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共焦显微镜检查在角膜病的应用
共焦显微镜作为一种新型的光学显微镜已广泛应用于眼科临床,使得活体正常人角膜各层结构得以显示.各种屈光矫正方法(角膜接触镜、PRK、LASIK)、角膜营养不良、角膜炎症、角膜移植手术后及虹膜角膜内皮综合征等引起的角膜病理变化均可通过共焦显微镜三维、实时、断层无损伤的检查,得以明确.共焦显微镜在角膜疾病的早期诊断及指导治疗上有其不可比拟的优越性.
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LASIK和LASEK术后角膜神经再生情况的比较
目的 在共焦显微镜观察下比较激光原位角膜磨镶术(LASIK)和激光L皮瓣下角膜磨镶术(LASEK)术后角膜神经再生的变化.方法 LASIK 16例(32眼),LASEK 13例(26眼).分别于术前、术后3月和术后6月进行中央角膜组织共焦显微镜检查,并测定泪膜破裂时间(BUT).结果 LASIK和LASEK术后上皮基底膜下神经纤维数量的差异有统计学意义.两组中,BUT与角膜神经再生均无明显相关关系.结论 LASEK术后角膜神经再生明显快于LASIK术后.
关键词： 激光原位角膜磨镶术 激光上皮瓣下角膜磨镶术 共焦显微镜检查 角膜神经 再生 -
正常人角膜神经的共焦显微镜观察
角膜内感觉神经的保护作用十分重要,交感神经纤维可调节角膜上皮完整性、上皮的增殖及伤口的愈合等.以往对角膜神经的研究方法多为离体检查,共焦显微镜作为一种新型的光学显微镜,可在活体上对角膜从四维(三维空间和时间)水平进行实时扫描成像[1-4].我们对37例(42只眼)正常人进行了共焦显微镜检查,以了解正常角膜内神经的形态,为各种病理状态下角膜神经形态的研究提供参考.
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共焦显微镜检查的护理配合
共焦显微镜(Confocal microscopy)是一种在四维(x、y、z轴和 real time)观察活体角膜水平,且无创伤的显微镜,其特点是:无论在透明或混浊的角膜都能在三维空间加真实时间里显示角膜结构和病理改变,尤其对真菌、阿米巴、病毒感染等能在病因学上作出诊断.由于其高分析率,高放大倍数,具有广泛的研究前景.我院引进TOMEY公司的卤灯光型的共焦显微镜主要应用于真菌性角膜炎、细菌性角膜炎、棘阿米巴性角膜炎、单疱病毒性角膜炎等的临床辅助诊断,取得了较好的临床应用价值,现将我们在临床工作中的护理经验介绍如下.
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中国人正常角膜的共焦显微镜检查
摘要:目的:探讨正常人共焦显微镜下角膜各层细胞的活体细胞形态学特征及密度.方法:对28例(年龄:36.6士14.5岁,范围:19～68岁)41眼(男14眼,女27眼)正常人中央部角膜进行活体共焦显微镜检查,描述角膜各层结构的图象特点,并分析角膜各层细胞的密度与年龄的相关性.结果:上皮表层细胞排列疏松,边界清楚,核反光较强;基底层细胞排列紧密,胞质和核反光弱,偶尔可见点状细胞核,细胞平均密度为5724.41士562.5个/mm2.Bowman's膜为无一定形状的膜状物,仅可分辨的结构是上皮下的念珠状神经纤维.基质层中可见相对较暗的背景下明亮的角膜细胞核.前基质内有放射状分布的神经纤维.前基质层角膜细胞平均密度为1099.10士164.90个/mm2,后基质层角膜细胞平均密度为754.37士90.37个/mm2,前后基质层细胞密度有显著性差别(P＜0.001).Descemet's膜结构不清.内皮层表现为规则的六边型镶嵌体,胞体明亮,细胞平均密度为3179.20士221.03个/nm2.角膜内皮细胞数量与年龄呈明显的负相关(r＝-0.879,P＜0.0001),而其他各层细胞的密度变化与年龄的增长无相关关系(r＝-0.004～-0.879,p＝0.207～0.979),左右眼及男女之间角膜各层细胞密度的差异无统计学意义(p＝0.156～0.844和p＝0.175～0.933).结论:共焦显微镜可以在实时、活体和三维空间从细胞水平对角膜各层结构进行定性和定量分析,具有高放大倍数、高分辨率和无损伤检查等优点,对角膜病的早期诊治以及病理形态学研究等具有重要的临床价值.
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膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统的建立及其在心肌细胞膜钙离子通道研究中的应用
目的 建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,并将其应用于体外心肌细胞膜钙离子通道的研究,验证其应用效果.方法 通过在激光扫描共聚焦显微镜上加装膜片钳装置,采用计算机自动控制技术建立膜片钳与激光扫描共聚焦显微镜的同步实时控制系统；将建立好的装置应用于观察体外雄性大鼠心肌细胞膜钙离子通道,并分析观察结果.结果 成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统；当刺激心肌细胞时,激光扫描共聚焦显微镜-膜片钳同步实时控制系统在通过激光扫描共聚焦显微镜观察钙火花的同时可通过膜片钳记录心肌细胞膜钙离子通道电流信号.定量分析结果表明相邻两个钙火花之间的时间间距分别为(10.055±0.021)、(10.079±0.021)、(10.087±0.021)s,符合膜片钳设定的刺激间隔(10 s)；单个钙火花在空间上均局限于2μm直径范围,在时间上平均经历了约30 ms,从出现至达到高浓度平均需10 ms,从达到高浓度到消失平均需20 ms,与钙火花理论吻合.结论 成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,在心肌细胞实现了在利用膜片钳进行全细胞记录观测和测定钙离子通道电流及其开闭时程的同时,利用激光扫描共聚焦显微镜获得了钙火花的显微结构形态图像,测定钙离子的位点变化,有助于进一步了解质膜钙离子通道的内部机制.
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共焦显微镜在角膜溃疡病原学诊断中的临床应用
目的 评价共焦显微镜(confocal microscopy)在角膜渍疡病原学诊断中的临床应用.方法 利用共焦显微镜对临床拟诊为角膜溃疡的36例患者进行检查,并对结果 进行分析比较.结果 36例中16例(16眼)观察到角膜基质内有菌丝,显示菌丝图像为相对暗的背景中呈明亮、线状形态.有2例(2眼)观察到了阿巴包囊,表现为位于浅基质层中白色闪光的圆形小体.结论 作为一种无创伤性的快速诊断工具,共焦显微镜在角膜溃疡病原学诊断的临床应用中有着重要的作用和显著的优点,并在对该病的病理特点的研究中也有着巨大的潜力.
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激光扫描共焦显微镜对飞秒激光小切口基质透镜取出术后角膜帽神经修复的动态观察
背景 飞秒激光小切口基质透镜取出术(SMILE)术后角膜中央部上皮基底膜下神经纤维丛存在再生的过程,但术后不同时间点角膜上皮基底膜下神经纤维的生长方式及角膜帽缘神经修复的动态变化鲜见报道. 目的 探讨SMILE术后角膜帽神经损伤情况及其修复规律. 方法 对2014年4月至2015年4月于山东医学高等专科学校附属眼科医院接受SMILE手术且按时完成随访的近视患者16例32眼进行回顾性分析.术眼于术前及术后1周、1个月、3个月、6个月进行随访检查,采用激光扫描共焦显微镜对术眼角膜中央部及帽缘切口部位进行0.4 mm×O.4 mm区域的扫描,采用Image-Pro Plus图像分析软件对上皮基底膜下神经纤维丛成像为清晰的图片进行分析,测定术眼角膜中央每平方毫米范围内图像中神经纤维的总长度,即角膜中央神经纤维密度,并观察帽缘神经纤维分支的修复.结果 术眼术前及术后1周、1个月、3个月、6个月角膜中央神经纤维密度分别为(19 687.45-1 147.59)、(10 500.46±1 056.22)、(12 833.40±1 047.98)、(13 564.04±1 173.01)、(14 661.35±941.92) μm/mm2,手术前后不同时间点总体比较差异有统计学意义(F=319.440,P=0.000).术眼术后角膜神经纤维密度均明显低于术前,手术1个月后随时间推移角膜中央神经纤维密度逐渐增加,各时间点间两两比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).术眼术后角膜上皮基底膜下均发现有较丰富的神经纤维丛,形态与术前接近,术后1周角膜帽缘小切口处可见神经纤维的断端及崩解,角膜帽缘非切口处神经纤维越过角膜帽缘伸入角膜帽;术后1个月角膜帽缘切口处可见新生神经芽穿过角膜切口;术后3～6个月角膜帽缘切口处可见明显的神经纤维连续延伸. 结论 SMILE术后部分浅层神经纤维未受到损伤,神经纤维的修复呈从角膜帽外向角膜帽内水平放射状再生的模式;术后角膜帽中央神经纤维密度随时间的延长逐渐增加.
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Sj(o)gren综合征患者的角膜激光共焦显微镜活体观察
目的 应用激光共焦显微镜观察Sjogren综合征(SS)患者角膜各层的形态改变.方法应用激光共焦显微镜对15例(30眼)SS患者和15例(30眼)同龄正常对照组的角膜进行检查,获取角膜全层图像,并进行比较、分析. 结果与对照组相比,SS组角膜上皮各层细胞密度均明显下降,并出现炎性细胞和树突状细胞浸润.角膜基质细胞呈多突起星状,细胞体积增大,胞核反光减弱,胞质反光增强,浅基质出现炎性细胞浸润.SS组较对照组角膜上皮下神经纤维变细,弯曲度变大,走行方向明显改变,部分神经纤维断裂.结论 SS患者不仅角膜上皮、浅基质细胞、上皮下神经出现明显改变,且角膜基质细胞形态与角膜免疫状态均出现异常.
关键词： 共焦显微镜检查 Sjogren综合征 角膜 干眼 -
微型角膜刀治疗角膜上皮内瘤样改变一例
患者,男,62岁,右眼疼痛、畏光、流泪20 d,加重并伴视力下降5d.发病时曾在当地医院按角膜炎治疗,症状无缓解.眼科检查:视力右眼0.15(不能矫正),左眼1.0;右眼睑痉挛,结膜无明显充血及异常分泌物,角膜中央区上皮有大片半透明灰白色地图样增生,直径约为6 mm,荧光素染色呈细微着色,未见新生血管;双眼前房、虹膜、晶状体、玻璃体及眼底均未见异常.角膜共焦显微镜检查提示:(1)右眼病灶处上皮水肿,角膜上皮细胞细胞核呈高反光,病灶与周围正常角膜上皮边界清晰,病灶深层基底细胞层可见大量白色树枝状高反光细胞群,但未见异型细胞浸润.
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彩色隐形眼镜致双眼严重棘阿米巴性角膜炎一例
患者,女性,23岁.主诉双眼疼痛、异物感、畏光、流泪、视物模糊21 d,于2004年9月来我院就诊.患者发病前配戴用盐水清洗的彩色隐形眼镜1个月,发病时在当地医院诊为"双眼病毒性角膜炎",因局部应用抗病毒滴眼液和抗生素滴眼液1周后病情无明显改善就诊于我院.入院后检查:右眼视力0.02,左眼0.04,双眼矫正视力无提高.结膜水肿,混合充血,双眼角膜中央区上皮缺损,角膜基质脓疡,溃疡表面白色脓苔附着.共焦显微镜检查:双眼角膜查及阿米巴包囊及滋养体.
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激光共焦显微镜下Fuchs角膜内皮营养不良患者的角膜观察
目的:探讨运用激光共焦显微镜观察Fuchs角膜内皮营养不良患者角膜各层形态.方法:收集2014年12月-2015年8月在我院就诊的Fuchs角膜内皮营养不良患者8例16眼,全部患者行激光共焦显微镜检查,对比双眼上皮、基质及内皮细胞形态图像.结果:8例16眼角膜内皮均可见滴状赘疣;10眼内皮细胞结构不清,7例14眼存在双眼内皮损害程度不一;8眼角膜前部基质层细胞肿胀;6眼角膜观察到上皮基底细胞肿胀.结论:激光共焦显微镜能够清楚观察到Fuchs角膜内皮营养不良患者角膜各层细胞变化,尤其是内皮层细胞改变.特别适用于角膜水肿患者.
关键词： 共焦显微镜检查 Fuchs角膜内皮营养 角膜 -
共焦显微镜在角膜溃疡病原学诊断中的临床应用
目的:评价共焦显微镜(confocal microscope,CM)在角膜溃疡病原学诊断中的临床应用.方法:利用共焦显微镜对临床拟诊为角膜溃疡的36例患者进行检查,并对结果进行分析比较.结果:患者36例中,有16例(16眼)观察到角膜基质内有菌丝,显示菌丝图像为相对暗的背景中的明亮的线状形态.有2例(2眼)观察到了阿巴包囊,表现为位于浅基质层中白色闪光的圆形小体.结论:作为一种无创伤性的快速诊断工具,共焦显微镜在角膜溃疡病原学诊断的临床应用中有着重要的作用和显著的优点,并在对该病的病理特点的研究中也有着巨大的潜力.
