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桂皮醛对miRNA-146a干扰的骨关节炎滑膜炎性反应影响的实验研究
目的:研究miRNA-146a基因及桂皮醛对miRNA-146a干扰的滑膜成纤维细胞释放TLR4、NO、MMP-13的影响,探寻其在OA滑膜炎性反应分子学机制中的作用.方法:采用脂质体转染法将miR-146a基因模拟及抑制性质粒载体对经LPS诱导后的OA滑膜炎性反应效应细胞滑膜成纤维细胞进行基因导入,并用桂皮醛对干扰后的细胞进行干预,检测不同组间TLR4、NO及MMP-13表达的差异.结果:miRNA-146a相关质粒转染后的TLR4、NO、MMP-13浓度的变化趋势大致相同:与对照组比较,三者的inhibitor组均升高,mimics组则均呈下降趋势(P＜0.05).桂皮醛单独作用于miRNA-146a干扰后的细胞时,与对照组比较,TLR4、NO、MMP-13浓度均有明显下降(P＜0.05),而当mimics和CA联合干预时,三者释放量显著下降(P＜0.05).结论:miRNA-146a及桂皮醛均对骨关节滑膜炎性反应产生影响,当mimics和桂皮醛联合作用时,抑制炎性反应效果好.为进一步阐明骨关节炎分子机制和药物靶点的识别与开发提供实验依据.
关键词： 骨关节炎 microRNA-146a Toll样受体 滑膜炎性反应 -
《伤寒论》中不同比例的桂芍配伍对骨关节炎滑膜炎性反应的作用研究
目的:研究《伤寒论》中不同比例的桂芍配伍对骨关节炎(OA)滑膜炎性反应的作用,筛选出该药对抗炎的佳配伍比例.方法:采用冷冻干燥法将桂枝与白芍单味药及二者在《伤寒论》中不同配伍比例(1:1、1:2、5:3)的水煎剂进行处理,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法确定干预浓度后,分别作用于经脂多糖(LPS)诱导的OA滑膜炎性反应的效应细胞滑膜成纤维细胞,通过流式细胞术测定不同组间细胞表面TLR2和TLR4的阳性率表达差异、Griess法、Elisa法测定上清液中NO、白细胞介素-1β(IL-1 β)和肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)的释放量.结果:桂芍及各配比组对TLR2、TLR4的阳性表达及NO、IL-1β及TNF-α的释放均低于对照组(P＜0.05),配伍组的抑制作用明显强于单味药组(P＜0.05),其中,桂芍比为5:3时抑制作用强.结论:桂芍配伍组对滑膜炎性反应的抑制作用优于单味组,桂芍药对抗炎作用的佳配伍比例为5:3.
