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瑞芬太尼和异丙酚对健康志愿者体外静脉血中性粒细胞呼吸爆发的影响
目的 评价瑞芬太尼和异丙酚对健康志愿者体外静脉血中性粒细胞(PMNs)呼吸爆发的影响.方法 健康志愿者12名,年龄20～40岁,体重55～65kg,取肘静脉血5 ml抗凝.采用正交实验设计确立实验因素为瑞芬太尼和异丙酚;实验水平数为5水平,即瑞芬太尼空白对照、溶媒(甘氨酸)对照、瑞芬太尼5、50、500 ng/ml和异丙酚空白对照、溶媒(脂肪乳)对照、异丙酚5、50、500μg/ml,用正交表L25(56),观察药物对静息状态和脂多糖(LPS)激活状态下PMNs呼吸爆发的影响,静息状态的PMNs不用LPS进行刺激,按实验设计方案加入相应药物孵育3 h;激活状态的PMNs根据用药时机分为预防性用药和治疗性用药,预防性用药加入相应药物孵育1 h,再加入LPS(终浓度1μg/ml)孵育2 h;治疗性用药首先加入LPS(终浓度1 μg/ml)孵育1 h,再加入相应药物孵育2 h.结果 瑞芬太尼50 ng/ml可增强静息状态下PMNs的呼吸爆发;各剂量瑞芬太尼治疗性用药均可增强LPS激活状态下PMNs的呼吸爆发(P＜0.05),预防性用药对PMNs的呼吸爆发无影响(P＞0.05).各剂量异丙酚及脂肪乳可降低静息和LPS激活状态下PMNs的呼吸爆发(P＜0.05),但各剂量异丙酚与脂肪乳比较差异无统计学意义(P＞0.05).瑞芬太尼和异丙酚对静息状态下和激活状态下PMNs呼吸爆发的影响没有交互作用.结论 瑞芬太尼对PMNs呼吸爆发的影响可能与PMNs所处的状态、用药剂量及用药时机有关;异丙酚的溶媒可抑制PMNs的呼吸爆发,而异丙酚本身无作用,且这种抑制作用与PMNs所处的状态及用药时机无关;瑞芬太尼和异丙酚对PMNs呼吸爆发的影响没有交互作用.
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罗哌卡因、布比卡因硬膜外麻醉对血小板体内活化状态的影响
罗哌卡因、布比卡因均为长效酰胺类局麻药,在临床上主要用于硬膜外麻醉和术后镇痛[1].关于两药对血小板功能影响的研究多为体外研究[2,3],测定两药对血小板聚集功能的影响,并未检测血小板的体内活化状态,而血小板活化是血栓形成的重要环节,对判断血栓前状态意义重大.本研究旨在探讨罗哌卡因、布比卡因硬膜外麻醉对血小板体内活化状态的影响.
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丙酮酸乙酯预先给药对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响
目的 探讨丙酮酸乙酯预先给药对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠24只,体重250～320 g,3月龄,制备Langendorff主动脉逆行灌注模型.随机分为3组(n=8),对照组(C组):改良的K-H缓冲液持续灌流120 min;缺血再灌注组(IR组)改良的K-H缓冲液平衡灌注30 min后,全心停灌30 min,再灌注60 min;丙酮酸乙酯组(EP组)改良的K-H缓冲液平衡灌注15 min后,再用含2 mmol/L丙酮酸乙酯的改良K-H缓冲液平衡灌注15 min,全心停灌30 min,后用含2 mmol/L丙酮酸乙酯的改良K-H缓冲液再灌注60 min.记录各组平衡灌注15 min(基础值)、再灌注10、30、60 min的左室收缩峰压(LVSP)、左心室内压上升/下降大速率(±dp/dtmax )、冠脉流量(CF),再灌注60 min时测定心肌ATP含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、肌酸激酶(CK)的活性.结果 与C组比较,IR组CF、LVSP、±dp/dtmax、SOD活性、ATP含量降低,MDA含量、CK活性、LDH活性升高(P＜0.05),EP组差异无统计学意义(P＞0.05);与IR组比较,EP组CF、LVSP、±dp/dtmax、SOD活性、ATP含量升高,MDA含量、CK活性、LDH活性降低(P＜0.05).结论 丙酮酸乙酯2 mmol/L预先给药通过提高心肌ATP含量,降低氧化应激反应,可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.
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诺氟沙星制剂体外抑菌实验研究
目的 探究诺氟沙星制剂体外抑菌实验的效果.方法 配置诺氟沙星酸性制剂、碱性制剂、长效制剂,对8种细菌及耐药金黄色葡萄球菌进行抑菌实验.结果 诺碱性和长效制剂抑菌作用相似,均好于酸性制剂.结论 改变诺氟沙星制剂的酸碱度,可能会产生不同的抗菌疗效,为此改变药物pH值,提高疗效,降低耐药性.
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热疗对人肝癌细胞株HepG2生长影响的体外研究
目的:探讨热疗对人肝癌细胞株HepG2生长的影响.方法:人肝癌细胞株HepG2细胞常规方法培养,采用水浴加热法(43.0℃)分别加热0.5h、1h和1.5h.处理后继续培养48h、72h、96h、120h和144h,绘制生长曲线;处理后分别培养0h、3h、6h、12h和24h,倒置显微镜观察细胞的形态变化.结果:随着加热时间的延长HepG2细胞数明显减少(P＜0.05,P＜0.01),细胞的形态也发生明显病理变化.结论:热疗对人肝癌细胞株具有细胞毒性作用,加热时间对癌细胞的生长有重要影响,热疗作为治疗肝癌的一种辅助疗法,值得进一步研究.
关键词： 热疗 人肝癌细胞株HepG2 生长曲线 体外研究 -
ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响
目的利用人胃癌BGC-823细胞体外培养实验,观察不同含量ω-3多不饱和脂肪酸合成的二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoc acid,DHA)对肿瘤细胞凋亡的影响.方法采用MTT法、凋亡形态学检查和流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 30和45 mg/L的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率(P<0.01),透射电镜可见细胞凋亡现象,流式细胞检测bcl-2和Gα基因蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01).结论ω-3多不饱和脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,细胞增殖受到抑制.
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4种室温固化型硬质衬里材料的初期细菌附着
目的了解不同室温固化型硬质衬里材料的细菌附着.方法选择4种临床上常用的室温固化型硬质衬里材料,制成10 mm×10 mm×1 mm大小的试件,分别在灭菌蒸馏水中保存1,10和60天后,放入1×1010/L菌悬液中,观察比较材料的初期细菌附着.结果 4种室温固化型硬质衬里材料的初期细菌附着存在差异,随着试件在水中浸泡时间的延长,其细菌附着量逐渐增多.结论不同室温固化型硬质衬里材料的初期细菌附着存在不同程度的差异.
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国产米诺环素对124株表皮葡萄球菌的体外抗菌活性研究
目的评价国产米诺环素对耐甲氧西林的表皮葡萄球菌(methicillin-resistent Staphylococcus epidermidis, MRSE)和甲氧西林敏感的表皮葡萄球菌(methicillin-sensitive Staphylococcus epidermidis, MSSE)的体外抗菌活性.方法用二倍琼脂稀释法测定43株MRSE和81株MSSE临床菌株的低抑菌浓度,并与惠产米诺环素进行比较.结果国产米诺环素对81株MSSE和43株MRSE的低抑菌浓度90分别为1和2mg/L.结论国产米诺环素对81株MSSE和43株MRSE的抑菌效果均较好,其敏感率均为 100 %.
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脉冲Nd:YAG激光照射后根管充填对根尖微渗漏的影响
目的通过脉冲Nd:YAG激光照射根管内侧壁后根管充填,测量根尖微渗漏,以了解脉冲Nd:YAG激光照射根管内侧壁对根尖微渗漏的影响.方法手用器械根管预备后,将牙标本分为4组,每组10颗.A组为常规治疗组,B、C、D组分别用50mj 10 Hz、100mj10 Hz、150mj10 Hz能量的激光照射根管内侧壁,以染料渗入法测量各组根尖微渗漏值.结果150 mj 10 Hz能量的激光照射根管内侧壁后,能有效减少根尖微渗漏.结论手用器械根管预备后,适当能量的脉冲Nd:YAG激光照射根管内侧壁能有效减少根尖微渗漏.
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条件培养液对脐血 CD+34 细胞扩增效应的实验研究
目的探讨并分析不同条件培养液对脐血CD+34 细胞的体外扩增效应及影响因素.方法利用4种条件培养液(胎儿肌肉、胎盘组织、外周血、脐血单个核细胞)对脐血CD+34 细胞进行2周的体外扩增,并和三细胞因子组合:干细胞因子(stem cell factor, SCF)、血小板生成素(thrombopoietin, TPO)、flt-3配基(flt-3 ligand, FL),对脐血CD+34 细胞扩增结果进行了比较;利用ELISA方法检测4种条件培养液中细胞因子[白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、FL、TPO]的浓度.结果脐血单个核细胞条件培养液及细胞因子组合对脐血CD+34 细胞均有明显的扩增效应,脐血组优于细胞因子组合;4种条件培养液中,脐血组细胞因子FL的含量明显高于其余条件培养液组.结论脐血条件培养液可作为体外培养扩增脐血CD+34 细胞有效而廉价的扩增剂;细胞因子FL可能是造成不同条件培养液对脐血CD+34 细胞体外扩增结果差异的主要因素.
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得力生联合化疗的体外抗癌活性
化疗是肿瘤治疗的重要手段之一,为提高疗效,减少毒性,目前多采用联合化疗.得力生注射液是主要用于抗肿瘤的中药制剂,由红参、黄芪、生蟾酥、生斑蝥提取制备而成.为考察得力生注射液与其他常用抗肿瘤药的联合抗癌活性,本文采用MTT法测定得力生注射液与其他5种常用抗肿瘤药的联合抗癌活性.
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人晶状体上皮细胞体外培养
白内障囊外摘除术后的远期并发症主要是后囊混浊，是导致视力下降的主要原因，其发生率可达50％。现已明确后囊混浊发生的主要原因是由于残留的晶状体上皮细胞增生，并向后迁移所致。因此，抑制晶状体上皮细胞的增生，对于减少后囊混浊的发生十分重要。筛选有效的适合于临床应用的药物，需要在体外培养晶状体上皮细胞进行。由于晶状体材料组织块小，且无色透明，上皮细胞的体外培养具有一定的难度。为此，作者进行人晶状体上皮细胞体外培养实验，并对材料的处理和细胞培养条件进行了探讨。
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孕激素对宫颈癌细胞株HeLa细胞体外生长的影响
宫颈癌是严重威胁广大妇女生命与健康的恶性肿瘤,且发病年龄趋于年轻化.手术和放疗可能使患者丧失或降低卵巢功能,使年轻患者术后生存质量下降.有报道,激素治疗对子宫内膜癌、卵巢癌均有一定疗效.本研究采用多种检测方法观察不同量浓度孕激素(progesterone)在体外对宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖、凋亡的影响,为临床宫颈癌患者的激素治疗提供理论依据,现报告如下.
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胃癌肿瘤细胞与外周血淋巴细胞体外药敏试验的相关性研究
恶性肿瘤具有异质性,同种类型肿瘤的不同患者,甚至同一患者不同的疾病阶段,化疗效果差异很大,故个体化化疗在肿瘤治疗领域已达成共识.但是由于相当一部分患者治疗时无法获取肿瘤组织,寻找其他能够代替肿瘤细胞进行抗癌药物敏感试验的试验材料同样是肿瘤研究工作者面临的重要课题.作者尝试将胃癌患者新鲜肿瘤组织与外周血采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2, 5- diphenyltetrazolium bromide,MTT]法进行体外抗癌药物敏感性的筛选,现报告如下.
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环孢素在体外对再生障碍性贫血的干预作用
目的:观察环孢素(CsA)在体外对再生障碍性贫血(AA)的粒/巨噬系祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(CFU-E)的作用,为临床应用提供实验依据.方法:采用RPMI1640琼脂和McCoy's5A甲基纤维素半固体平皿法,观察了CsA在体外对54例AA患者CFU-GM和CFU-E的影响,并以30例正常人作对照.结果:①AA患者的CFU-GM、CFU-E较对照组明显减低(P＜0.01).②CsA能明显促进AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖,这种促增殖作用随CsA剂量增加而增加.③重型AA患者CFU-GM和CFU-E对CsA的有效率较慢性AA高.④CFU-GM和CFU-E值中、重度减低的AA患者对CsA的有效率较无CFU-GM和CFU-E生长的AA患者高.结论:CsA在体外可促进部分AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖,故可作为治疗AA的一种有效方法.
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人胚胎干细胞分化研究进展
胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ES细胞)是由着床前囊胚期内细胞团(Inner Cell Mass,ICM)或早期胚胎原始生殖嵴的胚胎生殖细胞(Primordial Germ Cells,PGCs)建立的、可在体外未分化状态下长期增殖传代的、具有稳定的二倍体核型和多能干细胞表面特异抗原标记的、可分化为3个胚层来源的各种组织和细胞类型(包括生殖腺和生殖细胞)的永久细胞系.基于其特性,目前普遍认为,.ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育,新基因的发现,药物的筛选和致畸实验及作为细胞组织移植治疗,克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响.本文综述了人胚胎干细胞诱导分化研究进展.
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透明质酸对体外培养的大骨节病和骨关节炎软骨细胞透明质酸合成酶2 mRNA表达的影响
目的：对体外培养的人大骨节病和骨关节炎软骨细胞添加不同剂量透明质酸，观察干预前后软骨细胞透明质酸合成酶2（HAS2）mRNA的变化。方法选取2006年8月-2008年7月陕西地方病研究所明确诊断大骨节病，并实施膝关节游离体摘除术后取出游离体及关节软骨6例为大骨节病组；西安市红十字会医院明确诊断骨关节炎，并行全膝关节置换术后的膝关节软骨6例为骨关节炎组；另选择同时期由于意外车祸等原因截肢或身亡者的新鲜膝关节软骨6例为对照组。对3组软骨细胞采用不同剂量的透明质酸进行干预，分为0μg/ml（H0）、100μg/ml（H100）、500μg/ml（H500），通过RT-PCR法观察透明质酸对3组软骨细胞HAS2mRNA表达的影响。结果干预前3组HAS2mRNA表达比较，差异有统计学意义（P<0.05）；其中骨关节炎组较对照组降低（P<0.05）。干预后3组不同剂量间HAS2mRNA表达比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论退变的大骨节病和骨关节炎软骨细胞合成透明质酸能力下降；应用外源性透明质酸后，有增加软骨细胞自身透明质酸合成的趋势，为透明质酸关节腔注射治疗大骨节病及骨关节炎提供了理论基础。
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中药 QHF 复方对人乳腺癌 MCF -7细胞的体外抗癌效果研究
目的：研究中药 QHF 复方对人乳腺癌 MCF -7细胞的体外抗癌效果。方法人乳腺癌 MCF -7细胞，华蟾素：人参皂苷 Rg3：三七总皂苷：香菇多糖=57：1：0.4：7的比例配制中药 QHF 复方，配成5个浓度：QHF1、QHF2、QHF3、QHF4和 QHF5。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT 法）检测细胞抑制率、流式细胞仪检测细胞周期、酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法检测细胞上清液中血管内皮生长因子（VEGF）含量、Transwell 实验定量观察细胞迁移和侵袭能力。结果 MTT 实验结果显示：不同浓度的 QHF 作用于 MCF -7细胞24、48、72 h 后，随着 QHF 浓度的增加，抑制率不断增加（P <0.01）；且随着时间延长，药物对细胞的抑制率逐渐增加（P <0.01）。24、48、72 h 的中药 QHF 复方 IC50值对应华蟾素浓度分别为214.3、44.8、2.8μl。作用48 h 后，与正常对照组比较，QHF 复方组、盐酸多柔比星组、联合用药组细胞周期位于 G0/ G1期和 S 期的比例增多，位于 G2/ M 期的比例减少（P <0.05）；与联合用药组比较，QHF 复方组、盐酸多柔比星组细胞周期位于 G0/ G1期的比例减少，位于 S 期和 G2/ M 期的比例增多（P<0.05）。ELISA 结果显示：作用48 h 后，与正常对照组比较，QHF1组、QHF2组、QHF3组、QHF4组和 QHF5组上清液中 VEGF 含量均下降（P <0.05）。Transwell 实验结果显示：与正常对照组（127.3±5.7）比较，QHF3组（17.7±5.0）、QHF4组（51.3±2.9）和 QHF5组（63.0±6.6）穿透滤膜的 MCF -7细胞数目减少（P <0.01）。结论中药 QHF 复方在体外可抑制人乳腺癌 MCF -7细胞的增殖和迁移、侵袭能力，并能下调 VEGF 的表达。
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黄芪、丹参酮ⅡA 和5－氟尿嘧啶单用及联合应用对人宫颈癌 HeLa 细胞的体外作用研究
目的：检测黄芪、丹参酮ⅡA、5－氟尿嘧啶（5-FU）单用及联合应用对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其抗肿瘤机制，探讨黄芪、丹参酮ⅡA在宫颈癌治疗中的应用价值。方法2014年3—12月选取人宫颈癌HeLa细胞，分为6组，包括对照组、黄芪组、丹参酮ⅡA组、5-FU组、黄芪＋丹参酮ⅡA组、黄芪＋丹参酮ⅡA＋5-FU组，每组分别加入不同浓度的药物进行处理。应用四甲基偶氮唑盐比色法（ MTT法）和流式细胞术检测人宫颈癌HeLa细胞生长抑制率及细胞凋亡率，检测氧化应激因子丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）活力。结果4.0 g／ml黄芪、8.0μg／ml丹参酮ⅡA、50.0 mg／L 5-FU、4.0 g／ml黄芪＋8.0μg／ml丹参酮ⅡA、4.0 g／ml黄芪＋8.0μg／ml丹参酮ⅡA＋50.0 mg／L 5-FU人宫颈癌HeLa细胞生长抑制率高，同组培养72 h后人宫颈癌HeLa细胞生长抑制率高（P＜0.05）。培养72 h后，黄芪＋丹参酮ⅡA组人宫颈癌HeLa细胞生长抑制率较黄芪组、丹参酮ⅡA组、5-FU组升高（ P＜0.05）；黄芪＋丹参酮ⅡA＋5-FU组人宫颈癌HeLa细胞生长抑制率较黄芪组、丹参酮ⅡA组、5-FU组、黄芪＋丹参酮ⅡA组升高（ P＜0.05）。黄芪＋丹参酮ⅡA＋5-FU组人宫颈癌HeLa细胞凋亡率较黄芪组、丹参酮ⅡA组、5-FU组、黄芪＋丹参酮ⅡA组升高（ P＜0.05）。不同组MDA水平及GSH活力比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；不同组SOD活力比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；其中黄芪组、丹参酮ⅡA组、5-FU组、黄芪＋丹参酮ⅡA组、黄芪＋丹参酮ⅡA＋5-FU组SOD活力较对照组降低（ P＜0.05）。结论黄芪、丹参酮ⅡA、5-FU可诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡，联用后可增加抗肿瘤活性，具有临床应用价值。
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胃癌耐药细胞株SGC7901/阿霉素中miR-185的表达及对细胞多药耐药性的影响
目的：检测miR-185在胃癌组织及细胞株中的表达，探讨miR-185在胃癌多药耐药性（ MDR）发生机制中的作用。方法选取2014年3—5月于河北医科大学第四医院行胃癌切除术的20例患者胃癌及癌旁组织标本，荧光定量PCR技术检测胃癌及癌旁组织和人胃腺癌细胞株SGC7901、正常胃上皮细胞株GES-1、耐阿霉素（ ADR）的胃癌MDR细胞株 SGC7901/ADR 的 miR -185表达水平。采用 miR -185模拟物或无关对照序列转染细胞株SGC7901/ADR，检测其对化疗药物ADR、5-氟尿嘧啶（5-FU）、草酸铂（ L-OHP）的敏感性，荧光定量 PCR和Western blotting技术检测多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1、GST-π、LRP的mRNA及蛋白表达水平。结果癌旁组织和胃癌组织miR-185相对表达水平分别为（0.910±0.142）、（0.243±0.045），差异有统计学意义（ t＝20.025， P＜0.001）。细胞株GES -1、SGC7901、SGC7901/ADR miR -185相对表达水平分别为（0.903±0.117）、（0.630±0.101）和（0.191±0.030），差异有统计学意义（F＝46.850，P＜0.001）。其中，细胞株SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于GES-1，细胞株SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于SGC7901（P＜0.05）。ADR、5-FU和L-OHP对不同转染处理后的细胞株SGC7901/ADR抑制率比较，差异均有统计学意义（ P＜0.05）。其中， ADR、5-FU和L-OHP对miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR抑制率高于未转染和无关对照序列转染（ P＜0.05）。经不同转染处理后，细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-π mRNA和蛋白相对表达水平比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。其中，miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-π mRNA和蛋白相对表达水平低于未转染和无关对照序列转染（ P＜0.05）。结论胃癌细胞miR-185表达下调，通过上调miR-185的表达可提高胃癌细胞对化疗药物的敏感性，其机制可能是miR-185调控部分多药耐药基因的表达。
