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菟丝子含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖的效应及机制
目的:探讨菟丝子含药血清体外对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响及机制研究.方法:分离、培养大鼠MSCs,菟丝子含药血清诱导培养MSCs 72h后,MTT法检测大鼠MSCs增殖情况;RT-PCR检测增殖过程中MSCs不同细胞因子mRNA的表达;Real-time PCR检测骨形态蛋白-2(BMP-2)mRNA表达;Westem-blot检测BMP-2蛋白表达.结果:10%菟丝子含药血清具有显著促进MSCs增殖的作用(P<0.05),并显著促进BMP-2 mRNA的表达(JP<0.05).结论:10%菟丝子含药血清促进MSCs增殖的作用,可能与其促进BMP-2mRNA表达有关.
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珊瑚用以骨缺损修复的研究进展
珊瑚大量存在于自然界中,因具有疏松多孔的三维空间结构,且具有良好的生物相容性、无免疫原性、无毒副作用,基于以上特性,现已被用以作为骨缺损填充材料的研究,并已取得大量成果,现将该领域的研究作一综述.
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骨形态发生蛋白/碱性成纤维细胞生长因子复合材料修复关节软骨缺损的实验研究
目的探讨骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)复合材料在关节软骨缺损修复过程中的作用,为内源性修复关节软骨缺损提供实验基础.方法选用兔作为实验动物造成双侧股骨髁间窝全层软骨缺损,分别采用不同的材料(rhBMP2/PVP组、bFGF/PVP组、rhBMP2/bFGF/PVP组、PVP组)进行缺损修复,光镜及电镜下观察修复效果.结果术后8周rhBMP2/bFGF/PVP组软骨缺损已基本修复,12周时软骨修复更加光滑、完整.其余组软骨缺损修复效果不如rhBMP2/bFGF/PVP组.结论 BMP具有诱导形成软骨的活性,与bFGF的复合物能增强软骨细胞增生,较单独应用BMP效果好,是生物学修复关节软骨缺损的良好材料.
关键词： 关节软骨 骨形态蛋白 碱性成纤维细胞生长因子 软骨缺损 -
白藜芦醇抑制血管平滑肌细胞成骨样转化的实验研究
目的 研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对血管钙化的抑制作用,观察不同浓度的Res对高钙高磷诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(hVSMC)成骨样转化的影响.方法 体外培养hVSMC细胞,通过形态学和α-SMA标记进行鉴定.用高钙高磷(钙2.5 mmol/L、磷3.0 mmol/L)培养基诱导hVSMC成骨样转化,通过茜红素染色法鉴定成骨样转化.以普通培养hVSMC作为对照组,加高钙高磷为阳性对照组,实验组为阳性对照加不同浓度的Res(5、10、20 μmol/L)干预,培养12d后,检测各组细胞含钙量,实时荧光定量PCR检测hVSMC成骨样转化相关基因骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨形态蛋白(BMP-2)、骨桥蛋白(OPN)的表达水平;Western blotting和免疫荧光标记方法检测BAP、BMP-2、OPN蛋白的表达.结果 与对照组比较,阳性对照组细胞内含钙量明显升高约5倍,α-SMA蛋白表达下降,而成骨样细胞特异性标记BAP、BMP-2、OPN mRNA和蛋白质表达均显著升高(P＜0.01).不同浓度Res干预后后,细胞内含钙量下降,BAP、BMP-2、OPN mRNA水平降低(P＜0.05、0.01);BMP-2及OPN的蛋白表达显著降低(P＜0.01),并与Res浓度呈负相关.结论 hVSMC在高钙高磷条件下发生成骨样转化,而Res抑制此过程的进展并与其浓度呈正相关.
关键词： 白藜芦醇 人脐动脉血管平滑肌细胞 成骨样转化 骨桥蛋白 骨形态蛋白 -
骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术治疗根分叉病变的研究
目的 评价骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术治疗根分叉病变的临床效果.方法 选择30颗Ⅱ～Ⅲ度根分叉病变患牙,其中骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术治疗10颗(BMP组),引导组织再生技术治疗10颗(GTR组),常规牙周翻瓣术治疗10颗(OFD组),作为对照组.术后12周、24周分别观察各组的牙周探诊深度(PPD)、根分叉水平探入深度(HPD)、临床牙周附着丧失(CAL)和龈沟出血指数(SBI)等临床指标变化.用SPSS10.0软件包对相关数据统计学分析.结果 三组术后PPD、HPD、CAL和SBI均有明显减少,BMP组、GTR组与OFD组相比较,减少更为明显,有显著性差异(P＜0.05),BMP组与GTR组相比,PPD和CAL减少更为明显,有显著性差异(P＜0.01),而SBI无显著性差异(P＞0.05).术前与术后X线比较,BMP组可见阴影变小,牙槽骨密度增加更为明显.结论 骨形态蛋白复合物联合GTR技术与传统的GTR术和牙周翻瓣术相比,更能有效减轻牙周炎症、减少牙周袋深度、增加临床牙周附着水平和促进牙周骨组织再生修复的能力.骨形态蛋白复合物联合GTR技术治疗Ⅱ～Ⅲ度根分叉病变可以获得满意的临床效果.
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益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其机理研究
目的:探讨益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其作用机制.方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、PAN模型组、益肾活血方高剂量组(YHF-H)、益肾活血方中剂量组(YHF-M)、益肾活血方低剂量组(YHF-L)、蒙诺治疗组(FP).采用颈静脉注射结合尾静脉加强注射PAN的方法制作肾病模型.PAN首次注射后第5、10、15、20、25和30天测定24 h尿蛋白定量;31 d后处死动物,做血清总蛋白、血清白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等血生化学检查、肾脏组织光学显微镜和电子显微镜检查以及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析各组大鼠肾脏骨形态蛋白及其基因表达的情况.结果:益肾活血方能有效抑制由PAN所诱导的尿蛋白排泄增高、血清蛋白降低和血脂升高,减轻肾小管间质病变、抑制BMPRⅡ和Smad1在肾组织内的表达.结论:益肾活血方对PAN诱导的大鼠肾病综合征有治疗作用,其机制可能与调节骨形态蛋白表达有关.
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幼年血色病的研究进展
幼年血色病是一种常染色体隐性遗传病,以组织铁超载和不可逆的脏器损害为特征.发病主要与血幼素(HJV)基因和铁调素基因突变有关,两种基因突变类型引起的疾病表型有差异,且在合并HFE突变的遗传性血色素沉着症中起修饰作用.肝脏分泌的铁调素是体内铁代谢的主要调节者.近年发现HJV介导的骨形态蛋白(BMP)信号通路是调节铁调素表达和铁代谢的一个重要机制.HJV功能缺乏导致肝细胞BMP信号减弱,引起铁调素表达降低,不能有效调节铁代谢.
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骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨组织骨形态蛋白-2和血清骨钙素表达的影响
目的:研究骨碎补总黄酮对切除卵巢的雌性大鼠血清骨钙素和骨形态蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)在骨组织中表达的影响.方法:取3月龄雌性大鼠30只,随机分成假手术组、给药组和空白对照组.假手术组仅去除卵巢周围脂肪.给药组在去除卵巢后连续15周灌胃给服强骨胶囊,其余给等量自来水.15周后处死所有大鼠,取股骨中段组织.行BMP-2免疫组化染色,镜下观察染色标本摄像并用Image图形分析软件分析各标本阳性表达率.另取大鼠血清以放免法测定其血清骨钙素含量.结果:免疫组化染色后,图片分析显示给药组和假手术组bmp-2阳性率明显高于对照组(p<0.05);给药组和假手术组血清骨钙素的表达明显高于对照组(p<0.05).结论:骨碎补总黄酮对卵巢切除大鼠的BMP-2和血清骨钙素表达有促进作用.
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骨形态蛋白联合引导组织再生技术修复牙周骨缺损
目的:评价骨形态蛋白联合引导组织再生技术修复牙周骨缺损的临床效果.方法:选择30颗牙周骨缺损患牙,其中骨形态蛋白联合引导组织再生技术治疗10颗(BMP组),引导组织再生技术治疗10颗(GTR组),常规牙周翻辨术治疗10颗(OFD组)作为对照组.术后12周、24周分别观察各组的牙周探诊深度(PPD)、临床牙周附着丧失(CAL)和龈沟出血指数(SBI)等临床指标变化.用SPSS10.0软件包对相关数据统计学分析.结果:3组术后PPD、CAL和SBI均有明显减少,BMP组、GTR组与OFD组相比较,减少更为明显,有显著差异(P＜0.05),BMP组与GTR组相比,PPD和CAL减少更为明显,有极显著差异(P＜0.01),而SBI无显著差异(P＞0.05).术前与术后X线比较,BMP组牙槽骨密度增加更为明显.结论:骨形态蛋白联合GTR技术与传统的GTR术和牙周翻辨术相比,更能有效减轻牙周炎症、减少牙周袋深度、增加临床牙周附着水平和促进缺损处骨组织修复.
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人骨肉瘤原代细胞条件培养基中骨形态蛋白(BMP)的实验研究
目的:探索从人骨肉瘤细胞条件培养基中提取骨形态蛋白(BMP)的方法,并测定其生物学活性.方法:收集人骨肉瘤细胞条件培养基,通过浓缩、透析,SephcrylS-100凝胶层析纯化,BMP单克隆抗体鉴定所需洗脱峰,SDS-PAGE测定分子量,小鼠肌袋实验检测其骨诱导活性.结果:BMP单抗鉴定所提蛋白为BMP,SDS-PAGE显示分子量约为21kD,能够在小鼠肌肉内产生异位骨化.结论:人骨肉瘤细胞条件培养基中含有BMP,分离后具有良好的生物学活性,而骨肉瘤细胞可以在体外长期培养生长,为BMP的大量提取、临床应用提供一个有益的方法.
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恒强旋转磁场对骨折愈合过程中骨形态蛋白-2和血小板源性生长因子表达的影响
目的 观察恒强旋转磁场对骨折愈合过程中骨形态蛋白-2(BMP-2)和血小板源性生长因子(PDGFs)在骨折部位不同时间表达的变化,探讨恒强旋转磁场促进骨折愈合的机制.方法 将80只建立股骨闭合性骨折模型的Sprague Dawley(SD)大鼠按随机数字表法分为磁场干预组和对照组,每组40只.磁场干预组大鼠置于0.4T恒强旋转磁场(浙江康尔医疗器械公司)中,磁体旋转频率6 Hz,每日磁场干预1次,每次连续30 min,每周6次;对照组未做任何干预处理.分别于骨折后2、3、4和8周四个观察时间点(每个时间点10只大鼠),观察各组大鼠骨折部位BMP-2、PDGF-A和PDGF-B免疫组化染色阳性表达,并采用Nikon显微成像分析仪(Nikon 50i,日本)拍照(图像放大400倍),用生物图像分析处理软件测量阳性染色区域的积分光密度值(IOD).采用双因素方差分析比较时间、磁场的主效应及二者的交互效应.结果 ①不同时间点各组大鼠骨折部位BMP-2阳性表达的IOD值比较,差异有统计学意义(F=21.58,P＜0.01),多重比较显示,BMP-2阳性染色区域在骨折后2、3和4周时的IOD值均明显高于骨折后8周(P＜0.01),骨折后4周的IOD值亦明显高于骨折后2周(P＜0.01);磁场干预与时间存在有交互作用(F=3.17;P ＜0.05).②磁场干预组与对照组大鼠不同时间点间骨折部位的PDGF-A阳性表达IOD比较,差异有统计学意义(F=28.16,P＜0.01),多重比较显示,骨折后2周骨折部位PDGF-A的阳性表达的IOD值显著高于骨折后3周(P＜0.01)、4周(P＜0.01)和8周(P＜0.01),骨折后3周和4周PDGF-A的阳性表达IOD也显著高于骨折后8周(P＜0.01).③磁场干预组骨折部位的PDGF-B阳性表达IOD值明显高于对照组[磁场干预组(57.6±2.1) vs对照组(50.11±2.22)],差异有统计学意义(F=5.98,P＜0.05);且不同时间点骨折部位PDGF-B阳性表达IOD值比较,差异亦有统计学意义(F=50.06,P＜0.01),多重比较显示,骨折后3周骨折部位PDGF-B阳性表达IOD值显著高于骨折后2周(P＜0.05)、4周(P＜0.01)和8周(P＜0.01),骨折后2周和4周阳性表达IOD值亦显著高于骨折后8周(P＜0.01).结论 恒强旋转磁场可能通过调节骨折部位BMP-2和PDGF-B的表达,促进骨折的修复.
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骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术修复牙周骨缺损的实验研究
目的评价骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术修复牙周骨缺损的效果.方法选择6只新西兰兔,制备下前牙牙周骨缺损模型,将其分为3组:GTR组(牙周骨缺损处植入胶原膜)、BMP组(牙周骨缺损处植入骨形态蛋白复合物和胶原膜)和OFD组(牙周骨缺损处未植入任何物,对照组).术后12周分别观察各组缺损处的组织学变化.结果 BMP组骨缺损处只见少量的软组织,新生骨组织的量及其成熟程度明显优于GTR组和OFD组,显示骨组织修复良好.结论骨形态蛋白复合物联合GTR技术修复牙周骨缺损,与传统的GTR术和牙周翻瓣术相比,更能有效促进牙周骨组织再生与修复.
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Gremlin和BMP7在纤维化疾病中的作用
Gremlin是进化上高度保守的分泌型糖蛋白,属于骨形态蛋白拮抗剂家族成员,在个体胚胎发育过程中肺、肾等器官的形态形成过程中起重要作用,并参与成熟组织器官功能的维持.Gremlin通过与BMP直接结合,阻断BMP与受体结合,而拮抗BMP的生物学活性.TGF-β是目前已知的重要的促纤维形成因子,参与肾、肺、肝、眼、心等组织器官的纤维性病变.BMP7和TGF-β同属于TGF-β超家族成员,两者所介导的信号途径存在交联反应,共同参与调节正常生理活动及某些疾病的发生发展.迄今的研究证明Gremlin和BMP7均与纤维化病变的发生发展有关,且相互间可能存在调控与被调控的机制.
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人工骨骨诱导活性的研究进展
骨诱导活性作用是任何一种骨移植术的主要目的 .目前人工骨已广泛应用于复杂骨损伤的修复治疗,其骨诱导活性是研究的一大热点.本文针对近年来人工骨骨诱导活性的相关研究进展所作综述.
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人骨形态蛋白-3基因真核表达载体(PcDNA3-hBMP3)构建
0 引言人骨形态蛋白-3(hBMP-3)可诱导多种来源的未分化间充质细胞向软骨细胞和成骨细胞转化, 进而形成新骨,而且对软骨细胞也有促进分裂和增殖的作用,促进后者Ⅱ型胶原和氨基多糖(PG)的分泌. 转基因技术和真核表达载体的产生为软骨细胞库建立和开展软骨组织工程提供了新的途径. 本研究通过基因克隆和重组DNA技术将hBMP-3的cDNA构建在真核表达载体PcDNA3上,形成重组真核表达载体PcDNA3-hBMP3,这也是下一步基因转染的前期工作.
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骨形态蛋白与天然生物学材料复合的实验研究
目前在临床应用中大块骨缺损一直以依赖于取患者自体髂骨移植为金标准，理想的骨缺损修复支架材料与天然骨基质的结构、组成成分及生物学反应相似的复合支架材料。笔者对近年来文献报道的骨形态蛋白与天然生物材料衍生物复合包括院骨形态蛋白与胶原衍生物复合分子材料，骨形态蛋白与壳聚糖衍生物的复合材料，骨形态蛋白-2与透明质酸衍生物的复合材料这三大类，一一进行综述。
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骨形态蛋白在慢性腱病发病机制中的作用
慢性腱病又称肌腱过度使用性损伤,是一种常见的临床运动性病变,其发病机制目前仍不清楚.慢性腱病的临床标本及动物模型标本均可观察到成骨、成软骨源性骨形态蛋白(BMPs)如BMP-2、BMP-4、BMP-7的表达,也可观察到导致肌腱愈合失败的软骨样细胞、骨样细胞、脂肪细胞及钙化点,BMPs可能就是导致慢性腱病发病机制中组织化生和其他病理变化的主要原因.该论文总结了目前支持BMPs在慢性腱病发病机制中发挥作用的证据,从BMPs在慢性腱病中异常表达、作用的效应细胞、发病机制中的作用和潜在治疗方法这4个方面分别阐述,以更好地理解BMPs在慢性腱病发病机制中的作用,为慢性腱病退行性病变的干预和治疗提供参考.
