121 第一届食品质量和安全泛欧会议纪要 食源性疾病在欧洲增加——FAO／WHO建议对消费者提供更好的保护

因为食源性疾病在过去10年中明显增多，整个欧洲国家的食品安全和质量需要改善，联合国粮农组织(PAO)和世界卫生组织(WHO)于2002年2月25日在布达佩斯签署了一项联合声明。根据这两个联合国机构的报道，微生物(例如沙门菌和弯曲菌)和化学……

114零售生肉和鸡肉中多种弯曲菌污染

感染性腹泻患者弯曲菌感染的实验室检测及监测

目的 了解我国腹泻患者弯曲菌的感染现状.方法 采用体外分离培养以及特异核苷酸检测法对某医院腹泻患者粪便标本进行持续8个月的弯曲菌感染的监测.2013年4-11月持续收集北京某医院感染性腹泻门诊患者粪便标本278份,分别采用直接划线培养、增菌培养以及实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)的方法检测感染性腹泻患者弯曲菌的感染现状.结果 278份感染性腹泻患者粪便标本使用分离培养和特异核苷酸检测共有16份标本为空肠弯曲菌阳性.其中直接划线培养分离到6株空肠弯曲菌,阳性率为2.2％ (6/278),增菌培养分离到2株空肠弯曲菌,阳性率为0.7％(2/278);特异核苷酸检测获得14份阳性标本,阳性率为5.0％(14/278).分离培养、real-time PCR方法检测感染性腹泻患者粪便标本中弯曲菌的阳性率差异有统计学意义(x2=36.425,P=0.039).结论 本次检测结果表明感染性腹泻患者中弯曲菌的检出率显著低于国内新报道7.1％.与直接分离培养相比,增菌培养法检测粪便中弯曲菌的灵敏度显著降低.real-time PCR法能够快速检测腹泻患者弯曲菌的感染情况,其灵敏度(14/16,87.5％)高于分离培养(6/16,37.5％).

我国607株不同宿主来源弯曲菌耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3分布分析

目的 了解不同宿主来源弯曲菌对氨基糖苷类抗生素的耐药现状,确定耐药菌株中氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3的分布,并初步了解耐药菌株的菌型特征.方法 利用琼脂稀释法分析不同宿主来源菌株针对链霉素小抑菌浓度(MIC),对耐药的221株菌通过聚合酶链反应筛查氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3的分布情况.选取不同来源共100株耐药菌株进行多位点序列分型分析并进行聚类分析,获得耐药菌株的菌型特征及遗传相关性.结果 607株弯曲菌中共筛查到221株(36.41％)链霉素耐药株(MIC≥4 μg/ml),其中腹泻患者来源菌株耐药率33.33％ (78/234)、鸡来源菌株耐药率35.14％(123/350)、猪来源菌株耐药率86.96％(20/23).空肠弯曲菌耐药率14.37％(51/355),结肠弯曲菌耐药率67.46％(170/252).24株(10.86％)链霉素耐药弯曲菌中筛查到aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇,分别来自腹泻患者14株、鸡4株、猪6株.100株耐药菌株共分为58种ST序列型.结论 结肠弯曲菌链霉素耐药率明显高于空肠弯曲菌,猪源弯曲菌耐药率显著高于人源和鸡源,空肠弯曲菌与结肠弯曲菌中均筛查到aadE-sat4-aphA 3耐药基因簇.

北京市顺义区370份腹泻病例中弯曲菌监测结果

目的 了解北京市顺义区弯曲菌发病情况及流行特征,为制定有效防控措施提供依据.方法 对采集临床腹泻粪便标本进行病原体分离与鉴定,对弯曲菌流行特征进行分析.结果 腹泻粪便标本中弯曲菌阳性检出率7.03％ (26/370);26个感染病例中男性19例,女性7例;15 ～40岁患者16例,在年龄分布中构成比高;17例患者被诊断为急性胃肠炎,5例诊断为感染性腹泻,4例诊断为细菌性痢疾;病例临床症状出现频数为,腹泻26例,腹痛17例,脱水12例,发热8例,呕吐2例;可疑食品中水果蔬菜构成比高,为38.46％.结论 建立和完善弯曲菌监测体系应成为中国腹泻监测的重要内容

北京部分市售整鸡中沙门菌和弯曲菌协同定量污染研究

目的 对2013年北京部分市售整鸡样品中沙门菌和弯曲菌的定量污染水平、沙门菌血清型和弯曲菌种水平分布进行研究.方法 2013年5-7月采集北京市售整鸡样品33份,进行样品中沙门菌和弯曲菌的定量检测,并分别对沙门菌和弯曲菌进行血清分型和种水平鉴定.结果 19个样品检出沙门菌,检出率为57.6％;5个样品检出弯曲菌,检出率为15.2％;阳性样品中沙门菌和弯曲菌平均污染水平分别为119.4 MPN/100g和58.6 CFU/g.分离出的166株沙门菌被鉴定为14种血清型,常见的为肠炎沙门菌,其次为印第安纳沙门菌.从同一样品中分离到共11种2个以上不同血清型组合的沙门菌,常见的血清型组合为肠炎-印第安纳沙门菌.结论 2013年5-7月北京部分市售整鸡中沙门菌污染率较高、污染水平严重、血清型复杂.

石家庄市肉鸡屠宰和市售环节弯曲菌污染状况及耐药分析

目的 了解石家庄市肉鸡屠宰和市售环节中弯曲菌的污染状况及对12种抗生素的耐药谱和耐药特征.方法 采集屠宰前肉鸡肛拭子、鸡酮体涂抹拭子标本和市售鸡肉、鸡肝脏样品,参照GB 4789.9-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》和多重聚合酶链式反应(PCR)方法进行弯曲菌的分离和鉴定,用K-B纸片法对分离弯曲菌进行6类12种抗生素药敏测定.结果 在439份标本/样品中共有17份检出弯曲菌,总检出率为3.9％ (17/439).空肠弯曲菌对萘啶酸、左氧氟沙星、环丙沙星和四环素的耐药率均为85.7％ (6/7),对庆大霉素、链霉素、丁胺卡那、阿奇霉素、氟苯尼考全部敏感.结肠弯曲菌除对阿奇霉素、多西环素、氟苯尼考的耐药率小于50.0％外,对环丙沙星、左氧氟沙星、萘啶酸、庆大霉素、丁胺卡那、四环素、链霉素、克林霉素的耐药率均高于80.0％.17株弯曲菌多重耐药率为70.6％ (12/17),呈11种耐药谱型,市售环节分离株耐药谱型多于屠宰环节分离株,并具有各自不同的优势耐药谱型.结论 石家庄市肉鸡屠宰和市售环节均有一定程度的弯曲菌污染,分离株多重耐药情况严重,呈多种耐药谱型.

北京市九城区超市及农贸市场零售整鸡中弯曲菌含量与耐药性分析

目的 调查北京市9个城区超市及农贸市场零售环节整鸡样品中弯曲菌含量及抗生素耐药性情况.方法 于2012年8月至2013年7月,选取北京市9个城区的27个超市和18个农贸市场进行调查,共采集零售整鸡样品240份.用改良Karmali、Preston培养基对样品中弯曲菌数量进行测定,采用革兰染色、乳胶凝集和多重PCR方法分别对样品中的弯曲机进行纯化、分离和类型鉴定,并采用美国农业部弯曲菌定量计数方法,计算样品中弯曲菌含量.采用琼脂稀释法,测定弯曲菌对8种抗生素的低抑菌浓度(MIC).结果 弯曲菌检出率为26.3％(63/240),共计检出弯曲菌151株,其中空肠弯曲菌85株,结肠弯曲菌66株.弯曲菌含量的P25、P50、P75分别为7.5、45.0、350.0 CFU/g.空肠弯曲菌、结肠弯曲菌对抗生素耐药率为:阿奇霉素[AZI,13％(11/85)、82％(54/85)],氯霉素[CHL,33％(28/85)、42％(28/85)],环丙沙星[CIP,95％(81/85)、100％(85/85)],多西环素[DOX,38％ (32/85)、80％(53/85)],红霉素[ERY,12％ (10/85)、82％(54/85)],庆大霉素[GEN,25％(21/85)、68％(45/85)],四环素[TET,67％(57/85)、73％ (62/85)],所有菌株均对美罗培南(MEP)敏感.空肠弯曲菌多重耐药率为55％ (47/85),结肠弯曲菌为86％(57/66)(x2=16.70,P＜0.01).在151株弯曲菌中,共发现21个抗生素耐药谱,其中空肠弯曲菌耐药谱为20个,结肠弯曲菌耐药谱为10个.空肠弯曲菌中,耐药谱CIP-DOX-TET型比例高,为22％(19/85),CIP-TET、CHL-CIP-TET和CHL-CIP-GEN型分别为14％(12/85)、9％(8/85)和7％(6/85).结肠弯曲菌中,耐药谱AZI-CHL-CIP-DOX-ERY-GEN-TET型比例高,为35％ (23/66),AZI-CIP-DOX-ERY-GEN-TET和AZI-CIP-DOX-ERY-TET型分别为21％(14/66)和15％(10/66).结论 北京市9个城区零售整鸡样品弯曲菌检出率和含量较高,尤其以农贸市场现宰杀整鸡样品中弯曲菌含量较多,零售整鸡样品中检出的弯曲菌耐药形势严峻.

不同品系养殖鸡弯曲菌感染调查

目的 了解规模化养殖鸡弯曲菌感染现状. 方法 随机采集北京市某规模化养殖场蛋鸡(养殖时间大于120d)和肉鸡(养殖时间小于42d)肛拭子标本,采用两种分离培养方案(80份蛋鸡和200份肉鸡标本直接经选择性培养基划线培养,150份肉鸡标本经24 h增菌后采用选择性培养基划线培养)进行弯曲菌的微需氧(5％ O2、10％ CO2和85％N2)培养.从肉鸡标本中随机选取50份,提取病原菌DNA,进行弯曲菌荧光定量PCR检测,并对相同培养条件下生长菌落进行质谱鉴定. 结果 80份蛋鸡标本中分离到24株空肠弯曲菌,阳性率为30％;350份肉鸡标本未检测到弯曲菌.通过质谱菌落鉴定,205份标本检测到奇异变形杆菌,检出率为58.6％;145份标本检测到大肠埃希菌,检出率为41.4％.50份肉鸡粪便标本弯曲菌荧光定量PCR检测结果均为阴性,与分离培养结果一致. 结论 北京市规模化养殖蛋鸡弯曲菌感染率较高,饲养时间较短的肉鸡未发现弯曲菌感染.

200株弯曲菌对抗生素敏感性研究

目的了解近几年弯曲菌对抗生素的敏感性.方法采用Kirby-Bauer法,分析200株弯曲菌对30种抗生素做敏感性. 结果 1994～1998年氨基糖苷类、硫霉素、多粘菌素B、克拉霉素、麦迪霉素均无耐药菌;红霉素耐药为1.9%～4.5%,氟喹诺酮类为30.2%～54.5%,且氟喹诺酮类之间有完全性交叉耐药;头孢一、二代无敏感菌株;三代耐药菌多在50%以上.结论红霉素耐药菌5年来相对稳定,仍可作为治疗弯曲菌肠炎的首选药物; 次选氨基糖苷类、克拉霉素、交沙霉素;氟喹诺酮类、头孢类治疗效果差.

感染性腹泻的实验室诊断

感染性腹泻是由于食品和饮水受细菌、病毒和寄生虫污染所致.常见的病原体有:(1)细菌:霍乱弧菌、沙门菌、志贺痢疾杆菌、致病性大肠杆菌、弯曲菌等,属于革兰阴性菌;金黄色葡萄球菌属于革兰阳性菌,李斯特菌为革兰阳性的短小杆菌;(2)病毒:甲、戊型肝炎病毒和轮状病毒等;(3)寄生虫:溶组织阿米巴、蓝氏贾弟鞭毛虫等.

人群CagA阳性幽门螺杆菌感染调查

自1983年Warren及Marshall在人胃粘膜中发现螺状弯曲菌(即幽门螺杆菌,HP)以来,国内外进行了大量临床病理的研究,人们发现HP在人群中发病率很高,流行广泛.幽门螺杆菌与慢性胃炎消化性溃疡,胃癌和粘膜相关性淋巴样组织淋巴瘤密切相关.1996年WHO将其列为一级致癌因子,在我国普通人群中,HP感染率以达50%到60%.根据其CagA蛋白的有无将HP分为两型,I型菌:有CagA,表达CagA蛋白,具有毒素活性.Ⅱ型菌,元CagA,不表达CagA蛋白,无毒素活性.

新疆高寒地区家畜、家禽胆汁与肠内容物中的弯曲菌带菌情况的调查分析

目的 调查高寒地区家畜、家禽胆汁与肠内容物中弯曲菌的分布情况.方法 对12种家畜、家禽胆汁与肠内容物中的弯曲菌进行分离、培养、鉴定,并观察7种家畜、家禽胆汁弯曲菌的存活时间.结果 在1814份家畜、家禽胆汁中发现,猪、牛、马、羊、狗、猫、鸡、鹅、鸭、鹌鹑、鸽子、家兔的胆汁中弯曲菌带菌率分别为6.67%、4.17%、4.94%、3.64%、8.93%、19.05%、6.41%、2 78%、6.48%、24.39%、5.66%、0.体外实验证明,弯曲菌在胆汁中可存活4～7周.结论 高寒地区家畜、家禽肠内容物的带菌率均高于同种家畜、家禽的胆汁带菌率,提示该区家畜、家禽是弯曲菌的重要传染源.

阿奇霉素治疗呼吸道感染30例

阿奇霉素是15元大环内酯类抗生素,本品是通过阻碍细菌转肽过程抑制蛋白质合成达到抑菌作用,抗菌谱与克拉霉素相似,对肺炎支原体作用为本类药物作用强的,对流感杆菌弯曲菌淋球菌作用强,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有很好的抗菌活性,我院自2003年7月至10月用阿奇霉素治疗呼吸道感染30例取得了较好的临床效果,现报告如下.

2002年全国污染物监测网细菌质控检测报告

弯曲菌广泛存在于鸟、禽、狗、牛、猪等动物中.它是人类急性肠炎的重要致病菌之一,食品或饮用水受到该菌的污染可引起人类肠炎的暴发,全国食品污染物监测网拟开展对食品中弯曲菌的监测.为考察各监测点对弯曲菌的检验能力,指导今后的监测工作,确保其准确性,中国CDC营养与食品安全所下发了弯曲菌质控考核样(冻干燥菌种1支).现将本实验室的检测结果报告如下.

上海市2014年腹泻患者弯曲菌分离、毒力基因检测及分子分型结果

[目的] 了解上海市2014年腹泻患者中弯曲菌感染现状,并分析弯曲菌的毒力基因及分子分型特征.[方法] 采用膜过滤法对2014年上海市2 235例腹泻患者肛拭标本进行弯曲菌检测,并用常规生化试验和PCR方法鉴定分离菌株. 采用PCR检测弯曲菌分离株的6种毒力相关基因,包括鞭毛蛋白基因flaA,细胞溶涨毒素cdt基因簇cdtA、cdtB、cdtC,pVir质粒virB同源性基因virB11,外膜蛋白基因cadF. 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对弯曲菌分离株进行分子分型. [结果] 2 235例腹泻患者的肛拭标本中共检出弯曲菌43株,阳性率为1.9%. 其中空肠弯曲菌占95.3%(41/43),结肠弯曲菌占4.7%(2/43). 毒力相关基因检测显示,100.0%(43/43)的弯曲菌菌株flaA基因和cadF基因阳性,93.0%(40/43)的弯曲菌菌株cdtA基因和cdtB基因阳性,88.4%(38/43)的弯曲菌菌株cdtC基因阳性,只有7.0%(3/43)的弯曲菌菌株virB11基因阳性. 43株弯曲菌经PFGE分型,共分为6个聚类. [结论]上海市腹泻患者中分离的弯曲菌普遍存在flaA和cadF基因,cdtA、cdtB、cdtC基因携带率高,virB11携带率略低. 弯曲菌分子分型呈多样化和复杂化特征,其引起的腹泻以散发为主.

PCR-RFLP快速鉴定弯曲菌、弓形菌和螺杆菌

一种快速通过对16S RNA基因限制性片段长度多态性进行分析的鉴定菌种的两步法已建立,并被用于鉴定属于弯曲菌、弓形菌和螺杆菌的分离菌株.有158份标本(26例对照标本和132例临床分离标本)已被成功鉴定.

医学发展的里程碑祝贺Barry Marshall和Robin Warren荣获2005年诺贝尔生理学、医学奖

2005年10月3日瑞典卡罗林斯卡医学院宣布2005年诺贝尔生理学、医学奖的获得者为两位澳大利亚医师Barry Marshall和Robin Warren.他们的重大贡献表现在三个方面[1,2]:其一,从活动性胃炎和消化性溃疡患者的胃黏膜培养和分离出一种革兰阴性弯曲菌,现命名为幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp);其二,将Hp感染与慢性活动性胃炎和消化性溃疡联系起来,提出Hp是这两种疾病的重要病因;第三,1984年Barry Marshall在吞服含大量Hp的溶液后,出现不适症状,在第10天行胃镜检查时发现胃内出现急性炎症,14 d时症状消失,证明了Hp可引起活动性胃炎.

临床血液标本中18株弯曲菌的菌种与特征分析

目的 了解临床血液标本中分离的18株弯曲菌的菌种类型与特征.方法 按常规生化实验、16S rRNA基因和ropB基因测序技术对分离株进行种型鉴定,结合鉴定结果、生长属性和临床资料分析其病原学特征.结果 18株血流感染的病原菌均为革兰阴性逗点样弯曲或螺旋样弯曲的弧形菌.经16S rRNA基因和ropB基因测序分析,共有13株胎儿弯曲菌龟亚种、1株胎儿弯曲菌胎儿亚种,2株空肠弯曲菌空肠亚种,1株大肠弯曲菌和1株海鸥弯曲菌.临床资料显示,弯曲菌血流感染主要对象为新生儿和有基础性疾病患者(如肝炎、糖尿病、高血压),大多不伴随腹泻症状.体外存活实验显示,胎儿弯曲菌相对于空肠弯曲菌、大肠弯曲菌等具有较强的生存能力,其在含血液的血培养瓶中可存活一年以上.结论 胎儿弯曲菌龟亚种可能是我国弯曲菌血流感染的主要菌型.

肉鸡屠宰加工生产链中弯曲菌污染状况及耐药性分析

目的 了解江苏某肉鸡屠宰加工厂不同环节弯曲菌的污染状况及耐药现状.方法 采集屠宰前肉鸡泄殖腔、不同环节鸡酮体以及环境等样品,运用无血弯曲杆菌选择性培养基(modified charcoal-cefoperazone-deoxycholate agar,CCDA)平板法进行分离纯化,PCR鉴定后,采用K-B法测定6大类14种抗生素耐药情况.PCR检测弯曲菌Ⅰ型整合子、四环素耐药基因tet(O)、氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat 4-aphA-3以及弯曲菌gyrA基因第257位碱基的突变情况.结果 细菌分离结果显示170份样品分离到124株弯曲菌(72.95％o).分离株对链霉素、妥布霉素、卡那霉素、环丙沙星、氧氟沙星、萘啶酸、红霉素和四环素耐药率为100％,多重耐药现象普遍,多重耐药率高达100％,其优势耐药谱主要为CTX-CRO-cDA-K-NOR-S-AZM-CIP-TE-NA-E-LEV-ENR-TOB.分离株经PCR扩增未检测到Ⅰ型整合子,所有菌株在gyrA喹诺酮类耐药决定区发生了C-257-T点突变,tet (O)基因和aadE-sat 4-aphA-3检出率分别为100％和90.23％.结论 江苏某肉鸡屠宰加工生产链中弯曲菌污染及耐药情况比较严重,gyrA基因突变、tet (O)基因及aadE-sat 4-a phA-3耐药基因簇的携带,与弯曲菌对喹诺酮类、四环素类和氨基糖苷类耐药密切相关.