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  • 桂皮醛对miRNA-146a干扰的骨关节炎滑膜炎性反应影响的实验研究

    作者:王欢;唐学章;丁海涛;张美丽;杨黎黎;张栋;刘思婷;甘稳;徐铭康;郭玉茹;许晶;王庆甫

    目的:研究miRNA-146a基因及桂皮醛对miRNA-146a干扰的滑膜成纤维细胞释放TLR4、NO、MMP-13的影响,探寻其在OA滑膜炎性反应分子学机制中的作用.方法:采用脂质体转染法将miR-146a基因模拟及抑制性质粒载体对经LPS诱导后的OA滑膜炎性反应效应细胞滑膜成纤维细胞进行基因导入,并用桂皮醛对干扰后的细胞进行干预,检测不同组间TLR4、NO及MMP-13表达的差异.结果:miRNA-146a相关质粒转染后的TLR4、NO、MMP-13浓度的变化趋势大致相同:与对照组比较,三者的inhibitor组均升高,mimics组则均呈下降趋势(P<0.05).桂皮醛单独作用于miRNA-146a干扰后的细胞时,与对照组比较,TLR4、NO、MMP-13浓度均有明显下降(P<0.05),而当mimics和CA联合干预时,三者释放量显著下降(P<0.05).结论:miRNA-146a及桂皮醛均对骨关节滑膜炎性反应产生影响,当mimics和桂皮醛联合作用时,抑制炎性反应效果好.为进一步阐明骨关节炎分子机制和药物靶点的识别与开发提供实验依据.

  • 黑骨藤追风活络胶囊治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的临床疗效及机制

    作者:古金华;吴娅琳;陈文礼;赵平

    目的:探讨黑骨藤追风活络胶囊治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的临床疗效及深层作用机制.方法:将80例宜宾市第二人民医院确诊的风寒湿痹型类风湿关节炎患者随机分为观察组与对照组,各40例,对照组给予口服洛索洛芬钠,60 mg/次,3次/d,氨甲蝶呤(MTX)7.5~2 mg/次,1次/周;观察组在口服洛索洛芬钠基础上加用黑骨藤追风活络胶囊治疗,0.9g/次,3次/d,连续服药3个月;采用视觉模拟评分法(VAS)观察治疗前后关节压痛数、关节肿胀数、关节肿胀指数、双手平均握力、静息痛、晨僵时间变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组患者治疗前后血清中血沉(ERS),C-反应蛋白(CRP),类风湿因子(RF)含量变化;ELISA法检测两组患者治疗前后关节液中白细胞介素(IL)-17A,IL-18,IL-27含量变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测两组患者治疗前后关节液微小mRNA(microRNA,miR)-146a,miR-16表达变化.结果:经Ridit分析,观察组临床疗效优于对照组(P<0.05);观察组治疗后关节压痛数、关节肿胀数、关节肿胀指数、双手平均握力、静息痛、晨僵时间改善程度均显著优于对照组(P<0.01);观察组治疗后血清ERS,CRP,RF含量明显低于对照组;观察组治疗后关节液IL-17A,IL-18,IL-27含量及miR-146a,miR-16表达明显低于对照组.结论:黑骨藤追风活络胶囊可能通过降低miR-146a,miR-16表达,调控炎症因子释放,进而减轻自身免疫因子的表达,从而达到改善风寒湿痹型RA患者体征及症状的作用.

  • microRNA-146a与寻常型银屑病(血热型)严重性指数的相关性研究及竹黄颗粒的临床干预作用

    作者:梁育;王丹;许斌

    目的:研究microRNA-146a与寻常型银屑病(血热型)皮损面积和严重性指数(PASI)指数的相关性以及竹黄颗粒的临床干预作用.方法:以64例寻常型银屑病(血热型)的患者为研究对象,检测其外周血中miRNA-146a的表达水平,对治疗前患者外周血中miRNA-146a的表达水平与其PASI指数作直线相关分析.再将这些患者随机分成两组,各32例.治疗组予以竹黄颗粒口服、对照组口服复方青黛丸,4周为1个疗程,共2个疗程.并观察两组治疗前后PASI指数的下降程度,以此来反映竹黄颗粒的临床疗效.结果:外周血miRNA-146a的表达和PASI指数经过直线相关性分析有正相关关系(r=0.92,P<0.05),治疗后,竹黄颗粒治疗组较对照组PASI指数下降明显(P<0.01).结论:microRNA-146a与PASI指数呈正相关,说明血清中miRNA-146a的表达水平可以反映疾病的严重程度;竹黄颗粒对治疗寻常型银屑病(血热型)疗效显著.

  • 脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞中microRNA-146a与TNF-α的相关性研究

    作者:曾振国;龚洪翰;李勇;聂贞蕴;揭克敏;詹以安;聂成;刘芬;丁成志;邵强;卿城;朱白鹭;钱克俭

    目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和microRNA-146a在脂多糖(LPS)诱导的NR8383肺泡巨噬细胞中的动态表达,分析二者在时间上的变化关系,探讨mieroRNA-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用及其机制.方法 体外培养的肺泡巨噬细胞接种于六孔板,贴壁后加入1μg/mL的LPS,刺激0、3、6、12 h后离心收集培养上清液和细胞.采用实时荧光定量PCR检测细胞中microRNA-146a和TNF-α mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养上清液中TNF-α蛋白水平的表达.microRNA-146a和TNF-α mRNA的相关性采用双变量Pearson相关性分析.结果 (1)培养上清液中的TNF-α蛋白在LPS刺激3h后显著升高[(359.80±57.54) pg/mL,P<0.01],于12 h达高峰[(729.22±50.40) pg/ml,P<0.01]; (2) LPS刺激3h后,细胞中TNF-α mRNA的表达即达到顶峰[(67.48±24.52)倍,P<0.01],6h后开始降低[(29.53±4.26)倍,P<0.05];(3)LPS刺激6h后,microRNA-146a表达水平显著增高[(5.33±0.81)倍,P<0.01],并且持续增高[12h:(8.21±1.19)倍,P<0.01];(4)细胞中microRNA-146a 的表达水平与TNF-α mRNA的含量呈负相关(r=-0.895,P<0.01).结论 在LPS诱导的肺泡巨噬细胞中,microRNA-146a的表达水平与TNF-α mRNA的含量呈负相关,推测microRNA-146a可能参与了肺泡巨噬细胞的炎症反应调控.

  • MicroRNA-146 a在脓毒症髓源抑制细胞中的表达及其意义

    作者:赵建立;艾芬;李占飞

    目的:比较脓毒症3和7 d的髓源抑制细胞( MDSC)表型差异,了解其与MDSC增殖活性及免疫功能变化间的关系,通过检测MDSC中微小RNA-146a(microRNA-146a,miR-146a)的表达,探讨miR-146a对脓毒症MDSC免疫抑制活性的影响。方法采用盲肠穿孔结扎技术制备C57BL/6J小鼠脓毒症模型,运用磁珠分选方法收集分离CLP后3和7 d时小鼠骨髓MDSC(CD11b+Gr1+细胞),然后进行体外培养并给予脂多糖(LPS)刺激,收集细胞培养上清液,并检测3和7 d时分泌的细胞因子( TNF-α、TGF-β、IL-6、IL-10)和精氨酸酶活性,以及检测对T细胞的抑制作用与miR-146a的表达。结果 CLP后3 d时MDSC以分泌促炎因子(TNF-α、IL-6)为主,CLP后7 d时以分泌抗炎因子( IL-10、TGF-β)为主。 CLP后7 d比3 d时表现出更强的T细胞免疫抑制活性。 qRT-PCR检测小鼠骨髓MDSC中miR-146a表达,发现CLP 7 d时比3 d时的miR-146a表达量显著升高( P<0.05)。结论在脓毒症的进展过程中,MDSC表型随之发生演变,脓毒症晚期MDSC免疫抑制活性较早期显著增强。 miR-146 a表达上调可能是脓毒症后期MDSC免疫抑制活性增强的重要机制。

  • 外周血microRNA-146a的表达与糖尿病周围神经病变的关系

    作者:洪盈盈;赵晓宏;周庆元;柳围堤;薛开禄

    目的 分析外周血microRNA-146a(miR-146a)表达水平与糖尿病周围神经病变(DPN)的关系.方法 回顾性分析2015年5月-2016年7月西安交通大学医学院附属3201医院内分泌科收治的90例2型糖尿病(T2DM)患者的临床资料,分为T2DM合并DPN组(42例)与T2DM组(48例).所有患者入院后均采集外周血标本,测定外周血单核细胞(PBMCs)中miR-146a的表达水平,并收集其基线资料情况.测定患者右侧腓神经运动神经传导速度(MCV)、感觉神经传导速度(SCV),计算密歇根糖尿病神经病变评分(MNSI).采用Pearson相关性分析法探讨各指标与miR-146a表达的相关性,采用logistic回归分析研究miR-146a表达的影响因素,应用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)探讨miR-146a对T2DM发生DPN的预测价值.结果 与T2DM组相比,T2DM合并DPN组病程长,HbA1c、尿白蛋白/肌酐比值(UAlb/Cr)升高,而腓神经MCV、SCV、MNSI以及miR-146a表达水平降低(t=3.586~15.143,P均<0.05).miR-146a水平与病程、空腹血糖、HbA1c、MNSI呈负相关(r=-0.531、-0.621、-0.551、-0.662,P均<0.05),与MCV、SCV呈正相关(r=0.791、0.622,P均<0.05). MCV(OR=1.198,95%CI:1.021 ~1.398,P <0.05)、SCV(OR=2.851,95% CI:1.551 ~5.261,P<0.05)是影响miR-146a表达的独立危险因素,病程(OR =0.162,95% CI:0.081 ~0.264,P<0.05)、MNSI(OR=0.416,95% CI:0.071~0.456,P<0.05)为其保护因素.miR-146a预测DPN的敏感性为83.91%,特异性为62.12% (95% CI:0.567 ~0.841,P =0.008).结论 T2DM合并DPN患者外周血miR-146a表达水平较低,且SCV、MCV为影响miR-146a表达的独立危险因素,同时miR-146a对T2DM患者DPN的发生有较高的预测价值.

  • microRNA-122和microRNA-146a联合检测有望用于布病诊断

    作者:梁志娜;陈雅婧;于玖轩;周玉美;郑源强;石艳春

    目的:研究布病患者血浆microRNA-122(miR-122)和microRNA-146a(miR-146a)作为布病新型诊断标记的可行性.方法:采用实时定量PCR方法,测定验证样本(56例未经治疗的布病患者、32例经过治疗的布病患者和40例健康志愿者)血浆中microRNAs的表达水平.结果:miR-122和miR-146a在布病患者和健康志愿者之间的表达水平差异有统计学意义(P<0.001),并且表达水平与布病患者血清抗体有关,但与患者是否经过抗生素治疗以及患者是否具有明显临床表现均无相关性.miR-122和miR-146a组合诊断的AUC值为0.935,高于两者任何一个单独检测.结论:miR-122和miR-146a组合在布病诊断中具有潜在应用价值.

  • 布病患者血清microRNA-146 a表达及其与抗体滴度的关系研究

    作者:于玖轩;徐晓阳;雷霜霜;陈泽良;王季秋;王大力;郑源强;石艳春

    目的:研究microRNA-146a在布病患者血清中表达规律及其与血清滴度的关系。方法:采用定量PCR方法,测定布病患者和健康人血清中miR-146a的表达,并分析表达水平与血清抗体水平、就诊时间等彼此的相关性。结果:利用阳性参考品建立了miR-146a定量检测工作曲线,对20例布病阳性病例和20例正常人血清miR-146a进行了检测,布病患者血清中miR-146a显著低于正常人(P<0.001),miR-146a的水平与血清抗体滴度呈负相关(P<0.05)。结论:布鲁氏菌感染后患者血清中miR-146a表达被抑制,并且患者血清抗体滴度越高,抑制程度越高。

  • microRNA-146a与2型糖尿病的相关性研究进展

    作者:杨杰;王恺;何玉清;孔丹莉

    2型糖尿病是由遗传因素和环境因素共同导致的复杂疾病,胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍是其主要的发病机制.miRNAs是一类内源性非编码小RNA,通过调控各种基因的表达广泛参与细胞增殖、分化、凋亡、代谢等生物过程.近年研究发现,miRNA-146a与糖尿病、心血管疾病、自身免疫性疾病以及肿瘤等疾病密切相关,但miRNA-146a在2型糖尿病中的作用机制尚不清楚,还需进一步明确miRNA-146a对其的作用机制.该文就miRNA-146a与2型糖尿病及其并发症之间的相关性作一综述.

  • microRNA-146a重组慢病毒载体局部应用治疗免疫介导性内耳病的实验研究

    作者:罗晨曦;李涛;谭长强;黄和

    目的:自身免疫性内耳病( autoimmune inner ear disease, AIED)是目前临床上一部分可以有效治疗的内耳疾病,对其的研究工作具有重要的临床实际意义和实用价值,文中探讨microRNA-146a对免疫介导性内耳病( immune-mediated inner ear disease, IMIED)的免疫调节作用、及其治疗效果。方法采用钥孔戚血蓝蛋白抗原在已致敏的豚鼠圆窗龛局部免疫,制成IMIED动物模型30只,按配对设计分为microRNA-146a重组慢病毒组、空载慢病毒对照组、模拟手术对照组3组。microRNA-146a重组慢病毒组:鼓阶内注射microRNA-146a重组慢病毒;空载慢病毒对照组:鼓阶内注射慢病毒空载体;模拟手术对照组:鼓阶内注射PBS溶液。分别于免疫前、免疫后和鼓阶注射1周后,测试听觉功能和血清抗KLH特异性抗体水平变化。鼓阶内注射后1周( ABR试验后),每组3只动物行HE染色和光镜观察;另3只动物行荧光观察(慢病毒载体转染情况);,4只动物并测试内耳局部组织microRNA-146a的含量及其变化。结果3组动物免疫后血清中特异性抗KLH抗体水平较免疫前升高,重组慢病毒载体组[(1.90±0.74) vs (0.09±0.01),P<0.05],空载体对照组[(2.20±0.75) vs (0.11±0.02),P<0.05],模拟手术组[(2.10±0.64) vs (0.11±0.03),P<0.05]。与免疫前对应耳比较,免疫后、鼓阶注射后ABRⅢ波平均阈值均增加(P<0.05);与免疫后对应耳比较,重组慢病毒载体鼓阶内注射后ABRⅢ波平均阈值降低(P<0.05)。重组慢病毒载体组内耳microRNA-146a含量(1290.0±660.0)较空载体对照组(369.5±73.9)和模拟手术组(476.6±148.0)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光观察显示:micro-RNA146a重组慢病毒载体在内耳中分布在骨螺旋唇、螺旋神经节传入纤维、螺旋韧带基底细胞、Corti器、血管纹等,内耳光镜观察显示内耳免疫炎性反应较空载慢病毒对照组和模拟手术对照组明显减轻。结论 micro-RNA146 a重组慢病毒载体经鼓阶注射到内耳后,可在内耳广泛分布和转染,内耳组织中mi-croRNA-146a的含量明显升高。重组micro-RNA146a慢病毒载体内耳导入可显著减轻内耳免疫炎性病理损伤和听觉功能障碍。

  • MicroRNA通用探针法的建立及布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a的检测

    作者:程慧敏;魏青青;张欢;刘金玲;韩小虎;王大力;王兴龙

    目的 建立一种通用、敏感、特异的microRNA检测方法,用于检测布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a的表达,探讨其作为诊断标识的可能性.方法 以microRNA-146a模拟物为待检物,通过正交实验设计,对退火温度、探针浓度、试剂盒选择进行优化,建立特异敏感的通用检测方法;从布病患者和正常健康人血浆样本提取RNA,应用通用探针法进行检测,比较布病患者血浆microRNA-146a的表达变化.结果 建立了优化的通用探针法,与染料法相比特异性更强、扩增范围更大,具有通用检测能力.应用通用探针法检测布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a,发现布病患者血浆中microRNA-146a的表达被抑制(P<0.01),表明其可能作为布病诊断的分子标识.结论 经优化的通用探针法是一种通用、敏感、特异的检测方法,可用于microRNA的检测,microRNA-146a可能作为布病诊断的标识分子.

  • MicroRNA-146 a前体区基因多态性与江苏地区汉族人群喉癌遗传易感性的关联性分析

    作者:林丹;董伟达;陆美萍;邢光前;董佳迪;张伟强

    目的:探讨microRNA-146a(miR-146a)前体区基因多态性位点rs2910164 G>C与喉癌的关联性。方法建立病例-对照研究,选取204例喉癌患者和440例健康对照者,收集一般人口学资料和临床病理学特征,采用TaqMan探针对miR-146a rs2910164位点进行基因分型,logistic回归模型用于评价rs2910164位点与喉癌发病风险的关联性强度。结果 rs2910164多态性位点与增加罹患喉癌风险显著相关(GC/CC vs.CC:OR调整=2.49,95%CI=1.57-3.94)。分层分析显示,与携带GG基因型个体相比,携带C等位基因的吸烟、饮酒以及无肿瘤家族史个体罹患喉癌风险显著增加(P均<0.05),吸烟、饮酒与miR-146a rs2910164位点的共同作用效应更加显著(吸烟与rs2910164 GC/CC:OR=6.39,95%CI=2.72-15.0;饮酒与rs2910164 GC/CC:OR=4.19,95%CI=2.24-7.83)。结论miR-146a rs2910164 C等位基因与增加罹患喉癌风险有关,可以作为预测喉癌发病风险的潜在生物标志物。

  • microR-146a、microR-29a在新生大鼠急性肺损伤中的动态表达

    作者:陈丽;吴本清;陈文清;程涵蓉;涂惠英;易晓利;戎荣;燕旭东

    目的 观察脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤(ALI)肺组织中microRNA(miR)-146a、miR-29a的动态表达变化,探讨其对ALI的作用.方法 选取7d龄新生SD大鼠80只,简单随机法分为LPS组和对照组.LPS组大鼠腹腔注射内毒素(5 mg/kg)建立新生大鼠ALI模型;对照组大鼠腹腔注射9g/L盐水0.1 mL.分别于6h、1d、3d、7d留取新生大鼠肺组织及血清标本,观察肺组织病理变化,酶联免疫吸附试验测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-oα)的变化,反转录-聚合酶链反应法检测肺组织中miR-146a和miR-29a的相对表达量.结果 苏木精-伊红染色显示LPS组大鼠肺组织呈ALI表现,血清中TNF-α和肺组织中miR-146a的表达水平较对照组呈高表达趋势(P<0.05),miR-29a较对照组呈低表达趋势(P<0.05).结论 miR-146a和miR-29a的差异性表达在ALI中有重要作用,其关键靶点可能为临床早期诊治ALl及新药的研发提供新的标靶.

  • 血小板内microRNA-146a及155与急性冠状动脉综合征的关系

    作者:杨丽霞;李文琴;郭瑞威;方日亮;齐峰;叶金善

    目的:探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血小板内microRNA-146a(miR-146a)及microRNA-155(miR-155)的表达及临床意义.方法:169例患者根据临床表现和冠状动脉(冠脉)造影结果分为:ACS组87例,稳定型心绞痛(SAP)组39例,冠脉造影正常组(对照组)43例.ACS组根据临床诊断分为:急性心肌梗死(AMI)组46例,不稳定型心绞痛(UAP)组41例.采用Real-Time PCR检测血小板内miR-146a及miR-155的表达,比较各组间的差异.结果:①SAP组与ACS组miR-146a的表达水平较对照组升高,miR-155的表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05).②AMI组与UAP组miR-146a的表达水平较SAP组升高,且AMI组高于UAP组;miR-155的表达水平较SAP组降低,且AMI组低于UAP组,差异有统计学意义(P<0.05).③冠脉3支、双支病变组与单支病变组及对照组比较,miR-146a表达水平升高,miR-155表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).④软斑块、纤维斑块组与钙化斑块组比较,miR-146a表达水平升高,miR-155表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:ACS患者冠脉病变越严重,血小板内miR-146a表达水平越高,而miR-155表达水平则越低,提示其在ACS的发生、发展中可能起着重要作用,并有望成为ACS的诊疗标记物.

  • ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程中microRNA-146a的表达变化

    作者:骆瑜;熊玮;陈彩敏;刘峰;李江华;董少红

    目的:观察ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化发生过程中microRNA-146a (miR-146a)的变化,探讨miR-146a与动脉粥样硬化之间的关系.方法:在ApoE/小鼠中通过高脂高胆固醇喂饲构建动脉粥样硬化模型,分别在喂饲后第0周、4周、8周、12周、16周时采血和分离主动脉组织,通过HE染色和油红O染色观察主动脉组织的斑块形态,计算主动脉内膜/中膜比值和主动脉斑块的脂质含量;采用Real-Time PCR检测第0周、4周、8周、12周、16周时血浆和主动脉组织的miR-146a水平.结果:在高脂高胆固醇饲养后第8周时ApoE-/-小鼠主动脉组织开始出现动脉粥样硬化,在第16周时主动脉粥样硬化显著,16周时主动脉组织的内膜/中膜比值和主动脉斑块的脂质含量显著升高(P<0.01);在动脉粥样硬化发生过程中,小鼠血浆和主动脉组织中的miR-146a水平均明显升高,其中血浆miR-146a的峰值出现在第8周(P<0.01),之后血浆miR-146a逐渐下降;而主动脉组织的miR-146a水平从第4周开始升高(P<0.05),逐渐上升至16周时达到峰值(P<0.01);主动脉组织中miR-146a水平与ApoE/小鼠主动脉粥样硬化呈强正相关性(r=0.892 5,P<0.000 1).结论:miR-146a可能参与了ApoE/小鼠主动脉主动脉粥样硬化的发生.

  • microRNA-146a在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

    作者:窦尉尉;岳从雷;刘洪伟;徐宁;吕庆;高德

    目的:探讨microRNA-146a在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell caicinoma,OSCC)组织和细胞系中的表达并探讨其对OSCC细胞侵袭迁移能力的影响.方法:采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测60例OSCC组织和30例正常口腔黏膜组织中microRNA-146a的表达水平,并分析microRNA-146a的表达与OSCC临床病理学参数的关系.同时采用Real-time PCR检测microRNA-146a在人OSCC细胞系(SCC4、SCC15、Tca8113)和人正常口腔黏膜角化细胞系HOK中的表达水平,Transwell迁移和侵袭实验检测上调OSCC细胞microRNA-146a的表达后细胞侵袭和迁移能力的变化.结果:OSCC组织中microRNA-146a的表达水平明显低于正常口腔黏膜组织(P<0.05),并且microRNA-146a的表达与淋巴结转移和临床分期密切相关(P<0.05).OSCC细胞系中microRNA-146a的表达水平明显低于正常口腔黏膜角化细胞系(P<0.05).Transwell迁移和侵袭实验结果表明上调microRNA-146a的表达水平能够明显抑制Tca8113细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05).结论:microRNA-146a在OSCC组织和细胞中表达减低,上调microRNA-146a的表达能够明显抑制癌细胞的迁移和侵袭能力,可能成为OSCC基因治疗的潜在靶点.

  • LPS对COPD大鼠肺动脉平滑肌细胞microRNA-146 a的表达及合成分泌IL-6的诱导作用

    作者:杨丹;王昌明;马礼兵;林武洲;徐青;陈峰;刘晓黎;吕倩;蒋明

    目的 通过分析microRNA-146a在脂多糖(LPS)诱导慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中不同时间点表达的变化及与其合成分泌白细胞介素-6(IL-6)的相关性分析,探讨mi-croRNA-146a对PASMCs炎症反应的调控作用.方法 建立经典的COPD大鼠模型,采用酶消化联合组织块贴壁法,培养原代大鼠远端PASMCs,将第4代PASMCs分成对照组及LPS组,对照组不加入任何干预剂,LPS组用终浓度为1μg/mL的LPS诱导细胞;两组细胞分别培养12、24、48、72 h后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-6的表达水平;用实时荧光定量PCR(Taqman探针法)检测细胞microRNA-146a的表达情况,并将细胞上清液中IL-6的表达量与microRNA-146a表达情况进行相关性分析.结果 与对照组相比,LPS诱导组PASMCs中microRNA-146a的表达量在12 h开始升高,并呈递增趋势,72 h达峰(P<0.01);同时,LPS组细胞上清液中IL-6的表达量亦于12 h时升高,并且升高明显,72 h可达到高峰(P<0.01);经相关性分析,两者的表达量呈正相关(r=0.981,P=0.00).结论 COPD大鼠PASMCs在LPS诱导后合成分泌IL-6,同时PASMCs中microRNA-146a表达升高,两者表达量呈正相关,推测其可能与PASMCs的炎症反应调控有关.

  • 急性格林巴利综合征患者外周血microRNA-146a、microRNA-125b表达及其与免疫球蛋白、炎症因子的相关性研究

    作者:黄攀;徐敏;何晓英

    目的 探讨急性格林巴利综合征患者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b的表达水平与免疫球蛋白、炎症细胞因子的相关性.方法 选取我院神经内科收治的84例急性格林巴利综合征患者作为试验组(GBS组),另选取50例正常体检者作为对照组.采用RT-PCR技术检测所有纳入者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b的表达水平,采用免疫比浊法检测所有纳入者外周血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)的水平,采用酶联免疫吸附法检测所有纳入者外周血清中IL-6、CRP、TNF-α的水平.比较2组患者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b的表达水平,采用Spearman相关性分析方法分析microRNA-146a、microRNA-125b分别与免疫球蛋白、炎症因子的相关性.结果 试验组外周血清中microRNA-146a表达水平高于正常组,而microRNA-125b的表达水平低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组外周血清中IL-6、CRP、TNF-α、IgG表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析表明microRNA-146a与IL-6、CRP、TNF-α、IgG具有正相关性,而microRNA-125b与IL-6、CRP、TNF-α、IgG具有负相关性,差异均有统计学意义(P<0.05);而microRNA-146a及microRNA-125b与IgA、IgM无明显相关性.结论 急性格林巴利综合征患者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b存在差异表达谱,并且二者可能是通过调控免疫及炎症反应进而参与急性格林巴利综合征的发病.

  • 冠心病患者外周血单个核细胞中microRNA-155及146a的表达水平

    作者:李凝诗;杨丽霞;郭瑞威;朱国富;齐峰;叶金善

    目的 观察microRNA-155及146a在冠心病患者外周血单个核细胞中的表达水平.方法 148例心内科住院患者分为两组,对照组35例,冠心病组113例,冠心病组又分为3组,其中AMI组42例,UA组38例,SA组33例.采用实时定量PCR检测外周血单个核细胞上microRNA-155及146a表达情况.结果 与对照组比较,microRNA-155在冠心病组的表达水平降低,microRNA-146a升高(P<0.05);AMI组及UA组患者的microRNA-155表达水平显著低于对照组和SA组(P<0.05),microRNA-146a的表达水平则高于对照组和SA组(P<0.05),而AMI组及UA组两组间无明显差异(P>0.05).结论 随着冠心病病情的进展,患者microRNA-155及146a的表达水平随之改变,为冠心病患者的筛查及治疗提供了一个新方向.

  • 类风湿性关节炎患者microRNA-146a的表达及与血清学指标的相关性

    作者:荀春华;胡志坚;韩峰;伍模鑫

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是常见的以关节滑膜慢性炎症为主要特征的自身免疫性疾病,其主要病理改变为关节滑膜明显增厚并有大量炎症细胞浸润,血管翳形成以及软骨组织的侵蚀与破坏[1].microRNA可被分泌释放到细胞外,参与多种炎性和自身免疫性疾病的发病过程[2].Micro-RNAs (miRNAs)是一类短的(大约20 ~ 22个核苷酸)非编码RNA,介导RNA干扰和在翻译水平抑制蛋白表达.miRNAs与自身免疫性疾病进程有关且可能参与RA新的调控机制[2-4].

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