首页 > 文献资料
-
高浓度弹力蛋白酶低压力下腔内灌注制备兔腹主动脉瘤模型
目的:探讨高浓度(100IU/mL)弹力蛋白酶在低压力下,短时间腔内灌注制备兔腹主动脉瘤模型的新方法,为腹主动脉瘤的研究提供简便、易制作的动物模型.方法:雄性新西兰大白兔30只,按1:2的比例随机分为对照组(A组)10只,实验组(B组)20只,实验组在低压力下灌注高浓度(100IU/mL)弹力蛋白酶,并维持7～10min,对照组灌注0.9％氯化钠液,所有动物于术后第3周超声检查,后处死所有动物进行大体标本观察并行病理染色(HE、弹力纤维EVG、胶原纤维masson),比较组间病死率及病死率有无差别.结果:实验组动物病死率为15％,对照组病死率为20％,两组比较,差异无统计意义(P＞0.05).实验组成瘤率为100％,动脉壁弹力纤维降解,平滑肌细胞减少;对照组成瘤率为0％,动脉壁正常结构未见明显破坏,两组成瘤率比较,差异有统计学意义(P＜0.001).结论:腔内灌注高浓度弹力蛋白酶(100IU/mL)在低压力状态下,短时间内可成功制备家兔腹主动脉瘤模型,其病死率低,病死率高.
-
血清标记物Elastase 1和胰腺疾病
胰腺疾病如胰腺炎、胰腺癌和胰腺囊肿等常缺乏特异的临床表现,误诊漏诊率较高.其中胰腺癌早期诊断更是困难,患者获得诊断时常常已处于肿瘤晚期,错过了佳治疗时机.为了提高胰腺癌的诊断水平,人们在肿瘤血清标记物方面作了大量的工作.其中某些标记物如CA19-9,CEA和CA50等已经广泛用于临床并为人们所熟知.下面仅就另外一种标记物,即弹力蛋白酶1(elastase 1)在胰腺疾病,尤其是胰腺癌诊断中的应用做一简要综述.
-
低浓度弹力蛋白酶不同腔内灌注压力对建立兔腹主动脉瘤模型的影响
目的 探讨不同灌注压力条件下,经腹主动脉腔内灌注低浓度弹力蛋白酶对兔腹主动脉瘤(AAA)成瘤率及死亡率的影响.方法 30只雄性新西兰大白兔随机分为A、B、C三组,每组各10只,均经双腔导管向腹主动脉腔内注入10μl浓度为50 u/ml的弹力蛋白酶,灌注保持时间为7～10 min,灌注保持压力分别为A组0 mmHg,B组100～200 mmHg,C组300～400 mmHg,分别于术前及术后第7天行腹主动脉超声检查,计算各组腹主动脉扩张率、成瘤率及存活率,后处死动物,对血管灌注部位行组织病理及免疫组织化学染色.结果 将灌注后血管直径大于正常腹主动脉内经的50％者定义为腹主动脉瘤形成.A组存活10只,灌注部位血管扩张率为(16±9.4)％,成瘤率为0％,存活率为100％;B组存活10只,灌注部位血管扩张率为(98.8±16.4)％,成瘤率100％,存活率为100％;C组存活4只,存活动物灌注部位血管扩张率为(110±13.3)％,成瘤率100％,存活率为40％.结论 经腹主动脉腔内灌注低浓度弹力蛋白酶(50 u/ml),将灌注压保持在100～200 mmHg,能够在较短时间内成功制备腹主动脉瘤模型,且成瘤率高、死亡率低.
-
心脏外科危重病人过度反应研究现状
1992年美国危重病学会及胸科学会联席会议上首次提出全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)的概念〔1〕。认为严重感染、创伤、灼伤及急性胰腺炎是引起SIRS的常见原因。SIRS实际上是机体对疾病及损伤的过度反应，由局限性的炎症反应发展为全身炎症反应的过程。SIRS可导致多脏器功能衰竭(MODS)，引起严重后果。SIRS的机制 单核巨噬细胞系统、内皮细胞及中性粒细胞过度激活可促使炎性细胞因子过度释放和介导免疫系统参与，是引起SIRS的关键。其中多种细胞因子连锁反应起至关重要的作用，这种理论在越来越多的实验研究中得到验证。初步研究结果认为，损伤、组织坏死及严重感染均可刺激激活组织中滞留的巨噬细胞，并合成和释放多种细胞因子如肿瘤坏死因子(TNFα)、白细胞介素1(IL-1)等，故炎症反应是从组织中巨噬细胞激活开始的。多形核粒细胞的激活处于核心地位，当粒细胞过度激活时，其内的吞噬囊泡不能将颗粒成分及时隔离封闭，导致PMN弹力蛋白酶、氧自由基的继发性炎性介质大量向细胞间质逸出，损伤组织细胞；尤其PMN弹力蛋白酶的破坏力极强，可引起细胞外基质中各种成分降解、多种血浆蛋白水解，甚至还能破坏功能完整的细胞，致远隔脏器损伤的加重。在全身炎症反应中，激活的内皮细胞表面表达的不同粘附分子，可增加单核细胞和中性粒细胞的聚集和粘附，促进白细胞的游出，同时又造成对内皮细胞本身损伤，可导致毛细血管渗漏综合征，使重要器官间质水肿，从而加重病人循环功能障碍和组织器官血流灌注障碍。激活单核巨细胞、内皮细胞和粒细胞合成释放的多种细胞因子形成复杂的细胞因子网络，产生不断放大的细胞因子连锁反应是使病情不断加重的中心环节。另一方面，在导致过度全身炎症反应的细胞因子网络中，不仅存在着以TNFα及IL-1等为主的促炎细胞因子，同时存在着T淋巴细胞、B淋巴细胞激活而释放的IL-2和IL-10等为主的抗炎因子，分别对炎症反应起上调和下调作用〔2-8〕。
-
临床执业医师资格考试历年真题解析（六）
1.鉴别急性坏死型胰腺炎与水肿型胰腺炎有价值的实验室检查是
A．血清淀粉酶
B．血清脂肪酶
C．尿淀粉酶
D．血清正铁白蛋白
E．血清胆红素
答案：D
解析：腹腔内有出血性疾病时，红细胞被破坏释放出血红素，经脂肪酸和弹力蛋白酶作用，变为正铁血红素，与白蛋白结合成正铁白蛋白。正铁白蛋白在重症胰腺炎起病72h内常为阳性，此点有助于判断急性胰腺炎的病情和预后。 -
弹力蛋白酶mRNA在肝细胞中的表达
探讨肝脏组织细胞弹力蛋白酶mRNA的表达.克隆成地高辛素标记的大鼠胰腺丝氨酸弹力蛋白酶RNA探针,并以此进行原位杂交.多数肝细胞的胞浆内有弹力蛋白酶mRNA的表达,其强度因小叶内肝细胞部位的不同而有所差异.组成肝窦窦壁的内皮细胞以及其他细胞也有弹力蛋白酶mRNA的表达.从形态学证实肝脏细胞有弹力蛋白酶mRNA的表达,丝氨酸弹力蛋白酶有可能参与肝纤维化细胞外基质代谢.
-
高浓度弹力蛋白酶不同灌注保持时间对建立兔腹主动脉瘤模型的影响
目的：通过经腹主动脉腔内灌注高浓度弹力蛋白酶建立兔腹主动脉瘤（ AAA）模型，观察不同灌注保持时间对兔 AAA成瘤率及死亡率的影响。方法24只新西兰雄兔随机分为A组、B组、C组各8只，每组均经双腔导管注入10μl、浓度为100 U／ml的弹力蛋白酶，灌注保持时间A组3～5 min，B组7～10 min，C组20～30 min；后用生理盐水冲洗管腔3次；分别于术前及术后第7天行腹主动脉彩超检查，术后第7天处死动物，行组织学病理染色观察血管灌注部位组织学变化。结果 A 组存活8只，灌注局部血管扩张率40.3％～63.1％，其中5只扩张率大于50％，达到AAA成瘤标准，成瘤率62.5％，术后7 d存活率100％；B组存活8只，局部血管扩张率87.5％～109.2％，均达到成瘤标准，成瘤率100％，术后7 d存活率100％；C组存活3只，灌注局部血管扩张率237.7％～252.0％，成瘤率100％，术后7 d存活率为37.5％。结论高浓度弹力蛋白酶制作兔AAA模型，灌注时间保持7～10 min具有成瘤率高、死亡率低、操作简易等优点，易于推广。
-
rhKD/APP对实验性大鼠急性胰腺炎的保护作用
急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是临床常见急腹症之一,因急性坏死性胰腺炎出现全身炎性反应综合征(SIRS)及多器官功能衰竭(MOFS),病死率较高,从而引起临床高度重视.淀粉酶、胰蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、弹力蛋白酶、糜蛋白酶、胰血管舒缓素等引起的自身消化是胰腺炎的发病基础.抑制胰腺外分泌及胰酶活性,如抑制胰蛋白酶、弹性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等糖类和脂类水解酶是治疗胰腺炎的有效方法之一.
-
乌司他丁治疗轻症急性胰腺炎21例临床观察
乌司他丁(Urinastatin,UTI)是一种广谱的酶抑制剂,又称尿胰蛋白酶抑制剂,是从人尿中分离纯化的一种单链多肽糖蛋白.它既能抑制胰蛋白酶,弹力蛋白酶,缓激肽等蛋白水解酶,又能有效抑制磷脂酶A2,脂肪酶等脂肪水解酶,还能稳定细胞膜和溶酶体膜,抑制溶酶体酶的活性及释放,同时还具有抗炎作用[1].我们用以治疗轻症急性胰腺炎2l例,取得满意疗效,报道如下.
-
弹力蛋白酶加压灌注建立腹主动脉瘤大鼠模型方法的改进
目的:建立成功率高、符合人腹主动脉瘤(AAA)病理生理特点的大鼠AAA模型.方法:将20只SD大鼠随机均分为模型组和对照组,模型组通过左髂总动脉插管,行肾下腹主动脉节段猪胰弹力蛋白酶加压灌注(期间行一系列方法上的改进),对照组以同样的方式接受生理盐水灌注.于术前、术后7,14d通过彩色超声诊断仪检测两组灌注段腹主动脉尺寸,并于术后14d取灌注段腹主动脉标本行弹力纤维染色.结果:术后7,14d超声检测显示,对照组灌注段腹主动脉大小与术前比较无明显变化,模型组灌注段腹主动脉明显增大,模型成功率100％;术后14d,模型组大鼠灌注段腹主动脉横截面积为术前的(5.17±0.61)倍,而对照组为(1.03±0.09)倍,两组差异有统计学意义(P＜0.001).弹力纤维染色显示,模型组血管中层弹力组织明显破坏,动脉壁弹性纤维相对含量明显低于对照组(P＜0.001).结论:通过改进方法,建立了成功率高,病理特征典型的大鼠AAA模型,为开展AAA的基础研究提供了良好稳定的实验模型.
-
SIRS及PMN-弹力蛋白酶在急性胰腺炎中的临床意义
为探讨全身炎症反应综合征(SIRS)与PMN-弹力蛋白酶在判断急性胰腺炎病情中的临床意义.根据分级标准,将收治的急性胰腺炎区分为轻型和重症,分析判断胰腺炎严重度与SIRS、血浆PMN-弹力蛋白酶浓度之间的关系.结果显示,SIRS判断急性胰腺炎严重度的敏感性、特异性及准确率为94.1%,60%和78.1%.重症胰腺炎血浆中PMN-弹力蛋白酶浓度明显上升,其中合并脏器功能障碍者上升更为显著.提示SIRS是脏器功能障碍发生的早期预报,而PMN-弹力蛋白酶可作为一种严重SIRS的标志物.
-
胰腺丝氨酸弹力蛋白酶mRNA在正常大鼠组织器官中的表达
目的探查胰腺丝氨酸弹力蛋白酶mRNA在大鼠组织器官中的表达.方法克隆地高辛素标记的大鼠胰腺丝氨酸弹力蛋白酶Ⅱ的RNA探针,摘取Wistar雄性正常大鼠的组织器官,固定于4%多聚甲醛,进行原位杂交.结果正常大鼠腹主动脉的内皮细胞、中膜平滑肌细胞以及血管外膜成纤维细胞,血液细胞中的淋巴细胞、单核细胞,气管透明软骨细胞,胰腺的腺细胞、腮腺、颔下腺上皮细胞,肝细胞、肝窦壁的内皮细胞,小肠黏膜杯状细胞,心肌细胞,肾间质的纤维母细胞,肺泡上皮细胞,大脑胶质细胞,皮肤真皮纤维母细胞,睾丸曲精细管内的初级精母细胞、次级精母细胞以及精子,脾脏以及胸腺的淋巴细胞等,均有弹力蛋白酶mRNA的表达.结论胰腺丝氨酸弹力蛋白酶mRNA广泛表达于正常大鼠血管,气管,胰腺,肝,小肠,心,肾,脑,皮肤,睾丸,脾,胸腺等组织器官中.
-
弹力蛋白酶诱发犬分叉部囊状动脉瘤模型的研究
目的建立犬分叉部囊状动脉瘤模型并研究其形成原因.方法将犬分为3组,将ElastaseI型弹力蛋白酶注入右侧颈总动脉内和(或)结扎右侧颈总动脉,建立分叉部囊状动脉瘤模型,研究动脉瘤的形成过程,1个月内对动脉瘤模型进行复查,并行病理学检查.结果病理和血管造影证实:经酶处理+结扎右侧颈动脉的成瘤率100%,没有结扎而经酶处理过的动脉段没有形成动脉瘤模型,在1个月内弹力板结构有破坏.而单纯结扎动脉组成瘤率为42.8%.结论弹力酶诱发犬分叉部囊状动脉瘤模型重复性好,模型稳定,血流动力学改变是其形成的主要原因,动脉瘤具有良好的形态和病理特征,是比较理想的动脉瘤模型.
-
大鼠肾下型腹主动脉瘤模型的建立及方法改良
目的 建立稳定的大鼠肾下型腹主动脉瘤模型,提高大鼠存活率及成瘤率,使成瘤过程及病理学特征更符合人腹主动脉瘤.方法 健康成年SD大鼠24只,按雌雄比例1∶1随机分为A、B两组,每组12只.设立A组为生理盐水灌注组,B组为弹力蛋白酶灌注结合氯化钙涂抹组,两组均采用开腹腹主动脉穿刺插管加压灌注法,所有大鼠均术后饲养4周后开腹收集腹主动脉标本.术中术后均采用小血管测量尺测量腹主动脉直径,以术后4周腹主动脉扩张50％以上作为诊断腹主动脉瘤的标准.两组腹主动脉标本均行HE染色,观察其病理学变化.结果 A组大鼠存活率为83.33％,手术成功率为91.67％,成瘤率为0％;B组大鼠存活率为91.67％,手术成功率为100％,成瘤率为90.91％,两组成瘤率差异具有统计学意义(P＜0.05).两组大鼠灌注时腹主动脉扩张率分别为50.82％±4.11％和48.19％±3.89％,灌注后即时腹主动脉扩张率分别为29.55％±4.69％和27.89％±4.28％,两组间扩张率差异无统计学意义.术后28 d两组腹主动脉扩张率分别为27.89％±4.28％和88.98％±42.33％ (P＜0.05).B组腹主动脉呈梭形扩张,灌注段腹主动脉周围粘连较为明显,部分小鼠血管壁周围出现肉眼可见的钙化斑.镜下可见内膜明显增厚,中膜结构紊乱,基质降解,弹力纤维失去连续性,中膜有核平滑肌细胞减少,透壁性炎性细胞浸润.A组没有上述表现.结论 弹力蛋白酶加压灌注法结合氯化钙涂抹法建立的大鼠腹主动脉瘤模型,可通过术中手术细节的改进获得良好的手术成功率和成瘤率,适用于腹主动脉瘤发病机制及治疗等方面的实验研究.
-
检测粪胰弹力蛋白酶评价糖尿病及尿毒症患者胰腺外分泌功能进展
慢性胰腺炎、胰腺囊性纤维化、糖尿病、尿毒症等患者常出现胰腺外分泌功能不全.胰腺外分泌试验是检测胰腺功能的重要方法.胰腺外分泌试验分为直接外分泌功能试验和间接外分泌功能试验.直接外分泌试验是利用胃肠激素直接刺激胰腺,测定胰液和胰酶的分泌量,以作为判断胰腺外分泌功能的参考.胰腺直接外分泌功能试验是检测胰腺外分泌功能的金标准,但较难操作及标准化,且费时费力,会给患者带来较大痛苦,只在一些研究中心应用,很难在临床推广.
