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壮骨健膝方对IL-1 β诱导后软骨细胞表达Caveolin-1、p-p38、MMP-3、MMP-13及TNF-α的影响
目的:观察壮骨健膝方对IL-1 β诱导后软骨细胞中Caveolin-1、p-p38及其培养液中MMP-3、MMP-13和TNF-α表达的影响,探讨该方保护关节软骨的机制.方法:制备兔含药血清;取新西兰大白兔膝关节第二代软骨细胞,以10ng/mL IL-1β进行诱导,48h后随机分为空白血清组、含药血清组、阻滞剂A组、阻滞剂B组,并设未诱导的细胞为正常对照组,分别用不同方法干预6h后,检测软骨细胞及其培养液中上述5个指标的表达.结果:空白血清组5个指标的表达均高于其它各组(P＜0.05),而3个干预组均能降低其表达(P＜0.05),其中含药血清与SB203580联用的阻滞剂B组效果明显.结论:壮骨健膝方对关节软骨的保护作用可能与其抑制Caveolinp38MAPK信号通路的激活,进而降低软骨细胞表达MMP-3、MMP-13及TNF-α有关.
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辛伐他汀减轻载脂蛋白E-/-小鼠氧化应激及小窝蛋白1的表达
背景 氧化应激损伤内皮是动脉粥样硬化的始动因素.他汀对于动脉粥样硬化的干预主要集中在粥样硬化斑块形成之后,而对于粥样硬化斑块形成之前的研究较少.目的 观察辛伐他汀对载脂蛋白(apo)E-/-小鼠氧化应激及主动脉内皮小窝蛋白1的影响,探讨辛伐他汀在动脉粥样硬化一级预防中保护内皮功能的机制.方法 24只6周龄雄性apoE-/-小鼠.随机等分为两组:对照组、辛伐他汀[5 mg/(kg·d)]治疗组,4周后处死动物.常规生物化学法测定血总胆固醇(TC)、超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛(MDA)和血清一氧化氮(NO)含量.采用苏木素伊红(HE)染色法观察小鼠主动脉内皮组织,免疫组织化学法分析小鼠主动脉内皮的小窝蛋白1的表达.结果 两组间血脂水平无显著性差异.辛伐他汀治疗组主动脉内皮组织的损伤减轻(损伤阳性率33.3%比对照组:75%,P<0.05).治疗4周后,辛伐他汀治疗组SOD[(135.35±5.5)U/L比对照组:(97.2±7.6)U/L,P<0.01)和NO[(28.4±4.1)μmol/L比对照组:(12.3±2.1)μmol/L,P<0.01]均明显升高,MDA显著减低[(10.5±0.5)nmol/L比对照组:(17.3±1.0)nmol/L,P<0.01].辛伐他汀治疗组主动脉内皮上小窝蛋白1的表达(表达阳性率41.67%比对照组:83.33%,P<0.05)明显降低.结论 辛伐他汀在不影响血脂水平情况下,抑制主动脉内皮的小窝蛋白l的表达,减轻apoE-/-小鼠氧化应激,增加NO水平,起到改善内皮功能、抗动脉粥样硬化作用,在动脉粥样硬化的一级预防中可能发挥重要作用.
关键词： 辛伐他汀 载脂蛋白E-/-小鼠 氧化应激 小窝蛋白1 -
小窝蛋白1与肿瘤的关系
小窝蛋白是正常位于哺乳动物细胞膜内表面,蛋白质序列高度保守的一组蛋白,它包括小窝蛋白1、小窝蛋白2、小窝蛋白3和小窝蛋白4.它们与细胞的胞吞、脂质的代谢,以及细胞信号转导等有密切的联系.近年来发现,不仅肿瘤细胞小窝蛋白1表达水平与肿瘤的生长和转移有关,而且在肿瘤的间质细胞小窝蛋白1表达的水平也与多种肿瘤的转移有关.
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小窝蛋白1介导TGF-β信号通道调控肺细胞外基质重塑机制研究
目的：探讨caveolin-1通过介导TGF-β信号通道在体外调控小鼠肺细胞外基质重塑的机制研究。方法：选取cav1-/-小鼠作为动物模型设为实验组，野生型C57BL/6J小鼠设为对照组，检测肺机械性指标，测定Ⅰ型胶原纤维与弹性纤维含量及mRNA水平，检测肺血管蛋白渗出及支气管灌洗液（BAL）中细胞含量及细胞因子水平，测定TGF-β下游信号分子Smad2及ERK1/2水平。结果：与对照组比较，实验组中肺顺应性下降，僵硬度增加（P<0.05）；BAL中总蛋白及白蛋白水平和静脉注射伊文思蓝在肺组织的含量均明显增加（P<0.05）；Ⅰ型胶原纤维与弹性纤维含量及mRNA水平增加（P<0.05）；Smad2及ERK1/2水平均明显提高（P<0.05）；但BAL中细胞含量及细胞因子水平无差异。结论：小窝蛋白1通过介导TGF-β信号转导在体外上调细胞外基质重塑，促进肺纤维化发生。
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小窝蛋白1及其磷酸化在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义
目的 检测小窝蛋白1(caveolin-1,Cav-1)及其磷酸化小窝蛋白1(PY 14caveolin-1)在不同食管组织中的表达,探讨Cav-1及其PY14cav-1与食管癌发生、发展的关系.方法 收集60例食管鳞状细胞癌患者手术标本,采用蛋白印迹法检测Cav-1及PY 14cav-1在食管癌组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达情况,分析C av-1及PY14Cav-1表达水平与食管癌发生、发展的关系.结果 Cav-1及PY14cav-1在食管鳞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织与食管正常组织中的表达水平,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 Cav-1及PY14cav-1在食管癌组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达依次减少,提示其在食管癌的发生和发展过程中起着重要作用,而且可能参与食管癌的侵袭和转移.
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小窝蛋白1与ARDS的关系研究进展
小窝蛋白1(Caveolin-1,cav-1)是小窝的重要结构蛋白和调节蛋白,参与多种信号转导途径,调控物质跨膜转运,调节细胞增殖与凋亡.目前研究发现cav-1参与ARDS的发生、发展过程,但cav-1对ARDS患者发挥保护作用还是损伤作用仍不明确,本文就cav-1在ARDS的作用作一综述.
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cav-1和TNF-α在机械通气联合高氧致大鼠ALI中的表达研究
目的 观察机械通气联合高氧对大鼠肺组织小窝蛋白1(cav-1)、核转录因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响,探讨机械通气联合高氧致大鼠ALI的发生机制及其相互作用.方法 24只雄性SD大鼠随机分为对照组、机械通气组和机械通气联合高氧组.观察各组大鼠肺组织的病理学改变,计算肺组织湿/干重比值;采用BCA法测定BALF中蛋白含量;采用免疫组化染色法和Western blot法测定肺组织中cav-1蛋白表达;采用RT-qPCR法测定肺组织中NF-κB和TNF-αmRNA表达.结果 与对照组比较,机械通气组和机械通气联合高氧组大鼠肺组织湿/干重比值、BALF中总蛋白含量以及肺组织中cav-1蛋白、NF-κB mRNA和TNF-αmRNA表达水平均显著升高(P值均<0.001),同时肺组织呈明显损伤性改变;机械通气组和机械通气联合高氧组之间上述指标比较差异也均有统计学意义(P值均<0.001),但机械通气组肺组织病理损伤程度较机械通气联合高氧组轻.相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达量与NF-κB mRNA表达量之间呈正相关(r=0.827,P<0.001);NF-κB mRNA表达量与TNF-αmRNA表达量之间呈正相关(r=0.903,P<0.001).结论 高氧可上调肺组织cav-1的表达,使NF-κB信号通路发生活化,后者通过介导TNF-α等炎症细胞因子释放,从而加重机械通气大鼠肺组织炎症性损伤.
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小窝蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞TLR4/p38MAPK信号通路激活中的作用
目的 评价小窝蛋白-1(Cav-1)在盐酸戊乙奎醚抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞Toll样受体4/p38丝裂原活化蛋白激酶(TLR4/p38 MAPK)信号通路激活中的作用.方法 将小鼠巨噬细胞接种于6 cm培养皿(5 ml/个)中,采用随机数字表法分为5组(n=20):Scr-siRNA对照组(S组)、Scr-siRNA+LPS组(LPS组)、Scr-siRNA+LPS+盐酸戊乙奎醚组(LPS+P组)、Cav-1-siRNA+LPS组(C+LPS组)和Cav-1-siRNA+LPS+盐酸戊乙奎醚组(C+LPS+P组).S组、LPS组和LPS+P组经Scr-siR-NA转染24 h,C+LPS组和C+LPS+P组经Smart pool Cav-1 siRNAs转染24 h;转染结束后LPS组、LPS+P组、C+LPS和C+LPS+P组加入终浓度为1μg/ml的LPS孵育2 h;LPS+P组和C+LPS+P组于LPS孵育2h后加入终浓度为2μg/ml的盐酸戊乙奎醚孵育2h.采用Western blot法检测Cav-1和TLR4的表达水平,采用免疫荧光法检测p38 MAPK表达水平,采用ELISA法检测培养液TNF-α浓度,采用比色法检测髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 与S组比较,其余4组TLR4和p38 MAPK表达上调,培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性升高,LPS组和C+LPS组Cav-1表达下调(P＜0.05),LPS+P组Cav-1表达差异无统计学意义(P＞0.05);与LPS组比较,LPS+P组Cav-1表达上调,TLR4和p38 MAPK表达下调,培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性降低,C+LPS组Cav-1表达下调,TLR4和p38 MAPK表达上调,培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性升高(P＜0.05);与LPS+P组比较,C+LPS+P组Cav-1表达下调,TLR4和p38 MAPK表达上调,培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性升高(P＜0.05);与C+LPS组比较,C+LPS+P组Cav-1表达上调,TLR4和p38 MAPK表达下调,培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性降低(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞TLR4/p38 MAPK信号通路激活的机制与上调Cav-1表达有关.
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caveolin-1在骨巨细胞瘤中的表达及其意义
目的 研究cavmlin-1(小窝蛋白1)在骨巨细胞瘤中的表达,探讨其在骨巨细胞瘤发生发展中的可能作用.方法 应用免疫组织化学SP法检测53例骨巨细胞瘤和22例良性骨肿瘤中caveolin-1的表达,镜下观察caveolin-1在肿瘤组织中的分布,应用自动图像分析检测caveolin-1的表达情况.结果 ①caveolin-1表达于大多数骨巨细胞瘤的肿瘤细胞上,定位于细胞膜和细胞质,阳性细胞在肿瘤组织中呈散在分布,无一定规律.caveolin-1在良性骨肿瘤中表达微弱.②caveolin-1阳性表达率在骨巨细胞瘤和良性骨肿瘤中分别为54.7%和25.0%(P<0.05),caveolin-1在骨巨细胞瘤中高表达.③caveolin-1的表达在骨巨细胞瘤I级和Ⅲ级差异有统计学意义(P<0.01),而在骨巨细胞瘤其他分级之间无统计学差异(P>0.05).结论 caveolin-1在骨巨细胞瘤发生发展中可能发挥重要作用,并可作为骨巨细胞瘤Jaffe分级的辅助指标之一.
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紫外线诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤与小窝蛋白1mRNA表达量下降有关
目的 紫外线(UV)照射导致的氧化损伤是晶状体上皮细胞凋亡的原因之一,而小窝蛋白(Caveolin)参与晶状体上皮细胞凋亡过程.本实验拟研究紫外线造成的氧化损伤中Caveolin-1表达变化与晶体上皮细胞凋亡之间的关系,同时探讨阿司匹林(ASA)作为抗氧化剂对Caveolin-1表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法 UVB(4.43 mw/cm2)照射人晶状体上皮细胞系SRAOI/04(0 s,5 s,10 s,20 s),按照是否加入阿司匹林分为实验组和对照组.分别检测实验组和对照组细胞活性;利用AnnexinV-EGFP法检测细胞凋亡率:real time RT-PCB方法定量分析Caveolin-1 mRNA的量随照射剂量不同,及加入抗氧化剂前后所产生的变化.结果 随UV照射时间延长,单纯紫外线照射组细胞活性,Caveolin-1 mRNA表达量下降,细胞凋亡率增加.加入阿司匹林后,细胞活性增加.5 s,10 s组Caveolin-1 mRNA的表达量较对照组升高,细胞凋亡率较对照组下降(P＜0.05).但是照射20 s的条件下,加药后的细胞凋亡率及Caveolin-1 mRNA的表达量较未加药组无变化(P＞0.05).结论 UV照射可造成人晶状体上皮细胞凋亡.Caveolin-1 mRNA表达量减少,推测Caveolin-1表达量的变化可能与凋亡有关.低剂量的阿司匹林(3μmol/L)可以在一定程度上减少UV照射造成的晶状体上皮细胞凋亡,增加Caveolin-1的表达;但大剂量阿司匹林(＞30 μmol/L)会起到相反的作用,因此找到一个合适安全的剂量范围具有一定临床意义.
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替米沙坦、瑞舒伐他汀对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌小窝蛋白1、葡萄糖转运蛋白4表达的影响
目的 测定不同饮食喂养大鼠和替米沙坦、瑞舒伐他汀干预后大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,观察大鼠骨骼肌中小窝蛋白(Caveolin)1、葡萄糖转运蛋白(GLUT)4表达的变化.方法 4周龄Wistar雄性大鼠48只,以高糖高脂饮食诱导建立IR模型,以高糖高脂给药(替米沙坦、瑞舒伐他汀)诱导建立实验组,通过RT-PCR方法检测IR大鼠骨骼肌组织中Caveolin 1 、GLUT4的表达水平.结果 高糖高脂喂养组产生IR,给予替米沙坦、瑞舒伐他汀干预后IR明显改善,高糖高脂组Caveolinl mRNA在骨骼肌中的表达明显高于对照组(P＜0.05),高糖高脂组GLUT4mRNA在骨骼肌中的表达明显低于对照组(P＜0.05),替米沙坦、瑞舒伐他汀可降低Caveolinl mRNA在IR大鼠骨骼肌中的表达,升高GLUT4 mRNA在IR大鼠骨骼肌中的表达.结论 ①高糖高脂饲料喂养8 w可诱导大鼠IR.②IR大鼠骨骼肌组织Caveolin 1表达增加,GLUT4表达减少.③通过替米沙坦类、他汀类药物干预,可改善IR,降低Caveolin1表达水平,升高GLUT4表达水平.
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虫草菌丝提取物对DMN诱导肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞通透性影响
目的:研究二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型肝窦内皮细胞(SECs)通透性变化模式,以及虫草菌丝提取物(CME)对SECs通透性的影响,以阐明其抗肝纤维化的作用机制.方法:采用DMN 10 μg·kg-1腹腔注射,每周3次,连续4 wk的方法制作大鼠肝纤维化模型.按10 mg·kg-1·d-1剂量给予CME干预和治疗模型大鼠,qd,连续2 wk和4 wk.透射电镜观察肝组织超微结构.免疫组织化学染色法观察肝窦壁CD31和小窝蛋白1(Cav-1)表达.结果:正常肝窦壁SECs有许多窗孔,CD31和Cay-1呈现弱阳性染色.给予DMN刺激后,模型组大鼠肝窦壁SECs窗孔数量逐渐减少,CD31和Cav-1阳性染色细胞逐渐增多,至4 wk末时到达峰值;停止DMN刺激后,模型对照组大鼠肝窦壁SECs窗孔数量逐渐增多,CD31和Cav-1阳性染色细胞逐渐减少.经2 wk和4 wk处理后,与模型组和模型对照组比较,CME预防组和治疗组大鼠肝窦壁SECs窗孔数量显著增多,CD31和Cav-1阳性染色细胞逐渐显著减少.结论:在DMN诱导大鼠肝纤维化形成过程中,SECs表型发生变化,其通透性模式由以窗孔运送为主转变为以小窝运送为主,使通透性减少.CME能够改善SECs通透性,这可能是其抗肝纤维化作用机制之一.
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雄激素调控大鼠阴茎海绵体组织中eNOS表达的分子机制
目的:研究雄激素是否通过蛋白激酶B-3(AKT3)、Ⅰ类磷脂酰肌醇-3-激酶的p110催化亚单位(PIK3CA)、钙调蛋白(CALM)、小窝蛋白1(CAV1)调控大鼠阴茎海绵体组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,并影响阴茎勃起功能. 方法:8周龄健康雄性SD大鼠36只,随机均分为6组:4周对照组(A组)、6周对照组(B组)、4周去势组(C组)、6周去势组(D组)、4周去势+睾酮(T)替代组(E组)、6周去势+T替代组(F组).C、D、E、F组切除双侧睾丸及附睾,1d后E、F组隔日1次丙酸睾酮3 mg/kg皮下注射,其余各组等量植物油皮下注射.4周后(A、C、E组)、6周后(B、D、F组)分别检测各组大鼠海绵体内压(ICPmax)/平均动脉压(MAP)、血清T,通过免疫组化法及Western印迹法分别测定eNOS、P-eNOS、AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1在各组大鼠阴茎海绵体中的表达. 结果:各组实验大鼠体重、MAP无显著差异.血清T值和ICPmax/MAP比值:去势组(C、D组)较对照组(A、B组)及去势+T替代组(E、F组)极显著降低(P均＜0.01),且去势6周组(D组)较去势4周组(C组)显著降低(P均＜0.05),去势+T替代组(E、F组)及对照组(A、B组)各组间无显著差异.免疫组化结果显示:eNOS、P-eNOS主要表达在血管内皮细胞胞膜和海绵窦血管腔内;AKT3、PIK3 CA、CALM、CAV1主要表达于血管内皮细胞胞质和胞膜,少数表达于平滑肌细胞.eNOS、P-eNOS、AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1 Western印迹结果显示:去势组(C、D组)与对照组(A、B组)、去势+T替代组(E、F组)相比极显著降低(P均＜0.01),去势+T替代组(E、F组)与对照组(A、B组)相比无显著差异,且6周去势组(D组)比4周去势组(C组)表达显著降低(P均＜0.05),6周去势+T替代组(F组)与4周去势+T替代组(E组)相比无显著差异,6周对照组(B组)与4周对照组(A组)相比无显著差异. 结论:雄激素可能通过上调AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1蛋白的表达,磷酸化eNOS后激活eNOS,促进勃起;然而,确切的机制还应该采用AKT3、PIK3 CA、CALM、CAV1等的阻滞剂或者激活剂,以及采用基因转染或者基因敲除等方法,进一步明确分子机制.
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CAV1在人肺动脉成纤维细胞增殖调控中的作用
目的 研究小窝蛋白1(CAV1)在缺氧相关肺动脉成纤维细胞(PAFs)增殖调控中的作用.方法 将体外培养的人PAFs分为:对照组(C:21%O2);10%氧浓度组(10%O2);5%氧浓度组(5%O2)及2%氧浓度组(2%O2)进行细胞增殖实验,选取细胞增殖明显组为缺氧组(H)进行后续实验.并构建CAV1高表达质粒(pCAV1),然后再将PAFs分为对照组(C:21%O2),缺氧组(H),空白对照组(NC:缺氧+空质粒转染组)和CAV1高表达组(pCAV1:缺氧+pCAV1转染组),采用Western-blot法检测各组细胞中CAV1、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和细胞凋亡抑制蛋白2(c-IAP2)含量,四甲基偶氮唑蓝(MTT)及增殖细胞核抗原(PC-NA)免疫组化法检测细胞增殖情况.结果 缺氧能刺激PAFs增殖,并呈浓度依赖性,于2%氧浓度刺激48小时PAFs增殖达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(1.20+0.02 vs 0.54+0.04,P<0.01);缺氧组PAFs中CAV1表达下调(1.23±0.04 vs 0.90±0.02,P<0.01),cyclinD1(0.19±0.03 vs 1.15±0.06,P<0.01)和c-IAP2(0.63±0.04 vs 0.78±0.09,P<0.01)表达上调,细胞增殖增加(MTT:0.78±0.04 vs 1.20±0.02,P<0.01;PCNA:0.29±0.03 vs 0.54±0.03,P<0.01);CAV1在PAFs中高表达后(0.55±0.03 vs 0.90±0.03,P<0.01),cyclinD1(0.88±0.02 vs 0.52±0.02,P<0.01)和c-IAP2(0.87±0.02 vs 0.72±0.02,P<0.01)表达下调,PAFs增殖减少(MTT:1.20±0.02 vs 1.00±0.06,P<0.01;PCNA:0.52±0.03 vs 0.38±0.03,P<0.01).结论 缺氧能通过下调CAV-1在PAFs中的表达,促进PAFs的增殖、抑制其凋亡.cyclinD1和c-IAP2可能是CAV1调控PAFs增殖和凋亡的下游靶点.
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ATRA对肺腺癌A549细胞RXRα及CAV1表达和分布的影响
目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对肺腺癌A549细胞维甲类X受体α(RXRα)、小窝蛋白1(CAV1)表达和分布的影响。方法MTT法检测ATRA对 A549细胞增殖的影响；免疫荧光法检测RXRα、CAV1在A549细胞中的表达和分布；Western blot法检测ATRA处理A549细胞后对RXRα、CAV1表达的影响。结果ATRA可抑制A549细胞增殖并呈剂量依赖性；ATRA处理A549细胞3 d后,RXRα表达降低并有向细胞核集中的现象,CAV1表达量降低且在胞膜分布增加。结论ATRA可抑制A549细胞增殖并影响RXRα和CAV1的表达和分布,下调RXRα和CAV1在A549细胞中的表达并分别使其向核内和胞膜转移,从而可能参与调控细胞增殖。
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膀胱癌组织Caveolin-1表达与膀胱癌病理分级和临床分期相关性的M eta分析
目的 探讨膀胱癌组织小窝蛋白1(Caveolin-1)表达与膀胱癌病理分级和临床分期的相关性.方法 检索PubMed、EMBASE、Cochrane Library、CNKI万方数据库,按照纳入和排除标准选择研究膀胱癌组织Caveolin-1表达与膀胱癌病理分级和临床分期的相关性文献,评价纳入文献质量并提取资料.将各文献中的资料合并,比较合并后的高、低病理分级膀胱癌患者和浅表型、浸润型膀胱癌患者膀胱癌组织Caveolin-1阳性表达率.结果 共10篇文献纳入本研究,共501例患者.10篇文献均涉及膀胱癌组织Caveolin-1表达与膀胱癌病理分级相关性,其中高、低病理分级患者膀胱癌组织Caveolin-1阳性表达率分别为60.1%±16.0%、18.1%±9.0%,高、低病理分级者膀胱癌组织Caveolin-1阳性表达率比较P<0.05.癌组织中Caveolin-1表达与膀胱癌病理分级有关,合并OR值为0.14,95%CI为0.08~0.23,P<0.05.8篇文献涉及膀胱癌组织Caveolin-1表达与膀胱癌临床分期相关性,其中表浅型、浸润型膀胱癌组中Caveolin-1阳性表达率分别为20.2%±13.9%、55.8%±14.3%,表浅型、浸润型膀胱癌组中Caveolin-1阳性表达率相比P<0.05.膀胱癌组织Caveolin-1表达与膀胱癌临床分期有关,合并OR值为0.15,95%CI为0.10~0.23,P<0.05.结论 膀胱癌组织中Caveolin-1表达与膀胱癌病理分级、临床分期有关.
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盐酸布桂嗪对神经病理性疼痛模型小鼠痛行为及前扣带回小窝蛋白1表达的影响
目的 采用慢性坐骨神经结扎(chronic constriction injury,CCI)小鼠模型,探讨盐酸布桂嗪对神经病理性疼痛模型小鼠痛行为及前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)小窝蛋白1(Caveolin-1,Cav-1)表达的影响.方法 将20～ 25 g的成年雄性昆明小鼠64只按完全随机分组法分为4组(每组16只):Sham+ BH(Bucinnazine Hydrochloride,盐酸布桂嗪)组、Sham+NS(normal saline,生理盐水)组、CCI+ BH组、CCI+ NS组.从CCI第4天开始腹腔注射相应药物,每天1次,连续给药3d.热辐射刺激仪检测小鼠热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),电子测痛仪检测小鼠机械痛缩足阈值(mechanical with drawalthreshold,MWT),免疫组化法检测前扣带回c-Fos蛋白的表达,免疫印迹法检测总Cav-1蛋白(t-Cav-1)、磷酸化Cav-1蛋白(p-Cav-1)的表达变化.结果 腹腔注射盐酸布桂嗪(0.1 mg/10 g)能够改善神经病理性疼痛小鼠痛行为,CCI+ BH组小鼠热缩足潜伏期在CCI后第5天[(5.92±0.61)s,P＜0.05]、第6天[(7.93±0.91)s,P＜0.01]、第7天[(9.12±0.69)s,P＜0.01]与第4天[(4.92±0.41)s]相比延长;与第4天[(1.55土0.31)g]相比,机械缩足阈值在第6天[(2.54±0.41)g,P＜0.01]、第7天[(3.68±0.61)g,P＜0.01]提高.免疫组化结果显示,盐酸布桂嗪可使神经病理性疼痛小鼠前扣带回c-Fos蛋白表达降低(P＜0.01).免疫印迹显示,与CCI+NS(t-Cav-1:2.87±0.15,p-Cav-1:0.48±0.09)组比较,盐酸布桂嗪可使神经病理性疼痛小鼠前扣带回t-Car-1(1.97±0.31)、p-Cav-1(0.11±0.09)表达降低(均P＜0.01).结论 盐酸布桂嗪能够缓解神经病理性疼痛模型小鼠的热痛和机械痛行为,降低神经病理性疼痛小鼠前扣带回c-Fos、t-Cav-1、p-Cav-1蛋白的表达.
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Caveolin-1和前列腺癌的研究进展
Caveolin-1(Cav-1)是位于细胞膜上的多功能蛋白,和Cavin-1共同构建烧瓶样小窝结构的外形.它能与多种信号蛋白结合,参与信号转导、包吞以及分子转运等作用,与众多恶性转变密切联系,比如细胞转化、肿瘤生长、血管生成、多药耐药、细胞生存、迁移、恶性转移等.目前研究显示Cay-1促进前列腺癌的发生、发展.本文通过分析现有发表的文献,对Cav-1成为前列腺癌靶向治疗的研究进展作一综述.
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川芎嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响
目的 观察川芎嗪对单侧输尿管梗阻大鼠(UUO)肾小管上皮细胞-间充质转分化(EMT)的影响及机制.方法 SD大鼠60只,随机分为A组(假手术)、B组(UUO)、C组[川芎嗪,40 mL/(kg·d),腹腔注射]、D组[厄贝沙坦,50 mg/(kg·d),灌胃],每组各15只.术后分别于第3、7和14天取左肾组织.荧光实时定量PCR检测分化抑制因子1(Id1)mRNA,免疫组化法测Id1、小窝蛋白1(Cav1)、转化生长因子-β1(TGFβ1)、钙粘蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原表达及相关分析.结果 与A组比较,B组大鼠各时间点Id1 mRNA和蛋白、Cav1、TGFβ1、α-SMA和Ⅰ型胶原表达增多,E-cad表达逐渐减少;C组大鼠各时间点均反向调节上述因子,疗效与D组相似;UUO大鼠肾组织中Id1表达与Cav1、α-SMA、TGFβ1表达正相关,与E-cad表达呈负相关.结论 Id1及Cav1表达强弱与肾间质纤维化程度相关,川芎嗪能有效减轻UUO诱导的大鼠肾间质纤维化,可能与有效抑制Id1及Cav1表达,部分逆转EMT有关.
关键词： 肾间质纤维化 肾小管上皮细胞转分化 川芎嗪/治疗 分化抑制因子1 小窝蛋白1 -
微囊介导 VE－Cad 胞吞参与了 LPS 作用后血管通透性增高的形成
目的：观察脂多糖（ lipopolysaccharide，LPS）作用后微囊介导的血管内皮钙黏蛋白（ vascular endo－thelial cadherin，VE－Cad）胞吞，及其在血管通透性增高中的作用。方法：采用人血管内皮细胞株CRL－2922，以及免疫组化、免疫印迹、免疫共沉淀等技术方法，观察LPS处理后不同时点细胞质膜微囊重要结构蛋白小窝蛋白1（caveolin－1， Cav1）的蛋白表达和磷酸化，Cav1与VE－Cad的共沉淀和共定位，以及微囊抑制剂对LPS处理后Cav1与VE－Cad的共沉淀、VE－Cad质膜表达和单层细胞通透性的影响。结果：（1） LPS处理后Cav1蛋白表达无显著变化，但其Tyr14位点的磷酸化水平逐渐增高（P＜0．05），Cav1与VE－Cad的免疫共沉淀逐渐增多（P＜0．05），免疫组化激光共聚焦显微镜观察在4 h时可见明显的共定位；（2）细胞质膜微囊抑制剂非律平（5 mg／L）可以显著减少LPS处理4 h Cav1与VE－Cad的免疫共沉淀（P＜0．05），增强VE－Cad的质膜表达（P＜0．05），改善单层细胞通透性（P＜0．05）。结论：细胞质膜微囊介导VE－Cad胞吞参与了LPS作用后血管通透性增高的形成。
