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  • 栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型吸附量的影响

    作者:郭姗姗;王意忠;王秀坤;高英杰;金亚宏;李德凤;原桂东;张毅;宗桂珍;赵晔;崔晓兰

    目的 观察栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)吸附过程中病毒吸附量的影响,以探讨其抗病毒作用机理.方法 采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)作为荧光探针标记病毒,以肝素钠为对照,借助流式细胞仪,通过收集多种不同的加药方式后细胞表面的荧光强度,来考察病毒吸附过程中病毒吸附量的变化及栀子提取物ZG对此变化的影响.结果 单纯疱疹病毒1型在Hep-2细胞表面吸附存在饱和性、特异性;肝素钠3种加药方式均能明显降低病毒吸附量,先加药后吸附及吸附和加药同时进行两种方式,优于先吸附后加药的方式,其吸附抑制率分别为84.76%和82.02%;栀子提取物ZG 3种加药方式均能明显降低病毒吸附量,其中以吸附和加药同时进行组为显著,吸附抑制率为68.46%.结论 栀子提取物ZG可能是通过作用于病毒吸附的多个环节来达到抑制HSV-1的吸附作用.

  • 多发性硬化患者外周血CD8+CD28-调节性T细胞的变化

    作者:夏君慧;翁益云;张旭

    目的 探讨多发性硬化(MS)患者外周血CD8+CD28-T细胞数量的变化及临床意义.方法 采用前瞻性病例对照研究,收集自2005年10月至2008年8月间在温州医学院附属第一医院神经专科病门诊或病房治疗的处于急性活动期的复发缓解型MS患者51例,均符合2005年修改的Mc-Donald诊断标准[2].所有住院患者均给予甲基强的松龙1.0 g/d,连续使用5 d后改为强的松60mg/d,12 d后减量,总疗程不超过6周,对14例MS患者进行治疗前后的动态观察.以20例健康体检者为对照组(NC组),MS组和NC组在年龄、性别构成上差异无统计学意义.采用流式细胞技术检测外周血CD8+CD28-,CD8+CD28+,CD8+及CD4+CD8-T细胞的百分比.两组间均数比较采用独立样本t检验,治疗前后比较采用配对样本t检验,相关性分析采用Pearson相关检验.结果 急性活动期MS组CD8+CD28-T细胞的百分比为(18.48±9.89)%,低于NC组的(24.48±4.86)%(P<0.01),但CD8+CD28+T细胞百分比为(12.23±4.31)%,高于NC组的(8.55±3.49)%(P<0.01),CD8+T细胞的百分比两组比较差异无统计学意义(P>0.05);MS组CD8+CD28-与CD4+CD8-T细胞的百分比呈负相关性(r=0.488,P<0.01);MS患者激素治疗后CD8+CD28-和CD8+CD28+T细胞卣分比与治疗前相比差异无统计学意义(均P>0.05),且治疗后CD8+CD28-T细胞百分比(16.22±4.25)%低于NC组(P<0.01),CD++CD28+T细胞百分比(13.04±4.23)%高于NC组(P<0.01).结论 CD8+CD28-T细胞数日的减少参与了MS的病理过程,并可能通过调节CD4+T细胞起作用;MS急性期激素治疗并不能恢复CD8+CD28-T细胞的数目,激素可能是通过其他途径发生作用.

  • 胃癌患者手术前后淋巴细胞表型CD49 b、CD49 d的变化及其临床意义

    作者:陈腾;施靖华;赵荣华;李莉

    目的探讨胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞(PBL)表型CD49 b、CD49 d变化及其临床意义.方法选取20例胃癌患者为肿瘤组,同期百肿瘤患者27例为对照组,应用CD49 b、CD49 d单克隆抗体,以流式细胞仪为工具,对两组患者上述2种表型进行监测.结果①肿瘤组淋巴细胞CD49 d的表达低于对照组,差异非常显著(P<0.01);②进展期胃癌组CD49 9 b的表达明显低于早期组,有显著性差异(P<0.05);淋巴结转移组CD49 d的表达低于无淋巴结转移组,有显著差异(P<0.05);③根治及姑息切除肿瘤后,CD49 9 b、CD49 d的表达明显升高(P<0.05,P<0.01).结论胃癌患者淋巴细胞CD49 b、CD49 d的表达与肿瘤的生物学行为密切相关;切除肿瘤可能有助于改善患者细胞免疫功能.

  • 矽肺患者细胞免疫水平分析

    作者:杨阳;张晓晔

    目的 分析研究矽肺患者的细胞免疫水平,探讨矽肺患者易并发肺结核原因.方法 应用流式细胞仪检测50例矽肺患者和30例健康例群的外周血中CD4、CD8及CD4/CD8值,并进行比较.结果 矽肺组与健康组比较,外周血中CD4、CD8及CD4/CD8值三组数据比较差异均有显著性(P<0.05);矽肺组中三个期别间比较,外周血中CD4、CD8及CD4/CD8值三组数据比较差异均无显著性(P>0.05).结论 矽肺患者易并发肺结核可能与矽肺患者的细胞免疫水平下降有关.

  • 慢性乙型肝炎患者病程中CD5+B细胞及CD4/CD8的变化研究

    作者:瞿志军;李国航;黄兴国

    目的 研究CD5+B细胞和CIM/CD8在慢性乙型肝炎发病中的作用,以及他们之间的相关性.方法 采用免疫荧光双标记技术和流式细胞仪对48例慢性乙型肝炎患者发病前后周围血中CD4/CD8比例和CD5+B细胞的百分率和37例健康对照者进行比较.结果 在慢性乙型肝炎患者发病高峰期周围血CD4/CD8比例显著低于病情恢复期,且和健康对照组比较差异有显著性;而CD5+B细胞在慢性乙型肝炎患者发病高峰期,显著高于健康对照组和慢性乙型肝炎患者恢复期,差异有显著性.结论 慢性乙型肝炎的发病和T细胞免疫功能的紊乱相关,而CD5+B可能在乙型肝炎的慢性化机制中发挥作用.

  • 流式细胞仪两套软件检测HLA-B27比较及影响因素

    作者:吕程;刘宇;梁兴东

    人类白细胞抗原(HLA)是人类主要组织性相容性复合体(MHC)的表达产物,HLA-B27基因属于I型MHC基因,基本上表达在机体所有含核的细胞上,尤其是淋巴细胞表面含量丰富,研究证实HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎(AS)呈高度相关[1].随着分子生物学的发展,应用流式细胞仪检测HLA-B27也越来越普遍.因此我们对流式细胞仪上两套检测HLA-B27软件及影响因素作分析,以得到佳的检测结果.

  • 诊断超声对人早孕绒毛增殖细胞核抗原的影响

    作者:邓文慧;金辉;李旭;陈葳;程小丽;杨玉琮

    目的:探讨诊断超声对人早孕绒毛增殖细胞核抗原(PCNA)的影响.方法:选取105例孕6~8周健康妇女, 以3.5MHz诊断B型超声波经下腹持续照射孕囊10分钟或20分钟, 分组于照后不同时间行人工流产术取绒毛, 用流式细胞仪定量检测绒毛PCNA表达水平. 结果:早孕绒毛PCNA表达平均百分含量为12.53, 与孕妇年龄、产次无关;超声照射10分钟后24小时及照射20分钟后1、4、8、16、24小时绒毛PCNA表达水平与对照组比较无显著性差异(P>0.05).结论:应用诊断超声对早孕绒毛PCNA表达无影响.

  • 肝细胞癌射频治疗前后淋巴细胞亚群及T细胞功能的变化

    作者:王艳滨;吴后男;严昆;陈敏华;柯杨

    目的运用细胞膜表面标记和细胞内因子标记的流式细胞技术检测全血标本,从细胞数量和细胞功能两个角度,观察射频消融(RFA)治疗前后肝细胞癌(HCC)患者外周血淋巴细胞计数和T细胞功能分型的变化.方法经穿刺活检证实为HCC、进行RFA根治性治疗的26例患者为治疗组,以年龄、性别为匹配条件,同期选择正常对照26名为对照组.治疗组分别于RFA治疗前、治疗后1个月清晨空腹静脉取血.流式细胞仪测定B、NK、T、CD+4T、CD+8T细胞百分含量及单细胞水平上Th1、Th2、Tc1、Tc2功能亚群.分析两组间免疫指标的差别、分析治疗组于RFA治疗前后免疫指标的变化.结果肝细胞癌患者与正常人比较,NK细胞计数下降、CD+8T细胞中Tc1细胞的比例下降.射频治疗后Ⅰ类细胞比例增加,NK计数增多.其中男性、>55岁、病理分级为Ⅰ~Ⅱ级、临床分期为Ⅰ~Ⅱ期及Child-Pugh分级为A/B的患者,射频治疗后其NK计数或Ⅰ类细胞的比例明显高于治疗前,增高的幅度分别大于女性、≤55岁患者、病理分级为Ⅲ~Ⅳ级、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期及Child-Pugh分级为C的患者.结论本研究结果提示:RFA治疗1个月后,HCC患者的免疫指标有所提高,外周血免疫功能指标发生了变化,Ⅰ类细胞(Th1、Tc1)和NK逐渐增多,免疫抑制状态有所改善,细胞免疫功能逐渐增强.

  • 神经梅毒患者外周血淋巴细胞、树突状细胞亚群研究

    作者:张海萍;连石;朱威;孙雪静

    目的 分析神经梅毒患者外周血中淋巴细胞、树突状细胞的亚群特点,探讨其与神经梅毒发病之间的关系.方法 分别取健康人(10例,对照组)和神经梅毒患者(8例,试验组)外周血,用荧光标记法经流式细胞仪检测CD4+T、CD8+T、Th1、Th2细胞及DC1、DC2细胞的比例.结果 神经梅毒患者外周血中的CD4+T细胞比例高于正常对照组(P<0.05);CD8+T细胞比例低于正常对照组(P<0.05).在CD4+T细胞中,神经梅毒患者外周血中的Th1、Th2细胞分别占(14.12±5.12)%、(1.52±0.88)%,Th1/Th2比例为(12.05±5.62);正常对照组Th1、Th2细胞分别占(26.10±4.98)%、(0.99±0.35)%,Th1/Th2比例为(31.62±16.62).神经梅毒患者外周血中的Th1细胞及Th1/Th2的比例低于正常对照组(P<0.05).神经梅毒患者外周血中的DC1、DC2细胞分别占(0.44±0.17)%和(0.25±0.19)%,正常对照组分别占(0.34±0.10)%和(0.26±0.13)%,两组间差异无显著性意义(P>0.05).神经梅毒患者的DC1与Th1、DC2与Th2存在相关关系(P<0.05),DC1、DC2与Th1/Th2无相关关系(P>0.05).结论 神经梅毒患者细胞免疫功能受抑,其外周血中DC亚群的比例与Th1/Th2失衡无关.

  • CD62P与急性脑梗死的相关性

    作者:蒙绪卿

    目的 观察急性血栓性脑梗死(ATCI)和急性心源性脑栓塞(ACCE)患者CD62P的表达水平.方法 利用流式细胞仪测定35例ATCI患者、30例ACCE患者和33例正常对照组血液样本CD62P的表达水平.结果 与对照组相比,ATCI组和ACCE组CD62P均无升高(F=1.12,F=1.59,均P>0.05);ATCI组和ACCE组间CD62P表达水平也无显著性差异(F=1.12,P>0.05).结论 CD62P虽然是一种血小板活化标志物,但不论在急性血栓性脑梗死还急性心源性脑栓塞发病过程中,表达并无明显升高.

  • 支原体肺炎患儿淋巴细胞亚群的变化及意义

    作者:顾咏梅;黄莉

    目的 观察支原体肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群的变化及临床意义.方法 采用流式细胞仪检测20例支原体肺炎患儿和14例健康儿童淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD(16+56)+).两组年龄、性别差异无统计学意义.结果 支原体肺炎患儿CD3+细胞明显降低(P<0.01)、CD3+CD8+细胞降低(P<0.05)、CD3-CD19+细胞升高(P<0.01),较对照组差异有统计学意义;CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD(16+56)+细胞较对照组差异无显著意义(P>0.05).结论 支原体肺炎患儿存在细胞免疫失调,主要表现为CD3+、CD3+CD8+细胞降低,CD3-CD19+细胞升高.

  • HIV/AIDS的免疫学指标与病毒载量的分层分析

    作者:张世玺

    目的 探讨病毒载量与CD8/CD25、CD8/CD38、CD8/CD95、CD14、CD19、CD56等指标的相关性.方法 选用相应的抗体用流式细胞仪进行检测.结果 CD8/CD38、CD8/CD25、CD14、CD19在低层病毒载量(<1000 copies/ml)低于高层病毒载量(>1000 copies/ml),有在统计学意义(P<0.05);CD56、CD8/CD95在低层病毒载量(<1000 copies/ml)高于高层病毒载量(>1000 copies/ml),并有统计学意义(P<0.05).结论 CD8/CD38、CD8/CD25、CD14、CD19与病毒载量呈正相关性,CD56、CD8/CD95与病毒载量呈负相关性.

  • 腮腺混合瘤DNA含量测定及临床分析

    作者:邹弘驹;李永生;濮晓秋

    腮腺混合瘤是常见的涎腺肿瘤,其组织学定性主要依赖组织病理学,由于缺少客观的量化指标,故临床对腮腺肿瘤的预后评估常缺乏客观性依据.流式细胞仪能通过对肿瘤细胞DNA含量测定,分析细胞DNA指数(DI)及S期增殖率(SPF),从而以量化标准分析肿瘤生物学行为,为客观评估肿瘤的预后提供重要依据.

  • 维持性血液透析患者外周血调节性T细胞的表达

    作者:眭维国;孙燕燕;黄河;陈洁晶;蓝慧娟;戴勇

    目的 探讨维持性血液透析患者体内调节性T细胞表达水平及意义. 方法 采用流式细胞术测定解放军第181医院全军肾移植与血液净化中心13例维持性血液透析患者血液透析前、血液透析后外周血CD4+T细胞占淋巴细胞的比例及CD4+CD-127Treg、CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例. 结果 维持性血液透析患者血液透析前CD4+T细胞占淋巴细胞的比例高于健康对照组,CD4+CD127-Treg、CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例低于健康对照组,血液透析后CD4+T的比例下降,CD4+CD25+CD127-Treg的比例有所上升. 结论 尿毒症患者外周血CD4+T数量增高,CD4+CD127-Treg、CD4+CD25+CD127-Treg数量降低,免疫功能紊乱,而血液透析有利于改善机体的免疫功能.

  • 检测胞浆抗原用于急性白血病免疫分型

    作者:齐晖;李富荣;王新根;陈晓琳;戴勇

    胞浆抗原在急性白血病免疫分型中的临床意义.方法:用流式细胞仪检测42例初治急性白血病患者胞浆抗原CyCD3,CyCD22,CyCD79a和MPO.结果:T-ALL阳性胞浆抗原主要表达在CyCD3,阳性率占88.9%.B-ALL阳性胞浆抗原主要表达在CyCD79a,AML主要表达CyMPO.结论:CyCD3和CyCD79a,及MPO可分别作为T-ALL,B-ALL和AML系列特异性标志,对正确诊断白血病提供非常有价值的依据.

  • 流式细胞仪三色荧光标记技术在白血病免疫分型中的应用

    作者:罗代平

    目的 探讨流式细胞仪三色荧光标记技术在白血病免疫分型中应用价值.方法 选择该院2011年1月-2014年1月收治的120例急性白血病患者作为研究对象,抽取患者外周血进行流式细胞术免疫分析,采取自行设计的7组三色荧光标记抗体组合,共含15种抗体.结果 60例标本经单色荧光标记技术检测,T细胞免疫表型急性淋巴细胞白血病(T-ALL) 27例,急性B细胞型淋巴细胞性白血病(B-ALL) 11例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL) 22例;细胞分群问题致诊断不明确11例(18.3%);初始诊断与终诊断不符3例(5.0%),其中,2例为单纯髓系白血病,1例为单纯淋系白血病.经三色荧光标记技术检测后,90%的白血病患者类型及免疫分型可明确诊断.结论 流式细胞仪三色荧光标记技术在白血病免疫分型诊断中具有重要价值,诊断正确率较高.

  • CXCR4+细胞亚群比例在系统性红斑狼疮患者外周血中的变化

    作者:张清林;王敬亚;孟洁;岳婵娟;刘琳

    目的:考察 CXCR4+细胞亚群占淋巴细胞的比例是否在系统性红斑狼疮(SLE)疾病中发生变化。方法选取15例体检正常人员(正常对照组)以及25例初发SLE患者,使用流式细胞仪分析正常人、SLE患者治疗前和治疗后外周血中的CXCR4+细胞亚群,使用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分标准评估 SLE 患者治疗前和治疗后的疾病严重程度。结果 SLE 患者治疗前CXCR4+细胞亚群占淋巴细胞的比例低于治疗后(P=0.000)和正常对照组(P=0.001);SLE 患者治疗后 CXCR4+细胞亚群占淋巴细胞的比例与正常对照组的结果差异无统计学意义(P=1.000);SLE患者治疗前SLEDAI评分高于治疗后(P=0.000)。结论初发SLE患者治疗前的CXCR4+细胞数量占淋巴细胞的比例低于正常人,经临床治疗后可恢复到与正常人相似的水平。

  • 用白细胞共同抗原45去除白细胞对流式细胞仪测定肿瘤细胞干扰的探讨

    作者:沈宗丽;朱月清;吴晓柳;庄一平;王亚平

    流式细胞仪( FCM)是通过荧光抗原抗体技术进行细胞测量的先进仪器.穿刺活检术为肺良恶性肿瘤鉴别诊断和标记物检测提供了安全、准确、微创的途径.越来越多的临床研究关注肿瘤相关基因蛋白在恶性肿瘤发生发展中的作用,而蛋白表达水平在肿瘤细胞和正常细胞间存在差异[1-3],以往的工作多以免疫组化技术为手段,但在定量分析方面受到限制;而FCM快速进行多参数测量,特别是在混合细胞中可通过相应标记对细胞进行分类和定量.

  • 流式细胞术与三种活化血小板检测方法的比较

    作者:洪强;陈汉水

    血小板活化与多种血栓性疾病有关[1].血液中活化血小板增高可作为动脉血管病,如脑梗死、心肌梗死,外周血管病等局部血栓形成的标志物[2].活化血小板的测定,对于血栓形成的预防、诊断及治疗有着重要的意义.近年来,随着流式细胞仪应用的普及,使得活化血小板的检测成为可能.目前,活化血小板的测定方法主要有传统的血浆法、全血法与较新应用的内固定法.本研究对3种方法的具体操作步骤和方法进行比较,旨在全面评价和筛选适合于临床实验室日常应用的活化血小板检测方法.

  • 当前临床流式细胞分析的发展趋势

    作者:王建中;王淑娟

    流式细胞分析,又称流式细胞术(Flow cytometry,FCM),是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要是单细胞即可用于分析,如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等,实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也能分析,因此,实际上所有组织细胞均可用于分析.②极短时间内可分析大量细胞,只要标本中的细胞数量足够,流式细胞仪(Flow cytometer)可以每秒钟数十、数百、数千个细胞的速率进行测量,测量的细胞总数可达数千、数万乃至数百万个.③可同时分析单个细胞的多种特征,当同时用多种分子探针,如用不同荧光素标记的不同单克隆抗体进行多色荧光染色,通过流式细胞分析,即可获得单细胞的多种信息,使细胞亚群的识别、计数更为准确.④定性或定量分析细胞:通过荧光染色对单细胞的某些成分如DNA含量、抗原或受体表达量、Ca2+浓度等均可进行单细胞水平的定性与定量分析.

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