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桂枝汤对高、低体温大鼠下丘脑组织转录因子CREB的影响
目的:探讨体温变化时下丘脑组织中磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)的活性及桂枝汤调节体温作用与此关系.方法:选用前列腺素受体3(EP3)发热大鼠模型及氨基比林低体温大鼠模型,采用比色法测定给予桂枝汤后大鼠下丘脑组织中pCREB活性.结果:两种模型下丘脑组织中pCREB活性均有升高倾向,以发热大鼠明显;给予桂枝汤可使发热大鼠的pCREB活性降低,而低体温大鼠的pCREB活性变化不明显.结论:pCREB参与了大鼠的体温变化过程;桂枝汤的解热作用可能与降低pCREB活性有关;pCREB基本上不参与低体温机制的调节或仅有较弱调节作用,桂枝汤的升温作用与其关系不明显.
关键词： 桂枝汤 大鼠 体温 下丘脑 cAMP反应元件结合蛋白 -
电针对抑郁症模型大鼠脑磷酸化cAMP反应元件结合蛋白表达的影响
目的:研究电针对抑郁症模型大鼠脑磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响.方法:给大鼠施行3w慢性多种应激程序建立抑郁症模型,采用免疫组织化学方法检测大鼠皮质、下丘脑、海马p-CREB表达.结果:在上述相应脑区,抑郁症模型大鼠p-CREB表达降低,电针能缓解模型大鼠抑郁症状,提高大鼠皮质和海马p-CREB表达水平.结论:电针能够对抗抑郁症引起的p-CREB表达降低,这可能与其改善抑郁症状有关.
关键词： 电针 抑郁症 cAMP反应元件结合蛋白 -
糖肝康对糖尿病脂肪肝大鼠肝组织cAMP反应元件结合蛋白表达的影响
目的：观察糖肝康对糖尿病脂肪肝大鼠肝组织cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用链脲佐菌素联合高脂饮食复制糖尿病脂肪肝大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、护肝宁组和糖肝康小、中、大剂量组,每组10只,另取10只正常大鼠作为空白组。各给药组给予相应药物干预,12周后采用Western blot检测大鼠肝组织CREB的表达。结果与空白组比较,模型组肝组织CREB表达明显增高(P＜0.01)；与模型组比较,各给药组肝组织CREB表达明显减少(P＜0.01),糖肝康中、大剂量组优于护肝宁组(P＜0.01)。结论糖肝康可能通过降低CREB表达水平改善肝脏代谢,进而保护肝脏。
关键词： 糖肝康 脂肪肝 糖尿病 cAMP反应元件结合蛋白 大鼠 -
不同配伍柴郁温胆汤对抑郁模型大鼠海马CREB和BDNF表达的影响
目的 观察柴郁温胆汤及其不同配伍组合对抑郁模型大鼠海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠70只,随机分为正常组、模型组、复方组、化痰组、调气血组、养心脾组和马普替林组.除正常组外,各组采用孤养加慢性轻度不可预见性刺激方法建立大鼠抑郁模型,从应激第2天起分别灌胃给药至实验第23天.采用免疫组化法检测大鼠海马CA3区CREB和BDNF的表达. 结果 与正常组相比,模型组大鼠海马CREB和BDNF表达的总面积、阳性细胞数和平均光密度均明显降低(P＜0.01).与模型组相比,复方组、化痰组、马普替林组能够显著上调大鼠海马CREB和BDNF表达(P＜0.05或P＜0.01)；养心脾组能够提升CREB表达的总面积和阳性细胞数(P＜0.05)；调气血组能够提升BDNF表达的平均光密度(P＜0.05). 结论 柴郁温胆汤能够明显上调大鼠海马CREB和BDNF表达,其中以化痰药的配伍组合作用较明显.
关键词： 柴郁温胆汤 抑郁症 cAMP反应元件结合蛋白 脑源性神经营养因子 -
cAMP反应元件结合蛋白(CREB)与细胞凋亡
cAMP反应元件结合蛋白(CREB)是真核细胞内核转录调节因子,受多因素的激活而调控靶基因,调节细胞凋亡.细胞凋亡与机体生长发育、内环境稳定、防御反应等功能相关.
关键词： cAMP反应元件结合蛋白 细胞凋亡 -
外周注射福尔马林诱导大鼠前扣带皮层中ERK-CREB的激活
目的 研究外周福尔马林刺激诱导的大鼠前扣带皮层中细胞外信号调节激酶(ERK)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的激活.方法 大鼠单侧足底皮下注射5%的福尔马林,在刺激后的不同时间点将大鼠进行灌注固定或直接取前扣带皮层组织,用免疫组织化学和Western blotting方法观察前扣带皮层中磷酸化ERK和磷酸化CREB的激活情况.结果 单侧足底皮下注射福尔马林能诱导双侧前扣带皮层中ERK和CREB的磷酸化.磷酸化的ERK和磷酸化CREB的表达高峰分别在刺激后的3min和30min.非磷酸化的CREB和ERK没有显著变化.结论 大鼠前扣带皮层能够接受外周伤害性信息的传入,激活的ERK和CREB可能与疼痛的原发性不愉快有关.
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慢性复合应激对学习记忆的影响及cAMP/PKA-CREB信号通路的作用
目的 探讨慢性复合应激对大鼠学习与记忆的影响和cAMP/PKA-CREB信号系统在此机制中的作用.方法 将成年雄性Wistar大鼠分为对照组:不作任何处理;慢性单一应激组:每天捆绑6 h,持续6周;慢性复合应激组:每天随机暴露于4种应激原中,持续6周.应激结束后,用Morris水迷宫(MWM)测试大鼠空间学习与记忆成绩;免疫组织化学方法观察大鼠海马PKA-Cβ和磷酸化的CREB的表达水平;应用RT-PCR法半定量检测海马组织内BDNF和Bcl-2的mRNAs水平.结果 应激后在MWM寻找平台潜伏期,与对照组(18.9±13.0)s相比,慢性复合应激组(14.2±5.8)s明显缩短(P＜0.05),显示其空间记忆明显增强,而慢性单一应激组(20.4±12.8)s无明显差异(P＞0.05);慢性复合应激组大鼠海马CA1和CA3区PKA-Cβ的表达以及CA1区和齿状回pCREB的表达明显上调(P＜0.05);而慢性单一应激组海马各亚区PKA-Cβ和pCREB的表达无显著性改变(P＞0.05).BDNF和Bcl-2mRNAs的表达水平3组间差别无显著性(P＞0.05).结论 慢性复合应激可增强海马依赖的学习与记忆功能,多元的环境刺激可能是其增强的主要原因.PKA-CREB信号通路在其影响机制中发挥了一定的作用.
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降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑cAMP反应元件结合蛋白mRNA表达的影响
目的 探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的影响.方法 用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用原位杂交和图像分析技术检测大鼠缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA表达.结果 假手术组右侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA有明显表达,缺血再灌注组右侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA阳性产物吸光度值减少,CGRP组缺血侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA表达的吸光度值比缺血再灌注组增高(P＜0.05).结论 CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质CREB mRNA的表达,CGRP对缺血神经元的保护作用可能通过激活CREB的转录与翻译,从而启动一系列信号通路来实现.
关键词： 脑缺血 降钙素基因相关肽 cAMP反应元件结合蛋白 原位杂交 大鼠 -
cAMP反应元件结合蛋白:抗抑郁药信号转导通路的交汇点
本文综述了参与抑郁症和抗抑郁药作用的三条信号转导通路:环磷酸腺苷(cAMP)通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路、钙调蛋白激酶(CaMK)通路,以及cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, CREB)作为上述通路交汇点的研究进展,并探讨了新型抗抑郁药的可能作用靶点.
关键词： 抑郁症 信号转导 cAMP反应元件结合蛋白 -
卒中后认知障碍小鼠胆碱能神经环路组蛋白乙酰化内稳态失衡的机制研究
目的：观察卒中后认知障碍小鼠胆碱能神经环路组蛋白乙酰化内稳态变化。方法选用清洁级ICR雄性小鼠分为假手术组(n=60)和卒中后认知障碍组(PSCI组，n=60)。采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。水迷宫测试检测小鼠认知功能；分子生物学等方法检测小鼠梗死对侧胆碱能神经环路功能和组蛋白乙酰化内稳态变化情况。结果与假手术组相比，PSCI组水迷宫成绩下降(t>29.412, P<0.05)；中枢胆碱能神经环路中，乙酰胆碱(ACh)的含量降低(t>26.227, P<0.05)，胆碱乙酰基转移酶(ChAT) mRNA和蛋白的表达降低(t>28.593, P<0.05)，乙酰化组蛋白H3(Ac-H3)水平降低(t>24.126, P<0.05)，磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)和CREB结合蛋白(CBP)表达降低(t>25.634, P<0.05)，ChAT基因M型启动子组蛋白乙酰化水平下降(t>24.704, P<0.05)。结论短暂性MCAO模型可以引起小鼠认知功能障碍。PSCI小鼠中枢胆碱能神经环路的胆碱能系统功能受损，乙酰化内稳态失衡，ChAT基因启动子组蛋白乙酰化程度下降；这些很可能与脑卒中导致环路中相应脑区中p-CREB和CBP表达降低有关。
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8Hz 90dB次声作用对大鼠海马蛋白激酶A表达及cAMP反应元件结合蛋白磷酸化水平的影响
目的:观察8Hz 90dB次声作用对大鼠海马PKA表达及CREB磷酸化水平的影响.方法:采用免疫组织化学方法,观察8Hz 90dB次声作用不同时间点大鼠海马PKA表达及p-CREB-1(Ser-133)磷酸化水平.结果:8Hz 90dB次声作用后,大鼠海马CA1区各时间点PKA表达均上调,相应时间点CREB磷酸化水平亦上调,两者之间的变化呈显著正相关.CA3区除7d组PKA表达上调、CREB磷酸化水平亦上调外,两者之间总变化趋势为显著负相关.DG各时间点PKA表达与CREB磷酸化水平变化之间无显著相关性.结论:8Hz 90dB次声作用对大鼠海马各区PKA表达及CREB磷酸化水平均有不同程度的影响,提示次声对学习记忆功能影响的机制可能涉及对cAMP浓度增高→PKA激活→CREB磷酸化→CRE依赖性转录这一分子链产生了干扰作用.
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鞘内注射AIP对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及脊髓背角神经元磷酸化CREB的影响
目的:探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMK Ⅱ)在神经病理性疼痛中的作用.方法:坐骨神经选择性损伤(SNI)大鼠模型,随机分为4组(n=8):SNI组,Sham组,NS组,AIP组,后两组分别于术前20 min鞘内注射10μl的生理盐水或10%的AIP.于术后1d、2d、3d、4d、6d、8d、10d、14d测定大鼠机械缩足反射阈值(mechanical with-drawal threshold,MWT).分别于术后1d、3d、7d取大鼠脊髓腰段,用免疫组织化学法(n=6)检测脊髓背角磷酸化pCaMKⅡ的表达;Western blot法(n=4)检测脊髓背角神经元细胞核内pCREB的表达.结果:术后1～3d AlP组大鼠MWT较NS组明显升高(P<0.01);术前鞘内注射AIP在术后1d、3d能够使脊髓背角pCaMKⅡ的表达减少,同时脊髓背角神经元细胞核内pCREB的表达也明显减少.结论:CaMK Ⅱ参与了神经病理性痛的形成,其作用部分通过CREB介导.
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心肌细胞核钙调素Ⅰ和CREB磷酸化在压力负荷大鼠心肌肥厚中的作用
目的探讨钙调素Ⅰ(CaM Ⅰ)及核转录因子CREB磷酸化在压力超负荷大鼠心肌肥厚中的作用.方法100只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(n=50)和心肌肥厚组(n=50),制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型,模型复制成功后4周,以改良差速离心和密度梯度离心法提纯细胞核,以蛋白印迹法测定心肌细胞核CREB及磷酸化CREB(pCREB)表达,免疫组化法观察左室心肌组织CaMⅠ蛋白表达及分布,延续转录分析法观察阻断CaM后心肌细胞核c-fos mRNA的变化.结果与对照组比较,心肌肥厚组pCREB蛋白光密度明显增加(104.71 vs 75.29,P＜0.05),CREB蛋白光密度无明显变化(128.43vs 113.86,P＞0.05);CaMⅠ分布于细胞核及细胞浆,心肌肥厚组CaMⅠ蛋白表达较对照组明显增加(21.64 vs 17.24,P＜0.05);使用CaM抑制剂后心肌肥厚组心肌细胞核c-fos mRNA表达明显降低(144.6 vs 54.1,P＜0.05).结论压力超负荷时心肌细胞核内CaMⅠ蛋白表达增加,可能通过增加核转录因子CREB磷酸化,上调早期基因c-fos表达参与心肌肥厚的发生.
关键词： 左心室肥厚 钙调素 cAMP反应元件结合蛋白 c-fos -
cAMP反应元件结合蛋白在2型糖尿病大鼠肝脏的表达与意义
目的 探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)及磷酸化的CREB(p-CREB)在2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏的表达及其意义. 方法 健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组和T2DM组.以高脂高糖喂养加小剂量STZ腹腔注射法制备T2DM大鼠模型.免疫组织化学和Western 印迹法检测两组大鼠肝组织CREB及p-CREB蛋白的表达. 结果 与正常大鼠相比,T2DM大鼠肝脏p-CREB表达明显增高(P<0.01),血糖、血脂、肝TG、肝TC均与p-CREB相关;多因素逐步回归显示p-CREB与血糖独立相关. 结论 T2DM大鼠肝脏p-CREB表达明显增强,CREB活性变化可能与糖脂代谢紊乱密切相关.
关键词： cAMP反应元件结合蛋白 肝脏 糖尿病 2型 -
激活转录因子4协同核因子相关因子-2调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基的表达对支气管哮喘豚鼠的影响
支气管哮喘(简称哮喘)是一种气道慢性炎症性疾病.氧化应激在诱导气道炎症及其发展中起关键作用.核因子相关因子-2( NF-E2-related factor 2,Nrf2)是一种对氧化还原敏感的转录因子,调节肺部几乎所有相关抗氧化基因,如γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基(γ-glutamylcysteine synthetase catalytic subunit,γ-GCSc),发挥重要的抗氧化作用[1].激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)属于具有碱性亮氨酸拉链结构(basic leucine zipper,bZIP)的cAMP反应元件结合蛋白(CAMP-responsive element binding protein,CREB)家族中的转录因子.氧化应激时,ATF4能与Nrf2结合形成异二聚体,调控Nrf2及其靶基因γ-GCSc表达[2].本研究中通过观察哮喘急性发作期豚鼠肺组织中ATF4、Nrf2、γ-GCSc的表达变化,探讨其在哮喘发病及防治中的作用.
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高表达GPX1对阿尔茨海默病细胞模型内P-CREB水平的影响
目的 探讨细胞内高表达谷胱甘肽过氧化物酶(GPX1)能否提高阿尔茨海默病(AD)细胞模型中cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化水平.方法 采用MTT法确定G418的筛选浓度,采用目的质粒与绿色荧光蛋白质粒共转染的方式将GPX1重组质粒和pLNCX空载体质粒转染至PC12细胞,以G418筛选浓度筛选出成功转染进GPX1重组质粒和pLNCX空载体质粒的细胞；采用MTT法确定β淀粉样蛋白(Aβ25-35)的佳诱导浓度,建立AD细胞模型；以佳Aβ25-35浓度分别诱导转染GPX1重组质粒组和转染pLNCX空载体质粒组细胞48 h,采用免疫细胞化学方法检测诱导前后各组细胞内P-CREB的水平.结果 在佳Aβ25-35浓度诱导转染GPX1重组质粒组和转染pLNCX空载体质粒组前,两组细胞内的P-CREB水平无统计学差异(P＞0.05)；诱导48 h后,两组细胞内P-CREB水平均显著降低(P＜0.01),但转染GPX1重组质粒组细胞内的P-CREB水平仍明显高于转染pLNCX空载体质粒组的水平(P＜0.01).结论 Aβ25-35可导致细胞内P-CREB 水平降低,转染GPX1重组质粒可在一定程度上逆转Aβ25-35所致的P-CREB水平降低.
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吗啡依赖大鼠血液淋巴细胞CREB的磷酸化和胞浆内钙的反应性改变
目的研究吗啡依赖大鼠外周血淋巴细胞内信号传递的改变 . 方法大鼠经慢性吗啡处理后突然停药或注射纳洛酮催瘾 ,分离外周血淋巴细胞,流式细胞术观察淋巴细胞的磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosph o-CREB)免疫阳性反应,测定Fura-2/AM负载的单个淋巴细胞内胞浆游离钙([Ca2+ ]i). 结果慢性吗啡处理10 d的大鼠和经纳洛酮催瘾的大鼠外周血淋巴细胞的磷酸化CREB(Ser133)免疫阳性反应较对照组明显升高,自然戒断即停用吗啡6 d后磷酸化CREB免疫阳性反应接近对照水平.慢性吗啡处理还使部分淋巴细胞在纳洛酮刺激下胞浆内游离钙明显下降. 结论吗啡成瘾及戒断反应直接影响大鼠外周血淋巴细胞核内磷酸化CREB免疫阳性反应和胞浆内钙信号的变化.
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迷走神经电刺激对大脑中动脉阻断/再灌注大鼠脑损伤及脑组织中p-CREB表达的影响
目的 研究迷走神经电刺激(VNS)对大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)/再灌注大鼠脑损伤的影响及其机制.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,随机分为两组:MCAO/再灌注组(MCAO组,n=12)大鼠仅行MCAO/再灌注,MCAO/再灌注+VNS组(MCAO+VNS组,n=12)大鼠在接受MCAO/再灌注的同时行右侧颈部迷走神经电刺激.两组大鼠均在再灌注24h后采用Zea Longa评分法行神经功能评分,通过TTC实验检测脑梗死区体积,TUNEL法检测脑损伤区细胞凋亡情况,Western blotting检测脑损伤区组织中cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(p-CREB)的表达,免疫组化染色检测脑损伤区细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 与MCAO组相比,MCAO+VNS组大鼠神经功能改善(P<0.01),脑梗死体积减少(P<0.01),脑组织细胞凋亡减少(P<0.01);MCAO+VNS组大鼠脑梗死区组织中p-CREB蛋白表达(P<0.01)和Bcl-2的阳性细胞数量增加(P<0.01),Bax阳性细胞数量减少(P<0.01),但CREB蛋白表达量无明显差异(P>0.05).结论 VNS可显著改善MCAO/再灌注大鼠神经功能,降低脑梗死体积,其机制可能与提高p-CREB蛋白表达有关.
关键词： 迷走神经电刺激 cAMP反应元件结合蛋白 大脑中动脉阻断 细胞凋亡 -
小强度跑台运动对阿尔茨海默病转基因小鼠海马BDNF/ERK/CREB基因和蛋白表达的影响
目的:探讨小强度跑台运动对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)转基因小鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK) 1/2和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)蛋白及基因表达的影响.方法:实验动物分为野生型小鼠对照组(WtC)、野生型小鼠运动组(WtE)、转基因小鼠对照组(TgC)、转基因小鼠运动组(TgE).运动组小鼠进行5个月小强度跑台训练,每天以5m/min的速度开始运动5 min,后以8m/min的速度持续运动5 min,后以11 m/min的速度持续运动20 min,共运动30 min.运动训练结束后,检测各组小鼠海马BDNF、ERK1/2和CREB蛋白及基因表达情况.结果:与WtC组比较,TgC组小鼠海马组织中BDNF基因和蛋白表达明显增加(P＜0.05).TgE组小鼠海马BDNF基因和蛋白表达水平明显低于TgC组(P＜0.05);TgC组ERK1/2基因和蛋白表达水平明显高于WtC组(P＜0.05),但磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达明显低于WtC组(P＜0.05),TgE组ERK1/2基因和蛋白表达水平明显低于TgC组(P＜0.05),p-ERK1/2蛋白表达TgE组明显高于TgC组(P＜0.05);CREB基因和蛋白表达与ERK1/2基因和蛋白表达趋势一致,TgC组明显高于WtC组(P＜0.05),磷酸化CREB(P-CREB)蛋白表达TgC组明显低于WtC组(P＜0.05),TgE组CREB基因和蛋白表达水平明显低于TgC组(P＜0.05),P-CREB蛋白表达TgE组明显高于TgC组(P＜0.05).结论:长期小强度跑台运动减少APP/PS1转基因小鼠BDNF代偿性合成增加.ERK/CREB参与调节跑台运动对APP/PS1转基因小鼠学习和记忆损害的保护作用.
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运动通过调控CREB促进成年神经发生
成年脑内神经发生对维持神经元功能的稳定以及脑功能健康具有重要意义,其分子发生及信号调控机制非常复杂.其中,cAMP反应元件结合蛋白(cyclic-AMP response binding protein,CREB)是这一过程中各种调控通路的汇集点.成年神经发生过程一直伴随着CREB磷酸化,CREB通过整合各信号刺激,在精确调控成年神经发生中起极其重要的作用.自主运动及被动运动均能促进成年海马齿状回神经发生,改善由年龄增加及阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)等疾病引起的神经发生水平的下降,但其机制尚不清楚.本文从各种信号通路对CREB磷酸化水平调控、共激活因子对CREB转录水平调控、DNA甲基化及miRNA对CREB目的基因调控等不同角度,概述运动如何通过CREB来调节神经发生,在分子水平上为运动促进成年脑内神经发生提供理论依据.
关键词： 运动 神经发生 cAMP反应元件结合蛋白 共激活因子 表观遗传修饰
