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石榴多酚对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用
目的:观察石榴多酚(punicosides,Puns)对乙醇所致的急性小鼠肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法:将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、Puns低、中、高3个剂量组和水飞蓟宾组.预先给予Puns组和水飞蓟宾组灌胃给药4周后建立乙醇所致的急性肝损伤动物模型,观察Puns对肝、胸腺和脾脏指数的影响,检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(A LT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)的含量,及肝匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽S转移酶(GSH-ST)的含量变化.HE染色观察肝脏组织学改变,免疫组化法检测肝组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达情况.结果:Puns中剂量和高剂量组能显著降低小鼠肝指数,改善肝脏脂肪变性情况,降低小鼠血清中的ALT,AST,TG水平,降低肝匀浆中的MDA含量,增加SOD,GSH-Px和GSH-ST 3种酶的活性,改善肝组织学变化,抑制肝组织中MCP-1和NF-κB的表达.结论:Puns对小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用.
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补肾清肝中药配伍对间歇性低氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型p38MAPK/NF-κB信号通路的干预效应研究
研究补肾清肝中药配伍对间歇性低氧致人脐静脉内皮细胞损伤模型p38MAPK/NF-κB信号通路的干预效应.实验采用改良的间歇性低氧诱导人脐静脉内皮细胞建立体外细胞损伤模型,以补肾清肝中药有效成分配伍(异钩藤碱、桃叶珊瑚苷及川芎嗪)作为干预药物,首先进行中药优配伍浓度体外筛选,然后选择优配伍浓度作为干预剂量,观察其对模型p38MAPK/NF-κB信号通路的干预效应.结果显示异钩藤碱、桃叶珊瑚苷及川芎嗪在0.01 mg·L“时具有佳的体外抗炎效应.间歇性低氧组NF-κB p65入核量及p-IκB较对照组与其他各组均显著增加,同时免疫荧光染色NF-κB p65可见间歇性低氧组出现明显NF-κB p65核移位表现,内皮细胞黏附程度明显增加;与间歇性低氧组相比,p38MAPK抑制剂组及补肾清肝中药配伍组p-p38MAPK,NF-κB p65入核量及p-IκB表达量均明显较少,内皮细胞黏附明显被抑制.该研究表明,补肾清肝中药优浓度配伍通过将抑制p38MAPK的磷酸化作为起始,继而阻断了NF-κB的核移位行为,抑制其转录功能,实现对间歇性低氧诱导血管内皮细胞损伤模型的保护效应.
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β-细辛醚对Aβ1-42诱导星形胶质细胞活化所致PC12细胞损伤的保护作用研究
该文探讨β-细辛醚对Aβ11-42诱导星形胶质细胞活化所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制,为β-细辛醚在阿尔兹海默病(A1zheimer's diease,AD)防治中的应用提供实验依据.首先,采用实时无标记动态细胞分析技术(Real time cell analysis,RTCA)构建RA-h/PC12共培养体系,实时动态观察Aβ1-42诱导星形胶质细胞损伤后对共培养体系中PC12细胞存活率的影响,根据系统自动生成的存活率曲线和参数选出佳的药物干预时间,采用不同浓度的β-细辛醚对星形胶质细胞进行干预,观察共培养体系中PC12细胞存活率的改变;其次,采用MTT法检测Aβ1-42作用于RA-h对PC12细胞存活率的影响以及β-细辛醚的干预效应,验证RTCA的检测结果;进一步采用ELISA法检测下室培养液中IL-1β,TNF-α,BDNF的水平;Western blot法检测PC12细胞NF-κB的活性和ERK,p38,JNK磷酸化水平.结果显示,β-细辛醚(55.5 mg·L-1)能显著减缓Aβ1-42诱导的RA-h活化引起的PC12细胞存活率下降(P＜0.01),显著降低下室培养液中IL-1β,TNF-α的水平和PC12细胞ERK,p38,JNK 磷酸化水平(P＜0.01);β-细辛醚(166.7 mg·L-1)能促进下室培养液中BDNF的释放(P＜0.05).以上结果表明,Aβ1-42诱导RA-h活化并释放IL-1β,TNF-α等炎症因子加剧PC12细胞的损伤;β-细辛醚能降低IL-1β,TNF-α和促进BDNF的释放,抑制PC12细胞NF-κB的活性和ERK,p38,JNK磷酸化水平.
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雷公藤多苷抗巨噬细胞炎症及对TLR4/NF-κB调控炎症作用的研究
为研究雷公藤多苷(Tripterygium wilfordii polycoride,TWP)对LPS诱导巨噬细胞炎症反应时,对炎症因子TNF-α,IL-1β的抑制作用,对TLR4/NF-κB调控炎症作用的干预研究,同时观察其对TLR4/NF-κB调控炎症作用的影响.采用噻唑蓝(MTT)法检测受试药物TWP、地塞米松(DXM)及硫唑嘌呤(AZA)对细胞生长的影响,选择合适的药物浓度.通过LPS诱导小鼠RAW264.7细胞株产生炎症反应,ELISA法检测TNF-α及IL-1β的释放,Westen blotting法检测TLR4及NF-κB p65蛋白表达水平,荧光定量PCR(RT-PC R)测定TLR4及NF-κB的表达.实验结果显示TWP剂量依赖性抑制巨噬细胞炎性细胞因子TNF-α,IL-1β的释放,TWP各剂量组作用均逊于DXM,但TWP高剂量组与AZA组作用比较,对TNF-α作用其优于AZA组;对IL-1β作用其相当于AZA组.对TLR4/NF-κB调控炎症作用的影响,TWP剂量依赖性下调TLR4及NF-κB p65的表达,其作用相当于或优于DXM及AZA.终得出结论:该项研究显示TWP具有抑制TNF-α及IL-1β的作用,下调TLR4,NF-κB p65受体的表达是其作用的机制之一.
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慢性肾脏病肾组织炎症信号通路NF-κB的调节机制及中药的干预作用
在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)的进展过程中肾组织的炎症反应及其相关的组织损伤是导致其进展至终末期肾病的根本原因.其中,核转录因子(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)信号通路通过调控核内相应靶基因的转录或表达,以及影响炎症介质的合成,诱导炎症反应导致肾脏损害及肾纤维化.某些单味中药及其提取物(如黄芪、黄芩、银杏叶)以及一些中药复方(如当归补血汤、芪莲汤)可以减轻肾组织NF-κB信号通路引起的炎症损伤,延缓CKD进展.
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药用植物活性成分调控p65核转运总结与展望
NF-κB作为细胞内重要的核转录因子,参与许多细胞内信号通路的传导以及遗传信息的转录与调控,其信号传导通路主要包括IκB激酶的活化、IκB蛋白降解以及p65的核转运,其中p65核转运结合DNA是NF-κB发挥作用的关键.NF-κB的异常激活是诱发氧化应激、炎症、癌症等的主要因素,因此维持NF-κB活性平衡和调控p65的核转运对相关课题的深入研究具有重要的参考意义.该文综述了药用植物中主要活性物质多酚类、皂苷类、生物碱等对p65核转运的调控作用并对NF-κB上游通路进行了讨论,以期为天然活性物质开发成功能性食品的研究提供参考价值.
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黄芩苷对溃疡性结肠炎患者NF-κB及磷酸化NF-κB表达的影响
目的：本研究旨在探讨UC患者外周血单个核细胞NF-κB及磷酸化NF-κB及相关细胞因子在溃疡性结肠炎(UC)中的表达，并进一步探讨体外黄芩苷干预的作用。方法：应用western blotting蛋白水平检测UC患者外周血单个核细胞NF-κB p65和Phospho-NF-kB p65，用ELISA法检测血清IFN-r、IL-4、IL-6、IL-10水平及体外黄芩苷干预下的检测上述指标。结果：与健康对照组和IBS-D组相比较，p-NK-FB明显增高，NK-FB明显下降，p-NK-FB/NK-FB明显增高，差异有显著性（P＜0.05）；IBS-D组和健康对照组之间无显著性差异（P＞0.05）。体外培养体外黄芩苷干预下，在40umol浓度干预下p-NK-FB/NK-FB 较未干预前、DMSO干预、5umol干预、10umol和20umol浓度干预下下降，存在显著性差异（P＜0.05）。从ELISA检测较高浓度的黄芩苷能够明显抑制IFN-r、IL-6等细胞因子，可以使IL-4、IL-10升高。结论：黄芩苷作为黄芩汤的重要组成成分之一，可能是一种潜在的免疫抑制剂，可能抑制p-NK-FB/NK-FB，调节免疫平衡而缓解溃疡性结肠炎的炎症反应，为深入研究UC的发病机制及新药开发提供理论基础。
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金钗石斛对糖尿病大鼠肝组织NF-κB表达的影响
目的:探讨金钗石斛对糖尿病大鼠肝组织NF-κB表达的影响.方法:采用高糖高脂饲料和链脲佐菌素联合建立糖尿病大鼠模型,随机分成正常组、糖尿病组、金钗石斛组,各组均灌胃给药8w,采用HE染色法观察肝脏病理学改变,ELISA和免疫组化法分析肝组织NF-κB的含量和蛋白表达.结果:与造模组相比,金钗石斛组大鼠病理损伤减轻,肝脏NF-κB的含量和蛋白表达分别下降了27.94%和32.18%(均P<0.05).结论:金钗石斛可能通过抑制NF-κB的表达,保护糖尿病大鼠的肝脏.
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定心方对大鼠缺血及再灌注心律失常的保护作用及对核因子κB活化的影响
目的 研究定心方对大鼠缺血及再灌注心律失常的保护作用及对心肌组织核因子(NF)κB活化的影响.方法 用冠状动脉结扎及再松开的方法制备缺血及再灌注心律失常动物模型;记录Ⅱ导联心电图,对心律失常进行评分;常规HE染色观察心肌组织的病理改变;免疫组化法检测心肌组织NF-κB的表达.结果 定心方干预后缺血及再灌注心律失常明显减轻(P＜0.01),心肌组织病理改变减轻,心肌组织NF-κB的表达明显减少(P＜0.01).结论 定心方对大鼠缺血及再灌注心律失常具有良好的保护作用,抑制NF-κB的活化是其机制之一.
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痘病毒介导的NF-κB信号通路的调控
痘病毒是人和多种动物痘病的病原体,作为嗜上皮型的DNA病毒,在进化过程中,痘病毒特定的基因产物作用于机体免疫调控系统,调节免疫反应的进程和作用方式,进而完成其感染细胞、复制和繁殖的生物学过程.NF-κB信号通路是机体免疫系统重要的信号转导调节系统,各种痘病毒采用自身特殊的策略作用于这一免疫调节的重要靶系统,应对机体对其免疫清除和免疫反应.对痘病毒介导的宿主免疫调节的深入研究有助于研发新型疫苗和治疗性制剂.本文对近十年来各种痘病毒编码的多种目标蛋白参与宿主NF-κB信号通路调控的分子机制进行综述.
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SDF-1/CXCR4信号轴通过NF-κB通路诱导人退变髓核细胞凋亡
目的 探讨趋化因子SDF-1/CXCR4信号轴对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的调控作用及其分子机制.方法将术中摘取的椎间盘标本根据Pfirrmann退变程度分为正常组和退变组.用免疫组织化学法、定量PCR和Western blot等检测SDF-1和CXCR4的表达.用退变椎间盘髓核原代细胞培养,取第3~5代的细胞给予10 ng/mL SDF-1刺激、CXCR4-siRNA转染及NF-κB特异性抑制剂PDTC(20μmol/L)等不同处理,Western blot和q-PCR验证转染效率和信号通路上靶蛋白(基因)的表达;Annexin V/PI检测细胞凋亡率;细胞免疫荧光检测NF-κB的重要基团P65的核转移情况.结果SDF-1和CXCR4在退变椎间盘组织中表达显著升高(P<0.05);SDF-1可以诱导退变髓核细胞的凋亡,但在CXCR4的表达受到沉默后,SDF-1的促凋亡作用被抑制(P<0.05);加入SDF-1的诱导后,磷酸化P65的表达水平明显增高(P<0.05),P65向核内移位;用PDTC抑制NF-κB活性后,SDF-1促凋亡作用明显减弱(P<0.05).结论SDF-1/CXCR4信号轴促进髓核细胞凋亡的机制可能与Akt/NF-κB信号通路相关.
关键词： SDF-1/CXCR4 椎间盘退变 退变髓核细胞 AKT NF-κB -
长春新碱降低由转染A20 siRNA促进的弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系增殖
目的 研究A20小分子干扰RNA片段(siRNA)对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY1)增殖和多药耐药基因(MDR1)表达的影响.方法 分对照组、转染组、长春新碱干预组(VCR)组和转染+VCR组.用脂质体转染法将A20 siRNA转入OCI-LY1细胞,MTT法检测细胞对VCR的敏感性;流式细胞计量术检测细胞凋亡;用real-time PCR检测A20及MDR1 mRNA;用Western blot检测细胞内A20、Pgp蛋白及核蛋白NF-κB的表达.结果 1)A20 siRNA转染后,细胞增殖能力增强(P<0.05),VCR刺激后转染细胞的增殖曲线下降缓慢.2)转染细胞凋亡率明显低于对照组,VCR刺激24 h后OCI-LY1细胞凋亡率较加药前明显增加(P<0.05),VCR组凋亡率比转染+VCR组增高的幅度大(P<0.05).3)转染后,A20 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.001),NF-κB蛋白(P<0.001)、MDR1 mRNA(P<0.001)和Pgp (P<0.001)表达都明显增高;但MDR1 mRNA 和Pgp在药物刺激后表达降低(P<0.05),且VCR组较转染+VCR组降低的幅度大(P<0.01).结论 A20 siRNA能有效的增强OCI-LY1细胞内NF-κB的表达,使得MDR1基因及编码蛋白Pgp蛋白增强,从而抑制细胞凋亡、促进细胞增殖;VCR刺激后细胞内MDR1 mRNA和Pgp的表达明显降低,A20 siRNA则减弱了VCR的这一作用.
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NF-κB及其调控的miRNA在宫颈癌移植瘤及癌旁组织中的活化和表达
目的 分析宫颈癌移植瘤小鼠的癌与癌旁组织中miR-15b和miR-16的表达状况以及NF-κB信号通路在宫颈癌癌旁组织活化情况,为宫颈癌的诊断和治疗提供新思路.方法 建立小鼠宫颈癌移植瘤模型,取癌组织与癌旁组织,以及正常的脂肪组织,用实时荧光定量PCR方法检测miR-15b和miR-16的表达,用免疫组化检测NF-κB(P65)蛋白的表达及定位.结果 移植瘤造模成功.miR-15b在宫颈癌组织中表达为32.21±3.67,明显高于癌旁组织的25.16±1.86和正常组织的1.00 ±0.12(P ＜0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P＜0.05);miR-16在宫颈癌组织中表达为28.63±2.34,明显高于癌旁组织的22.16±1.76和正常组织的1.00±0.12(P ＜0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P＜0.05).在正常脂肪组织中,NF-κB(P65)蛋白主要定位于胞质,而在癌组织与癌旁组织中,NF-κB (P65)蛋白主要位于胞核.结论 NF-κB通路及其相关的miR-15b和miR-16可能参与了宫颈癌发生的早期分子事件.
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TrKA-siRNA抑制乳腺癌细胞系MCF-7 NF-κB的表达并促细胞凋亡
目的 探讨TrKA基因表达的变化对NF-κB P65核蛋白的表达和细胞凋亡的影响.方法 构建TrKA特异小于扰RNA(siRNA)表达载体,重组体经测序鉴定正确后转染乳腺癌MCF-7细胞.G418(geneticin)筛选稳定表达TrKAsiRNA干扰细胞株,命名为TrKA-siRNA.荧光实时定量RT-PCR、Western blot和免疫组化法检测TrKA基因和蛋白的表达,Western blot检测NF-κB P65核蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 成功构建TrKA-siRNA表达载体,TrKA mRNA和蛋白水平分别下调74.7%和80.5%(P<0.05).神经生长因子(NGF)作用2 h后,MCF-7组细胞NF-κB P65核蛋白表达明显增加,而TrKA-siRNA组细胞NF-κB P65核蛋白改变不显著.与McF-7组相比,TrKA-siRNA组细胞凋亡明显增加(P<0.05),NGF对其凋亡无促进作用.结论 有效阻断TrKA基因的表达能抑制NF-κB抗凋亡途径的活化,从而增加了乳腺癌MCF-7细胞的凋亡.此作用可能不依赖于外源性的NGF.
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虫草素增强顺铂诱导的食管癌细胞系Eca109凋亡
目的 研究虫草素与顺铂联合用药对食管癌细胞Eca109凋亡的影响及其作用机制.方法 将食管癌细胞Eca109分为对照组、不同浓度虫草素处理组、不同浓度顺铂处理组和虫草素(70 μg/mL)与顺铂(0.8 μg/mL)联合处理组.MTS法检测Eca109细胞增殖;Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测Eca109细胞凋亡;Western blot法检测细胞核内NF-κB P65及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平;ELISA法检测细胞核内NF-κB P65与DNA的结合活性.结果 虫草素与顺铂联合应用使顺铂对Eca109细胞的抑制率由29.30％增加至70.41％ (P ＜0.05),增强了顺铂对Eca109的敏感性;与顺铂单独用药相比,联合用药能够显著增加顺铂诱导的细胞凋亡(P＜0.05);与对照组相比顺铂能够增加细胞核内NF-κB P65的活性,而虫草素却能抑制NF-κB P65的活性,联合用药后NF-κB P65的活性下调;与虫草素和顺铂单独用药相比,联合用药组能够使抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著降低(P＜0.05),而促凋亡蛋白Bax表达则显著增高(P＜0.05).结论 虫草素可能通过抑制NF-κB途径,调节下游信号分子Bcl-2和Bax的表达,增强顺铂对Eca109的凋亡诱导效应.
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CRP促进THP-1来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1的表达
目的 探讨C反应蛋白(CRP)对单核细胞株(THP-1)来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)蛋白和mRNA的表达及相关信号转导通路的影响.方法 用佛波醇脂诱导THP-1分化为巨噬细胞.用不同浓度CRP在体外干预,分别采用RT-PCR和细胞酶联免疫测定干预后巨噬细胞LOX-1抗原蛋白和mRNA的表达.同时观察当NF-κB、AP-1和MARK信号通路抑制剂存在时,CRP对LOX-1抗原和mRNA表达的影响.结果 CRP促进巨噬细胞LOX-1蛋白和mRNA表达增加.NF-κB的抑制剂BAY11-7085能抑制CRP对LOX-1蛋白和mRNA表达的诱导作用.结论 CRP能在转录及转录后水平诱导THP-1来源的巨噬细胞表达LOX-1,这种调节作用可能是通过NF-κB信号传导通路实现的.
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miR-548p表达上调抑制卵巢癌细胞系SKOV-3的增殖和迁移
目的 探讨miR-548p对卵巢癌细胞系SKOV-3细胞增殖和迁移能力的影响,阐明miR-548p发挥功能的相关作用机制.方法 实时荧光定量PCR分析卵巢癌组织和癌旁组织以及卵巢癌细胞系中miR-548p的表达;用miR-548p模拟物作用于SKOV-3细胞,MTT和Transwell方法检测SKOV-3细胞增殖及迁移;Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶、线粒体凋亡蛋白以及NF-κB.结果 相对于癌旁卵巢组织及人卵巢上皮细胞系,miR-548p在卵巢癌组织以及卵巢癌细胞系中低表达(P<0.05);增加miR-548p的表达可以抑制SKOV-3细胞的增殖及迁移,伴随相关MMP-2、MMP-9以及Bcl-2蛋白的表达减少,Bax蛋白的表达增加(P<0.05);miR-548p的表达增加可显著抑制SKOV-3细胞p-p65含量(P<0.05).结论 miR-548p通过降低p65磷酸化水平调控卵巢癌细胞的增殖和迁移,为卵巢癌的治疗提供了一个新的潜在靶点.
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吗啡对人中性粒细胞p65蛋白含量的影响
观察吗啡对中性粒细胞NF-κB亚单位p65及其抑制蛋白I-κB mRNA表达、p65蛋白含量的影响.分离提取20例健康人外周血中性粒细胞,以RPMI1640培养液悬浮细胞,将细胞按照每孔1×106个置入培养板.每份细胞分为正常对照组、TNF-α组(20 μg/L)、吗啡组(50 nmol/L)、芬太尼组(100 nmol/L)、丁丙诺啡组(2 nmol/L)、吗啡50 nmol/L+TNF-α 20 μg/L组和芬太尼100 nmol/L+TNF-α 20 μg/L 组、丁丙诺啡2 nmol/L+TNF-α 20 μg/L组.置CO2孵箱孵育3 h后提取细胞总RNA,采用RT-PCR方法检测中性粒细胞NF-κB亚单位p65及其抑制蛋白I-κB mRNA表达;采用免疫蛋白印迹法(Western blot)测定p65蛋白含量.结果示TNF-α组p65 mRNA表达明显增强,约增加31.3%(P＜0.01),而I-κB mRNA的表达减弱约12.6%(P＜0.05).单纯吗啡组及吗啡+TNF-α组对p65 mRNA的表达均显示出抑制作用,且吗啡对I-κB mRNA的表达有增加趋势(P＜0.05).芬太尼组、丁丙诺啡组及加TNF-α刺激后p65及I-κBmRNA的表达均无影响(P＜0.05);Western blot结果亦显示吗啡明显降低p65蛋白含量(P＜0.05),而芬太尼和丁丙诺啡则无效果.结果提示,吗啡具有抑制中性粒细胞 NF-κB激活的作用.
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E3泛素连接酶RNF121对脂多糖诱导的巨噬细胞表达促炎性细胞因子的影响
目的 探讨E3泛素连接酶RNF121对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞表达促炎性细胞因子的调控作用.方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,Western blot检测RNF121的表达.用RNA干扰(si-RNF121)降低RNF121的表达,小鼠腹腔巨噬细胞经LPS刺激后,实时荧光定量PCR法检测TNF-α和IL-6的mRNA水平,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α和IL-6的浓度,Western blot检测小鼠腹腔巨噬细胞中P65及磷酸化P65(p-P65)的表达水平,利用双荧光素酶报告基因法检测NF-κB的活性.结果 LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞后,RNF121的蛋白水平显著降低(P＜0.05),蛋白酶抑制剂MG132能够显著增加RNF121的蛋白水平.si-RNF121降低RNF121的表达后,给予LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,IL-6和TNF-α的表达水平均显著下降(P＜0.05),转录因子P65的磷酸化(p-P65)水平及NF-κB的活性均显著降低(P＜0.05).结论 E3泛素连接酶RNF121通过调控NF-κB的活性从而影响小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α及IL-6的表达.
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呼吸道合胞病毒诱导A549细胞凋亡与NF-KB信号通路有关
目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)诱导肿瘤细胞凋亡机制,为临床肿瘤治疗提供新方向.方法 RSV以感染复数(MOI)3感染人肺Ⅱ型腺上皮癌细胞(A549)及人肺成纤维细胞(IMR-90)细胞,在感染后2、4、8、24、36、48和72 h等不同时间点,光学显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,空斑实验测定细胞内病毒滴度,Westernblot法检测caspase-3,8,9、细胞色素C(CytC)和NF-κB蛋白表达.结果 RSV感染A549及IMR-90细胞后,A549细胞存活率较IMR-90低,细胞内病毒滴度较IMR-90高(P＜0.05),细胞呈现明显凋亡改变.Caspase-3,8,9和CytC呈时间依赖性增强,以caspase-9表达为主.A549细胞内NF-κB表达8h内先增高并达高峰,24h开始下降,36 h表达明显下调(P＜0.01).结论 RSV可通过内源性及外源性途径引起A549细胞凋亡,以内源性途径为主,NF-κB在此过程中发挥一定作用.
