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  • 电针对心肌缺血大鼠细胞凋亡指数及miRNAs表达影响的研究

    作者:卢继东;吴松;刘建民;杨书侠;望庐山;周焕娇;王华

    目的:探讨电针内关穴(电针组)对心肌缺血大鼠细胞凋亡相关微小核糖核酸(miRNA)表达的影响,以期探讨其作用机制.方法:30只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只.模型组和电针组以盐酸异丙肾上腺素2 mg/(kg·d)背部皮下注射14 d的方法制备心肌缺血大鼠模型;正常组注射等量生理盐水.电针组在造模后选取内关穴进行电针,每天1次,共21 d.运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清CK、CK-MB及VCAM-1的表达量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI)值;Real time PCR法检测心肌细胞miRNA-133a、miRNA-133b、miRNA-208、miRNA-499的表达量.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清CK、CK-MB、VCAM-1表达升高;心肌细胞凋亡指数增多;心肌细胞miRNA-133a、miRNA-133b表达降低,miRNA-208、miRNA-499表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01).电针组上述指标均明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01).结论:电针内关穴可有效防治心肌缺血,其保护作用可能与上调心肌miRNA-133a、miRNA-133b的表达,抑制miRNA-208、miRNA-499的表达有关.

  • 表观遗传学与哮喘研究进展

    作者:杨男

    哮喘是一种气道慢性炎症性疾病,遗传因素及环境因素共同参与其发病.一方面,哮喘与遗传因素密切相关;另一方面,饮食摄入、烟雾暴露、空气污染等外界因素均与其发病相关.新近研究发现,表观遗传学在哮喘发生发展中发挥重要的作用,遗传及环境因素均可影响表观遗传学修饰.因此,该文对哮喘表观遗传学调控及哮喘表观遗传学治疗等方面研究进展加以综述.

  • 在肿瘤治疗中靶向肿瘤干细胞:间充质干细胞的应用前景

    作者:张艳玲;韩小博

    骨髓间充质干细胞是人体干细胞的亚群,有多向分化的潜能.新的研究证据证明,变化内外微环境可以使骨髓问充质干细胞向肿瘤干细胞方向重编程导致肿瘤发生.肿瘤干细胞由于参与细胞迁移、侵袭,转移,抗药等.因此,靶向肿瘤干细胞对肿瘤的治疗提供一个新的方向.但是肿瘤干细胞的起源和它的分子连接还不是很清楚.在缺氧和炎症下,新研究的证据表明肿瘤干细胞和上皮-间质转变(EMT)的细胞表型之间的内在联系与miRNAs有同样的潜在机制.我们研究了肿瘤干细胞在EMT、炎症、缺氧时的特征可能对肿瘤干细胞的消肖除提供一个很好的治疗途径.

  • miRNAs在肝细胞癌中的研究现状与展望

    作者:那延立;张城硕;张佳林

    微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是一类非编码小分子RNA,主要在转录后水平调节基因的表达,进而在功能上通过调控下游基因的表达来影响组织和细胞的生物学功能.目前研究已证实miRNAs的异常表达与肿瘤的发生发展密切相关.本文对近年发现致肝细胞癌的miRNAs相关研究进展进行综述.

  • 微小核糖核酸在产科疾病的研究进展

    作者:刘玉红;朱允菊

    微小核糖核酸(miRNA)是一类长约18~24nt的小分子非编码RNA,它通过转录后机制调节基因表达,减弱各种遗传网络中的蛋白质输出.miRNA的发现已经转变了我们对基因调节的理解,并引发了研究者旨在利用其作为诊断标记和治疗工具的强烈兴趣.miRNA参与生物体的生长、发育和凋亡的调控,并在疾病发生和发展过程中起着重要作用.现从miRNA的生成、作用机制、胎盘miRNA与产科疾病发生的关系等方面予以综述.

  • MicroRNA调控膀胱癌演进的研究现状及展望

    作者:熊涛;王剑松;王海峰

    微小核糖核酸(microRNA ,miRNA)在转录后水平对基因的表达进行调控。miRNA在膀胱癌的演进过程中发挥着类似于癌基因或抑癌基因的作用。目前研究表明,对miRNA的调控可为临床膀胱癌的诊治提供一个新的靶点,提高膀胱癌患者的远期生存率和生活质量。本文将就miRNA的形成、作用机理及其对膀胱癌发生、发展的影响等方面作一综述,介绍miRNA在膀胱癌演进过程中的研究进展。

  • 阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞microRNA-21表达的影响

    作者:刘洋;李浪;周游;王江友;苏强;孙羽涵

    目的 研究阿托伐他汀在体外对人CD4+T淋巴细胞miRNA-21表达的影响.方法 取12例健康志愿者的新鲜外周血,免疫磁珠分选出CD4+T淋巴细胞,分为空白组、PHA+(0、1、5、10 μmol/L)阿托伐他汀组,体外培养48 h后收集各组细胞及培养基上清液,荧光定量PCR检测miRNA-21及PDCD4mRNA表达水平,Western印迹检测PDCD4蛋白表达,ELISA检测培养基上清液TNF-α及IL-10浓度.结果 ①与空白组比较:PHA刺激后,CD4+T淋巴细胞miRNA-21 、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白表达及上清液TNF-α浓度均升高(均P<0.05).②与PHA+0μmol/L他汀组比较:加入不同浓度阿托伐他汀后,CD4+T淋巴细胞miRNA-21相对表达量和上清液IL-10浓度增加(P<0.05),而PDCD4蛋白表达和上清液TNF-α浓度明显降低(P<0.05).结论 阿托伐他汀能促进PHA刺激的人CD4+T淋巴细胞miRNA-21的表达增加,从而抑制靶蛋白PDCD4,促进抗炎因子IL-10分泌和抑制促炎因子TNF-α.

  • 茵陈提取物对糖尿病大鼠肾组织中miRNAs表达谱的影响及其肾脏保护作用

    作者:孙成博;孙波;刘春禹;李星儒;王志琴;张璟祎;张雪绵;王泽红;于晓艳

    目的:观察茵陈提取物(HACE)对糖尿病大鼠肾组织中微小核糖核酸(miRNAs)表达谱的影响,从miRNA角度探讨HACE对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其机制.方法:采用链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,将60只雄性Wistar大鼠分为对照组(12只)、模型组(24只)和HACE组(24只).分别于给药8和16周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率和尿蛋白排泄率;HE染色检测大鼠肾组织形态表现;miRNA芯片初步筛查各组大鼠肾组织中miRNAs差异表达谱,对于差异表达在1.74倍以上高丰度的miRNAs筛选阳性miRNAs,采用RT-qPCR验证筛选的miRNAs的相对表达量.结果:与模型组比较,给药8和16周后HACE组大鼠肾小球系膜聚集等现象明显减轻,尿白蛋白排泄率明显降低(P<0.05).miRNA芯片初筛,对照组和模型组大鼠肾组织中有35个差异表达的miRNAs,模型组和HACE组大鼠肾组织中有17个差异表达的miRNAs.RT-qPCR法检测,给药8周后,与对照组比较,模型组大鼠肾组织中miR-1306-3p (P<0.05)、miR-672-5p(P<0.05)和miR-3550 (P<0.01)相对表达量明显降低;与模型组比较,HACE组大鼠肾组织中miR-672-5p相对表达量升高(P<0.05).给药16周后,与对照组比较,模型组大鼠肾组织中miR-21-5p相对表达量升高(P<0.01),miR-1306-3p (P<0.05)、miR-672-5p (P<0.01)和miR-466d (P<0.05)相对表达量降低;与模型组比较,HACE组大鼠肾组织中miR-21-5p (P<0.05)和miR-1306-3p (P<0.05)相对表达量降低,miR-672-5p相对表达量升高(P<0.05).结论:HACE作用后糖尿病大鼠肾组织中miRNAs表达谱出现变化.HACE对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与miRNAs有关.

  • 针刺百会、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织及血清miRNA-29、miRNA-320表达的影响

    作者:张亚敏;徐虹;孙华;陈素辉;王富明;杨杨

    目的:探讨电针百会和足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠保护作用是否能通过microRNA途径调节实现,进一步探讨针刺百会、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠保护作用的机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和药物组。后3组造模后根据再灌注时间又分为1天、3天、5天和7天组。电针组电针百会穴和左侧足三里穴。药物组腹腔注射依达拉奉3 mg/kg。规定时间点取大鼠脑组织和血清,以qPCR法检测脑组织和血清中miRNA-29、miRNA-320表达。结果:同期各个时间点,电针组和药物组脑组织及血清miRNA-29表达低于模型组( P<0.05),电针组与药物组都能下调miR-NA-29表达,除血清7天时间点,电针组miRNA-29在同一时间点的表达高于药物组( P<0.05)。同期各个时间点,电针组和药物组脑组织及血清miRNA-320表达高于模型组( P<0.05),电针组与药物组都能上调miRNA-320表达,电针组miRNA-320在同一时间点的表达低于药物组( P<0.05)。结论:针刺大鼠百会、足三里穴能下调脑缺血大鼠脑组织及血清miRNA-29的表达,上调miRNA-320表达,减轻缺血再灌注后脑损伤,针刺对脑缺血再灌注后脑组织有一定的保护作用。

  • miRNAs 在不同级别宫颈癌中的差异性表达分析及其临床意义

    作者:罗燕鸿;林娟娟;叶蕾;孔丹莉;何玉清

    宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一,虽然高危型人乳头瘤病毒持续性感染是导致宫颈癌发生的主要因素,但是表观遗传学调控在其发展过程中也具有重要作用。研究发现,微小核糖核酸( microRNAs , miRNAs )在不同级别宫颈癌中有明显差异性表达,并广泛参与了宫颈癌发生的各个生物学过程。本文系统分析了85篇实验性文章中报道的不同阶段宫颈癌组织的 miRNAs 差异性表达谱,并将其分别归类到宫颈上皮内瘤样病变1-3级( cervical intraepithelial neoplasia , CIN 1-3)和宫颈癌4个病理分级中,为评价 miRNAs 在宫颈癌早期诊断和预后监测中的临床应用价值提供了科学的理论依据。

  • MicroRNA-155、microRNA-203在银屑病患者皮肤中的表达及定位

    作者:王丽丽;王也;王英;李锘;白彦萍

    目的:研究microRNA-155 (miR-155)、microRNA-203(miR-203)在银屑病患者皮损区及非皮损区皮肤中的表达及定位.方法:活检切取12名寻常型银屑病患者皮损及邻近非皮损区的皮肤组织,采用石蜡包埋,通过RT-PCR法检测和比较12对标本的皮损区、非皮损区中miR-155、miR-203表达水平,并以5'端、3'端地高辛标记的探针对组织切片中的目的miRNA进行原位杂交,观察miR-155、miR-203在皮肤组织中的定位情况.结果:12对标本中,miR-155在皮损区的表达显著高于非皮损区,差异具有显著统计学意义(P<0.05);而皮损区和非皮损区miR-203的表达未见统计学差异(P>0.05).miR-155在皮肤的表皮、真皮均有表达,定位在细胞核,基底层表达较高;miR-203在基底层和表皮突表达较高,细胞核、细胞质中均有表达.结论:银屑病患者皮损区miR-155的表达显著升高,定位在细胞核,在皮肤的表皮、真皮均表达,可能参与了银屑病的发生发展过程.

  • 微小RNA在氟骨症发病机制研究中的作用

    作者:徐嘉珣;裴俊瑞;孙殿军

    氟的主要靶器官是骨相组织,临床表现为氟斑牙和氟骨症.其中,氟骨症发病机制不清且尚无特异的治疗手段,对人体健康危害较大.研究表明,氟对骨细胞调控的分子机制涉及较多信号通路蛋白和功能基因的异常改变,然而氟对这些信号蛋白和功能基因的调节机制仍不清楚.微小RNA(miRNA)是一类具有调节mRNA转录和蛋白表达功能的非编码RNA,在细胞的生长发育和分化中具有非常重要的作用.近年研究发现,miRNA与骨代谢调节密切相关,它在骨细胞的分化、生长和生物学活性等方面均具有调节作用.本文旨在探讨miRNA在氟骨症发病机制中可能发挥的作用,为氟中毒发病机制的深入研究提供新的思路和线索.

  • 调控心肌纤维化的主要微小核糖核酸及其通路研究进展

    作者:张娟妞;冀涛;孙树秋

    心肌纤维化是心肌正常组织结构中出现的以成纤维细胞增殖、胶原过度沉积及异常分布为主要表现的病变.微小核糖核酸(miRNAs)是一类内源性非编码的长度约为22 bp的单链RNA,通过与其靶基因mRNA互补配对,在转录后水平介导基因调控.近年来研究发现,miRNAs在心肌纤维化形成过程中发挥重要的调节作用,作为心肌纤维化预防和治疗的靶点,受到越来越多关注.

  • 微小核糖核酸在胃癌中的应用研究进展

    作者:袁杰;王继见

    胃癌是常见恶性肿瘤之一,进展快,预后差,微小核糖核酸可作为胃癌生物标志物,在胃癌诊断、治疗及预后预测方面有作用,本文主要综述了近年来胃癌与微小核糖核酸相关研究取得的新进展.

  • MicroRNA-26b对糖氧剥夺诱导的BV-2细胞表达白介素-6的靶向调控作用研究

    作者:宿映;张丽;魏文石

    目的 研究microRNA-26b对糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导BV-2细胞释放白介素-6(interleukin 6,IL-6)的影响.方法 OGD诱导小鼠胶质细胞系BV-2细胞活化,通过ELISA和RT-qPCR定量培养上清IL-6浓度及BV-2细胞IL-6 mRNA水平.转染IL-6microRNA-26b模拟物(miR-26b mimics)和阴性对照(negative control,NC)至BV-2细胞后,经OGD处理检测培养上清IL-6浓度.通过共转miR-26b mimics和携带有IL-6 mRNA 3'UTR的双荧光素酶报告质粒至293T细胞,明确miR-26b对IL-6的靶向调节作用.结果 与对照组比较,经1hOGD处理后的BV-2细胞IL-6 mRNA水平和培养上清中IL-6增加(P<0.05);转染microRNA-26b可以减少OGD引起的IL-6释放(P<O.05);共转miR-26b和双荧光素酶报告质粒后萤火虫荧光索酶活性高于对照组(P<0.05).结论 microRNA-26b可结合至IL-6 mRNA的3'UTR区,可能通过这一机制下调OGD诱导的BV-2细胞IL-6表达.

  • 血清微小核糖核酸-122在慢性乙型肝炎肝功能衰竭患者中的表达及其与疾病严重程度的关系

    作者:王伟静;项晓刚;赵钢德;赖荣陶;王芃;莫瑞东;郭斯敏;周惠娟;刘芸野

    目的 探讨CHB肝功能衰竭患者外周血循环miRNA的表达及其与疾病严重程度的关系.方法 选择2011年8月至2011年11月在上海交通大学医学院附属瑞金医院就诊的CHB肝功能衰竭患者5例及健康体检者5名,进行血清Exiqon LNA miRNA芯片分析.另选2010年8月至2012年3月就诊的急性乙型肝炎10例、CHB 22例、乙型肝炎肝硬化12例、CHB肝功能衰竭58例,健康体检者23名,实时定量PCR检测血清miRNA-122相对表达量.且对不同PTA程度、不同终末期肝病模型(MELD)评分的CHB肝功能衰竭患者miRNA-122相对表达量进行比较.相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析,生存分析采用Kaplan-Meier分析.结果 芯片分析结果显示,CHB肝功能衰竭患者血清有148个miRNA发生显著变化,其中3个上调,为miRNA-122、miRNA-595和miRNA-300,145个下调.实时定量PCR结果显示,与健康对照者相比,各组患者血清miRNA-122相对表达量均有不同程度的升高.CHB肝功能衰竭组miRNA-122相对表达量高,且30%<PTA≤40%患者血清miRNA-122相对表达量是20% <PTA≤30%患者的1.8倍,是PTA≤20%患者的2.3倍.MELD评分≤30时,血清miRNA-122表达水平随肝功能衰竭程度加重而升高,且与MELD评分呈正相关(r=0.521,P<0.01);而当MELD评分>30时,血清miRNA-122表达量升高反而不明显.动态观察发现CHB肝功能衰竭患者血清miRNA-122表达量随病情好转而下降.结论 早期CHB肝功能衰竭患者血清miRNA-122相对表达量明显上升,可作为监测疾病严重程度的血清标志物.

  • 人类免疫缺陷病毒阳性Burkitt淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤中差异微小核糖核酸的筛选及靶基因预测

    作者:王迪;曾东;郑叶;张鹏;冯艳玲;卢洪洲

    目的 筛选 HIV感染相关Burkitt淋巴瘤(Burkitt lymphoma ,BL )与弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma ,DLBCL)中差异性微小核糖核酸(microRNA ,miRNA).方法 收集上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心5份BL和3份DLBCL新鲜冰冻组织标本,19份BL和15份DLBCL石蜡标本. Agilent human miRNA microarray芯片技术检测新鲜冰冻的BL和DLBCL组织中miRNA表达情况,查找差异miRNA .利用SmartRNAplexTMmiRNA技术在BL和DLBCL石蜡组织中验证关键miRNA ,生物信息学方法预测靶基因.结果 以DLBCL 为参照,BL 组中有42个差异性miRNA ,其中28个miRNA上调,14个miRNA下调.以真核生物正向调控和高表达分子能促进肿瘤发生为依据,从BL组表达上调的miRNA选出5个关键miRNA验证,结果与芯片一致.与DLBCL相比,5个 miRNA 在 BL 中的表达均上调,分别为 miRNA-16-2-3p 、miRNA-20a-3p 、miRNA-130b-3p 、miRNA-185-5p和miRNA-423-5p(t值分别为2 .715 、2 .539 、2 .750 、4 .004和3 .625 ,均 P<0 .05) .其中miRNA-16-2-3p对应的靶基因可能主要为CTNND2和 RAD21 ;miRNA-20a-3p的靶基因可能主要为DYRK1A和GPAM ;miRNA-130b-3p的靶基因可能主要与IRF1 、DICER1 、PTEN等相关;miRNA-185-5p的靶基因可能主要为VEGFA 、NFATC3和SEC24C ;miRNA-423-5p的靶基因可能主要是PA2G4和PNKD .结论 BL和DLBCL中存在差异表达的miRNA ,有望为BL和DLBCL 诊断、鉴别诊断提供新的分子标志物.关键miRNA潜在靶基因与细胞生存、增殖、分化、凋亡和癌变等相关,可能对BL的发生、发展起重要作用.

  • 人脐带间充质干细胞对急性肝功能衰竭小鼠肝组织微小核糖核酸-155和肿瘤坏死因子表达的影响

    作者:龚邦东;安方梅;景波;余东山;李婧;房星星;张晓宇;程昉;冯润

    目的 探讨间充质干细胞(MSC)对急性肝功能衰竭(ALF)小鼠肝组织中miRNA-155和TNF表达的影响,以及与MSC疗效间的关系.方法 采用随机数字表法和随机数余数分组法将BALB/c清洁级小鼠96只分为4组,即健康对照组、急性肝功能衰竭组、MSC治疗组和MSC预防组各24只.ALF组予以D-GalN 900 mg/kg+脂多糖10 μg/kg腹腔注射建立模型;MSC治疗组在900 mg/kg D-GalN+ 10 μg/kg脂多糖腹腔注射后2h,予以尾静脉注射MSC 1×106;MSC预防组在900mg/kgD-GalN+10 μg/kg脂多糖腹腔注射前予以尾静脉注射MSC 1×106;健康对照组予以0.9%氯化钠溶液1 mL腹腔注射.给药7h后每组处死小鼠12只,检测小鼠血清肝功能,ELISA法检测TNF水平,实时定量PCR检测肝组织miRNA-155、TNF mRNA.余下每组12只小鼠观察24 h生存率.组间均数比较用单因素方差分析,相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析.结果 D GalN/脂多糖诱导7h后,MSC预防和MSC治疗组小鼠ALT水平均较ALF组降低,差异均有统计学意义(q值分别为13.20和4.58,均P<0.01);MSC预防组和MSC治疗组AST水平均较ALF组降低,差异均有统计学意义(q值分别为18.90和9.83,均P<0.01).与ALF组相比,MSC预防组和MSC治疗组血清TNF水平均有所降低,差异均有统计学意义(q值分别为14.70和3.95,均P<0.01).健康对照组、ALF组、MSC治疗组和MSC预防组小鼠肝组织TNF mRNA表达水平分别为1.0±0.3、19.2±2.2、6.6±1.7和4.3±0.9,组间比较差异有统计学意义(F=72.24,P<0.01).与ALF组相比,MSC预防组和MSC治疗组小鼠肝组织TNF mRNA表达水平均有下调,差异均有统计学意义(q值分别为31.40和21.72,均P<0.01).与ALF组相比,MSC预防组和MSC治疗组小鼠肝组织miRNA-155水平均有下调,差异均有统计学意义(q值分别为19.40和9.58,均P<0.01).ALF组小鼠肝组织miRNA 155上调和TNFmRNA诱导呈正相关(r=0.734,P=0.007).MSC预防组和MSC治疗组miRNA-155和TNF mRNA的部分逆转亦呈正相关(r值分别为0.687和0.590,P值分别为0.014和0.044).给药后24 h,健康对照组、ALF组、MSC治疗组和MSC预防组各死亡0/12、10/12、6/12和3/12只,组间比较差异有统计学意义(x2=19.078,P<0.01).结论 在MSC干预小鼠ALF发病过程中,可以部分逆转上调的肝组织miRNA-155和TNF,且存在协同性,提示MSC治疗ALF可能通过对肝组织miRNA-155和TNF的调控发生作用.

  • 微小核糖核酸-34a对肝星状细胞增殖及活化的影响

    作者:陈达之;宋梅;王玉群;曹肃婷;林镯;许烂漫;施可庆;王雅琴;陈永平

    目的 观察慢病毒表达载体介导微小核糖核酸-34a(miRNA-34a)体外转染肝星状细胞-T6(HSC-T6)后对肝星状细胞增殖率及活化的影响,探讨miRNA-34a在肝纤维化中可能的作用.方法 体外培养HSC-T6细胞,分别对miRNA-34a重组慢病毒组和空白对照病毒组转染肝星状细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8试剂盒)检测细胞增殖抑制率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western印迹法检测HSC-T6细胞转化生长因子-β1 (TGF-β1)、a-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和基质金属蛋白酶3 (MMP3) mRNA及蛋白表达.组间差异采用单因素方差分析,方差齐性者两两比较采用LSD法,方差不齐者采用Dunnett T3检验,相关性检验采用Pearson直线相关分析.结果 转染效率为80%;与空白对照病毒组相比,转染后RT-PCR显示,miRNA-34a重组慢病毒组miRNA-34a mRNA的含量是3.6,其表达量明显升高;miRNA-34a重组慢病毒组肝星状细胞增殖率明显降低(24、48及72 h的F值分别为9.048、168.070、812.390,均P<0.05);TGF-β1和α-SMA mRNA的表达量均降低,相对于空白对照病毒组的含量分别为0.28和0.13;TGF-β1和α-SMA蛋白表达量均降低(F=64.444、90.577,均P<0.05);而MMP3表达量明显升高(F=374.584,P<0.05).结论miRNA-34a能抑制肝星状细胞增殖和活化,有望在治疗肝纤维化中发挥作用.

  • D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导急性肝功能衰竭小鼠血清微小核糖核酸的表达

    作者:王伟静;安方梅;余东山;赵钢德;项晓刚;赖荣陶;桂红莲;郭斯敏;王晖;谢青

    目的 探讨D氨基半乳糖联合脂多糖诱导急性肝功能衰竭小鼠血清微小核糖核酸(miRNA)的表达变化以及与肝组织miRNA的相关性.方法 Balb/C清洁级小鼠40只分为两组,模型组32只,对照组8只.模型组应用D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导Balb/C小鼠急性肝功能衰竭,对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液1 mL.模型组给药后0、3、5和7h分别处死小鼠各8只,采集血清及肝组织,观察小鼠给药后肝功能生物化学指标及肝组织病理学变化.抽提血清及肝组织miRNA,取0、5和7h肝组织进行锁核酸(LNA)-miRNA微阵列分析,并用实时定量反转录PCR检测miRNA.组间均数比较用单因素方差分析,相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析.结果 随着小鼠急性肝功能衰竭的发生,肝组织miRNA的表达发生显著变化,共有21个miRNA明显上调,27个miRNA明显下调,其中miRNA-122和miRNA-1187表达下调,miRNA-146a、miRNA-155表达上调.经PCR验证发现小鼠肝组织miRNA 122和miRNA-1187表达逐渐下调,血清miRNA-122和miRNA-1187的表达则逐渐上调;炎性相关的miRNA 146a和miRNA-155在肝组织和血清中表达均明显增加.小鼠miRNA-122和miRNA-1187在组织与血清中的表达呈负相关(r值分别=-0.477和-0.420,P值分别=0.0089和0.0231),而miRNA-155在组织与血清中表达呈正相关(r=0.678,P=0.0001).小鼠血清miRNA 122(r值分别=0.571和0.554)、miRNA-1187(r值分别=0.471和0.542)的相对表达量与ALT和AST水平均呈正相关(均P<0.05).血清miRNA 122和miRNA-1187在给药5h上升显著,早于血清转氨酶的变化.结论急性肝功能衰竭小鼠肝组织和血清miRNA-122和miRNA-1187的表达呈负相关,血清中miRNA-122、miRNA-1187的变化早于血清转氨酶的变化,有可能成为早期预测肝损伤的血清标志物.

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