液相色谱-质谱联用法研究大鼠血浆及纹状体中罗匹尼罗药动学

目的:通过大鼠血浆及纹状体组织匀浆中罗匹尼罗的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)检测方法,研究其在血浆和纹状体的药动学特征.方法:通过LC-MS/MS检测分析血浆和纹状体组织匀浆样品.大鼠尾静脉注射罗匹尼罗(0.27 mg·kg-1),分别于给药前和给药后不同时间点采集血浆、制备纹状体组织匀浆样品,测定浓度,计算血浆药动学参数,考察纹状体分布特征.结果:血浆和组织匀浆中罗匹尼罗在1 ～ 100ng· mL-1浓度范围内线性关系良好(r2 ＞0.99).罗匹尼罗在大鼠血浆中消除半衰期t1/2为(0.49±0.30)h,药-时曲线下面积AUC0～∞为(29.48±11.49) ng·h·mL-1,纹状体中消除半衰期t1/2为(0.29±0.04)h,药-时曲线下面积AUC0～∞为(75.66 ±16.06) ng·h·g-1,其浓度随血药浓度下降而下降.结论:该方法重复性好、灵敏度高、特异性强.罗匹尼罗可迅速透过血脑屏障并在纹状体富集,是一种高效多巴胺D2受体激动剂.

甲磺酸培高利特治疗超老年帕金森病的疗效与安全性

六十年代初,发现用左旋多巴治疗帕金森病(PD)有效,但长期用左旋多巴制剂后副反应的发生率高,连续治疗3～5年后,有20%～50%的患者出现运动波动和异动症[1].近几年国外推崇用多巴胺(DA)受体激动剂治疗PD.临床已应用的DA受体激动剂多为麦角类衍生物,如溴隐停、甲磺酸培高利特(pergolide mesylate,协良行),α-二氢麦角隐停、麦角己脲和卡麦角林(cabergoline)等;非麦角类新合成的激动剂如普拉克索(pramipexole)、罗匹尼罗(ropinirole)和泰舒达等.

罗匹尼罗治疗帕金森病的安全性评价

评价罗匹尼罗片剂治疗帕金森病患者的安全性。221例帕金森病患者随机接受罗匹尼罗[高平均剂量（7.99±2.03）mg/d，109例]或溴隐亭[高平均剂量（13.35±3.45）mg/d，112例]治疗，为期12周。安全性指标为不良反应、血压、脉搏、实验室检查和心电图。罗匹尼罗组不良反应发生率为34.9％（38例），溴隐亭组不良反应发生率为34.8％（39例），两组不良反应发生率与溴隐亭组间差异无统计学意义（χ2＝0.000，P＝0.995）。罗匹尼罗用于治疗中国帕金森病患者安全性良好。

罗匹尼罗治疗帕金森病的多中心、随机、双盲、溴隐亭对照临床疗效和安全性评价

目的 评价罗匹尼罗片剂治疗帕金森病患者的疗效和安全性.方法 随机、双盲、双模拟、罗匹尼罗和溴隐亭平行分组多中心临床试验.研究对象于2005年11月至2007年4月由北京、兰州、武汉等7所医院招募.221例帕金森病患者按随机数字表进行分组,分别随机接受罗匹尼罗(9 mg/d)或溴隐亭(15 mg/d)治疗,为期12周.疗效指标为统一帕金森病评定量表(UPDRS)各部分评分相对于基线的变化；对合用左旋多巴出现“剂末现象”的患者,基于患者日记记录的“关”期时间的变化及临床疗效的整体评价.安全性指标为不良反应、血压、脉搏、实验室检查值和心电图.计量资料采用t检验、配对t检验及协方差分析；计数资料采用x2检验.结果 意向性治疗人群中,治疗12周后与基线比较,罗匹尼罗组和溴隐亭组的UPDRSⅢ总评分均值分别下降(11±9)分和(11±10)分(t=0.685,P=0.932)；UPDRSⅡ总评分均值分别下降(4±4)分和(3±5)分(t=1.784,P=0.076)；罗匹尼罗非劣效于溴隐亭.罗匹尼罗组和溴隐亭组治疗12周后“关”期时间[(3.0±1.2)h,(3.8±1.6)h]与基线时[(4.2±2.0)h,(4.4±1.7)h]相比,关期小时数显著减少(t=10.772,t=5.746,P=0.000).研究者对整体疗效评价显效率两组比较罗匹尼罗组优于溴隐亭组(q =7.241,P=0.007).本次试验没有发生严重不良事件.罗匹尼罗组发生在5％以上的有关的不良反应有体位性低血压、恶心、头晕、上腹部不适、失眠、心悸,试验结束后多数不良事件已缓解或消失.不良反应发生频率罗匹尼罗组与溴隐亭组间差异无统计学意义.结论 罗匹尼罗用于治疗中国帕金森病患者是安全而有效的.

普拉克索在帕金森病治疗中的临床应用

帕金森病为一中老年人常见的慢性进展性中枢神经系统变性疾病,主要由于黑质致密区多巴胺能神经元变性导致黑质-纹状体通路多巴胺神经递质明显减少而发病.左旋多巴替代疗法虽然在帕金森病初期能有效地改善临床症状,但长期应用后疗效衰退并引起症状波动、运动障碍和精神症状等并发症.多巴胺受体激动药具有克服上述左旋多巴的不足,延缓左旋多巴治疗的开始时间并加强其治疗效果.根据多巴胺受体激动药的化学性质可将其分为麦角碱类和非麦角碱类,前者临床常用药物有溴隐亭、培高利特、卡麦角林、麦角乙脲等,后者包括阿朴吗啡、吡贝地尔、罗匹尼罗和普拉克索等.

罗匹尼罗和普拉克索延缓帕金森病病程

D2/D3受体激动药罗匹尼罗对抗鱼藤酮介导多巴胺能细胞凋亡的研究

目的:探讨D2/D3多巴胺受体激动药罗匹尼罗对多巴胺能细胞是否具有抗凋亡作用并研究其机制.方法:使用多巴胺能细胞株SH-SY5Y,以高剂量呼吸链抑制药鱼藤酮诱导细胞凋亡建立细胞凋亡模型.通过Hoechst染色观察并计数凋亡的细胞,应用免疫印迹(Westernblot)方法检测促凋亡基因caspase 9,cleaved caspase 9,cleaved caspase 3,PARP,cleaved PARP的表达.结果:高剂量鱼藤酮处理细胞24 h后其凋亡比例明显升高,罗匹尼罗(10-5,10-4mol·L-1)预处理2 h能显著减少细胞凋亡的比例.免疫印迹方法显示10-44mol·L-1罗匹尼罗预处理2 h能减少caspase 9,caspase 3,PARP的剪切.结论:罗匹尼罗能有效抑制鱼藤酮诱导细胞凋亡,其机制可能是通过抑制内源性通路中caspase 9剪切而实现的.

普拉克索和罗匹尼罗对体外培养的多巴胺神经元的神经营养作用

目的:探讨新型选择性多巴胺D3受体激动剂普拉克索和罗匹尼罗对多巴胺神经元的神经营养作用及其机制.方法:在大鼠的腹侧中脑细胞和不同部位星形胶质细胞培养基中加入普拉克索和罗匹尼罗刺激,观察药物对多巴胺神经元存活的影响.结果:药物直接作用或从黑质区星形胶质细胞培养基中提取的条件培养液均可使酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量增加,同时培养液中脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)含量增加.而其他脑区的星形胶质细胞不能产生类似作用.结论:普拉克索和罗匹尼罗对多巴胺神经元具有神经营养作用,这可能是由于其使特定区域星形胶质细胞产生并分泌了神经营养因子.

LC-MS/MS法测定人血浆中罗匹尼罗及联合多巴丝肼片后的药动学

目的 建立人血浆中罗匹尼罗浓度的LC-MS/MS分析方法,并应用于罗匹尼罗及联合多巴丝肼片后的药动学研究.方法 12名健康受试者随机分成2组,采用双周期交叉试验设计,分别给予罗匹尼罗1 mg或罗匹尼罗1 mg同时服用多巴丝肼片250 mg,两次试验的清洗期为1周.采用LC-MS/MS测定罗匹尼罗的浓度,色谱柱为Spursil C18(150mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-10 mmol· L-1醋酸铵-甲酸(50∶50∶0.1,V/V/V),质谱采用多反应监测模式,检测离子为m/z 261→m/z 160(罗匹尼罗)和m/z 256→m/z 167(内标苯海拉明),用DAS2.0.1软件以非房室模型计算罗匹尼罗的药动学参数并评价多巴丝肼片对罗匹尼罗的影响.结果 人血浆中罗匹尼罗的低定量限10.0 pg· mL-1,在10.0～5 000 pg·mL-1范围内线性关系良好,批内及批间精密度RSD均小于15％.单独用药与联合用药的主要药动学参数:tmax分别为(1.40±0.53)h和(1.23±0.49)h,ρmax分别为(1 559±508) pg·mL-1和(1 629±494) pg·mL-1,t1/2分别为(6.67±1.13)h和(6.57±1.11)h,用梯形法计算AUC0-36h分别为(10.8±3.1)和(12.6±3.1) ng·h·mL-1.结论 本方法适合于罗匹尼罗的药动学研究,联合服用多巴丝肼片后,罗匹尼罗的tmax和ρmax无显著差异,AUC增加约16.7％.

盐酸罗匹尼罗的合成

2-甲基-3-硝基苯乙酸经氯代、酰胺化、还原得N,N-二丙基-2-甲基-3-硝基苯乙胺,与草酸二乙酯缩合、水解后还原得到2-硝基-6-[2-(二丙胺基)乙基]苯乙酸,后经还原、缩合闭环及成盐反应制得盐酸罗匹尼罗,总收率约36%.

罗匹尼罗与溴隐亭治疗帕金森病临床疗效对比分析

目的 比较罗匹尼罗与溴隐亭治疗帕金森病临床疗效和安全性.方法 研究对象来自神经内科2010年9月至2013年9月收治的80例帕金森病患者,采用计算机随机分组的方式将帕金森病患者分为对照组和观察组各40例,两组患者分别在既往服药的基础上加用溴隐亭或罗匹尼罗治疗,采用帕金森病统一评分量表(UPDRS)评价临床疗效,比较两组患者临床治疗效果和安全性.结果 入组时,两组患者间UPDRS得分比较差异无统计学意义(P均＞0.05),干预后,两组患者UPDRS得分均较入组时显著改善,观察组患者UPDRS得分均显著低于对照组患者(P均＜0.05).两组患者均未发生明显不良反应.结论 罗匹尼罗治疗帕金森病有较好的疗效,优于溴隐亭.

血液透析滤过联合罗匹尼罗对尿毒症患者不宁腿综合症的临床疗效观察

目的 探讨血液透析滤过联合罗匹尼罗对尿毒症患者不宁腿综合征的疗效.方法 将50例行血液透析的不宁腿综合征患者采用简单随机方法分成对照组和观察组.对照组予以常规血液透析治疗,每周3次,每次4h,联合罗匹尼罗(0.25 mg/d)口服,观察组予以血液透析滤过治疗,每周3次,每次4h,联合罗匹尼罗(0.25 mg/d)口服,疗程为12周.观察治疗前后患者精神卫生相关指标(包括不宁腿严重程度评分,抑郁、睡眠质量及生活质量评分)和临床检验指标(血清中全段甲状旁腺素、β2-微球蛋白、血肌酐、血红蛋白含量).结果 治疗12周后,对照组和观察组患者不宁腿严重程度评分、抑郁评分、睡眠质量评分都较治疗前明显降低(P＜0.05),观察组较对照组降低更为明显(P＜0.05).透析后对照组和观察组生活质量评分都明显增加,观察组较对照组增加更为明显(P＜0.05).透析后血清中全段甲状旁腺素及β2-微球蛋白含量观察组较对照组明显降低(P＜0.05).透析前后2组血肌酐和血红蛋白水平无明显差别(P＞0.05).结论血液透析滤过联合罗匹尼罗对血液透析患者不宁腿综合征疗效明显.

盐酸罗匹尼罗片的人体药动学

目的:研究盐酸罗匹尼罗片剂在健康人体的药动学.方法:以液相色谱-串联质谱分析法(LC-MS-MS)测定12名健康志愿受试者单次口服1.0 mg罗匹尼罗片后36 h内不同时间的血药浓度,采用DAS 2.0.1软件计算给药后的药动学参数.结果:12名健康受试者单次空腹口服1.0 mg罗匹尼罗片后,其主要药动学参数t1/2为(6.7±1.1)h;tmax为(1.4±0.5)h;Cmax为(1.6±0.5)μg·L-1;AUC0-t为(10.8±3.1)μg·h·L-1,AUC0-∞为(11.1±3.2)μg·h·L-1,MRT为(8.5±1.1)h,CL/F为(95.8±21.9)L·h-1,Vd/F为(916±256)L.结论:本方法灵敏、快速、准确、选择性强,可较好地满足罗匹尼罗的药动学研究,为临床用药提供依据.

新型多巴胺受体激动剂罗匹尼罗的药代动力学研究进展

罗匹尼罗(ropinirole,商品名 Requip)系英国史克制药公司(Smithkine Beecham Co)开发, 1996年 9月在英国首次上市.本品属第二代多巴胺受体激动剂,主要药理作用在于能有效、选择性地刺激多巴胺 D2受体.本品与左旋多巴(levodopa)相比,能显著降低运动障碍的发生 [1].大量的临床前实验表明,不论帕金森病(Parkinson's disease ,PD)处于哪一阶段,本品都能控制其症状 [2].本品的优越性非常明显,引起了世界各地的广泛关注,已在除日本外的其他市场获得批准上市.目前,本品已被我国作为治疗 PD的一线药物用于临床 [3].笔者就近几年本品药代动力学研究进展作一简要介绍,以期为临床合理应用该药提供参考.

UPLC-MS/MS法测定人血浆中罗匹尼罗的浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中罗匹尼罗浓度的方法,并用于药动学研究.方法:血浆样品经乙腈沉淀后,以阿替洛尔为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定.色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH Amide,流动相为水(含10 mmol/L乙酸铵和0.1％甲酸)-乙腈(85:15,V/V),流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL.采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 261.2→114.1(罗匹尼罗)和m/z 267.2→145.0(内标).选择8例健康受试者,男、女各半,单次给予盐酸罗匹尼罗片1.0 mg后,采用该法测定给药前后罗匹尼罗的血药浓度,采用WinNonlin 6.3软件计算其药动学参数.结果:罗匹尼罗血药浓度在0.02～2 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.997 3),批内、批间RSD＜10％,准确度为95.2％～99.7％,提取回收率为68.5％～79.9％,基质效应和稀释效应均不影响其血药浓度的测定.8例健康受试者口服盐酸罗匹尼罗片1.0 mg后,cmax为(2.1±0.5)ng/mL,tmax为(1.0±0.5)h,t1/2为(4.7±1.5)h,AUC0-36h为(14.7±6.0)ng·h/mL,AUC0-∞为(15.1±6.1)ng·h/mL;不同性别受试者主要药动学参数比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:该方法操作简便、灵敏度高、分析时间短,适用于人血浆中罗匹尼罗的浓度测定及药动学研究.

罗匹尼罗—治疗帕金森病的新型多巴胺激动剂

帕金森病(Parkinson's Disease.PD)是中枢神经系统变性疾病,发病率约为1/1000,多发生于50岁以上的老年人,在60岁以上人群高达2%[1].随着我国社会逐步进入老龄化,PD患者逐渐增多,已成为严重的社会与经济问题.传统的左旋多巴疗法由于长期应用疗效下降及一系列副作用,使其应用受到一定限制.1996年英国史克制药公司推出了第二代多巴胺激动剂--罗匹尼罗(商品名Pequip),为临床医生治疗PD增加了选择余地,并有望改善PD病残的治疗.1 结构与名称本品是选择性非麦角林(nonergoline)多巴胺D2受体激动剂,与第一代多巴胺激动剂的区别在于它没有麦角林结构,而具有与天色多巴胺极相似的简单化学结构,见图1.本品因而具有高特异性[2],不会引起严重肺部并发症,周围水肿,红斑性肢痛及腹膜后纤维化.2 药理作用本品与D2受体有较高的亲和力,可选择性作用于D2受体,从而产生抗PD效应.本品与其他同类3种激动剂的作用比较见表1.