NF-κB p50亚基在原发结内的非特指型外周T细胞淋巴瘤中的表达

目的 探讨原发结内的非特指型外周T细胞淋巴瘤(PTCL-U)核转录因子(NF-κB p50)的表达与其复杂的生物学行为的关系.方法 应用免疫组织化学方法,检测51例经病理确诊的原发结内PTCL-U患者病理组织的NF-κ Bp50、p170糖蛋白的表达情况,分析其与临床特征、治疗效果、预后的关系.结果 51例患者中NF-κB p50和p170糖蛋白的阳性表达率分别为21.6%(11/51)和60.8%(31/51).NF-κBp50和p170糖蛋白的表达和一般行为状态差(PS＞2分)及首程治疗不能完伞缓解显著相关(Spearman相关系数=0.459、0.313、0.284;P=0.001、0.025、0.044).NF-κ B p50表达阳性组总的生存率经Log-Rank检验显著低于阴性组(P=0.0451).多因素生存分析显示:一般行为状态差(PS＞2分)、Ki-67高表达为PTCI-U的独立预后不良冈素,NF-κ B p50尚不能作为独立预后因素.结论 NF-κ B p50的表达和原发于结内的PTCL-U的耐药性和不良预后有关.

Bruton酪氨酸激酶在B细胞肿瘤中的研究进展

Bruton酪氨酸激酶(Btk)是非受体蛋白酪氨酸激酶Tec家族的成员之一,在B淋巴细胞的生长、增殖、分化和信号转导中起重要作用.当B细胞受体(BCR)受到各种因素激活后,Btk将被磷酸化而激活,激活的Btk引起下游信号分子的活化,BCR信号通路的活化在B细胞肿瘤的发生和维持中起重要作用.文章就近年来Btk在B细胞肿瘤中的研究进展作一综述.

锌指蛋白A20与树突状细胞

锌指蛋白A20(A20)是一种具有泛素化修饰作用的锌指蛋白,在肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)和脂多糖(LPS)等诱导刺激下高度表达,并能通过限制NF-κ B活性的方式调节树突状细胞(DC)的成熟、细胞因子的产生及免疫活性.对A20的生物学特征、参与机体免疫反应的途径及其对DC细胞的成熟和功能的影响进行综述.

大鼠脑挫伤后NF-κB mRNA表达规律的研究

目的 应用实时定量PCR技术检测大鼠脑挫伤后脑组织中NF-κB mliNA的时序性表达规律.方法 Wistar大鼠64只,随机分为1个对照组和7个实验组,每组8只.建立大鼠脑挫伤模型,于伤后0.5h、6h、12h、1d、3d、7d及14d取材,一步法提取总RNA,检测其完整性和浓度,按照0.4μg总RNA量逆转录合成第一链cDNA,以RPL32为参比基因进行荧光定量检测,采用△Ct法比较其与对照组脑组织中NF-κB mRNA表达的倍数关系.结果 NF-κB mRNA的表达于脑挫伤后呈现先增高后下降的表达规律,0.5h升高,为对照组的9.190倍,伤后12h升至高,为对照组的13.40倍,随后开始下降,至伤后14d时仍维持较高水平,为对照组的2.585倍.结论 大鼠脑挫伤后脑组织中NF-κB mRNA的表达随着损伤时间呈现先增高后降低的规律性变化,可望作为推断早期脑挫伤的客观指标之一.

核因子-κB及其在创伤性脑损伤后的作用

核因子-κB是一种具有多向性调节作用的核转录因子.机体受到创伤后,NF-κB被激活,调节多种炎性介质基因转录,引起局部及全身的炎症反应.对NF-κB的有关研究可望用于法医学家对损伤时间的推测.

miR-146a对氢醌抑制HL-60细胞分化的调控作用

目的：观察氢醌对HL-60细胞向单核细胞分化的影响，并初步探讨miR-146a的调控作用。方法：设miR-146a-5p抑制剂和阴性对照处理的HL-60细胞，分别以不同浓度(0、0.5、1.0、2.5和5.0μmol/L)的氢醌处理3 h后，接种于含豆蔻酰佛波醇(PMA)的培养基中，培养72 h诱导其分化。采用实时荧光定量PCR检测细胞内miR-146a及其靶基因TRAF6的表达量，流式细胞术检测CD11b和CD14的表达，Western blot检测TRAF6蛋白及其下游调控因子IκBα蛋白的表达水平。结果：与对照组相比(0μmol/L)，氢醌可抑制PMA诱导的HL-60细胞CD11b和CD14的表达，5.0μmol/L的氢醌使其表达量分别减少44%和38%(P均<0.01)；同时miR-146a的表达比对照组升高近2倍(P<0.01)；TRAF6 mRNA的表达下降约40%，其蛋白表达下降74%(P均<0.01)；磷酸化IκBα蛋白的表达减少约45%，IκBα总蛋白表达升高约73%(P均<0.01)。当抑制miR-146a的表达后，氢醌对TRAF6、IκBα和磷酸化IκBα蛋白表达的影响不明显。结论：miRNA-146a是氢醌影响HL-60细胞分化的调控因子之一。

Survivin、NF-кB和STAT3 mRNA在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的：检测Survivin、NF-κB、STAT3 mRNA在40例子宫颈癌组织及30例正常子宫颈组织中的表达，分析它们与患者临床病理指标的相关性，初步探讨它们在子宫颈癌发生发展中的相互关系及作用机制。方法：经Trizol一步法提取40例子宫颈癌组织及30例正常子宫颈组织标本的总RNA，逆转录成cDNA，反转录RT-PCR法检测子宫颈癌组织及正常子宫颈组织中Survivin、NF-κB、STAT3 mRNA表达，分析Survivin、NF-κB、STAT3 mRNA表达及与临床病理指标之间的相关性。结果：子宫颈癌组织中Survivin、NF-κB、STAT3 mRNA表达水平显著高于正常子宫颈组织(P<0.05)。Ⅱb～Ⅲa期子宫颈癌组织中三者mRNA的表达显著高于Ⅰ～Ⅱa期(P<0.01)；子宫颈癌患者中有淋巴结转移者Survivin mRNA的表达明显高于无淋巴结转移者(P<0.01)。且STAT3表达与Survivin表达相关(r=0.483，P<0.05)；Survivin表达与NF-κB表达相关(r=0.377，P<0.05)。结论：Survivin、NF-κB、STAT3 mRNA在子宫颈癌组织中表达上调，共同参与子宫颈癌的发生发展。

乙醇诱导小鼠急性肝细胞损伤模型中NF-κB的表达

目的：研究核因子NF-κB在乙醇诱导小鼠急性肝细胞损伤中的表达及意义。方法：40只小鼠随机分成对照组和3个乙醇(250、500、1000 mmol/kg)染毒组，每组10只。一次性灌胃染毒，16 h后检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)的活力；染毒24 h后采用HE及油红O染色进行病理学观察；采用免疫组织化学法观察小鼠肝细胞中NF-κB蛋白的表达。结果：3个乙醇染毒组小鼠血清中的转氨酶AST和ALT活力均高于对照组(P均<0.05)；HE染色发现小鼠肝组织中出现肝细胞内空泡变性。油红O染色显示损伤的肝细胞内出现大量脂滴。免疫组织化学检测发现500和1000 mmol/kg乙醇染毒组小鼠肝细胞胞质及胞核内NF-κB蛋白表达的积分光密度明显高于对照组(P<0.05)。结论：成功复制了急性小鼠酒精性肝损伤的模型，NF-κB升高是小鼠急性酒精性肝细胞损伤的一个重要分子事件。

酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定

目的:构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒pHis-NF和pLacZ-NF. 方法:人工合成44 bp的三重NF-κB元件寡聚核苷酸,通过DNA重组技术将靶序列NF-κB串定向插入细菌-酵母穿梭质粒pHisi和pLacZi的多克隆位点MCS后,用特异性酶切、琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳、DNA测序等方法进行鉴定. 结果:PAGE电泳和DNA测序分析证实定向插入的寡聚核苷酸串与预先设计的插入序列一致. 结论:成功地构建了重组质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF,为借助酵母单杂交实验技术平台深入探讨NF-κB因子相关基因的转录调控机制奠定了实验材料和技术基础.

NF-κB通路激活在肿瘤发生发展中的作用

NF-κB是一组重要的转录因子,参与细胞中多种生理过程,具有复杂的调节机制.近年来的研究发现 NF-κB在在肿瘤发生发展过程中具有重要而且复杂的作用,总体来说, NF-κB通路的异常激活可导致一系列与肿瘤相关基因的异常表达,从而抑制肿瘤细胞凋亡,促进正常细胞转化及肿瘤血管形成和转移等,直接影响恶性肿瘤的发生和发展,其抑制剂的开发亦为肿瘤治疗提供了一种新的选择.

大鼠脑挫伤后NF-κB表达的分子生物学研究

目的阐明不同程度及不同时间脑挫伤后NF-κB表达的变化.方法应用免疫组织化学染色、Westernblot和RT-PCR方法对48例不同程度实验性脑挫伤大鼠的脑组织进行了检验,同时以3例非脑挫伤和3例假手术大鼠的脑组织做对照.结果伤后1h NF-κB即有表达、24～48h达高峰,一周后停止表达.阳性细胞多集中于挫伤区及周围带皮质和脑实质内海马区;不同程度脑挫伤组之间于伤后各个时间段NF-κB表达无明显差异.结论本实验首次通过对不同程度脑损伤后NF-κB表达量的研究,找到其表达的时间性变化规律,对确定脑挫伤形成时间有意义,但不能作为判断脑挫伤程度的指标.

NF-κBp50/p52 double knockout (dKO) and RANK KO mice have no osteoclasts and develop severe osteopetrosis associated with dwarfism. In contrast, Op/Op mice, which form few osteoclasts, and Src KO mice, which have osteoclasts with defective resorptive function, are osteopetrotic, but they are not dwarfed. Here, we compared the morphologic features of long bones from p50/p52 dKO, RANK KO, Op/Op and Src KO mice to attempt to explain the differences in their long bone lengths. We found that growth plates in p50/p52 dKO and RANK KO mice are significantly thicker than those in WT mice due to a 2-3-fold increase in the hypertrophic chondrocyte zone associated with normal a proliferative chondrocyte zone. This growth plate abnormality disappears when animals become older, but their dwarfism persists. Op/Op or Src KO mice have relatively normal growth plate morphology. In-situ hybridization study of long bones from p50/p52 dKO mice showed marked thickening of the growth plate region containing type 10 collagen-expressing chondrocytes. Treatment of micro-mass chondrocyte cultures with RANKL did not affect expression levels of type 2 collagen and Sox9, markers for proliferative chondrocytes, but RANKL reduced the number of type 10 collagen-expressing hypertrophic chondrocytes. Thus, RANK/NF-κB signaling plays a regulatory role in post-natal endochondral ossification that maintains hypertrophic conversion and prevents dwarfism in normal mice.

HBX基因对人肝癌细胞系HepG2中HNF-4α及NF-κB表达的影响

目的：通过检测转染X基因HepG2人肝癌细胞脂质体中NF-4α及NF-κB的表达，探讨X基因与HNF-4α，NF-κB及肝癌细胞的关系。方法将HepG2成人肝癌细胞分成三组：将HBx真核表达载体pcDNA3/HBx转入HepG2细胞做为实验组；以转染空载体细胞组和未转染HepG2细胞组作为对照组。PCR检测各组X基因、HNF-4α及NF-κB的核内RNA表达情况， Western Blot检测NF-κB核内蛋白的表达情况。结果转染HBx细胞组中HNF-4α的表达值低于另两组，而NF-κB表达值高于另两组。同组中，HNF-4α的表达值与NF-κB表达值呈负相关。结论成功将X基因转染入HepG2细胞，并在细胞中表达，转染HBx基因可通过X蛋白抑制HNF-4α的表达而增强NF-κB的活性，促进肝癌细胞增殖致其癌变及生长转移等方面加速。

妊娠高血压疾病胎盘组织中hTERTmRNA与NF-κB、survivin表达的相关性

目的 通过检测不同程度的妊娠高血压孕妇与正常妊娠孕妇胎盘组织中hTERT及NF-κ.B、survivin的表达,探索妊娠高血压的发病机制.方法 选取2013～2014年的在我院分娩的孕妇为研究对象,共计90例,其中正常孕妇30例,足月轻度子痫前期孕妇30例,足月重度子痫前期孕妇30例,采用定量实时RT-PCR的方法检测胎盘中hTERT mRNA的水平,采用Westemblot对NF-κB、survivin表达量的细胞进行定量分析.结果 与正常孕妇的胎盘组织相比,hTERTmRNA在足月重度子痫前期和足月轻度子痫前期的胎盘组织的表达均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);与正常孕妇的胎盘组织相比,NF-κ3、survivin在重度子痫前期胎盘的表达显著降低,而轻度子痫前期孕妇的胎盘组织Survivin的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);在重度子痫前期胎盘组织中,hTERTmRNA与NF-κB和Survivin的表达呈负相关系数分别为R1 =-0.793,R2=-0.827,P<0.05.结论 对于轻度子痫和重度子痫的病人,hTERTmRNA表达均显著上升、NF-κB和Survivin的表达均不同程度的下降,推测hTERT及NF-κB和survivin的表达与妊娠高血压的发病过程有密切关系.

宫腔粘连的临床分析 ER、PR和NF-κB在宫腔粘连发病机制中的意义及26例

目的:探讨分析ER、PR和NF-κB在宫腔粘连发病机制中的意义及26例宫腔粘连的临床分析.方法:选取我院2016年8月16日一2018年12月31日收治的26例宫腔粘连患者,作为研究组;同期选择26例由于不孕症来我院接受宫腔镜手术的患者作为对照组,对比分析两组人员ER、PR和NF-κB水平.结果:研究组患者ER、PR表达低于对照组,P<0.05;研究组患者NF-κB表达高于对照组,P<0.05;研究组中ER表达与NF-κB表达无明显相关性,P<0.05.结论:宫腔粘连内膜组织中的ER、PR低表达可能与宫腔粘连有关,能够作为宫腔粘连术后激素治疗的预测指标.导致患者宫腔粘连的主要病因在于妊娠相关性宫腔操作.

NF-κB活化在放化疗诱导肿瘤细胞凋亡中的作用

NF-κB是由Rel蛋白家族中的成员以同源或异源二聚体形式组成的一类蛋白蛋,以非活性形式存在于胞质.一旦接受刺激信号,NF-κB活化并易位核内,调节下游基因的表达.近发现,许多诱导细胞凋亡的因子,如化疗药物、电离辐射在诱导肿瘤细胞凋亡的同时,由于活化了NF-κB,会使其诱导凋亡的作用下降,因此NF-κB活化的抑制已成为肿瘤治疗研究的热点之一.本文就NF-κB家族的构成与活化诱导机制;抑制NF-κB活化在增强化疗药物及辐射诱导细胞凋亡中的作用等作一综述.

切应力诱导人脐静脉血管内皮细胞基因转录因子NF-κB的活化

目的研究发现力学信号可在内皮细胞内传递而引起内皮细胞一系列代谢变化.本研究欲明确流体切应力诱导血管内皮细胞NF-κB活化.方法将对照和切应力处理10、20、30、60min的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)裂解物,通过SDS-PAGE电泳分离,用半干电转移仪将蛋白从凝胶转移于硝酸纤维素膜上,检测IκBα和磷酸化IκBα免疫印迹强度.将生长于载玻片上的对照和切应力处理0.5、1、1.5、2h的HUVECs,用4%多聚甲醛固定后,用免疫荧光细胞化学染色检测切应力刺激后NF-κB p65的核转移情况.结果 IκBα和磷酸化IκBα免疫印迹显示,切应力刺激HUVECs 10min后磷酸化IκB明显增强,其后随刺激时间延长逐渐降低,于60min降至几乎测不到;IκB随刺激时间延长而降低,30min降至测不到.NF-κB p65荧光细胞化学染色显示,未刺激的HUVECs胞浆染色阳性,刺激0.5、1h后胞核染色阳性,1.5、2h后胞核染色强阳性.结论提示切应力刺激可诱导NF-κB激活并向核内转移.

NGFR/NF-κB/Nav1.5表达与脑胶质瘤病理分级相关性研究

目的 探讨Nav1.5、NGFR、NF-κB三种蛋白的表达水平与脑胶质瘤临床病理分级之间的相关性.方法 收集遵义医学院附属医院病理科2010～2017年胶质瘤患者石蜡包埋标本,21例初治患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测脑胶质瘤组织Nav1.5、NGFR及NF-κB三种蛋白的表达水平,采用免疫荧光法检测脑胶质瘤组织中NGFR及NF-κB蛋白的表达水平,分析Nav1.5、NGFR及NF-κB三种蛋白表达水平与脑胶质瘤患者临床病理分级之间的关系.结果 免疫组织化学方法显示,高级别(Ⅲ级、Ⅳ级)脑胶质瘤中Nav1.5、NGFRR及NF-κB蛋白的表达水平显著高于低级别(Ⅰ级、Ⅱ级)脑胶质瘤的Nav1.5、NGFR及NF-κB蛋白的表达水平,且与临床病理分级呈正相关(P＜0.05).免疫荧光方法显示,高级别脑胶质瘤组织NGFR和NF-κB蛋白表达水平显著高于低级别脑胶质瘤NGFR和NF-κB表达水平.结论 Nav1.5、NGFR及NF-κB三种蛋白在胶质瘤组织中的表达水平与胶质瘤病理分级呈正相关.

6-姜酚对抗丙酮醛引起的HK-2肾小管上皮细胞损伤的机制

目的 探讨6-姜酚对丙酮醛引起的HK-2肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的可能机制.方法 实验分为四组:对照组、丙酮醛损伤组、丙酮醛+6-姜酚组(丙酮醛与6-姜酚共处理)及6-姜酚组.用DCFH-DA(双氯荧光素)染色法检测HK-2细胞内活性氧(ROS)的水平;比色法测点细胞SOD(超氧化物歧化酶)活力;western blot法检测NF-κB蛋白表达水平.结果 与对照组相比,丙酮醛损伤组HK-2细胞内ROS水平明显增高,SOD活力明显降低,而NF-κB蛋白表达水平明显增高;加入6-姜酚处理后,HK-2细胞内ROS水平及NF-κB蛋白表达水平明显降低,而SOD活力明显增高.结论 6-姜酚对抗丙酮醛引起的HK-2细胞损伤的机制可能与其提高细胞抗氧化能力及抑制NF-κB介导的炎症通路有关.

miRNA对Fontan术后血小板活化程度及血栓形成影响的精确预测价值

目的 探讨微小核糖核酸(miRNA)对Fontan术后血小板活化程度及血栓形成影响的精确预测价值.方法 选取单心室行Fontan术后病儿6例作为实验组(TG组),体检正常儿童6例作为对照组(CG组),分别提取两组血清、血小板和白细胞内miRNA;选取和心血管病相关的miRNA(miR-126、miR-150、miR-197、miR-223及miR-21),通过qRT-PCR检测其表达情况;通过流式细胞仪检测血小板活化程度;通过Western Blot方法检测经慢病毒转染抑制miR-223表达后对细胞核因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响.结果 CG组和TG组血清中miR-126、miR-223表达水平比较,差异有显著性(t=3.22、3.45,P＜0.05).两组外周血血小板和白细胞中miR-223表达水平比较,差异有显著性(t=5.62、4.32,P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示,TG组血小板中CD62 p、CD41a的表达率较CG组显著升高(t=17.57、87.78,P＜0.01);Western Blot检测结果显示,TG+病毒无转录抑制因子组(TC组)白细胞I小蛋白表达下调,p-p65蛋白表达上调;CG+病毒含转录抑制因子组(CI组)白细胞中Iκb蛋白表达上调,p-p65蛋白表达下调;与CI组组比较,TG+病毒含转录抑制因子组(TI组)白细胞中kb蛋白表达下调,p-p65蛋白表达上调;Ikkb和NF-κB蛋白表达在不同处理组间无明显变化.结论 Fontan术后病儿血清中miR-223表达水平升高,血小板活化率增加;miR-223表达升高后可能通过NF-κB信号路径来促进血小板活化和血管内皮损伤,从而影响血栓形成.