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体外培养的神经干细胞聚集体结构分析
观察大鼠神经干细胞聚集体的内部结构并分析其细胞组成.培养神经干细胞,分别做HE染色;nestin、GFAP、NSE免疫组化;细胞超微结构应用扫描电镜和透射电镜观察.结果显示,细胞聚集体内有健康细胞和凋亡或坏死细胞,后者被前者包裹形成典型的鸟巢状结构.健康细胞分为两大类,一种是小细胞,电子密度低,细胞表面较光滑;nestin强阳性和/或GFAP阳性.另一种细胞较大,有突起,电子密度高,nestin弱阳性.健康细胞间存在粘附连接,细胞内可见到吞噬体和板层状膜样结构.推测神经干细胞聚集体内的小细胞是较幼稚的神经干细胞,大细胞为处于分化前期的细胞.神经干细胞具有吞噬功能.
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2型糖尿病患者血小板-白细胞聚集体和血小板活化指标的研究
血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregation,PLA)是由活化的血小板和白细胞在黏附分子和细胞因子的共同作用下聚集形成的,是敏感的血栓标志物,在血栓形成和炎症反应过程中扮演着重要角色.2型糖尿病(2 diabetes mellitus,2DM)患者常以动脉粥样硬化、微循环障碍等病变为特点,以糖尿病心脑血管疾病、糖尿病肾病、糖尿病眼病等并发症为患者致残和致死的主要原因.而这些血管内皮受损、血凝状态改变及炎症反应可能与血小板和白细胞的功能异常相关.因此,研究血小板活化状态和PLA的形成在糖尿病患者体内的变化,探讨其临床意义即是我们研究的目的所在.
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聚乳酸微小凹图式上大鼠海马神经干细胞聚集体形成行为的研究
目的 制备聚乳酸(PLLA)三维微小凹图式并实现图式上新生大鼠海马神经干细胞(NSC)三维聚集体的形成及培养.方法 用2只新生1~3 dSPF级SD大鼠体外分离提取海马组织并培养NSC,观察其悬浮神经球和贴壁生长特性;以紫外光光刻和复制模塑法制备3种不同结构尺寸的PLLA微小凹图式;以普通光学显微镜和ImageJ图像处理软件研究图式上NSC聚集体的形成及大小分布;以免疫细胞荧光技术研究图式上NSC标志物Nestin的表达.结果 NSC在体外能够以悬浮神经球和贴壁生长的2种方式生长.在所研究的3种结构尺寸的图式中,无通道(120-0 μm)和通道宽度为20μm(120-20 μm)的微小凹图式更利于NSC聚集体的形成(P<0.01);而在通道宽度为40 μm的图式(120-40 μm)上NSC更倾向于沿通道方向生长、迁移,并形成准一维排布的三维神经细胞网络.图式上聚集体Feret's直径分布均匀,无大的聚集体(直径> 120 μm)出现.在细胞聚集体及神经细胞网络形成期间NSC均保持Nestin阳性表达.结论 PLLA微小凹图式可用于体外NSC聚集体形成及神经细胞网络的三维图式化,这为干细胞组织工程及基于神经细胞的微系统提供了有效的研究及应用途径.
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三维培养人多能干细胞的研究与进展
背景:人多能干细胞具有体外长期自我更新和分化为几乎所有体细胞类型的独特潜能,在细胞治疗、再生医学、药物筛选、毒理学测定、疾病建模和立体器官发生等领域有广泛的应用前景.传统体外二维培养方法难以获得大量的细胞,而三维培养技术为人多能干细胞的大规模生产开辟了一条新的途径.目的:对目前人多能干细胞三维培养的研究进展作一综述.方法:应用计算机检索PubMed和CNKI数据库2005年1月至今有关人多能干细胞三维培养的文章,英文检索词为"human pluripotent stem cells,three dimension culture,microcarrier,suspension culture,aggregates,hydrogel,microencapsulation,bioreactor system,pluripotency",中文检索词为"多能干细胞,三维培养",保留77篇文献进行分析.结果与结论:细胞聚集体、微载体和水凝胶是目前实验室三维培养多能干细胞的主要形式.与二维培养相比,三维培养可更高效地扩增细胞,提高细胞产量,为人多能干细胞临床应用奠定了良好的基础.
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红细胞聚集性的实验研究方法及临床检测
聚集性是红细胞的主要流变特性之一.循环血液中的红细胞聚集体直接影响血液在低切速流动下的粘度.某些病理状态下红细胞发生严重聚集("血泥"或sludge)会影响局部微循环畅通,使血流阻滞.因此,红细胞聚集性检测不仅具有重要的临床应用价值,而且对血液循环尤其是微循环深入研究具有重要意义.
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108例老年恶性肿瘤患者血小板及纤维蛋白原变化的观察
近来老年人肿瘤的发病率有增高的趋势,从老年患者死亡原因看,肿瘤死亡占很大的比例,肿瘤的早期发现、早期治疗显得非常重要,它可以大幅降低死亡率.临床上我们通过观察血小板和纤维蛋白原的变化对肿瘤早期发现有一定帮助,因为血小板可与循环中的肿瘤细胞相互作用形成血小板-肿瘤细胞聚集体,能促进肿瘤局部增殖,同时肿瘤细胞转移也需要血小板的帮助,血小板对肿瘤细胞血行转移的所有中间步骤均有促进作用.本文观察108例老年恶性肿瘤患者血小板计数及纤维蛋白原的变化,结果在40%~60%患者均有不同程度血小板增多及纤维蛋白原增高,这与患者不良预后有关,现报道如下.
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丹红与复方丹参治疗急性脑梗死疗效比较
急性脑梗死是在脑动脉硬化的基础上发生血液有形成分凝集,血液流变性的异常[1],是促发脑梗死的重要危险因素,红细胞聚集性增加,形成的网络增多,强度增强,所需的使血液流动和使红细胞聚集体解聚的屈服力增加,导致微循环血流障碍,从而产生组织低灌注、低氧、缺血,使脑血流量减少,促成了脑缺血和脑血栓的形成[2].我院对丹红与复方丹参治疗急性脑梗死疗效进行了比较,现报道如下.
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微载体培养L02人肝细胞应用于生物人工肝的初步研究
L02人肝细胞株组织学来源为人正常肝组织,具备一定正常肝细胞的生物功能.我们将高密度微载体培养的L02人肝细胞聚集体加入中空纤维生物反应器,构建简易体外生物人工肝装置并进行初步的应用研究.一、材料与方法1.材料:L02人肝细胞株购于中国科学院上海细胞生物学研究所;Cytodex3微载体为Pharmasia公司产品;聚羟乙基异丁烯酸(Poly-HEMA)及DMEM、HamsF12培养基均为Sigma公司产品.
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高浓度甲状腺素对软骨细胞聚集体(pellets)体外形成软骨组织的作用
目的:药物浓度(100nM)甲状腺素对组织工程软骨形成的作用.方法:将软骨细胞聚集体分为常规培养组(DMED+10%FBS)和100nM甲状腺素组(DMED+10% FBS +100nM甲状腺素),体外培养1、2和3周取材进行大体形态、组织学、二型胶原和十型胶原免疫组化染色和软骨特异基因PCR分析.结果:100nM甲状腺素组形成的软骨细胞聚集体的体积和湿重均明显低于常规培养组,甲苯胺兰、二型胶原(ColⅡ)染色较常规培养组弱,软骨细胞特异基因的表达水平与常规培养组相似,软骨细胞肥大相关基因十型胶原(Col Ⅹ)及基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达较对照组减弱,成骨方向分化相关基因(Col Ⅰ,Runx2)的表达与常规培养组相似.结论:高浓度甲状腺素能够抑制软骨细胞肥大,但同时也抑制了软骨细胞增殖和软骨细胞基质分泌.