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血小板减少及血液中微粒的临床检验结果
目的 对血小板减少以及血液中微粒的临床检验结果 进行分析探讨,为今后的临床检验工作提供可靠的参考依据.方法 抽取在2010年1月-2012年12月间我院收治的冠心病、慢性肾功能衰竭、急性脑梗死、急性白血病化疗后以及健康体检者各50名,对其展开血小板微粒检测,并对检测结果 展开对比分析.结果 冠心病、慢性肾功能衰竭、急性脑梗死患者血浆中血小板微粒较健康者发生明显升高(P<0.05),急性白血病化疗后患者的检测结果 与健康者之间无明显差异(P>0.05).结论 血小板微粒能够对血小板活化进行反映,并可以在疾病预测以及诊断血栓性疾病中发挥重要作用,值得关注.
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流式细胞仪细胞分选参数调校方法的研究
目的：探讨 BD FACSAria Ⅲ流式细胞仪进行细胞分选实验快速调校佳仪器运行参数的方法。方法以稀释的 CS&T 质控微球和 Accudrop 液滴延迟测定微球为实验材料，依次使用4种不同大小型号的喷嘴，在相应的鞘液压力下调校主液流和侧液流，测定液滴延迟时间。结果确定了仪器佳分选调校参数，使用70μm，85μm，100μm，130μm 喷嘴测定出的液滴延迟参数分别为47.00、30.00、27.00、16.00。结论按照佳分选调校参数参考值设定仪器，而后根据主侧液流形态和液滴延迟左框进框亮度进行微调，是实现 BD FACSAria Ⅲ流式细胞仪分选条件快速优化的关键。
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EPICS XL流式细胞仪的基本原理及临床应用
EPICX XL是由美国库尔特公司(C0ULTER)1993年推出的临床型流式细胞仪系统.流式细胞术作为细胞分析手段已被广泛应用于细胞免疫学、血液学、肿瘤学等各个领域.本文对由美国库尔特公司(COULTER)生产的EPICS XL流式细胞仪的基本原理、软件功能及临床应用作一简单介绍.
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活动性肺结核T细胞亚群分布特点
CD4+T和CD8+T是结核病患者产生保护性免疫反应的主要效应细胞.在结核菌感染的早期活化的CD4+T和CD8+T就向感染灶转移和聚集,通过递呈抗原、参与结核结节的形成、溶解被感染的细胞以及直接杀菌等作用来控制结核菌扩散和防止结核病的复燃[1～3].本研究采用流式细胞仪观察活动性肺结核患者外周血CD4+T和CD8+T细胞亚群分布,进一步明确T细胞亚群与结核病发病的关系.
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支气管肺炎患儿免疫功能的检测分析
目的:探讨小儿免疫功能与支气管肺炎的关系.方法:收治小儿支气管肺炎患儿160例,同时收集同期健康体检的50例,年龄8个月～12岁儿童作为对照组进行比较,两组人员均进行采用FACS Vantage流式细胞仪进行T淋巴细胞百分数值及绝对计数比较.结果:支气管肺炎患儿SD3+、SD3++ SD8+、SD3++SD4+均低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:支气管肺炎患儿免疫功能低于正常人.
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流式细胞术在临床检验中的应用分析
目的：通过了解和讨论，对流式细胞术在临床检验中的应用情况做出详细分析。方法：通过多次严谨性实验并且真实详细记录每次实验数据，进一步分析流式细胞术在临床检验中的应用效果和可行性。结果：经过实验数据分析，流式细胞术在检验HLA-B27抗原、淋巴细胞亚群、肿瘤标志物、白血病免疫、临床微生物等应用中有着明显的效果。结论：流式细胞术在临床检验中可以得到很好的应用。
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网织红细胞测定的三种方法的评价
目的:对流式细胞仪、库尔特血球计数仪、人工显微镜方法计数网织红细胞进行评价.方法:对流式细胞仪法、库尔特血球计数仪法、人工显微镜法.结果:仪器法(尤其足流式)的重复性无论在高、中、低值均比手工法好,准确性三者无显著性差异.结论:流式细胞仪、库尔特血球计数仪测定网织红细胞重复性好、准确性高、操作简便、快捷、可成批测定,是测定网织红细胞的好方法.
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多发性骨髓瘤的免疫表型分析
多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞异常增生的恶性肿瘤，以恶性浆细胞在骨髓中大量增殖，产生溶骨性破坏及过量单克隆免疫球蛋白为主要表现。MM的诊断主要依据骨髓中存在浆细胞浸润，血、尿中存在一定量的单克隆蛋白以及瘤细胞浸润或单克隆蛋白引起的器官损害。本文就流式细胞术免疫表型检测对MM诊断和预后的研究进展进行综述。
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大鼠脑出血后血肿周围组织中细胞凋亡的研究
目的:动态检测大鼠脑出血后不同时间段血肿周围组织中凋亡细胞比例,从而证实脑出血后存在着细胞凋亡现象.方法:制备动物模型,分别于术后6小时,24小时,72小时,10天4个时间点处死各组大鼠,制备脑组织单细胞悬液,通过凋亡检测试剂盒双染色后经流式细胞仪检测细胞凋亡率.利用统计学软件SPSS 17.0对实验结果进行统计学分析.结果:6小时组血肿周围脑组织中细胞凋亡率即显著高于对照组,24小时组细胞凋亡率继续升高,72小时组达到高峰,10天组有所下降,但仍显著高于对照组.结论:脑出血后,血肿周围脑组织中脑细胞凋亡率明显升高,72小时达到高峰,持续升高10天以上.
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经典干细胞标志物CD34、PDGF-βR、VEGF-R2在早孕蜕膜组织中的表达研究
目的 研究经典干细胞标志物CD34、PDGF-βR、VEGF-R2在早孕6～8周蜕膜组织中的表达.方法 提取6～8周早孕期人工流产术蜕膜组织(n=16),消化后选用CD34、PDGF-βR、VEGF-R2单克隆抗体进行荧光染色,分别采用单染、双染及三染法,应用流式细胞仪技术分析上述经典干细胞标志物的表达及其相互关系.结果 6～8周早孕期蜕膜组织细胞中,(1)单染法证实CD34+细胞为(0.81±1.07)％,PDGF-βR+细胞为(9.94±7.36)％,VEGF-R2+细胞为(0.90±1.19)％;(2)双染法证实CD34+/VEGFR2-细胞(0.59±0.61)％,CD34+/VEGF-R2+细胞(0.16±0.10)％;(3)三染法证实CD34+/VEGFR2+/PDGF-βR+细胞(0.09±0.06)％,CD34+/VEGFR2-/PDGF-βR+细胞(0.15±0.13)％. 结论 早孕6～8周蜕膜组织中存在经典干细胞标志物CD34、PDGF-βR、VEGF-R2阳性表达的细胞,存在少量的双阳性表达及三阳性表达的细胞.早孕蜕膜组织中存在于细胞参与其发育过程.
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利用流式细胞仪计数蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫方法的初探
目的 研究利用流式细胞仪对蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)孢囊和微小隐孢子虫(Crypto sporidium parvum)卵囊的高浓度混合样本进行计数,为“两虫”标准品制备提供技术支撑,以期能降低“两虫”检测试剂成本.方法 利用已知浓度的荧光微球对经免疫荧光染色的“两虫”混合样本进行计数,采用非参数检验中两个相关样本检验方法对流式细胞仪和荧光显微镜计数结果进行统计学分析比较.结果 流式细胞仪方法计数蓝氏贾第鞭毛虫孢囊和微小隐孢子虫卵囊的相对标准偏差(RSD)分别为14.7％和15.2％,比荧光显微镜计数结果的RSD(14.1％和15.1％)稍高.利用Wilcoxon检验得出两种方法对孢囊和卵囊的计数结果差异均无统计学意义(Z=-0.91 8,P=0.359和Z=-0.102,P=0.919).结论 利用流式细胞仪计数高浓度“两虫”混合样本的方法能达到生物学实验要求的精确度,并与荧光显微镜计数方法具有等效性,可弥补荧光显微镜无法直接计数高浓度样本的不足,并为“两虫”标准品的筛选与分装奠定基础.
关键词： 蓝氏贾第鞭毛虫 微小隐孢子虫 流式细胞仪 荧光显微镜 Wilcoxon检验 -
浙江地区健康青少年和成人外周血 T 淋巴细胞免疫表型调查及正常参考值范围的建立
目的 通过对健康青少年和成人外周血 T 淋巴细胞免疫表型分布调查,建立健康人外周血 T 淋巴细胞免疫表型正常参考值范围.方法 选择浙江地区义务献血和健康体检者 385 例,血样用 Multi TEST 四色特异性 T 淋巴细胞亚群荧光抗体进行荧光标记,FACS Callibur 流式细胞仪检测样品,Multiset 程序获取数据并分析结果,SPSS 12.0 软件包进行统计分析.以百分位数法,采用 95% 可信区间确定正常参考值范围.结果 男性和女性的 CD3+ 的百分率和 CD3+ CD4+ 百分率和绝对数均有差异,表现为女性高于男性.而 CD3+绝对数和 CD3+ CD8+ 百分率和绝对数没有性别差异.T 淋巴细胞免疫表型各个指标在不同年龄组之间均有差异,表现 CD3+ CD8+(相对数和绝对值)随年龄组增大而逐渐下降趋势,而 CD3+ CD4+(相对数和绝对值)则随年龄组增大而逐渐增加.浙江省健康人 T 淋巴细胞免疫表型参考值范围:CD3+ 百分数(%):47.98～82.60;CD3+ 绝对数(个/μl):712.49～2 367.55;CD8+百分率(%):14.24～41.48;CD8+ 绝对数(个/μl):219.14～1 109.81;CD4+ 百分率(%):24.15～51.66;CD4+绝对数(个/μl):383.61～1 345.60;CD4/CD8:0.70～3.25.结论 健康人淋巴细胞免疫表型的分布存在性别和年龄差别.由于这种差别细微,可以在同一种族同一区域建立统一的正常参考值范围.
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2型糖尿病血小板膜糖蛋白测定意义
糖尿病(DM)患者并发慢性微血管病变和大血管病变,是影响其预后和生活质量的主要原因.其发病机制甚为复杂,其中血小板活化与血管内皮细胞的功能紊乱起主要作用.我们用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测2型糖尿病患者血小板膜糖蛋白CD41、CD61、CD62p,探讨2型糖尿病血小板膜糖蛋白变化与早期微血管病变的关系和相关因素.
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流式细胞技术在毒理学研究中的应用
流式细胞仪(FCM)是在上世纪70年代发展起来的一种测量细胞荧光染色强度,定量测定细胞和亚细胞成分(微粒)的细胞分析仪.它也是在单细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质进行快速测量并可分选高纯度细胞亚群的一项新技术[1].近年来,随着细胞和分子生物学技术尤其是单克隆抗体技术的发展和分子探针的开发,流式细胞技术日见成熟,它以快速、灵活、灵敏和定量的特点,在国内外被广泛应用于医学基础研究和临床实践多方面.目前,流式细胞技术在毒理学多个分支研究领域已得到广泛应用,在研究外源化合物的细胞毒性和致癌分子机理方面显现出重要价值.笔者就目前FCM技术在免疫毒理、生殖和遗传毒理、发育毒理、环境以及神经毒理学方面的应用作一综述.
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血样经荧光抗体染色后放置不同时间对 CD4+T淋巴细胞计数的影响
目的 了解HIV/AIDS感染者进行CD4+T淋巴细胞检测时血样经荧光染色后随着放置时间的延长,CD4+T淋巴细胞计数的变化.方法 用FACSCount流式细胞仪对运城市HIV/AIDS病人送检的30份血样采集后放置8 h进行荧光染色,染色后再放置30 min、24 h、48 h、72 h、96 h后分别进行CD4+T淋巴细胞计数.并将结果进行平均值((x))、标准差(s)和变异系数(CV)的统计计算.结果 同一样品染色后放置30 min至96 h内检测的数据差异均＜20%,为可接受范围.其中血样经荧光染色后再放置不同时间检测的30份血样中有21份五次重复测定值的CV值＜5%,占70%.相关性分析显示:五个时间点上的检测结果相互之间都具有很好的相关性,且相关系数(r值)均≥0.99.结论 在实验室其他条件(温度、试剂等)不变的情况下,用FACSCount流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞,血样经荧光微球染色后放置时间延长至96 h五个时间点的CV%值＜20%,对检验结果影响不大.
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派克汉尼汾携新款智能注射泵亮相2014慕尼黑上海分析生化展
在9月25日举办的2014慕尼黑上海分析生化展上，全球运动和控制领域的领导者派克汉尼汾公司推出一款更为智能、高效的检测注射泵，吸引了众多参展商的关注。该产品使用寿命长，可靠性高，停机时间短，能够显著提高临床诊断和分析化学系统的性能，适用于体外诊断、血液分析、分子诊断、流式细胞仪、基因组分析、蛋白组分析、液体处理、样本制备、色谱分析以及精密流量控制等应用。
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BD FACSJazz 分选型流式细胞仪操作技巧及维护方法
流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机技术、细胞荧光化学技术为一体的新型高科技仪器，能够同时对细胞多种生物物理、生物化学方面的指标快速、准确定性和定量分析，而分选型流式细胞仪可以在分析的基础上对目的细胞进行分离[1,6]。基于流式细胞仪的强大功能，已被广泛应用于免疫学、血液学、肿瘤学等领域[2]。正因为流式细胞仪是大型高精密仪器，故在操作人员、日常维护以及故障处理方面经验要求较高。[3~4]。
关键词： BD FACSJazz 分选 流式细胞仪 操作 维护 -
“医心一意”，迈瑞新品精彩绽放第72届CMEF
金秋十月，在美丽的山城重庆，迈瑞以“医心一意”为主题，携SAL8000生化免疫流水线、BriCyte E6流式细胞仪、DC-8EXP专家版彩超、DC-70高性能彩超、DigiEye 680数字X射线成像系统等系列新品与解决方案精彩亮相第72届CMEF，再一次生动、全面地诠释了迈瑞与医者“医心一意”创新的丰硕成果，向业界展示迈瑞基于“洞察临床需求，全球联动研发”的创新风采。
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苦参碱改构体X对人鼻咽癌CNE1细胞的凋亡诱导作用
目的:探讨苦参碱改构体X体外诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡的作用与机制.方法:用0,29,58,116,232,464μmol·L-1不同剂量改构体X处理对数生长期CNE1细胞48 h,采用MTT法检测苦参碱改构体X对CNE1细胞增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测改构体X对CNE1凋亡率和细胞周期的影响,Western blot法检测改构体X对CNE1细胞内Bcl-2、Bax及p53等凋亡过程中相关蛋白表达的影响.结果:苦参碱改构体X作用CNE1 48 h后,MTT结果显示,改构体X对CNE1细胞增殖有抑制作用并具有浓度依赖性;流式细胞仪分析结果显示,改构体X 58,116 μmol· L-1浓度组细胞凋亡率高出苦参碱组70.02％,75.73％,高于阴性对照组(P＜0.05,P＜0.01);细胞周期测定结果显示改构体X各剂量组均可不同程度地将CNE1细胞周期抑制在G1期,与阴性对照组相比具差异显著性(P＜0.05,P＜0.01);Western blot检测表明,苦参碱改构体X作用CNE1 48 h后,凋亡相关蛋白Bcl-2降低,Bax,p53增加,与阴性对照组相比有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:苦参碱改构体X在体外可诱导CNE1细胞凋亡,其促凋亡机制可能与阻滞细胞周期、增加促凋亡蛋白Bax和p53表达并降低抑制凋亡蛋白Bcl-2表达有关.
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流式细胞仪检测清开灵注射液及其有效成分诱导HL-60细胞凋亡及其机理研究
我们通过流式细胞仪检测证明:清开灵注射液及其有效成分黄芩甙、猪去氧胆酸体外作用以诱导HL-60细胞凋亡为主,体外作用6h可诱导产生凋亡早期蛋白AnnexinV,并同时增加Fas蛋白表达,降低bcl-2蛋白表达(P＜0.01).牛黄胆酸可同时上调Fas和bcl-2表达,无明显诱导细胞凋亡作用.
