首页 > 文献资料
-
烟雾暴露和低氧单独及联合作用对大鼠肺血管重建及蛋白激酶C-α表达的影响
目的探讨烟雾暴露和低氧单独及联合作用对大鼠肺血管重建及蛋白激酶C-α(PKC-α)表达的影响.方法健康雄性Wistar大鼠56只,随机分为正常对照组(C组)、烟雾暴露组(S4W组和S8W组)、低氧组(H4W组和H8W组)和烟雾暴露+低氧组(SH4W组和SH8W组),复制大鼠慢性烟雾暴露及低氧模型.右心导管法记录并测定平均肺动脉压(mPAP),分离心脏计算右心室肥厚指数(RVHI).弹力纤维染色计算腺泡内肺动脉3种类型血管的构成比及肺动脉管壁骨架蛋白(α-SM-actin)染色显示肺血管重建,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)染色检测细胞增殖、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PKC-α mRNA表达,免疫荧光及Western blot检测PKC-α蛋白表达.结果与C组大鼠mPAP[(14±4)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa]比较,H4W、H8W、SH4W、SH8W组大鼠mPAP均显著增高[(31±7)(32±8)、(32±9)、(31±10)mm Hg,P均<0.01],而S4W、S8W组均无显著升高[(15±5)、(16±6)mm Hg,P均>0.05].S4W、S8W、H4W、H8W、SH4W和SH8W组大鼠RVHI(0.258±0.024、0.394±0.021、0.374±0.020、0.414±0.019、0.434±0.023、0.442±0.020)、肌型动脉占血管总数的百分比[(33.5±6.8)%、(41.1±9.8)%、(35.9±6.6)%、(46.0±6.3)%、(42.9±6.5)%、(50.2±9.9)%]及α-SM-actin表达(53±15、75±14、56±11、82±17、83±17、98±16)均显著高于C组(P均<0.01),凋亡指数(2.5±1.0、3.8±1.4、2.3±1.1、3.3±1.1、3.5±1.4、4.8±1.4)和增殖指数(33.1±11.8、43.8±11.0、36.5±10.6、46.3±12.1、45.3±12.4、53.3±13.4)均高于C组(P均<0.01).肺动脉PKC-α mRNA和蛋白的表达均增强(P均<0.01).且SH4W、SH8W组各指标分别与H4W、H8W组比较,差异均有统计学意义(P均<0.01).结论烟雾暴露和低氧均能诱导肺动脉平滑肌细胞凋亡与增殖,导致肺血管重建,二者协同作用能加重肺血管重建;激活PKC信号转导途径可能是其部分机制.
-
血管内皮生长因子与烟雾暴露所致大鼠肺气肿发病关系的研究
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与烟雾暴露所致大鼠肺气肿发病的关系.方法36只12周龄雌性SD大鼠随机均分为烟雾暴露组(S组)和正常对照组(N组).S组随机均分为S1、S2、S3组,分别烟雾暴露2、4、8周;N组亦随机均分为N1、N2、N3组,在常氧下再饲养0、4、8周.分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和改良的链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测大鼠肺内VEGF mRNA、VEGF及其受体2(KDR,激酶插入区包含受体)蛋白表达水平;苏木精-伊红(HE)染色评估S组大鼠肺部病理改变,用平均内衬间隔(MLI)与平均肺泡数(MAN)评估肺气肿程度.用SPSS 10.0进行方差分析、非参数检验和相关性分析.结果 (1)S组大鼠出现肺部炎症,至第8周(即S3组)出现早期肺气肿样改变,S3组的MAN较同时段N3组显著下降,MLI显著增加(P<0.05);(2)S组大鼠肺组织VEGF表达及肺血管内皮细胞KDR表达显著下降:S1组与N1组比较,VEGF189 mRNA及肺泡、支气管上皮VEGF蛋白表达下降(P<0.01);S2组与N2组比较,VEGF189、VEGF165、VEGF121 mRNA及肺泡、支气管上皮VEGF蛋白表达均显著降低(P<0.01);S3组VEGF mRNA表达与N3组比较差异无显著性(P>0.05),但肺泡、支气管上皮细胞VEGF蛋白质表达及肺血管内皮细胞KDR表达水平显著低于N3组(P<0.01,P<0.01,P<0.05);(3)肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞VEGF蛋白表达下降与MAN减少呈显著正相关(r=0.43,r=0.37;P均<0.05),与MLI增加呈显著负相关(r=-0.42,r=-0.37;P均<0.05).结论烟雾暴露能抑制大鼠肺内VEGF及其受体KDR表达,VEGF在烟雾暴露所致的大鼠肺气肿发病过程中可能具有重要意义.
-
肿瘤坏死因子α与血管内皮生长因子在烟雾暴露大鼠肺气肿模型中的动态变化
近年大量研究提示肿瘤坏死因子α(TNF-α)是导致慢性阻塞性肺疾病(COPD)慢性炎症损伤和肺实质毁损的关键细胞因子,而血管内皮生长因子(VEGF)是滋养肺泡组织所必需的抗损伤细胞因子.我们通过建立大鼠烟雾暴露肺气肿模型,动态观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α含量与肺组织中VEGF表达,以探讨TNF-α和VEGF失衡在肺气肿形成中的作用.
-
烟雾暴露对支气管哮喘豚鼠肺内P物质含量及其基因表达的影响
为探讨烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)、血液中P物质(SP)含量及其肺组织中SP基因表达的影响,我们对此进行了研究并探讨了烟雾暴露对SP的影响机制.
-
胆红素对烟雾暴露大鼠肺泡巨噬细胞核因子κB及白细胞介素8表达的影响
吸烟是引起慢性阻塞性肺疾病(COPD)的主要危险因素,氧化/抗氧化系统失衡与肺气肿的发生、发展密切相关,胆红素作为一种新型的抗氧化剂和免疫调节剂对某些组织损伤具有保护作用[1,2],在本组研究中,我们观察其在肺气肿大鼠发病中的作用.
-
维甲酸对烟雾暴露所致大鼠肺气肿单核细胞趋化蛋白1和转化生长因子β的影响
慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展与体内诸多趋化活素、细胞因子、生长因子和酶等密切相关.且吸烟是其重要的致病因素.本文旨在研究维甲酸对烟雾暴露大鼠肺组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和转化生长因子β(TGF-β)的影响,以探讨其在COPD防治中的意义.
-
烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞核因子κB的影响及机制
核因子κB(NF-κB)是重要的转录调节因子, 吸烟作为导致慢性阻塞性肺疾病(COPD)的重要因素, 其对NF-κB的影响及作用机制尚不清楚.我们的实验通过在体及离体研究,探讨烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞(AM) NF-κB的作用及相关机制.
-
胆红素对烟雾暴露大鼠支气管上皮细胞结构和基质金属蛋白酶9表达的影响
支气管上皮细胞长期受烟雾中的氧化剂等有害物质损伤时,可产生气道及其周围组织的慢性炎症,导致气道结构改变,表现之一为细胞外基质(ECM)结构重塑.基质金属蛋白酶的表达失衡,与ECM代谢紊乱密切相关.近年来发现胆红素既是体内有潜在毒性的代谢产物,也是一种有效的抗氧化剂[1],对某些组织具有保护作用[2,3].我们在吸烟大鼠肺气肿模型建立过程中进行胆红素干预,观察胆红素对吸烟大鼠支气管黏膜的保护作用,以及对支气管上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响.
-
烟草烟雾暴露与变态反应性疾病相关性的研究进展
暴露于烟草烟雾(exposure tobacco smoke,ETS)会导致多种肿瘤和心血管疾病,甚至死亡.2009年世界卫生组织(WHO)报告[1]每年有超过500万人死于因吸烟引起的疾病.1981年Kjellman[2]首次在Lancet杂志撰文指出烟草烟雾可能会导致身体过敏状态增强,此后关于ETS和变态反应性疾病相关性的研究便逐渐增多,但目前两者间的关系仍不明确.现阶段的研究主要集中于吸烟对变应性鼻炎、支气管哮喘(简称哮喘)和异位性皮炎三者造成的影响.
-
香烟烟雾暴露对支气管哮喘影响机制的研究进展
支气管哮喘(简称哮喘)是一种以可逆性气流受限为特征的慢性气道炎症性疾病,在世界范围内的发病率有明显增加.流行病学研究结果显示,环境污染可能是其发病原因之一.香烟烟雾是一种重要的环境污染物,近年来研究结果显示,母亲孕期吸烟、儿童被动吸烟以及主动吸烟均可增加哮喘发病率,长期吸烟能够增加哮喘发作严重度及病死率,且减弱对糖皮质激素(简称激素)治疗的反应性.本文对香烟烟雾暴露与哮喘发病和病情发展的关系及其影响机制进行综述.
-
N-乙酰半胱氨酸对烟雾暴露所致大鼠慢性阻塞性肺疾病模型的影响
血管内皮细胞牛长因子(VEGF)对于维持正常肺泡结构、抗损伤及组织修复、抗内皮细胞凋亡具有重要作用,父于抗氧化剂对COPD肺组织VEGF分泌及间隔细胞凋亡影响的研究鲜有报道.我们采用熏香烟法建立大鼠COPD模型,通过N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预,观察其对大鼠肺功能、肺气肿程度和肺泡间隔细胞凋亡及VEGF分泌的影响,了解COPD发病机制中氧化和抗氧化失衡与凋亡之间的关系.
-
烟雾暴露慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内细胞凋亡和增殖的变化
目前慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制尚未完全明了,越来越多的研究结果表明,细胞凋亡参与COPD的形成过程.为此,我们观察了吸烟对COPD大鼠肺内细胞凋亡和增殖的影响,探讨细胞凋亡和增殖在COPD发病中的意义.
-
烟草烟雾暴露对小鼠肺部CD4+白细胞介素-17+T细胞表达的影响
COPD是一种进行性、不完全可逆性气流受限疾病,而吸烟是重要的危险因素[1].戒烟是目前证明能延缓COPD患者肺功能进行性下降的有效措施之一[ 2],但其作用机制不明.近年来的研究结果表明,COPD可能是一种由吸烟诱发T细胞参与的炎症反应和自身免疫性疾病[3];特异性分泌IL-17的CD4+ Th细胞(Th17细胞)、表达特异性转录因子维甲酸相关孤独受体(retinoid-related orphan nuclear receptor,RORγt)和STAT3转录因子,主要分泌IL-17、IL-21和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子,具有强大的促炎症作用[4-5],RORγt在一定程度上可以反映Th17细胞的水平及功能活性.
-
红霉素干预对烟雾暴露大鼠肺部炎症的影响
长期小剂量应用大环内酯类抗生素在治疗弥漫性泛细支气管炎等慢性肺部炎症性疾病中取得了良好的疗效,其可能的作用机制是抑制吞噬细胞(如中性粒细胞)的氧化爆发,抑制炎性细胞炎性介质、细胞因子的释放,从而削弱肺部炎症反应[1].长期吸烟会导致气道、肺部一系列的炎症反应,本实验观察了红霉素干预对暴露于香烟烟雾中大鼠肺部炎症的影响.
-
香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠OX-62、白介素12表达的影响
目的 研究香烟烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠肺组织树突状细胞(dendritic cell,DC)的特异性标记蛋白OX-62、血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)白介素12(IL-12)表达的影响,探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、暴露组;建立哮喘大鼠模型和哮喘大鼠香烟烟雾暴露模型,收集BALF进行白细胞计数及分类,用免疫组织化学半定量法测定肺部OX-62染色阳性细胞的数量及分布,用免疫印迹法(Western blot)测定肺组织OX-62蛋白的含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆和BALF中IL-12的含量.结果 ①与对照组相比,哮喘组大鼠BALF中白细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞数量明显增加,差异均有统计学意义(P值均<0.01);与哮喘组相比,暴露组大鼠BALF中白细胞、中性粒细胞数量明显增加,差异有统计学意义(P值均<0.01).②OX-62蛋白染色阳性细胞即为DC,与对照组相比,哮喘组和暴露组大鼠肺部DC数量明显增加,差异均有统计学意义(P值均<0.01);与哮喘组相比,暴露组大鼠肺部DC数量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01).③与对照组相比,哮喘组和暴露组大鼠肺组织OX-62蛋白的含量明显增加,差异均有统计学意义(P值均<0.01);与哮喘组相比,暴露组大鼠肺组织OX-62蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01).④与对照组相比,哮喘组和暴露组大鼠血浆和BALF中IL-12含量明显降低,差异均有统计学意义(P值均<0.01);与哮喘组相比,暴露组大鼠血浆和BALF中IL-12含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).⑤相关性分析:血浆和BALF IL-12含量与肺组织DC数量均呈负相关(r=-0.592和-0.583,P值均<0.01).结论 香烟烟雾暴露可以上调哮喘大鼠模型肺部DC的数量以及下调IL-10和IL-12的表达,这些变化可能是香烟烟雾加重和改变哮喘气道炎症的免疫学机制之一.
-
烟雾暴露对大鼠肺血管t-PA与PAI-1表达的影响
目的 观察烟雾暴露对大鼠肺血管内皮细胞组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)与纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)表达的影响,探讨烟雾暴露及戒烟对肺血管内皮细胞纤溶功能的影响.方法 将雄性SD大鼠40只随机分为对照组(C组)、烟雾暴露1个月组(S1组)、烟雾暴露3个月组(S2组)、烟雾暴露1个月戒烟1个月组(Q1组)、烟雾暴露3个月戒烟1个月组(Q2组),每组各8只.造模成功后取肺组织,免疫组织化学染色检测肺血管内皮细胞t-PA与PAI-1蛋白的表达.结果 ①与C组比较,S1、S2组的t-PA表达减少(P<0.05).Q1、Q2组的t-PA表达分别比S1、S2组增加,但仍低于C组(均P<0.05),S1、S2组差异无统计学意义(P>0.05).②与C组比较,S1、S2组的PAI-1表达增加(P<0.05).Q1、Q2组的PAI-1表达分别比S1、S2组减少,但仍高于C组(均P<0.05).S2组的PAI-1表达高于S1组(P<0.05).结论 烟雾暴露可影响肺血管内皮t-PA与PAI-1的表达,使其纤溶功能受抑,戒烟后上述作用有所恢复.
-
烟草烟雾暴露对哮喘大鼠气道CCR6mRNA及其蛋白表达的影响
目的 研究烟草烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道chemokine receptor 6 (CCR6)表达的影响,探讨吸烟加重哮喘气道炎症的免疫学机制.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、烟雾暴露组、哮喘组和哮喘+烟雾暴露组,每组10只.建立哮喘大鼠模型和哮喘大鼠烟草烟雾暴露模型,采集大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)行白细胞计数及分类,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法及免疫组织化学法检测各组大鼠气道CCR6 mRNA及蛋白的表达.结果 ①哮喘组(69.0±3.5;4.1±1.0;8.9±2.0)、哮喘+烟雾暴露组(86.7±5.2;2.2±1.0;19.0±2.8) BALF中白细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞均高于对照组(10.1±3.8;1.3±0.7;2.2±1.1)、烟雾暴露组(47.7±6.8;0.5±0.3;2.7±1.4) (P均<0.05);哮喘+烟雾暴露组BALF中白细胞总数和中性粒细胞高于哮喘组,嗜酸粒细胞低于哮喘组(P均<0.05).②哮喘组(8.15±0.88;0.452±0.013)、哮喘+烟雾暴露组(15.16±0.87;0.531±0.024) CCR6 mRNA及其蛋白表达水平均明显高于对照组(1.01±0.52;0.299±0.027)、烟雾暴露组(5.55±0.54;0.442±0.018)(均P<0.01);哮喘+烟雾暴露组明显高于哮喘组(均P<0.01).结论 烟草烟雾暴露可通过促使气道CCR6 mRNA及其蛋白高表达,加重哮喘大鼠气道慢性炎症.
关键词: 烟雾暴露 支气管哮喘 趋化因子受体CCR6 -
成纤维细胞烟雾暴露后产生的基质蛋白具有促细胞增殖作用
慢性阻塞性肺疾病(COPD)以肺气肿及呼吸道壁增厚为特征,其主要致病因素是长期暴露于颗粒物。香烟烟雾是常见的颗粒物,其细胞毒性和促炎活动相结合致肺泡破坏引起肺气肿。目前尚不清楚香烟烟雾本身是否可引起呼吸道壁增厚。
-
香烟烟雾暴露对大鼠肺组织缺氧诱导因子1α表达的影响
目的 研究烟雾暴露对大鼠肺组织缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible faetor-1α,HIF-1α)和核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB) p65表达的影响,探讨烟雾暴露致大鼠肺动脉高压的发生机制.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为对照组、烟雾暴露4、8、12周组,每组8只,制备各组烟雾暴露模型.右心导管法测肺动脉平均压(mPAP),并计算右心肥厚指数(RVHI),荧光定量PCR测各组大鼠肺组织HIF-1α mRNA,免疫组织化学方法测各组大鼠肺组织HIF-1α、NF-κB p65蛋白表达.结果 ①大鼠mPAP烟雾暴露8周组[(14.700±1.125) mm Hg]、12周组[(17.830±2.437)mm Hg]明显高于对照组[(10.670±1.125)mm Hg],差异有统计学意义(P<0.05);烟雾暴露12周组大鼠RVHI(0.260±0.006)高于对照组(0.220±0.020),差异有统计学意义(P<0.05);②大鼠肺组织中HIF-1αmRNA相对表达量在烟雾暴露8周组(1.170±0.211)、12周组(1.360±0.185)高于4周组(0.920±0.141)及对照组(0.760±0.137),差异有统计学意义(P<0.05);③各烟雾暴露组大鼠肺血管平滑肌中HIF-1α及NF-κBp65蛋白的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);④HIF-1α蛋白的表达与mPAP、RVHI、HIF-1α mRNA的相对表达量及NF-κBp65蛋白的表达均呈正相关(r=0.688、r =0.497、r =0.706、r =0.583,P值均<0.01).结论 HIF-1α和NF-κB在烟雾暴露大鼠肺组织中表达均增高,HIF-1α和NF-κB在烟雾暴露引起肺动脉平均压增高的过程中可能发挥了一定作用.
-
香烟烟雾暴露对大鼠肺组织血小板衍生生长因子BB表达的影响
目的 研究烟雾暴露对大鼠肺组织血小板衍生生长因子BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF BB)和核因子κB(nuclear factor-κB,NFκB) p65表达的影响,探讨烟雾暴露致大鼠肺动脉高压的发生机制.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为对照组、烟雾暴露4、8、12周组,每组8只,制备各组烟雾暴露致肺动脉高压模型.RT-PCR方法检测PDGF-BB mRNA表达,免疫组织化学方法测各组大鼠肺组织PDGF-BB、NF-κBp65蛋白表达.结果 ①大鼠肺组织中PDGF BB mRNA相对表达量在烟雾暴露4周组(2.823±0.453)、8周组(4.015±0.052)、12周组(6.098±0.439)高于对照组(1.024±0.231),差异有统计学意义(P<0.05);②大鼠肺组织中PDGF-BB蛋白相对表达量在烟雾暴露4周组(0.220±0.005)、8周组(0.367±0.004)、12周组(0.492±0.003)高于对照组(0.077±0.003),差异有统计学意义(P <0.05),NF-κBp65蛋白相对表达量在烟雾暴露4周组(0.330±0.003)、8周组(0.452±0.003)、12周组(0.596±0.003)高于对照组(0.186±0.001),差异有统计学意义(P<0.05);③PDGF-BB蛋白的表达与PDGF-BB mRNA的相对表达量及与NF-κBp65蛋白的表达均呈正相关(r=0.686、r=0.501,P值均<0.01).结论 烟雾暴露大鼠肺组织中PDGF-BB在转录和翻译水平表达均增高,且PDGF-BB和NFκB蛋白表达有相关性,提示PDGF-BB和NF-κB在烟雾暴露引起肺动脉平均压增高的过程中可能发挥了一定作用.
关键词: 烟雾暴露 高血压 肺性 血小板衍生生长因子BB 核因子κB