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TIPE2-shRNA慢病毒载体的构建、病毒包装及功能检测
TIPE2( TNFAIP8L-2, tumor necrosis factor-a induced protein-8-like 2)2008年作为新型免疫调节因子被首次鉴定出来[1],它由184个氨基酸构成,具有与死亡受体结构域( DED )相似的结构域和6个保守的α螺旋结构,隶属于TNFAIP8家族。 TIPE2是一种胞质蛋白,高表达于髓系和淋巴系的免疫细胞。研究表明, TIPE2是炎症反应及免疫自稳过程中不可或缺的调控因子,可通过负调T cell receptor ( TCR)和Toll-like receptor ( TLR)信号通路来达到抗炎的目的,TIPE2缺失的老鼠可表现出脾脏肿大、体重减轻、多器官功能衰竭等[1]。近有研究发现,肝癌患者中 TIPE2蛋白水平明显降低,敲除TIPE2后Ras 下游Ral 及AKT等信号分子显著活化,从而拮抗细胞死亡,增强细胞迁移能力[2],这就提示TIPE2可能具有除免疫调节之外的更多功能。本研究旨在构建针对TIPE2的特异性shRNA 慢病毒表达载体,包装高效的慢病毒颗粒,为深入探索TIPE2功能奠定良好的基础。
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类风湿关节炎患者Foxp3+CD4+CD25+T细胞的流式细胞术检测及意义
类风湿关节炎(RA)是一种自身免疫性疾病.CD4+CD25+调节性T细胞(Trag),是近几年来确定的一类T细胞亚群.在维持机体免疫自稳及调控免疫应答方面起重要作用.
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免疫治疗呼吸疾病的关注
1 抗病原微生物的免疫机制机体免疫系统的三大功能为免疫防御、免疫自稳及免疫监视.机体抵抗病原微生物的免疫机制主要包括非特异性免疫与特异性免疫.
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非小细胞肺癌组织中CD4+CD25high调节性T淋巴细胞检测及其临床意义
CD4+CD25high调节性T淋巴细胞(简称Treg)是近年来确定的一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞亚群,在维持机体免疫自稳、调控免疫应答方面起重要作用.病理状态下,Treg的增加可促进肿瘤生长,抑制抗肿瘤免疫效应.我们通过检测43例非小细胞肺癌及癌旁组织Treg和白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA的表达,初步探讨Treg对肺癌发生浸润的临床意义.
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自身免疫性淋巴细胞增殖综合征的研究进展
自身免疫性淋巴细胞增殖综合征(Autoimmune lymphoproliferative syndrome,ALPS)是一种凋亡相关基因Fas介导的凋亡受损导致淋巴细胞增殖的遗传性疾病.之前认为是一种少见病,自1999年美国国立卫生院(NIH)推荐了该病的诊断和分型标准后,全世界有近500例病例被报道.2001年中国医学科学院血液学研究所、血液病医院林冬等[1]首次在国内对该病进行了详细介绍.由于该病为研究机体凋亡调控、免疫自稳方面的天然模型,越来越受到人们的重视.
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浅析免疫与祖国医学理论的关系
"免疫"一词出现较晚,<免疫类方>中免疫与传染性疾病相关,与现代免疫有一定区别.但早期的免疫学方法的运用在我国晋唐时期已有记载.本文通过对免疫概念的溯源、中医理论与免疫的联系、对免疫认识的差异,论述了免疫理论的核心与祖国医学理论核心密切相关,具有相通之处.
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抗独特型抗体研究进展
免疫系统是生物体体内执行免疫功能的组织系统,由免疫器官(组织)、免疫细胞和免疫分子组成。机体的免疫功能包括体液免疫和细胞免疫两大部分,两者相互独立又紧密配合,发挥免疫防御、免疫自稳和免疫监视等重要作用。抗体是发挥体液免疫功能的主要成分,是机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆性B细胞增殖分化形成的浆细胞产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)分子。抗体分子的基本结构由四条肽链组成,两条相同的轻链( Light chain,L)和两条相同的重链(Heavy chain,H)。通过对来自不同B细胞克隆的抗体分子的氨基酸序列进行比较发现,其氨基端(N-端)的氨基酸组成及排列顺序随抗体的不同差异非常明显,称为可变区( Variable region ,V区),组成抗体的抗原结合部位;其余部分的氨基酸序列则相对变化很小,称为恒定区( Constant region ,C区)。
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Tim-3信号免疫调节作用研究进展
T 淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白( T cell immunoglobulin mucin,TIM)是2002年Monney等[1]在研究哮喘易感基因的过程中,在小鼠第11号染色体上发现并鉴定的一个新基因家族,其在人类和鼠类均有证实,其中人类的TIM基因家族由3个成员组成即 TIM-1、TIM-3和 TIM-4,位于5号染色体5q33.2上。 TIM基因编码的蛋白均为一类具有共同基序的Ⅰ型跨膜糖蛋白,其基本结构由五种组分构成,包括一个信号肽、特征性的免疫球蛋白Ⅴ区( IgV)结构域、黏蛋白样区、跨膜区和含有磷酸化位点的胞内尾巴区[2]。如它们的名字所示, Tim分子初被认为特异表达在T细胞表面,直接调节T细胞反应[3-5]。近来发现Tim分子在免疫细胞上广泛表达,参与调节多种 T 细胞包括调节性 T 细胞( regulatory T cell,Treg)的分化,在免疫自稳与凋亡细胞的清除过程中发挥重要作用[5,6]。
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肝癌患者红细胞CD35、CD44s和CD58分子的检测及临床意义
红细胞膜上广泛存在免疫分子(如CD35、CD44s、CD58等)参与机体识别抗原,清除循环免疫复合物,增强巨噬细胞的吞噬功能和调控淋巴细胞等非特异性和特异性免疫反应,在抗感染、抗肿瘤和免疫自稳过程中具有重要作用[1].
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免疫负调控分子肿瘤坏死因子α诱导蛋白8-2与炎症
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8-2(turmor necrosis factor α-induced protein-8-1ike2,TNFAIP8L2,TIPE2)是近年来发现的免疫负调控分子,其通过对TCR和TLR进行信号转导,调控固有免疫应答和适应性免疫应答,维持机体免疫稳态.本文总结了TIPE2的组织学分布及其与免疫和炎症性疾病之间的关系.
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调节性T淋巴细胞在移植免疫耐受领域的临床应用研究
CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ 调节性T淋巴细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞亚群,其免疫抑制功能成为近年来免疫学领域研究的重要内容~([1]).Treg不仅在维持机体免疫自稳方面发挥关键的作用,而且在移植后诱导和维持免疫耐受方面的作用也越来越受到人们的重视~([2]).
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自身免疫和免疫缺陷的统一
很多疾病并存自身免疫和免疫缺陷两种病理机制,这两种机制体现“一体两面”的关系.免疫性疾病通常并存细胞免疫不及和体液免疫过亢的病理特征,如自身免疫性糖尿病和获得性免疫缺陷综合征.食饮有节、起居有常、不妄作劳、避虚邪贼风、恬淡虚无是维护机体免疫自稳的有效措施.
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siRNA介导的IBP表达抑制对 T细胞凋亡的影响
目的 研究IBP表达抑制后对T细胞凋亡产生的影响.方法 构建IBP siRNA稳定表达及阴性对照载体,脂质体法转染Jurkat T细胞,G418筛选稳定转染细胞株,用anti-CD3和CD28 mAb刺激介导的TCR信号方式作用于稳定转染细胞后,以3H-TdR掺入实验检测细胞增殖,Annexin-v/PI双参数法经流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 TCR信号刺激下,阴性对照组细胞的3H-TdR掺入量在24h时下降为未刺激对照组的67%,随时间延长其下降更显著,且24h发生明显凋亡,凋亡率为21.96%;IBP siRNA表达载体转染细胞在不同时相点的增殖均不受影响,24h凋亡率仅为2.12%,比阴性对照组细胞显著降低.结论 IBP缺失能使TCR信号刺激下的细胞激活后凋亡受到抑制,提示IBP可能参与T细胞免疫自稳状态的调节.
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Blimp-1调控免疫系统的研究进展
Blimp-1即B淋巴细胞诱导成熟蛋白,初一致认为其仅在B细胞和浆细胞中发挥调节作用.研究发现,Blimp-1不仅局限于B细胞和浆细胞,还可参与调控免疫系统中髓系细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞的发育与功能;此外,Blimp-1对T细胞的增殖分化和免疫自稳亦发挥着至关重要的作用.Blimp-1在免疫系统中调控作用的机制仍知之甚少.笔者通过综述近年来Blimp-1在免疫系统中的研究现状,以便于深入研究Blimp-1的功能及其机制.
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药物过敏患者创面换药体会
由药物引起的变态反应称药物过敏.过敏反应是不正常的免疫反应,可对机体造成危害.正常的免疫功能包括免疫监视、免疫自稳和免疫防御等三大功能,生理情况下,三者共同构筑机体的防御屏障,对机体起到保护的作用;而在病理情况下,上述功能任何一个环节的出现问题都可以给机体造成损害,其中,在临床上由药物过敏引起的皮肤损害较常见,其表现主要为:药物热、丘疹和水疱、渗出和糜烂,本文就由药物过敏引起皮肤损害后创面的护理问题进行初步探讨[1].我科2007年~2008年,采用庆大霉素16万单位加地塞米松5mg治疗药物过敏患者38例,疗效显著,现报道如下.
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免疫负调控分子TIPE2的研究进展
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8-2( tumor necrosis factor -α-induced Protein -8-like2,TN-FAIP8L2,TIPE2),是近发现的一种新型免疫负调控分子,优先表达在正常小鼠的髓系和淋巴系细胞,而在人体分布更加广泛。TIPE2可以调控T细胞受体( TCR)和TOLL样受体( toll-like recePtor,TLR)的信号转导,从而对固有性免疫应答和适应性免疫应答进行免疫负调控,以便维持免疫自稳;TIPE2还可以通过直接结合casPase-8后,抑制激活蛋白( activator Protein,AP)-1和核因子( nuclear factor,NF)-κB的活化等途径发挥其促细胞凋亡作用。现研究已证实 TIPE2的表达异常与系统性红斑狼疮( systemic luPus erythematosus, SLE)等多种疾病有关。本文总结了TIPE2基因定位结构特点、生物学功能以及TIPE2异常表达和疾病的关系和临床意义。
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NKT细胞一种新型的T细胞
NKT细胞(natural killer T cell)主要是指携带一恒定的T细胞受体(TCR)αβ和NK细胞活化性受体的CD4-CD8-CD4+CD8-T细胞,是由Budd等在1987年首先报道的,以后有大量的研究表明这类细胞是不同于传统T细胞的新一类T细胞,在发育、表型、及免疫功能等方面有其自身的特殊性,尤其是近年来的研究认为NKT细胞在机体免疫自稳、抗感染和抗肿瘤免疫等方面具有重要的作用.
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白细胞介素-1生物学效应的基础研究
白细胞介素-1(IL-1)是一种多功能细胞因子,是细胞因子网络中的关键因子.在中枢神经系统,IL-1与发热、食欲不振、慢波睡眠有关;在脉管系统,IL-1可引起血管扩张,诱导粘附分子和趋化因子表达,促进中性粒细胞外渗;在肝脏中,IL-1可诱发急性时相蛋白合成;在结缔组织中,IL-1可致骨吸收和胶原酶合成,促进成纤维细胞、角质细胞增生和组织重建.此外,IL-1可作用于多种免疫活性细胞并扩大其功能,在排除外来微生物感染(抗感染免疫)及维持机体内环境的平衡(免疫自稳)中均起着重要作用[1].本文就IL-1生物学效应的基础研究作一简要综述.