调控干细胞的分化方向,已经成为了组织工程与再生医学领域的研究热点.目的:综述了近10年来力学因素调控间充质干细胞神经向分化领域的研究进展,为干细胞替代疗法治疗退行性疾病提供相关的理论基础.方法:检索Web of Science和PubMed数据库中关于力学因素对间充质干细胞神经向分化影响的文献,并进行系统的归纳总结和分析,终得到104篇相关文献.结果与结论:机械力刺激、细胞外物理环境因素对骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、牙髓干细胞、子宫内膜干细胞等间充质干细胞的神经向分化有重要影响.不同的力学因素可能通过 PI3K-AKT-mTOR、Wnt/β-catenin、Rho、MAPK等信号通路调控间充质干细胞的神经向分化,但具体的机制还有待进一步研究.
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干细胞心肌向分化成熟过程中的物理刺激方法
背景:寻找提高干细胞心肌向分化成熟度的方法成为心脏疾病治疗研究的热点.目的:总结和分析了提高干细胞心肌向分化成熟度的物理刺激方法及研究新进展.方法:以"干细胞、心肌细胞、机械刺激、电刺激、基质、三维培养、成熟度"为中文关键词,以"stem cel,cardiomyocyte,mechanical stimulation,electrical stimulation,substrate,three-dimensional culture,maturity"为英文关键词,使用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)等数据库,纳入方法规范、逻辑严谨、与物理因素刺激干细胞心肌向分化成熟相关的研究性论文,排除个案研究、方案设计不合理的研究、无规范严谨纳入标准的综述性研究及与论述主题无关的研究.结果与结论:通过检索文献,总结了提高干细胞心肌向分化成熟度的各种物理刺激因素,包括其作用机制及研究进展,为临床使用干细胞移植治疗心脏疾病带来了全新的方法,但目前的研究仍存在一些需要解决的问题,如移植细胞死亡、免疫排斥反应、心律失常和致瘤等,限制了其在临床的应用.
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三维培养人多能干细胞的研究与进展
背景:人多能干细胞具有体外长期自我更新和分化为几乎所有体细胞类型的独特潜能,在细胞治疗、再生医学、药物筛选、毒理学测定、疾病建模和立体器官发生等领域有广泛的应用前景.传统体外二维培养方法难以获得大量的细胞,而三维培养技术为人多能干细胞的大规模生产开辟了一条新的途径.目的:对目前人多能干细胞三维培养的研究进展作一综述.方法:应用计算机检索PubMed和CNKI数据库2005年1月至今有关人多能干细胞三维培养的文章,英文检索词为"human pluripotent stem cells,three dimension culture,microcarrier,suspension culture,aggregates,hydrogel,microencapsulation,bioreactor system,pluripotency",中文检索词为"多能干细胞,三维培养",保留77篇文献进行分析.结果与结论:细胞聚集体、微载体和水凝胶是目前实验室三维培养多能干细胞的主要形式.与二维培养相比,三维培养可更高效地扩增细胞,提高细胞产量,为人多能干细胞临床应用奠定了良好的基础.
