首页 > 文献资料
-
颈髓损伤后GAP-43及内皮素mRNA表达与血脊髓屏障损害的研究
目的:为了探讨颈髓损伤后生长相关蛋白(GAP-43)mRNA及内皮素-1(ET-1)mRNA与血脊髓屏障损害的关系.方法:应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测颈髓损伤后颈髓组织GAP-43mRNA及ET-1mRNA表达.结果:伤后6～72h颈髓组织GAP-43 mRNA及ET-1 mRNA均较对照组明显增高(P＜0.01).结论:颈髓损伤后GAP-43 mRNA及ET-1 mRNA表达水平增加与伤后血脊髓屏障损害的发生、发展密切相关,生长相关蛋白、内皮素在颈髓损伤后血脊髓屏障损害的病理生理过程中起重要作用.
-
神经损伤与再生中神经元GAP-43mRNA表达的原位杂交研究
目的研究周围神经损伤过程中生长相关蛋白(GAP-43)mRNA表达的变化规律. 方法建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型,用原位杂交技术对大鼠的腰髓和背根神经节的GAP-43mRNA表达进行观察. 结果大鼠坐骨神经损伤2d后,腰髓腹角运动神经元和背根节感觉神经元可检测到GAP-43mRNA杂交信号;术后4、7和14d明显增强;术后30d减弱,60d已恢复正常. 结论周围神经损伤诱导神经元胞体GAP-43mRNA表达显著增强,表明GAP-43在神经再生过程中起重要作用.
-
不同功率半导体激光照射与大鼠脊髓生长相关蛋白表达的关系
目的 研究不同功率半导体激光照射损伤的大鼠坐骨神经后脊髓中生长相关蛋 白(GAP-43)的表达与激光功率和照射时间的关系。方法 172只雄性SD大鼠制成坐骨神经损伤模型，随机分为1个对照组和3 个激光照射组，每组42只。分别以功率为5、10和15 mW、波长810 nm的半导体激光照射激光 组大鼠神经损伤部位，每天1次，连续照射10天。照射后1、3、7、14、28、42和56天取鼠 脊髓用于免疫组化方法观察脊髓内GAP-43表达的变化。结果 半导体激光照射后第7天内各激光照射组和对照射组无明显差异。第14天 和第28天时15 mW激光照射组脊髓内GAP-43表达高于对照组。第56天时激光照射组较对照射 组脊髓内GAP-43表达稍低，而5 mW和10 mW激光照射组与对照组比较无明显差异。结论 15 mW半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中GAP-43表达的 变化，对神经再生过程有一定的影响，而5 mW和10 mW半导体激光照射对损伤神经后大鼠中G AP-43表达作用不明显。
-
强制性使用运动疗法对大鼠脑缺血后神经可塑性的影响
目的:观察强制性使用运动疗法对大鼠脑梗死区周围皮质的生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触素(SYP)表达的影响,探讨其促进脑缺血后神经可塑性的机制.方法:采用白体血栓注入并闭塞大脑中动脉的方法制备局灶脑缺血模型.将90只健康SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、局灶脑缺血模型组(MCAO模型)、强制性运动疗法组(CIMT组)各30只.在局灶脑缺血模型成功后7天,运动疗法组建立强制性使用运动疗法模型.参照Bederson评分标准对各组大鼠进行神经功能缺损评分采用原位杂交技术检测脑梗死区周围皮质GAP-43及SYP mRNA的表达.采用免疫组化技术检测GAP-43及SYP蛋白表达.结果:与模型组比较,运动疗法组在制模后2、4、8周神经功能缺损评分明显降低,而GAP-43及突触素mRNA及蛋白表达在各时间点均明显高于对照组.结论:强制性使用运动疗法能改善大鼠脑缺血神经功能,其机制可能与运动疗法能够促进梗死灶周围皮质GAP-43及SYP的表达,从而促进脑缺血后的突触发生与重塑有关.
-
电针对大鼠急性骨骼肌损伤修复中生长相关蛋白和聚集蛋白表达的影响
目的:通过观察电针治疗对急性骨骼肌损伤中生长相关蛋白(GAP-43)及聚集蛋白(agrin)表达的影响,探讨电针促进受损骨骼肌功能恢复的作用机制.方法:将32只SD大鼠随机分为正常组(A组,n=4)、模型组(B组,n=4)、自然恢复组(C组,n=12)、电针组(D组,n=12),A组为空白对照不做任何处理,其余各组使用自制重物打击器建立骨骼肌急性钝挫伤模型,C组不做电针处理自然恢复,D组于造模后48h开始电针干预,每日1次,每次15min.于造模后24h处死B组取材观察造模是否成功,C组及D组于建模后第7、14、21天三个时间点同时取材使用HE染色观察组织形态变化,Western-bolt检测GAP-43及agrin表达情况.结果:HE染色显示:与A组比较,各组肌细胞大量溶解、肌纤维排列紊乱及炎性细胞浸润.D组与C组比较,肌卫星细胞增殖较快,新生肌纤维明显增多,修复更为迅速.在正常组织中GAP-43表达量极少,骨骼肌损伤后各组中GAP-43表达量显著增高(P＜0.05);在第14天,GAP-43表达量达到高峰,D组继续表达呈上升趋势(P＜0.01),C组开始下降,但仍高于A组(P＜0.05).与A组相比,骨骼肌受损后各时间点C、D两组agrin的表达明显增多(P＜0.05),其中D组差异为显著(P＜0.01).结论:电针有促进受损骨骼肌恢复的作用,可能与提高GAP-43和agrin的表达水平有关.
-
麻黄碱对脑缺血大鼠运动功能恢复的影响及分子机制研究
目的:研究麻黄碱对大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)后运动功能康复的影响,并探讨其加速神经康复的分子机制.方法:体重为220-250g的雄性SD大鼠56只,随机分为假手术组,自然恢复组和治疗组.应用Koizumi线栓法建立单侧MCAO模型.术后1周,2周,3周,4周应用横木行走试验评定运动功能改善,免疫组织化学方法检测缺血周围区生长相关蛋白(GAP-43)、突触素(SYP)表达的变化.结果:横木行走试验评分显示治疗组康复速度明显高于自然恢复组;在1,2,3周时,免疫组化光密度定量测定显示治疗组GAP-43和SYP的表达水平高于自然恢复组.结论:麻黄碱可加速脑缺血后动物的运动功能恢复速度,其机制与促进脑内神经重塑和结构重建的分子表达有关.
-
生长相关蛋白-43影响神经细胞分裂方向作用的研究
目的研究生长相关蛋白-43（growth associated protein-43，GAP-43）与G蛋白对神经细胞分裂方向的调控，探讨GAP-43参与神经发生的机制。
方法6只C57BL／6J GAP-43高表达的转基因孕鼠（E13.5 d和E17.5 d的胎鼠均为24只）为实验组，6只野生型孕鼠（E13.5 d和E17.5 d的胎鼠均为24只）为对照组。分别取E13.5 d的3只实验组及对照组胎鼠，脑室区进行免疫荧光染色测定GAP-43的表达位置；再分别取E13.5 d的12只实验组及对照组胎鼠，向脑中加入裂解液分别提取膜蛋白和细胞质蛋白，通过Western blot测定GAP-43的表达位置及表达量；取E17.5 d的3只GAP-43高表达的转基因胎鼠的鼠脑进行GAP-43和G蛋白的免疫荧光共染色，观察二者的共定位情况；取E17.5 d的9只GAP-43高表达的转基因胎鼠的鼠脑进行免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，co-IP）检测GAP-43与Gαi间的相互作用。取E13.5 d和E17.5 d的9只实验组胎鼠计数转基因胚胎鼠脑中神经前体细胞（neuro progenitor cel，NPC）中沿水平和垂直不同方向分裂的细胞数量，并与对照组小鼠进行对照。
结果 E13.5 d实验组胎鼠的GAP-43蛋白的表达量高于对照组（P<0.05）；GAP-43特异性表达于细胞膜上；免疫荧光共染色结果表明GAP-43与Gαi共定位于细胞膜上，进一步通过co-IP证明GAP-43和Gαi相互结合；E13.5 d时，转基因组与对照组相比，细胞沿水平、中间和垂直角度分裂的细胞数量差异有显著性（P<0.05）。
结论 GAP-43可调控神经细胞分裂方向，这可能是GAP-43参与神经发生的机制。本研究为进一步研究GAP-43对卒中后神经损伤修复的作用机制提供基础。 -
托吡酯及天麻素对戊四氮点燃大鼠的行为、脑电图和海马生长相关蛋白-43表达的影响
癫癎的发病机制迄今尚未完全明了,近年来癫癎脑内神经可塑性变化成为研究的热点.有学者发现,生长相关蛋白-43(growth-associated protein-43,GAP-43)是神经系统特异性胞膜磷酸蛋白,现已将其作为一种神经可塑性的标志,对GAP-43的检测可以反映轴突的生长及突触的形成.托吡酯(TPM)是近年来国外研究开发的一种新型抗癫癎药.天麻素为中药材天麻的有效成分,具有抗癫癎作用.我们拟通过建立戊四氮(PTZ)点燃大鼠模型,观察TPM及天麻素对大鼠行为、脑电图(EEG)及海马内GAP-43表达的影响.
-
大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后GAP-43及IGF-1的表达
生长相关蛋白(GAP-43)在突触重建过程中,新生发芽末梢中的含量非常高,一旦突触重建完成,其含量呈幅度性下降,甚至呈微量或无阳性表达.胰岛素样生长因子-1(IGF-1)作为一种特异性神经营养因子,不仅有利于神经细胞生长发育和修复再生,而且能阻止细胞凋亡和死亡,有助于神经细胞受损后的功能恢复.
-
视神经损伤后修复再生的GAP-43原位杂交和免疫细胞化学动态研究
目的研究和探讨视神经损伤后的自然修复再生和脑源性神经营养因子及睫状神经营养因子互补辅助再生的GAP-43mRNA原位杂交组织化学和分子神经生物学变化特征,寻找视神经有效再生的新途径.方法用猫作为实验对象,术前动物被分为四组:①正常对照组;②单纯球后视神经1/2截断组;③视神经1/2截断并定时玻璃体内注射生理盐水对照组;④视神经1/2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合因子辅助再生组.动物模型制做为以眶外侧人路方法手术开眶,暴露眼球后视神经,在眼球后5 nrn处准确行视神经的1/2截断术.术后四组动物共同在正常视环境中饲养4～8个月,视神经1/2截断并玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子辅助再生组,在术后即日注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液(10 ng),并在以后每周注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液2次.在视神经损伤后第4个月和第8个月后将动物处死行外侧膝状体的GAP-43免疫细胞化学和原位杂交组织化学检测.结果在视神经损伤4个月时,四组的外侧膝状体的损伤眼相应输入层GAP-43免疫阳性神经元的细胞数密度和积分光密度比较为:正常对照组与视神经1/2截断组和视神经1/2截断并定时玻璃体内注射生理盐水对照组比较都有显著差异性(P均＜0.001),而与视神经1/2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合因子辅助再生组比较有显著差异性(P＜o.01);视神经1/2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合因子辅助再生组与视神经1/2截断并定时玻璃体内注射生理盐水对照组和视神经1/2截断组比较都有显著差异性(P均＜0.001),在视神经损伤8个月时,四组的外侧膝状体的损伤眼相应输人层GAP-43免疫阳性神经元的细胞数密度和积分光密度比较为:正常对照组与视神经1/2截断组和视神经1/2截断并定时玻璃体内注射生理盐水比较都有显著差异性(P均＜0.001),而视神经1/2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液组比较也有差异(P＜0.05);视神经1/2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液组与视神经1/2截断并定时玻璃体内注射生理盐水组和视神经1/2截断组比较都有显著差异性(P均＜o.01).损伤第4个月和第8个月时外侧膝状体的损伤眼相应输入层的GAP-43mRNA原位杂交阳性信号积分光密度和数密度经计算机图像分析及统计学处理发现原位杂交组织化学图像分析结果与免疫细胞化学图象分析结果相一致.结论①视神经1/2损伤后可以施加条件因素辅助再生,脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子对促进视神经损伤后的再生有调节局部微环境和互补促生长作用;②原位杂交组织化学实验观察也证实了视神经1/2损伤后的复合神经营养因子辅助视神经再生具有显著的拮抗损伤效应.
-
金思维对老年性痴呆大鼠海马CA1区GAP-43表达的影响
目的观察β淀粉样肽(Aβ)对大鼠海马CA1区GAP-43表达的改变及中药金思维对其的影响.方法应用凝聚态Aβ1-42在大鼠海马内注射以建立老年性痴呆(AD)动物模型;4周后取脑冰冻切片,采用免疫组化法和计算机图像分析技术测定海马CA1区GAP-43阳性神经元数目及光密度值.结果海马CA1区GAP-43阳性细胞数模型组和正常组(分别为52.33±28.45和59.60±22.84)相比无显著差异;金思维组(77.06±14.66)与模型组和多奈哌齐组(51.26±22.44)相比均有显著性差异(P＜0.01).海马CA1区GAP-43阳性细胞OD值模型组和正常组(分别为92.77±7.37和71.30±11.65)相比有显著差异(P＜0.01);金思维组(75.44±5.29)与模型组比较有显著差异(P＜0.01);而与多奈哌齐组(73.09±5.18)相比无显著性差异(P＞0.05).结论金思维可使老年性痴呆模型大鼠海马区GAP-43的表达量增加,为金思维促神经生长、改善突触可塑性和学习记忆功能的分子机制提供了新的内容.
-
氟对原代培养海马神经元细胞活性及突触素和生长相关蛋白GAP-43表达的影响
目的 探讨氟对原代培养海马神经元的细胞活性及突触素(SYN)和生长相关蛋白GAP-43表达的影响.方法 将原代培养的新生SD大鼠海马神经元分别暴露于含0.0、0.1、0.2、0.4、0.8 μg/ml氟化钠的培养基中培养24h.检测海马神经元的细胞活性、细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrtogenase,LDH)活力及海马神经元中SYN和GAP-43蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,0.4、0.8 μg/ml的氟染毒组海马神经元的细胞存活率均下降(P＜0.01),各染毒组细胞培养上清液中LDH的活力均升高(P＜0.01);0.1 μg/ml氟染毒组海马神经元中SYN蛋白的表达水平升高(P＜0.01),而0.4、0.8 μg/ml氟染毒组SYN蛋白的表达水平均降低(P＜0.01);0.2、0.4、0.8μg/ml氟染毒组海马神经元中GAP-43蛋白的表达水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.01).且随着NaF染毒剂量的升高,海马神经元的细胞存活率呈下降趋势,细胞培养上清液中LDH的活力呈上升趋势,海马神经元SYN蛋白的表达水平呈先上升后下降的趋势,GAP-43蛋白的表达水平呈下降趋势.结论 氟染毒可降低原代培养海马神经元的生存活性并损伤原代培养海马神经元的突触可塑性.
-
针刺对缺血缺氧性脑瘫乳鼠的治疗作用
目的:探讨针刺治疗促进脑瘫乳鼠运动功能恢复的作用机制.方法:采用改良的缺氧缺血性脑病(HIE)造模方法建立脑瘫乳鼠模型,将60只乳鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组(n=20),观察各组乳鼠运动功能情况并评分,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量,检测大脑病变区域的突触素(sYP)和神经生长相关蛋白(GAP-43)的表达.结果:针刺治疗组运动功能评分较模型组运动功能评分显著增加(P＜0.05);血清SOD活性较模型组显著增加(P＜0.01);血清MDA含量较模型组MDA含量明显降低(P＜0.01);脑组织SYP和GAP-43的表达较模型组SYP和GAP-43活性的表达明显增加(P＜0.05).结论:针刺疗法能通过降低MDA的活性、升高SOD的含量、进一步上调病变部位的大脑皮质区的SYP及GAP-43的表达从而改善缺血缺氧性脑瘫乳鼠的运动功能.
-
大鼠外伤性视神经病变后 GAP-43表达的变化
目的：研究大鼠视神经夹挫伤后视神经和视网膜神经节细胞（ retinal gangliocytes ，RGCs）形态学及生长相关蛋白-43（growth associated protein-43，GAP-43）表达的变化。方法采用大鼠球后视神经钳夹伤模型，分别于损伤后1、4、7、14、28 d处死动物，HE染色观察视神经组织及RGCs的动态改变，免疫组化方法检测视神经轴突GAP-43的表达变化。结果视神经损伤后，RGCs数目明显下降，14 d内降低速度较快，14 d后下降速度减慢；与正常大鼠视神经轴突相比，GAP-43表达明显增加，伤后14 d达峰值，14 d后逐渐下降（ P ＜0烫．05）。结论视神经损伤后RGCs数量减少是其视功能下降的病理基础之一，视神经轴突GAP4-3表达增加是视神经损伤修复的一种表现。
-
刺五加总黄酮对脑缺血大鼠脑组织P38及GAP-43蛋白表达影响的实验研究
目的 探讨脑缺血大鼠脑组织P38、GAP-43的变化及刺五加总黄酮的保护作用.方法 制作大鼠脑缺血模型,应用免疫组化方法,测定正常对照组、治疗组、正常组P38、GAP-43-表达的影响.结果 P38和GAP-43的表达水平随再灌注延长而不断上升;在各时间点,治疗组P38和GAP-43的表达水平均高于对照组(P＜0.01).结论 刺五加总黄酮可上调突触素P38、生长相关蛋白GAP-43的表达,具有促进突触再建和增强、完善再建突触效能的作用.
-
睫状神经营养因子与生长相关蛋白-43在视神经损伤修复中作用
人类和其他成年哺乳动物的成熟中枢神经系统损伤后由于内在因素轴突很难再生,功能不可逆性丧失[1].视神经作为中枢神经的一部分,由于解剖上的易及性及其他特性,许多中枢神经系统损伤再生的研究将视神经作为经典实验模型[1].
-
重组人促红细胞生成素对大鼠视神经挫伤后GAP-43mRNA影响
目的 观察大鼠视神经夹挫伤后视神经生长相关蛋白-43mRNA(growth associated protein-43mRNA,GAP-43mRNA)的变化,观察玻璃体腔内注射重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对大鼠视神经不完全损伤后GAP-43mRNA的影响.方法 动物实验研究.于2011年5～10月在河北医科大学第三医院实验中心应用建立的外伤性视神经损伤动物模型,进行实验观察.此动物模型分为正常对照组、损伤组(视神经钳夹+生理盐水组)及rhEPO组(视神经钳夹+rhEPO组),于损伤后1、4、7、14和28 d应用反转录-聚合酶链反应(reversetranscription polymerase chain reaction,RT-PCR) 技术观察视神经GAP-43mRNA的变化.结果 RT-PCR结果显示伤后1d损伤组和rhEPO组均无表达;4d损伤组和rhEPO组GAP-43mRNA均表达阳性,组间差异无统计学意义(P＞0.05);7、14、28 d rhEPO组GAP-43mRNA表达呈强阳性,损伤组表达呈弱阳性,rhEPO组GAP-43mRNA表达强于损伤组,半定量分析差异有统计学意义(P＜0.05).结论 视神经夹挫伤能上调视神经GAP-43mRNA表达,玻璃体腔内注射rhEPO能增强视神经GAP-43 mRNA表达.
-
不同剂量维生素E对大鼠脑缺血再灌注后GAP-43及突触素P38表达的影响
目的 研究不同剂量维生素E(VitE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后梗死周围区生长相关蛋白-43(GAP-43)及突触素P38表达的影响,从而进一步探讨抗氧化剂在脑缺血损伤中的作用机制及VitE应用剂量.方法 成年健康雌性Wistar大鼠125只,随机分成假手术组、对照组、大剂量VitE组(300 mg/kg)、中剂量VitE组(50 mg/kg)和小剂量VitE组(2.5 mg/kg).采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)动物模型.各组分别于术后6 h、1 d、3 d.7 d、14d取脑片.应用免疫组化方法观察脑缺血再灌注后GAP-43和P38的表达.结果 (1)小剂量VitE组GAP-43和P38表达较对照组有所增高,但差异无显著性(P＞0.05).(2)大、中剂量VitE组间GAP-43和P38表达比较未见明显变化(P＞0.05).(3)大、中剂量VitE组与对照组比较:GAP-43表达增高,1 d、3 d、7 d、14 d各时间点差异均有显著性(P＜0.05);P38表达也增高,3 d,7 d、14 d时间点差异具有显著性(P＜0.05).结论 抗氧化剂VitE可增强中枢神经系统损伤后神经元再生重塑功能.对于VitE佳剂量的选择,尚有待进一步研究.
-
重复经颅磁刺激对帕金森病鼠纹状体生长相关蛋白和突触素表达的影响
目的 探讨重复经颅磁刺激 (repetitive transcranial magnetic,rTMS)对帕金森病(PD)模型鼠纹状体生长相关蛋白(Growth activty protein-43,GAP-43)和突触素(synaptophysin,p38)表达的影响.方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组,PD模型组,假磁刺激(srTMS)组,rTMS组,每组10只.小鼠皮下注射MPTP(15 mg·kg-1·2 h-1·次-1,注射4次)复制PD模型,rTMS干预,利用免疫组织化学染色技术检测GAP-43和p38的表达变化,并借助图像分析系统对其进行定量分析.结果 PD模型组、srTMS组及rTMS组GAP-43阳性产物较对照组明显增多,以rTMS组GAP-43表达升高为明显,且着色深,PD模型组和srTMS组校正光密度值(COD)均明显高于对照组(P＜0.05),rTMS组COD显著高于对照组(P＜0.01)及PD模型组和srTMS组(P＜0.05).PD模型组和srTMS组及rTMS组p38表达较对照组反应产物明显减少,PD模型组和srTMS组 COD均显著低于对照组(P＜0.01),rTMS组 COD值明显低于对照组(P＜0.05),但rTMS组p38表达较PD模型组和srTMS组增多,COD显著高于PD模型组和srTMS组(P＜0.05).结论 rTMS可诱导受损的纹状体区GAP-43和p38的表达上调,从而推测rTMS可能通过促进轴突再生和突触重塑,进而对受损的多巴胺转运通路起修补作用,增加多巴胺转运,从而达到治疗作用.
-
大鼠颅脑外伤后生长相关蛋白在中枢神经系统的表达
目的 观察大鼠颅脑外伤后生长相关蛋白(GAP-43)在中枢神经系统表达的变化,为探讨颅脑外伤后神经元再生和修复机制及临床应用药物治疗颅脑外伤提供理论依据.方法 采用液压冲击法建立大鼠脑外伤模型,同时设正常对照组和假手术对照组.成模后取额皮质及海马部位,应用HE染色法观察额皮质区和海马CA1区的病理学改变,免疫组化法检测GAP-43的表达.结果 轻、中、重度损伤组大鼠脑组织均出现明显的病理学改变,各损伤组大鼠创伤性颅脑外伤(TBI)后,额皮质区及海马CA1区均于12 h开始出现GAP-43表达增强,3 d后明显增强,1周达高峰,2周时开始降低.GAP-43的免疫反应产物的实际累积光密度值(CIOD)值在TBI 12 h后各时间点均明显高于同期的正常对照组和假手术对照组,中、重度损伤组CIOD值在TBI12 h后明显高于同期轻度损伤组.结论 大鼠TBI后,GAP-43的表达增强;TBI损伤越重,其GAP-43的表达越强.
