首页 > 文献资料
-
妊娠期糖尿病与胰岛素抵抗关系的临床研究
目的 通过观察胰岛素受体底物-1(IRS-1)和葡萄糖转运体-4(GLUT4)在妊娠期糖尿病(GDM)患者和健康孕妇胎盘组织中的表达情况,分析其与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(HOMA-ISI)的相关性,探讨GDM与胰岛素抵抗的关系. 方法 采用1:1随机对照病例研究,选择30例妊娠期糖尿病(GDM)患者和30例同孕龄正常健康孕妇为研究对象.分娩时采集胎盘组织,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测IRS-1和GLUT4的mRNA表达水平,采用SPSS17.0软件分析IRS-1和GLUT4与HOMA-IR和HOMA-ISI的相关性. 结果 正常孕妇胎盘组织中IRS-1在mRNA水平表达量显著高于GDM患者(P＜0.05).正常孕妇胎盘组织中上GLUT4在mRNA水平表达量亦显著高于GDM患者(P＜0.05).GDM组比正常对照组HOMA-IR显著增加[(4.42±1.12) vs.(1.76±0.96)],HOMA-ISI则显著降低[(-1.45±0.25)vs.(-0.27±0.34)](P均＜0.01).相关性分析结果显示,IRS-1表达与HOMA-IR呈负相关(r=-0.473,P＜0.01),与HOMA-ISI呈正相关(r=0.342,P＜0.05);而GLUT4的表达与HOMA-IR呈负相关(r=-0.520,P＜0.01),与HOMA ISI无相关性(r=0.187,P＞0.05). 结论 GDM患者中IRS 1和GLUT4在mRNA水平表达明显下降,且与HOMA IR和HOMA-ISI有相关性,提示HOMA-IR的增加和HOMA-ISI的降低可能涉及GDM的发病机制.
-
乙酰左旋肉碱改善肿瘤坏死因子-α诱导大鼠L6细胞胰岛素抵抗的实验研究
目的 研究乙酰左旋内碱(ALC)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的大鼠肌细胞胰岛素抵抗的影响.方法 分化好的L6肌细胞分为6组,分别为对照组、100nmol/L胰岛素组、100nmol/L胰岛素+10ng/ml TNF-α组、胰岛素+TNF-α+三个不同浓度ALC组(浓度分别为0.1、0.3、0.6mmol/L).继续培养24h.实验结束后分别用葡萄糖消耗实验、葡萄糖转运实验检测胰岛素刺激下L6细胞对葡萄糖的消耗和利用情况,Western blot检测细胞胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)的蛋白表达水平.结果 与100nmol/L胰岛素组比较,10ng/ml TNF-α作用24h后胰岛素刺激下细胞上清液中葡萄糖的残存量显著增加和细胞内葡萄糖转运量明显减少(P<0.05),而ALC作用后明显改善TNF-α的抑制作用(P<0.05),并呈剂量-反应关系.Western blot结果显示,与胰岛素组相比,TNF-α增高IRS-1的Ser307磷酸化表达,而ALC作用后减少IRS-1的Ser307磷酸化表达.结论 10ng/ml TNF-α作用24h能诱导L6肌细胞的胰岛素抵抗,而ALC能改善这种胰岛素抵抗,可能是通过减少IRS-1的Ser307磷酸化表达来实现的.
-
地塞米松诱导L6肌细胞胰岛素抵抗模型的建立及EGCG的保护作用研究
目的 建立地塞米松(DEX)诱导的大鼠骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,并观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对其的保护作用.方法 分化好的L6肌细胞,以1μmol/L DEX诱导L6肌细胞产生胰岛素抵抗,予以不同浓度的EGCG进行干预24 h.然后分别用葡萄糖消耗实验、葡萄糖转运实验检测胰岛素刺激下L6细胞对葡萄糖的消耗和利用情况,Western blot检测细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的蛋白表达水平.结果 与100 nmol/L胰岛素组比较,1μmol/L DEX作用24 h后胰岛素刺激下细胞上清液中葡萄糖的残存量显著增加和细胞内葡萄糖转运量明显减少(P＜0.05),而EGCG作用后明显改善DEX的抑制作用(P＜0.05),并呈剂量反应关系.Western blot结果显示,与胰岛素组相比,DEX增高IRS-1的Ser307磷酸化表达,而EGCG作用后减少IRS-1的Ser307磷酸化表达.结论 本研究表明,1μmol/L DEX作用24 h能诱导L6肌细胞的胰岛素抵抗,而EGCG能改善这种胰岛素抵抗,可能是通过减少IRS-1的Ser307磷酸化表达来实现的.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 地塞米松 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物-1 -
橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响
目的:观察橄榄苦苷(oleuropein,OL)对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响.方法:常规复苏细胞,于10％ FBS+ 1％青-链霉素的DMEM(1 g·L-1葡萄糖)培养基中,37℃5％ CO2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用;利用1×10-6mol· L-1胰岛素溶液刺激HepG2肝细胞36 h后建立肝细胞胰岛素抵抗模型,分为模型组,OL组(50 μmol·L-),另设正常HepG2肝细胞为正常组,每组设6个复孔;对数生长期细胞,饥饿培养24 h后,诱导建立胰岛素抵抗模型,进行药物干预36 h后,以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测OL对细胞活性的影响;OL对胰岛素抵抗HepG2肝细胞干预后,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肝细胞胰岛素受体(InsR),胰岛素受体底物-1(IRS-1),葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)mRNA和蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性明显降低(P＜0.05),胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,OL干预后胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性显著升高(P＜0.01);胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显升高(P ＜0.05,P＜0.01).结论:OL能够增加胰岛素抵抗肝细胞活性,上调肝细胞胰岛素信号通路中InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一.
-
降糖消脂片对KK-Ay糖尿病肥胖小鼠胰岛素受体及底物表达的影响
目的:建立糖尿病肥胖小鼠模型,观察降糖消脂片对模型小鼠胰腺胰岛素受体及底物表达的影响.方法:采用KK-Ay转基因小鼠,高脂饲料喂养造成糖尿病肥胖小鼠模型.对照组为同龄C57小鼠,成模的KK-Ay小鼠分为模型组、吡格咧酮组、降糖消脂片高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg-1)(11只/组),连续灌胃给药(ig)8周.每周称体重及摄食量,隔周测血糖.药后8周取胰腺作病理切片,并取胰腺组织检测胰岛素受体及底物表达.结果:降糖消脂片各剂量组明显减轻糖尿病肥胖小鼠体重,降低血糖.病理结果显示:降糖消脂片可减少变性及凋亡的胰岛细胞.糖尿病肥胖模型组小鼠胰腺组织胰岛素受体β(insulin receptor β,lnsRβ)和胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)的表达低于对照组.降糖消脂片可有效诱导InsRβ和IRS-1表达.结论:降糖消脂片对KK-Ay糖尿病肥胖小鼠有明显的治疗作用,并可诱导胰岛素受体及底物表达.
-
补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠IRS-1 Ser307磷酸化表达的影响
目的:观察补肾通脉方对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠的靶器官中胰岛素受体底物-1丝氨酸307(insulin receptor substrate-1 Ser307,IRS-1 ser307)磷酸化表达的影响,探讨补肾通脉方改善PCOS的IR的机制.方法:建立IR的PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为模型组和中药组,另设13只正常对照组.中药组大鼠以补肾通脉方干预.各组动情后期大鼠于门静脉推注胰岛素前后各处死一半.免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝脏、脂肪IRS-1 Ser307磷酸化蛋白表达,免疫组化法检测卵巢IRS-1 ser307磷酸化蛋白表达.结果:模型组IRS-1 Ser307磷酸化在肝脏、脂肪和卵巢中表达均明显高于正常组(P＜0.05,P＜0.01),中药组均显著低于模型组(P＜0.05,P＜0.01).各组肝脏、脂肪和卵巢中IRS-1 Ser307磷酸化表达在胰岛素刺激后均较刺激前明显增多(P＜0.05).结论:补肾通脉方可下调胰岛素靶组织IRS-1 Ser307磷酸化水平、改善胰岛素信号转导,这可能是其改善PCOS的IR的机制之一.
-
降糖消脂片对KK-Ay转基因小鼠胰岛素抵抗的影响
目的 观察降糖消脂片对KK-Ay转基因小鼠稳态模型评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)、胰腺组织胰岛素(insulin,INS)及胰岛素受体(insulin receptor,InsR)蛋白表达的影响.方法 采用高脂饲料喂养KK-Ay转基因小鼠,制备糖尿病肥胖小鼠模型.同时选取11只同龄C57小鼠作为正常对照.将成模的55只KK-Ay小鼠采用随机数字表法分为模型组、吡格列酮组(8 mg/kg)、降糖消脂片高、中、低剂量组(分别给予降糖消脂片1 0、5、2.5g生药/kg),每组1 1只.以上各组均灌胃给药,正常对照组及模型组灌胃等体积灭菌水,每日1次,连续8周.给药8周后,称体重并测随机血糖(random blood glucose,RBG);眼静脉丛取血,测定INS、TC及TG水平,计算HOMA-IR及ISI;取胰腺进行形态学观察;采用免疫组化方法检测胰腺组织INS及InsR表达;采用免疫印迹(Western blot)法检测胰腺胰岛素受体β(insulin receptorβ,InsRβ)及胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)蛋白表达水平.结果 与正常对照组比较,造模后各组小鼠出现肥胖,血糖及血脂明显升高(P＜0.01).给药8周后模型组小鼠体重增加(P＜0.01),血糖及血脂稳定在高位水平;与模型组比较,降糖消脂片各剂量组小鼠体重、TG、INS及HOMA-IR水平明显降低(P ＜0.05,P＜0.01);且高剂量组RBG降低更明显(P＜0.01);降糖消脂片高、低剂量组小鼠ISI明显升高(P ＜0.05,P＜0.01).胰腺病理HE染色结果显示,模型组胰岛萎缩,胰岛数目明显减少,分布稀疏,胰岛密度减低,胰岛细胞代偿性肥大,空泡变性,并可见凋亡细胞,表现为胞浆肿胀,核固缩.降糖消脂片高、中剂量组胰岛细胞数目明显增多,变性及凋亡细胞减少.免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组INS及InsR累积光密度(IOD)值明显降低(P＜0.01);与模型组比较,降糖消脂片各剂量组胰腺INS及InsR IOD值明显增加(P ＜0.05,P＜0.01).Western blot结果显示,与正常对照组比较,模型组InsRβ及IRS-1蛋白表达明显降低(P＜0.01);与模型组比较,降糖消脂片各剂量组InsRβ及IRS-1蛋白表达水平升高(P＜0.01),与吡格列酮组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 降糖消脂片对KK-Ay糖尿病肥胖小鼠有明显的降糖、降脂及改善胰岛素抵抗的作用,其机理可能是通过增加胰岛细胞InsRβ及IRS-1表达,促进INS与受体的结合,从而改善糖、脂代谢和IR状态.
-
补肾通脉方对胰岛素抵抗大鼠胰岛素信号转导的影响
目的:观察补肾通脉方对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)模型大鼠肌肉和脂肪组织中胰岛素刺激后的胰岛素受体(InsR)和胰岛素受体底物-1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的影响.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,治疗组以纯中药制剂补肾通脉方进行干预;模型组和治疗组大鼠均用脂肪占总热卡含量61%的高脂饲料饲养8周,正常组喂以普通饲料;常规测定空腹血糖(FBG)及葡萄糖负荷后1、2h血糖(BG-1h, BG-2h),以放射免疫法测定空腹血清胰岛素(Fins);采用免疫沉淀及Western blot技术测其肌肉及脂肪组织中胰岛素刺激后的InsR和IRS-1酪氨酸磷酸化水平.结果:与模型组比较,治疗组FBG虽无明显变化,但Fins显著降低(P＜0.01),因而胰岛素敏感指数(ISI)明显升高(P＜0.01);治疗组BG-1h和BG-2h水平较模型组明显降低(P＜0.05,P＜0.01);治疗组大鼠肌肉和脂肪组织中InsR β亚单位和IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白电泳条带密度明显增加.结论:补肾通脉方对大鼠IR有显著的改善作用,其机制可能与提高IR大鼠肌肉和脂肪组织中InsR和IRS-1在胰岛素刺激后的酪氨酸磷酸化水平,改善胰岛素信号转导等环节有关.
-
自发性2型糖尿病大鼠主动脉胰岛素受体底物1与eNOS的蛋白表达
应用免疫组织化学和Western印迹方法,测定16周及24周自发性2型糖尿病OLETF大鼠主动脉胰岛素受体底物1(IRS-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达,以同种系非糖尿病LETO大鼠作为正常对照,以探讨胰岛素受体后信号传递分子IRS-1与胰岛素抵抗状态下大血管病变的关系.结果显示IRS-1和eNOS在主动脉内膜呈阳性表达;OLETF大鼠呈胰岛素抵抗特征,在16周和24周其主动脉组织内IRS-1的蛋白表达水平均明显低于对照组,分别减少28.2%和33.9%(P＜0.01).eNOS蛋白水平分别减少27.7%和35.8%(P＜0.01).两者变化方向一致.提示血管组织胰岛素受体后信号传递分子异常,导致内皮细胞胰岛素抵抗及一氧化氮生成障碍,可能是糖尿病患者早期大血管病变危险性增加的机制之一.
-
APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马IRS-1、IGF-1R表达的影响
目的通过对胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)在海马表达的观察,研究APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马神经元I RS-1、IGF-1R的影响. 方法用链脲佐菌素(STZ)诱发小鼠糖尿病模型,并皮下注射APP17肽对糖尿病小鼠进行治疗,4周后取脑组织做IRS-1、IGF-1R免疫组织化学染色. 结果糖尿病小鼠海马内IRS-1、IGF-1R阳性反应神经元胞浆与突起深染,而正常小鼠及APP17肽保护的糖尿病小鼠海马阳性细胞数目少,染色淡. 结论糖尿病小鼠海马IRS-1、IGF-1R广泛表达;APP17肽能影响糖尿病脑病小鼠脑内IRS-1,IGF-1R的表达,使之接近正常.
关键词： App17肽 糖尿病脑病 胰岛素受体底物-1 胰岛素样生长 因子受体 -
血脂变化对OLETF大鼠肝脏、脂肪组织胰岛素受体底物1和含2个SH结构的蛋白酪氨酸磷酸酶蛋白表达的影响
目的 观察血脂变化对OLETF大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和含2个SH结构的蛋白酪氨酸磷酸酶(SH-PTP2)蛋白表达的影响. 方法 14只OLETF大鼠被随机分为降脂治疗组和对照组.采用Western杂交技术检测OLETF大鼠肝脏、脂肪组织内IRS-1及SH-PTP2的蛋白表达水平. 结果 降脂治疗组血糖及血脂水平较对照组下降(P＜0.05),肝脏、脂肪组织内IRS-1蛋白表达较对照组增加(t=14.61,15.76,P均＜0.01),而SH-PTP2的蛋白表达较对照组减少(t=-3.07、-28.76,P均＜0.01). 结论 降脂治疗可增加OLETF大鼠肝脏、脂肪组织内IRS-1蛋白表达,减少其SH-PTP2蛋白表达,并可能因此影响其胰岛素信号传导,改善其靶组织对胰岛素的敏感性.
-
利拉鲁肽对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶及胰岛素受体底物-1表达的影响
目的：探讨胰升血糖素样肽‐1（GLP‐1）类似物利拉鲁肽对体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）胰岛素受体底物‐1（IRS‐1）、一氧化氮合酶（eNOS）和磷酸化eNOS（p‐eNOS）表达的影响。方法以含有5.5 mmol／L葡萄糖的DMEM培养基体外培养 HUVECs ，将上述细胞分为10组，各组中均加入3 nmol／L的利拉鲁肽注射液干预，分别于第0、10、15、30、45、60、90、120、150、180 min提取细胞，以Western blot检测各组细胞IRS‐1、eNOS及p‐eNOS表达情况。结果利拉鲁肽干预HUVECs不同时间后，各组细胞表达IRS‐1和p‐eNOS有所不同，0、10、15 min细胞p‐eNOS表达比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。从第30 min开始，p‐eNOS表达逐渐增加，至第150 min达峰，随之p‐eNOS表达量开始下降（P＜0.05）；IRS‐1表达趋势与p‐eNOS相似，也具有利拉鲁肽时间依赖性，且作用高峰亦为150 min（P＜0.05）；而各时间点eNOS表达比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 GLP‐1类似物利拉鲁肽呈时间依赖性的促进正糖培养的 HUVECs IRS‐1及 p‐eNOS 的表达，其作用高峰为第150 min ，而对eNOS的表达未观察到促进作用。
-
中国人2型糖尿病患者胰岛素受体底物-1基因变异的研究
目的确定中国人胰岛素受体底物-1基因变异是否与2型糖尿病相关。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性分析方法筛选了68例中国人2型糖尿病患者和68例正常对照组的胰岛素受体底物-1基因的+1700～+4437bp片段。再将单链构象多态性有改变的全部片段进行DNA序列分析。结果发现2种出现氨基酸变化的核苷酸变异[GGG→AGG(G971R)和CCT→TCT(P1079S)]和3种无声变异[GAT→GAC(D422D)、CCA→CCC(P737P)和GCA→GCG(A804A)]，其中CCA→CCC(P737p)和CCT→TCT(P1079S)]是首次报道。这5种核苷酸变异均在2型糖尿病患者中发现，而在正常对照组中只发现GCA→GCG(A804A)。中国人2型糖尿病患者这5种变异的发生频率远高于正常对照组(38.2％vs 7.4％，χ2=18.42，P＜0.01)。常见的多态性是GCA→GCG(A804A)，在2型糖尿病患者中它的发生率远高于正常对照组(26.5％vs 7.4％，2=8.84，P＜0.01)。在2型糖尿病患者和正常对照组中，该变异的纯合子发生率分别为8.8％和1.5％(χ2=2.41，P＞0.05)。结论胰岛素受体底物-1基因的核苷酸变异可能与中国人2型糖尿病的发生有相关性。
-
胰岛素受体底物-1、内皮型一氧化氮合酶与胰岛素抵抗、糖尿病下肢血管病变及糖尿病足发病关系的临床研究
目的 探讨胰岛素受体底物-1(IRS-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)与糖尿病下肢血管病变及糖尿病足(DF)的发病关系,为临床预防及治疗糖尿病下肢血管病变提供试验依据. 方法 采用RT-PCR检测糖尿病足溃疡(DFU)组、糖尿病合并下肢血管病变(T2DM+ PAD)组、T2DM组及正常对照(NC)组外周血单个核细胞IRS-1及eNOS mRNA表达,并采集各组临床生化资料,稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).采用方差分析,秩和检验及直线相关进行组间比较及各指标相关关系的分析.结果 T2DM、T2DM+ PAD和DFU组TG、TC、FPG、2 hPG、HbA1c、HOMA-IR均高于NC组(P＜0.05),T2DM+PAD和DFU组TG,LDL-C及病程高于T2DM组,HDL-C低于T2DM组(P＜0.05).NC组IRS-1 mRNA 2-△△CT和eNOS mRNA 2-△△CT表达高[1.00(0.70,1.41),1.00(0.65,1.53)],DFU组低[0.26(0.10,0.62),0.18(0.11,0.31)](P＜0.05).T2DM、T2 DM+ PAD、DFU组IRS-1与eNOSmRNA表达呈直线相关(r=0.4638、0.5471、0.5023,P＜0.05). 结论 IRS-1可能通过下调eNOS的表达参与了糖尿病下肢血管病变及DF的发生发展.
-
胰岛素受体α、β及胰岛素受体底物-1在子宫内膜癌的表达及其临床意义
目的 探讨胰岛素受体α(IRα)、β(IRβ)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)在子宫内膜癌的表达及其临床意义.方法 用免疫组织化学法检测10例正常子宫内膜、18例子宫内膜增生及57例子宫内膜癌组织中IRα、IRβ及IRS-1蛋白的表达.结果 IRα、IRβ、IRS-1的表达在10正常子宫内膜表达分别为80.00%(8/10)、60.00%(6/10)及70.00%(7/10);在18例子宫内膜增生组织中分别为77.78%(14/18)、61.11%(11/18)及77.78%(14/18);在子宫内膜癌组织中分别为47.37%(27/57)、54.39%(31/57)及63.16%(36/57).IRα的表达在子宫内膜癌组织与正常子宫内膜组及子宫内膜增生比较差异有显著性(P＜0.05),其余差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅰ期子宫内膜癌组织中IRα的阳性表达率明显低于Ⅱ～Ⅳ期者(P＞0.05); IRβ及IRS-1各组间的阳性表达率与Ⅱ～Ⅳ期者相近(P＞0.05);IRS-1的阳性表达率Ⅰ期明显低于Ⅱ～Ⅳ期者(P＞0.05);IRα、β、IRS-1蛋白的表达在子宫内膜癌G1-2与G3差异有显著性(P＜0.05),与肌层浸润深度及淋巴结转移与否差异无显著性(P＞0.05).结论 IRα及IRS-1的表达与子宫内膜癌的期别有关,提示其表达的改变可能是子宫内膜腺癌发生的早期事件.
-
姜黄素对阿尔茨海默病模型小鼠胰岛素受体底物-1的影响
目的 观察姜黄素对阿尔茨海默病模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)表达的影响,探讨姜黄素神经保护作用机制.方法 将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组、姜黄素高(400 mg/kg)、中(200 mg/kg)、低(100 mg/kg)剂量组,并以同窝阴性小鼠作为正常对照组.连续灌胃6个月后,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR法进行检测.结果 免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区IRS-1阳性细胞较正常组明显增加(P＜0.01),与模型组相比,各干预组IRS-1阳性细胞数减少(P＜0.05或P＜0.01),p-IRS-1结果与IRS-1结果相反.Western blot检测海马IRS-1和p-IRS-1的蛋白表达结果与免疫组化检测结果一致.RT-PCR检测IRS-1 mRNA表达结果与免疫组化和Westernblot结果一致.结论 姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的IRS-1和减少的p-IRS-1得以恢复,并调节IRS-1 mRNA表达,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导,提示姜黄素可能通过调节胰岛素信号转导机制发挥抗阿尔茨海默病作用.
关键词： 姜黄素 阿尔茨海默病 双转基因小鼠 胰岛素受体底物-1 磷酸化胰岛素受体底物-1 -
胰岛素受体底物-1基因rs1078533单核苷酸多态性与2型糖尿病合并冠心病患者氯吡格雷抵抗的相关性研究
目的 探讨胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)基因rs1078533单核苷酸多态性与2型糖尿病合并冠心病患者氯吡格雷抵抗(clopidogrel resistance,CR)发生的相关性.方法 入选2012年4月-2013年4月沈阳军区总医院2型糖尿病合并冠心病住院患者325例,采用光学比浊法测定20μmol/L二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的残余血小板聚集率(residual platelet agglutination,RPA),当RPA≥70％时定义为CR.所有入选患者根据RPA分为CR组(n=142)和非氯吡格雷抵抗(NCR)组(n=183).采用聚合酶链式反应结合直接测序法测定IRS-1基因rs1078533位点在CR组和NCR组的基因型及等位基因分布频率.结果 IRS-1基因rs1078533多态位点在CR组和NCR组基因型分布频率符合Hardy-Weinberg平衡.三种基因型(AA、AC和CC)在两组的分布频率分别为1.4％、16.8％、81.8％和1.6％、19.8％、78.6％.基因型(AA、AC和CC)及等位基因(A和C)分布频率在CR组和NCR组间均无统计学差异(P=0.786,P=0.524).Logistic回归分析校正性别、年龄、体质量指数、吸烟和高血压等冠心病和糖尿病易患因素后,IRS-1基因rs1078533单核苷酸多态性仍与2型糖尿病合并冠心病患者CR的发生无相关性.结论 IRS-1基因rs1078533单核苷酸多态性与2型糖尿病合并冠心病患者CR的发生无相关性.
关键词： 氯吡格雷抵抗 胰岛素受体底物-1 2型糖尿病合并冠心病 单核苷酸多态性 -
APP5肽类似物P165和罗格列酮对SH-SY5Y细胞IRS-1和p-CREB表达的影响
观察APP5肽类似物P165和罗格列酮（rosiglitazone）对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）损伤人神经母细胞瘤株SH - SY5Y细胞后,胰岛素信号通路相关因子IRS-1和p-CREB表达水平的影响.方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ损伤模型组(STZ 0.8mmol/L)、罗格列酮保护组（STZ 0.8 mmol/L+罗格列酮20 μmol/L）,APP5肽类似物P165保护组(STZ 0.8 mmol/L+P165 30 μmol/L),进行细胞形态观察,IRS-1和p-CREB免疫细胞荧光染色观察,采用image-pro plus 图像分析软件测定平均吸光度值.结果与对照组相比,STZ损伤组细胞生长分裂减慢、突起缩短,细胞胞体皱缩,IRS-1和p-CREB免疫荧光染色强度减弱；与STZ损伤组相比,罗格列酮组和P165组突起伸展,细胞形态和细胞胞体皱缩现象明显改善,细胞出现强荧光染色.平均吸光度值测定结果显示:与对照组相比,STZ损伤组IRS-1和p-CREB平均吸光度值降低（P＜0.008）,与STZ损伤组相比,P165组和罗格列酮组平均吸光度值有所上升,差异均有统计学意义(P＜0.008).结论APP5肽类似物P165和罗格列酮可能通过增加IRS-1、p-CREB的表达来改善STZ对于SH-SY5Y细胞的损伤,从而达到保护神经元的作用.
关键词： APP5肽类似物P165 罗格列酮 链脲佐菌素 胰岛素受体底物-1 P-CREB -
妊娠期糖尿病患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4的表达
目的：探讨妊娠期糖尿病患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4的表达。方法选取2012年3月~2014年3月本院产科门诊收治的住院分娩孕妇共83例,按照检查结果将其分为妊娠期糖尿病组(GDM组)(n=43)和正常足月妊娠组(对照组)(n=40)。检测两组孕妇的各临床指标(身高、血压、体重以及空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油等),同时采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测定患者胎盘组织中的IRS-1和GLUT4的表达水平。结果 GDM组的空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油等指标水平均高于对照组(P<0.05)。 GDM组的HOMA-IR高于对照组,GDM组的HOMA-ISI、HOMA-β%低于对照组(P<0.05)。IRS-1在两组胎盘组织中的表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)；GLUT4在两组胎盘组织胞质中的表达水平的比较,差异无统计学意义(P>0.05),在胎盘组织细胞膜中的表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IRS-1、GLUT4作为胰岛素信号通路中的信号转导分子,其在胰岛素抵抗环节中发挥重要作用。
-
御唐丸对糖尿病大鼠胰腺组织IRS-1基因表达和蛋白磷酸化的影响
目的 探讨御唐丸对糖尿病大鼠胰腺组织胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因表达和蛋白磷酸化的影响.方法 将150只SD大鼠按体重分层随机分为空白组(20只)及造模组(130只).用高脂饲料连续喂养造模组大鼠10周制备2型糖尿病大鼠模型,按随机数字表法分为模型组、糖尿乐组、御唐丸高剂量组、御唐丸低剂量组及格华止组,每组20只.按大鼠与成人等效剂量折算,御唐丸高剂量组给予御唐丸2.70 g/(kg·d),御唐丸低剂量组给予御唐丸1.35 g/(kg·d),糖尿乐组给予糖尿乐2.43 g/(kg·d),格华止组给予格华止0.09 g/(kg·d),模型组及空白组给予生理盐水2 mL/d.连续灌胃给药8周后取大鼠胰腺组织,用Real-time PCR方法检测IRS-1 mRNA表达水平,用Western blot法检测IRS-1蛋白表达及磷酸化水平.结果 与模型组比较,格华止组、糖尿乐组、御唐丸低剂量组及御唐丸高剂量组IRS-1 mRNA的相对表达量均有所增加(P＜ 0.05或P＜0.01),且御唐丸高剂量组IRS-1 mRNA的相对表达量高于御唐丸低剂量组(P＜0.05);与模型组比较,格华止组、糖尿乐组、御唐丸低剂量组及御唐丸高剂量组IRS-1 ser307蛋白磷酸化水平均显著降低(P＜0.01),且御唐丸高剂量组IRS-1 ser307蛋白磷酸化水平显著低于御唐丸低剂量组,差异有高度统计学意义(P＜0.01).结论 御唐丸能通过影响IRS-1mRNA相对表达量、抑制IRS-1 ser307蛋白磷酸化进程从而减轻胰岛素抵抗,进而对2型糖尿病起到治疗作用.
