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星状病毒分子生物学研究进展
星状病毒(Astrovirus)首次于1975年由Appleton和Higgins用电镜检测胃肠炎患儿粪便标本时发现,由于电镜下病毒颗粒呈星形,因此被Madeley和Cosgrove命名为星状病毒.对志愿者和自然感染者的研究均证实星状病毒与腹泻密切相关.世界各地均已有星状病毒感染的报道,既可散发也可以引起暴发流行,亦可引起医源性感染.与轮状病毒相似,星状病毒感染多发生在2岁以内尤其是1岁以内的婴幼儿.住院腹泻患儿中星状病毒检出率为2.5%~9.0%,目前认为星状病毒是婴幼儿病毒性胃肠炎的第二位病因,仅次于轮状病毒.此外,老年人和免疫缺陷患者也是星状病毒感染的高危人群,人类免疫缺陷病毒感染者、接受骨髓移植及联合免疫缺陷患者发生星状病毒感染均已有报道.星状病毒亦是健康成年人发生胃肠炎的病因之一[1].应用多克隆抗体和单克隆抗体,可将星状病毒划分为7个血清型(serotype)HastV-1~HastV-7,近数据库中又报道了血清型8(HastV-8).Noel等[2]将星状病毒分为7个基因型(genotype),并且证明这7个基因型与血清型的划分是一致的.
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粉防己碱、大黄与潘生丁抗肝纤维化作用比较
目的:观察并比较粉防已碱(tetrandrine,tet)、大黄与潘生丁对实验性肝纤维化的影响,探讨其可能的作用机制.方法:四氯化碳皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型,分别给予不同剂量的药物灌胃,酶动力法测定肝功能指标,放免法测定细胞外基质(extracellular matrix,ECM)水平,HE、VG染色和电镜检测病理形态学改变.结果:三种药物可不同程度地改善肝纤维化时的肝功能状态,降低ECM含量,降低肝纤维化程度,以小剂量Tet、大剂量大黄和小剂量潘生丁效果显著.药物间比较无显著差异.结论:Tet、大黄和潘生丁均可保护肝细胞,抑制ECM合成,具有防治实验性肝纤维化和肝硬化的作用.
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老年内毒素血症模型大鼠血浆内皮素水平及肾脏的功能与病理改变
一、材料与方法雄性Wistar大鼠,青年(3月龄)组18只,体重(278.78±14.86)g;老年(25月龄)组16只,体重(508.00±43.57)g.经心脏取血2.5ml,2周后1次性尾静脉注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)1.5 mg/kg,制成内毒素血症模型,3 h后再次取血,并摘取左侧肾脏作为病理标本.测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN);放射免疫分析法(解放军总医院科技开发中心放免所)测定血浆内皮素(Endothelin,ET)含量.病理标本行光镜(HE、PAS染色)及电镜检测.注射LPS前后,自身比较采用配对t检验;两组间比较采用两样本t检验.ET值与Cr值之间的关系采用直线相关分析.
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丹黄消炎液对皮肤溃疡感染耐药鲍曼不动杆菌及TLR 4作用
目的:通过电镜观测及Toll样受体4(TLR-4)、IL-1β的检测,明确丹黄消炎液对创面感染耐药鲍曼不动杆菌的抑制作用及其机理.方法:新西兰白兔30只,采用皮肤切开注菌法建立皮肤感染泛耐药鲍曼不动杆菌溃疡模型,随机分为三组:空白组、中药灌胃组、中药外敷组.空白组创面外敷0.9%氯化钠溶液,同时0.9%氯化钠溶液10 mL/kg灌胃1次.中药灌胃组创面外敷0.9%氯化钠溶液,同时丹黄消炎液10 mL/kg每日灌胃1次.中药外敷组创面丹黄消炎液外敷,同时0.9%氯化钠溶液10 mL/kg每日灌胃1次.分别于造模成功后用药前、用药后第24、48、72 h及第10 d取各组伤口处组织及第72 h分泌物,以Western blotting检测伤口处组织TLR-4表达,免疫组化检测IL-1β含量.扫描电镜检测分泌物中鲍曼不动杆菌形态.结果:用药后48 h中药灌胃组TLR-4为0.1809±0.0357,IL-1β为2.0503±0.2632,中药外敷组TLR-4为0.1824±0.0194,IL-1β为2.6405±0.5425,表达均较空白组明显升高(P<0.05),用药后72 h中药灌胃组TLR-4为0.1501±0.0060,IL-1β为1.8793±0.9265,中药外敷组TLR-4为0.1540±0.0028,IL-1β为1.9195±0.5334,表达均较空白组明显升高(P<0.05),且用药48 h TLR-4、IL-1β达到峰值.用药后10d空白组TLR-4、IL-1β表达明显高于中药灌胃组、中药外敷组(P<0.05).不同用药途径丹黄消炎液作用对TLR-4、IL-1β无明显差异(P>0.05).用药后72 h电镜检测显示,中药灌胃组、中药外敷组细菌大量坏死粘连,中药外敷组略优于中药灌胃组.结论:中药制剂丹黄消炎液对感染泛耐药鲍曼不动杆菌溃疡有抑制作用,可能与TLR-4、IL-1β的表达升高参与机体的炎症反应调节有关;不同用药途径与丹黄消炎液作用是否有影响,值得进一步研究.
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慢性病毒性肝炎的综合诊断与电镜检测的意义
慢性病毒性肝炎临床表现多样而复杂,诊断除根据临床资料外,尚须结合流行病学、病原学、免疫学以及肝活组织光镜、电镜和免疫组织化学检查等多种观察指标作综合判断.本文选择我院1979年6月~1983年4月间住院患者中上述各项检测较完整的70例,作回顾分析,着重对慢迁肝(CPH)和慢活肝(CAH)进行比较,现将结果报告如下.
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养殖贻贝中观察到一种球形病毒
用电镜负染方法在发病的贻贝内脏团、鳃、外套膜组织匀浆中观察到一种球形病毒粒子,其直径为80~200nm,具囊膜.上述组织超薄切片发现在其结缔组织细胞质中均存在该病毒粒子,带双层囊膜,有"封入体"结构,未见包涵体.在未发病的杂色蛤、香螺、牡蛎等内脏团中也观察到少量同种病毒粒子.用带病毒贻贝组织匀浆投喂和划伤感染不带病毒的绣凹螺,使之成为带病毒状态.采用蔗糖梯度离心法,25 000 r/min,离心3h,可于20%~30%蔗糖层间获得病毒沉淀带.
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PTPIP51增加线粒体-肌浆网接触诱导心肌细胞凋亡
目的:蛋白酪氨酸激酶相互作用蛋白51(protein tyrosine phosphatase interacting protein 51,PTPIP51)定位于线粒体及肌浆网。拟研究其对心肌细胞线粒体及细胞功能的作用及作用机制。方法:冠脉左前降支结扎再通术建立缺血再灌注模型;H2 O2刺激乳鼠原代心肌细胞凋亡;流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡;MitoTracker Green、ER Tracker Red观察线粒体/肌浆网共定位;电镜检测线粒体/肌浆网接触面积;钙荧光探针检测胞浆和线粒体内钙变化。结果:缺血再灌注损伤心肌及H2 O2诱导的凋亡心肌细胞中,PTPIP51蛋白水平显著升高;过表达PTPIP51导致心肌细胞凋亡,敲低则抵抗H2 O2所致凋亡。 PT-PIP51使线粒体与肌浆网接触面积增加、线粒体钙浓度增高;抑制线粒体钙升高可以逆转PTPIP51引起的细胞凋亡。结论:缺血再灌注损伤时,心肌PTPIP51蛋白上调,通过增加线粒体与肌浆网的接触面积使线粒体内钙超载,参与诱导心肌细胞凋亡。
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非风湿性主动脉瓣狭窄与肺炎衣原体感染有关
方法:35例受试对象,17例为因患严重非风湿性主动脉瓣狭窄(AVS)而行换瓣术者,18例属年龄匹配的死者.分别选取肉眼可见的病损主动脉瓣组织,用免疫组化,结合聚合酶链反应或透射电镜检测肺炎衣原体.
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人星状病毒的研究进展
人星状病毒(Human Astrovirus,HAstV)是1975年由Appleton和Higgins用电镜检测英国一起腹泻疫情的粪便标本时首次发现,由于病毒颗粒表面呈星形,此后被Madeley和Cosgrove命名为星状病毒.
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LXR mRNA在动脉粥样硬化兔中的表达变化
目的:观察LXR mRNA在动脉粥样硬化(AS)兔不同时段的表达,探讨LXR对AS的影响。方法采用随机对照研究的方法将20只健康雄性新西兰兔分为对照组和AS组,各10只,对照组予普通饲养,AS组予高脂饲养并注射牛血清白蛋白。分别在第1周和第8周检测两组兔子胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、LXR mRNA及髂外动脉组织电镜检测。结果血脂方面,第1周,AS组TC升高, HDL-C降低,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);第8周,AS组TC、LDL-C均升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);髂外动脉内膜形态学方面,AS组第1周和对照组第1、8周肉眼观察0级。第8周AS组肉眼观察0.5级;髂外动脉内膜组织电镜检测方面,AS组第1周和对照组第1、8周未见明显病理改变。AS组第8周可见平滑肌细胞中充满了大量脂滴小泡,胞浆中可见胆固醇结晶样物质、密体和线粒体等结构;LXR mRNA表达方面,第1周,LXRαmRNA组间比较差异无统计学意义(P>0.05);第8周,AS组LXRαmRNA升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LXRαmRNA表达升高可能是一种改善动脉粥样硬化早期的代偿调节机制。
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bc1-2基因与头颈部肿瘤
抗凋零基因bc1-2(B Cell Leukaemia/Lymphoma-2)是一种原癌基因,早是从B细胞淋巴瘤染色体14和18位断裂点t(14:18)(q31:q21)中得到,免疫电镜检测bc1-2基因表达蛋白定位于细胞内氧自由基产生的位置.如线粒体、核周膜和内质网[1].bc1-2是已明确的抗凋亡基因.研究表明bc1-2基因与许多肿瘤发生、发展密切相关,可作为评估肿瘤预后的一个参数,是细胞凋亡的调控因子.高等动物中第一个被确认的存活基因就是bc1-2基因,它能阻遏程序性细胞凋亡(Apoptosis)和延长细胞生命,但不促进细胞增殖[2].关于bc1-2抗凋亡作用及机理与肿瘤发生发展关系的研究是目前该领域内受关注的问题之一.本文将bc1-2基因异常及其与头颈部癌的关系作一综述.
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肠道星状病毒感染及检测技术
星状病毒于1975年首先由Appleton和Higgins用电镜检测急性胃肠炎患儿粪便时发现,由于电镜下病毒颗粒呈星形,故命名为星状病毒Astrovirus.