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Bruton酪氨酸激酶泛素化调节的研究
目的:探讨Bruton酪氨酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase,Btk)的代谢调节途径和可能的分子机制.方法:用蛋白酶体抑制剂和/或佛波酯(PMA)处理内源性表达Btk的B细胞系A20、Ramos细胞及转染了外源性Btk的293T、COS-7细胞,应用RT-PCR法检测上述细胞Btk mRNA表达水平,Western blot法检测Btk蛋白表达水平;通过抗IgM抗体交联BCR刺激A20细胞,检测细胞Btk泛素化水平;用Btk、泛素和Cbl共转染COS-7细胞,检测其泛素化Btk水平;用Btk和编码野生型或突变型泛素(K29R、K48R、K63R)即单泛素的质粒共转染293T细胞,经蛋白酶体抑制剂处理后用抗泛素抗体和抗Btk抗体检测泛素化Btk水平;稳定转染并表达Btk-GFP的293T细胞经氯喹处理后,应用Western blot检测其Btk蛋白表达水平.结果:蛋白酶体特异性抑制剂和/或佛波酯可减少Btk转录,从而引起Btk蛋白表达下降.Btk通过泛素化进行翻译后修饰,泛素化修饰程度与Btk的表达及活化水平有关.Cbl为Btk的E3泛素连接酶,它可导致Btk泛素化.Btk受多聚和/或单泛素化调节,Btk可在溶酶体内发生泛素化和降解,溶酶体抑制剂氯喹可上调Btk的表达.结论:Btk蛋白的表达水平受泛素化途径调节,该调节与Btk的表达水平有关.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 泛素化 蛋白酶体抑制剂 B细胞 -
Bruton酪氨酸激酶和核因子-κB在高氧诱导肺损伤中的作用
目的 观察Bruton酪氨酸激酶(Bruton's tyrosine kinase,Btk)和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在高氧诱导的急性肺损伤(hyperoxia-induced acute lung injury,HALI)小鼠肺组织中的表达水平,探讨两者在HALI发生中的作用机制.方法 雄性昆明小鼠72只,按随机数字表法随机分为四组:对照组、高氧暴露3d组(H3d组)、高氧暴露3d+抑制剂组(H3d +Ⅰ组)和抑制剂组.光镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白含量(TP)和肺湿/干质量比值(W/D);采用Western blot法测定肺组织Btk、p-Btk和pNF-κBp65蛋白表达;采用RT-qPCR法测定肺组织白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达,采用ELISA法检测血清中单核细胞趋化因子-1 (MCP-1)含量.各组间比较采用单因素方差分析.结果 对照组与抑制剂组比较,各测定数据差异均无统计学意义(P＞0.05).与H3d+Ⅰ组比较,H3d组肺组织病理损伤明显增加且BALF总蛋白含量和W/D比值均明显增高,(分别为P=0.002,P=0.000)差异均具有统计学意义;H3d组肺组织Btk、p-Btk和pNF-κB p65表达量明显高于H3d +Ⅰ组(分别为P=0.002,P=0.013,P=0.000).H3d组肺组织IL-6 mRNA表达水平明显高于对照组(P=0.004)、抑制剂组(P=0.000)和H3d+Ⅰ组(P=0.021);H3d组血清MCP-1含量均高于对照组(P =0.002)、抑制剂组(P=0.000)和H3d+Ⅰ组(P =0.009).相关性分析结果显示,各组小鼠肺组织Btk或p-Btk表达水平与pNF-κB p65表达量之间呈正相关(r=0.902;r=0.954,P＜0.01).结论 Btk可能通过调控NF-κB信号通路而介导IL-6和MCP-1等炎症细胞因子释放,在HALI发生中起重要作用,抑制Btk的活性可有效减轻肺损伤的严重程度.
关键词： 高氧 急性肺损伤 Bruton酪氨酸激酶 核因子-κB 小鼠 湿/干质量比值 单核细胞趋化因子-1 信号通路 -
32例套细胞淋巴瘤中BTK蛋白的表达及临床意义
目的:检测套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)患者病理组织中Bruton酪氨酸激酶(Bruton tyrosin kinase,BTK)表达水平并分析其与患者临床特征及预后的相关性.方法:选取天津医科大学肿瘤医院2011年1月至2015年12月期间经病理检测诊断为MCL且随访资料完整的32例患者和10例良性淋巴结增生患者的病理组织.采用免疫组织化学法对32例MCL组织和10例良性淋巴结组织染色,并采用SPSS 17.0统计学软件对所收集的患者临床数据资料进行分析.结果:BTK蛋白在MCL组织和正常的淋巴组织中均呈阳性表达,但在MCL病理组织中多为强阳性表达;BTK阳性表达与Ki-67和MIPI评分相关;应用Kaplan-Meier法对预后进行分析,显示BTK强阳性表达患者的无进展生存期(progression free survival,PFS)显著低于BTK弱表达患者(P=0.030),但总生存期(overall survival,OS)无统计学意义(P=0.073);PFS的单因素分析结果显示,年龄≥65岁,ECOG评分≥2分,骨髓受累,BTK强阳性表达,Ki-67>30%,根据套细胞淋巴瘤国际预后指数(mantle cell lymphoma international prognostic index,MIPI)评分≥6分,皆是MCL患者的不良预后因素,但在Cox多因素分析结果中仅MIPI评分≥6分可作为MCL患者的独立不良预后因素.结论:BTK在MCL患者中多为强阳性表达,且与Ki-67和MIPI评分呈正相关;BTK强阳性表达患者的PFS显著低于BTK弱表达患者,但由于随访时间短暂和样本量限制,BTK的强阳性表达尚不能作为PFS的一项独立不良预后因素.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 套细胞淋巴瘤 无进展生存期 依鲁替尼 -
Bruton酪氨酸激酶在自身免疫性疾病中作用的研究进展
Bruton酪氨酸激酶(bruton tyrosine kinase,BTK)属于非受体酪氨酸激酶Tec家族,作为B细胞受体(B cell receptor,BCR)信号通路中的关键激酶在B细胞的分化发育中起到重要的调节作用.研究表明,BTK大量表达可以使BCR信号通路异常激活,可使B细胞功能失调、免疫耐受状态改变,并转化为自身反应性B细胞,分泌大量自身抗体诱发自身免疫性疾病.近十年来,人们已经研发出十余种小分子BTK抑制剂,其应用于自身免疫性疾病治疗的临床试验正在大量开展.BTK有望成为治疗自身免疫性疾病的新靶点.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 信号通路 BTK抑制剂 自身免疫性疾病 -
X-连锁无丙种球蛋白血症临床分析及基因诊断
目的 分析X-连锁无丙种球蛋白血症(XLA)的临床特点及Bruton酪氨酸激酶(BTK)的基因突变情况.方法 回顾分析通过基因检测确诊的20例XLA患儿的临床资料,以及采用Sanger测序方法分析BTK基因的突变情况.结果 20例患儿均为男性,发病年龄6～54月龄,平均(26.3±14.61)月龄;基因诊断确诊年龄26～168月龄,平均(64.7±38.22)月龄;诊断周期中位数为27.5月龄(3～114月龄).临床表现以呼吸道感染为主,其中18例诊断为肺炎,另外2例为消化道感染.免疫功能检测示成熟B淋巴细胞缺如或比例显著降低,血清IgG、IgA及IgM水平明显降低.基因检测提示错义突变10例,无义突变4例,移码突变3例,内含子剪切位点突变2例,剪接突变1例.20例患儿明确诊断后均给予静脉输注丙种球蛋白替代治疗,感染频次均显著减少,均无后遗症.结论 对反复严重、特殊部位感染的男童,尤其是有相关家族史的患儿,尽早行免疫功能筛查,并行基因检测明确诊断及遗传咨询.
关键词： X连锁无丙种球蛋白血症 Bruton酪氨酸激酶 免疫缺陷 -
BTK与PKCβ在多发性骨髓瘤中表达及调控的信号通路机制研究
目的:分析Bruton酪氨酸激酶(BTK)与蛋白激酶Cβ(PKCβ)在多发性骨髓瘤患者肿瘤细胞(MM)和正常人骨髓血淋巴细胞中的表达,探究它们之间的调控关系以及对NF-κB的影响.方法:运用qRT-PCR和Western blotting检测BTK与PKCβ的表达情况.利用siRNA降低BTK的表达,使用抑制剂PCI-32765抑制BTK,在过表达BTK的同时抑制PKCβ,运用qRT-PCR、Western blotting检测PKCβ的变化,Western blotting检测p65核内外分布情况.结果:在30例初诊MM患者标本中,BTK的阳性率为30％,与正常人骨髓血标本相比(阳性率为5％)差异具有统计学意义;PKCβ的阳性率为46.67％,与正常人骨髓血标本相比(阳性率为15％)差异具有统计学意义.在8226细胞中降低BTK的表达或者抑制BTK后,PKCβ的mRNA和蛋白表达下调,而p65的总蛋白表达虽无变化,但是核内的p65下降.过表达BTK可使PKCβ表达上调和p65核内分布增加,但是PKCβ抑制剂LY333531可逆转BTK过表达导致的NF-κB过度激活.结论:BTK与PKCβ在多发性骨髓瘤患者的肿瘤细胞中呈高表达;BTK通过调控PKCβ激活NF-κB.
关键词： 多发性骨髓瘤 Bruton酪氨酸激酶 蛋白激酶Cβ 核因子κB -
Bruton酪氨酸激酶BTK及其抑制剂的研究进展
Bruton酪氨酸激酶(BTK)是B细胞抗原受体(BCR)信号转导通路中的关键激酶,目前已成为治疗血液恶性肿瘤和自身免疫失调疾病的热门靶标.BTK有多个抑制剂已进入临床研究,表现出较好的开发前景,其代表性药物依鲁替尼(ibrutinib)在临床试验中对于套细胞淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病显示出突出的治疗活性,已被批准上市.本文对BTK的结构功能以及在研的BTK抑制剂临床研究进展进行了综述.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 小分子抑制剂 依鲁替尼 恶性肿瘤 -
Bruton酪氨酸激酶及Ibrutinib应用于B细胞肿瘤的研究进展
Bruton酪氨酸激酶(BTK)是非受体酪氨酸激酶肝脏肿瘤中表达的酪氨酸激酶家族的一员,是B细胞受体信号通路中的关键蛋白分子,在正常B淋巴细胞的成熟以及B细胞肿瘤中发挥重要的作用.Ibrutinib是BTK的小分子抑制剂,它能不可逆地与BTK结合,有效抑制包括慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤等血液系统B细胞恶性肿瘤细胞的生存和发展.Ibrutinib的作用已经在体内实验以及临床试验中获得肯定.现就BTK的分子结构、作用机制,以及Ibrutinib临床前和临床研究等方面进行综述.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 Ibrutinib B细胞肿瘤 综述 -
Bruton酪氨酸激酶在B细胞肿瘤中的研究进展
Bruton酪氨酸激酶(Btk)是非受体蛋白酪氨酸激酶Tec家族的成员之一,在B淋巴细胞的生长、增殖、分化和信号转导中起重要作用.当B细胞受体(BCR)受到各种因素激活后,Btk将被磷酸化而激活,激活的Btk引起下游信号分子的活化,BCR信号通路的活化在B细胞肿瘤的发生和维持中起重要作用.文章就近年来Btk在B细胞肿瘤中的研究进展作一综述.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 NF-κB B细胞肿瘤 -
Bruton酪氨酸激酶抑制剂在B细胞恶性肿瘤中的研究进展
Bruton酪氨酸激酶(BTK)是Tec激酶家族的一种非受体酪氨酸激酶,在B细胞受体信号转导中发挥重要作用.BTK已经成为靶向治疗某些B细胞恶性肿瘤的一个新靶点.近年来的研究发现,BTK抑制剂PCI-32765(ibrutinib)能有效治疗慢性淋巴细胞白血病与套细胞淋巴瘤等多种B细胞恶性肿瘤.文章就BTK抑制剂在B细胞恶性肿瘤中的研究进展作一综述.
关键词： Bruton酪氨酸激酶 抑制剂 B细胞恶性肿瘤
