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  • E3泛素连接酶RNF121对脂多糖诱导的巨噬细胞表达促炎性细胞因子的影响

    作者:孟姝;刘音;姜明红

    目的 探讨E3泛素连接酶RNF121对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞表达促炎性细胞因子的调控作用.方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,Western blot检测RNF121的表达.用RNA干扰(si-RNF121)降低RNF121的表达,小鼠腹腔巨噬细胞经LPS刺激后,实时荧光定量PCR法检测TNF-α和IL-6的mRNA水平,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α和IL-6的浓度,Western blot检测小鼠腹腔巨噬细胞中P65及磷酸化P65(p-P65)的表达水平,利用双荧光素酶报告基因法检测NF-κB的活性.结果 LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞后,RNF121的蛋白水平显著降低(P<0.05),蛋白酶抑制剂MG132能够显著增加RNF121的蛋白水平.si-RNF121降低RNF121的表达后,给予LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,IL-6和TNF-α的表达水平均显著下降(P<0.05),转录因子P65的磷酸化(p-P65)水平及NF-κB的活性均显著降低(P<0.05).结论 E3泛素连接酶RNF121通过调控NF-κB的活性从而影响小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α及IL-6的表达.

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