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丹黄通脉方对颈动脉粥样硬化大鼠血清基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶抑制剂1的影响
目的 探讨丹黄通脉方对颈动脉粥样硬化斑块的影响及可能作用机制.方法 30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丹黄通脉方组,每组10只.模型组、丹黄通脉方组采用高脂复合饲料及腹腔注射维生素D3法制作颈动脉粥样硬化模型.造模成功后丹黄通脉方组给予丹黄通脉方10ml/(kg·d)灌胃,空白组及模型组给予等量蒸馏水,每日2次,连续6周.观察各组大鼠颈动脉病理形态学变化,测定血清基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)水平.结果 光镜下观察显示,模型组血管内膜明显增厚,泡沫样细胞堆积,弹力纤维层不同程度破坏、断裂.丹黄通脉方组血管内膜稍增厚,可见少量泡沫样细胞形成,弹力纤维层稍紊乱,程度较模型组轻.与空白组比较,模型组和丹黄通脉方组颈动脉内膜、中膜面积比(I/M)、MMP-9、TIMP-1均明显升高(P＜0.05);与模型组比较,丹黄通脉方组大鼠I/M、血清MMP-9水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01). 结论 丹黄通脉方能够下调MMP-9水平,可能是改善颈动脉粥样硬化和稳定斑块的作用机制之一.
关键词： 颈动脉粥样硬化 丹黄通脉方 组织形态学 基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶抑制剂1 -
支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中基质金属蛋白酶及其抑制剂与气道炎症及气流受限
目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的水平及其与炎性细胞数、肺功能的关系.方法 分别选择14例缓解期哮喘患者(哮喘组)、12例稳定期COPD患者(COPD组)和10名健康对照者(健康对照组)进行肺功能测定和用诱导痰检查方法对痰炎性细胞进行分类计数,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定诱导痰上清液中自细胞介素4(IL-4)、MMP-9和TIMP-1浓度.结果 哮喘组患者诱导痰中嗜酸粒细胞、中性粒细胞分别为0.181±0.067、0.30±0.07,健康对照组为0.007±0.005、0.26±0.06,COPD组为0.042±0.017、0.50±0.10,3组细胞间比较差异有统计学意义(F值分别为4.32、4.13,P均＜0.05).哮喘组、COPD组、健康对照组间诱导痰中IL-4浓度分别为(19±7)×10-3 g/L、(14±6)×10-3 g/L、(11±4)×10-3 g/L,3组诱导痰中IL-4浓度比较差异无统计学意义(F=1.56,P均＞0.05),且分别与嗜酸粒细胞、中性粒细胞和第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%)无相关(r分别为0.33、0.11、0.19、0.25、0.39、0.40、0.21、0.35、0.17,P均＞0.05).哮喘组和COPD组诱导痰中MMP-9、TIMP-1浓度分别为(15.9±6.0) g/L、(13.4±5.1) g/L、(19.8±8.5) g/L、(16.7±7.6) g/L,健康对照组分别为(1.8±1.1) g/L、(1.3±0.9) g/L,两组MMP-9、TIMP-1浓度比较差异有统计学意义(F值分别为2.99、4.22,P均＜0.05).哮喘组MMP-9浓度与嗜酸粒细胞呈正相关(r=0.71,P＜0.05);COPD组MMP-9浓度与中性粒细胞呈正相关(r=0.59,P＜0.05),但与FEV1占预计值%和第一秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)无相关(r分别为0.22、0.16、0.25、0.30,P均＞0.05).哮喘组和COPD组TIMP-1浓度均与嗜酸粒细胞和中性粒细胞无相关(r分别为0.27、0.31、0.20、0.35,P均＞0.05),但与FEV1占预计值%呈负相关(r分别为-0.58、-0.62,P均＜0.05).哮喘组和COPD组诱导痰中MMP-9/TIMP-1比值分别为0.8±0.7、0.8±0.6,两组比较差异无统计学意义(F=1.78,P＞0.05),但与健康对照组(1.5±0.6)比较差异有统计学意义(F=3.70,P＜0.05),且与FEV1占预计值%呈正相关(r分别为0.56、0.61,P均＜0.05).结论 哮喘组和COPD组患者诱导痰中MMP-9/TIMP-1比值的失衡与气道炎症和气流受限有关,这种失衡在哮喘和COPD细胞外基质的重塑和气流受限的发病机制中发挥重要作用.
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基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶抑制剂1和转化生长因子β1的表达与支气管哮喘不可逆性气流阻塞
目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)在支气管哮喘(简称哮喘)不可逆气流阻塞中的表达.方法 2008年6月至12月就诊于山西医科大学第一医院的哮喘患者48例,根据应用β2受体激动剂后是否出现气流可逆,将哮喘患者分为可逆气流阻塞组(24例)不可逆气流阻塞组(24例)以及对照组(10名).通过盐水诱导痰液,利用ELISA方法 检测哮喘患者及对照者血清、诱导痰中的MMP-9、TIMP-1和TGF-β1浓度.结果 哮喘患者血清及痰液中的MMP-9、TIMP-1和TGF-β1含量均高于对照组,不可逆气流阻塞组含量高于可逆气流阻塞组.血清与痰液中的该三种因子有良好的相关性.哮喘组血清及痰液中的MMP-9/TIMP-1比值均低于对照组,不可逆气流阻塞组痰液中的MMP-9/TIMP-1比值比可逆气流阻塞组减小,血中无变化.结论 采用诱导痰的方法 来获取气道内的分泌物是一种安全有效的方法 .痰液和血清中的MMP-9、TIMP-1和TGF-β1均可以作为哮喘不可逆气流阻塞的生物标记物,痰液中的MMP-9/TIMP-1的比值比血清中更敏感地预测哮喘的不可逆气流阻塞.
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高血压患者血清基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶抑制剂1、脂联素水平与白蛋白尿的关系
目的 探讨高血压患者血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)和脂联素(ADPN)的水平变化及其与白蛋白尿发生的相关性.方法 选择在我院进行体检的建筑工人175名,检测血压、尿常规、尿白蛋白肌酐比值(ACR)、血糖、血脂及肾功能,根据其血压和ACR分为健康对照组、单纯白蛋白尿组、单纯高血压组和高血压合并白蛋白尿组.测定各组受试者血清MMP-9、TIMP-1和ADPN水平,采用t检验进行数据分析.结果 与健康对照组比较,单纯高血压组及高血压合并白蛋白尿组血清MMP-9和TIMP-1水平明显升高(P＜ 0.05或P＜0.01),高血压合并白蛋白尿组血清MMP-9水平较单纯高血压组明显升高(P＜0.05),两组血清TIMP-1水平差异无统计学意义.与健康对照组比较,高血压合并白蛋白尿组血清ADPN水平明显下降(P＜0.05).结论 高血压患者血清MMP-9和TIMP-1水平明显升高,MMP-9/TIMP-1平衡及血清ADPN可能参与高血压患者白蛋白尿的发生.
关键词： 高血压 基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶抑制剂1 脂联素 -
末端病大鼠跟腱超微结构、胶原、MMP-1及TIMP-1的研究
目的:观察末端病大鼠跟腱超微结构、胶原、基质金属蛋白酶1(Matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂1(Tissue inhibitors of Metalloproteinase-1,TIMP-1)的变化,探讨跟腱末端病的发病特点.方法:将20只1月龄雄性SD大鼠随机分为对照组和造模组,每组10只.经过5周的电刺激跳跃之后,对实验大鼠跟腱进行HE染色和电镜观察,测试跟腱胶原Ⅰ、胶原Ⅲ、MMP-1及TIMP-1.结果:与对照组比较,造模组大鼠跟腱胶原排列混乱扭曲,Collagen-Ⅰ mRNA的表达和Collagen-Ⅰ蛋白的合成量均显著下降(P＜0.05);Collagen-ⅢmRNA表达迅速上调,Collagen-Ⅲ的合成量也显著增加(P＜0.05);MMP-1 mRNA、TIMP-1 mRNA的表达和MMP-1、TIMP-1蛋白含量显著增加(P＜0.01).结论:跟腱末端病发生时,胶原Ⅰ的降解能力增强,胶原Ⅲ的合成能力增强,MMP-1与TIMP-1参与跟腱的重塑.胶原的合成与降解处于动态之中,胶原结构混乱和代谢失衡贯穿于跟腱末端病的整个发病过程.
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HIF-1α siRNA对非小细胞肺癌A549细胞TIMP1、MMP1表达的影响
目的 探讨HIF-1 α基因沉默对非小细胞肺癌(NSCLC) A549细胞基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(matrix metalloproteinase inhibitor,TIMP1)表达的影响.方法 将siRNA-HIF-1α质粒载体稳定转染至A549细胞中,于缺氧环境下培养.应用MMT法和Transwell试验分别检测转染细胞的增殖、迁移和侵袭能力.应用qRT-PCR和蛋白免疫印迹分别检测转染细胞内TIMP1、MMP1 mRNA和蛋白表达水平.结果 与Control组相比,A549组HIF-1 αmRNA和蛋白表达显著增加(均P＜0.05).与Blank组和si-NC组相比,si-HIF-1α组HIF-1α mRNA表达水平显著降低(P＜0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组在转染24、48和72 h后细胞增殖率均显著降低(均P＜0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组A549细胞在转染24 h后的迁移和侵袭数量均显著降低(P＜0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组细胞内MMP1表达水平显著降低,而TIMP1表达水平显著增加(均P＜0.05).结论 在缺氧状态下,HIF-1 αsiRNA靶向沉默HIF-1α在A549细胞内的表达,并可以通过下调MMP1表达和上调TIMP1的表达而抑制细胞的增殖、迁移和侵袭.
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TNFα、MMP-1及其抑制剂在肝纤维化组织中的表达及其相关性研究
目的 研究肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、基质金属蛋白酶1(Matrix metalloproteinabe-1,MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂1(Tissue inhibitor of metallopmteinase-1,TIMP-1)在肝纤维化发展的不同时期的表达情况及意义.方法 采用免疫组化法,检测TNF-α、MMP-1和TIMP-1在52例肝纤维化发展不同时期的组织中的表达情况,应用统计软件分析结果 .结果 ①TNF-α、TIMP-1的阳性表达随肝组织炎症及纤维化程度增加而增强(P<0.05);MMP-1在各组间的表达无显著性差异(p>0.05).②MMP-1/TIMP-1比值与肝纤维化程度呈负相关;TNF-α的表达与MMP-1、TIMP-1的表达呈显著性正相关.结论 TNF-d对肝纤维化的形成有一定的促进作用;②MMP-1/TIMP-1系统在肝纤维化形成过程中起着重要的调控作用;①TNF-d能诱导MMP-1、TIMP-1的表达.
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TIMP1基因对人结肠癌HCT-8细胞增殖影响的研究
目的 采用体外试验探讨基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因对人结肠癌(HCT-8)细胞增殖的影响.方法 构建TIMP1基因的真核表达载体和RNA干扰质粒(pcDNA3.1-TIMP1-K、TIMP1 RNAi、pcDNA3.1和空白对照),将TIMP1基因真核表达质粒和RNA干扰质粒分别瞬时转染入HCT-8细胞48～72h后,采用Real TimePCR方法检测TIMP1基因在HCT-8细胞中基因转录表达水平,并用Western blot方法检测TIMP1基因在HCT-8细胞中蛋白表达水平,采用MTr试验检测TIMP1基因过表达和干扰后对HCT-8细胞增殖的影响.结果 成功构建了TIMP1真核表达质粒和RNA干扰质粒.与空白对照比较,质粒pcDNA3.1-TIMP1-K在HCT-8细胞中mRNA和蛋白的相对表达含量较高,质粒TIMP1 RNAi的mRNA和蛋白表达含量较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).构建过表达质粒(pcDNA3.1-TIMP1-K)转染HCT-8细胞后,与空白对照相比,第1～4天HCT-8细胞的活性无显著变化(P＞0.05),第5～7天TIMP1基因过表达能够促进HCT-8细胞的增殖活性(P＜0.05)；构建干扰质粒(TIMP1 RNAi)转染HCT-8细胞后,与空白对照相比,第1～4天HCT-8细胞生长无显著变化(P＞0.05),第5～7天TIMP1基因过表达能够抑制HCT-8细胞增殖(P＜0.05).结论 TIMP1基因过表达后能够促进人结肠癌细胞的增殖,在一定条件下还能够抑制人结肠癌细胞的增殖.
关键词： 基质金属蛋白酶抑制剂1 人结肠癌细胞 增殖 -
慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰基质金属蛋白酶及其抑制剂与气道炎性反应及气道重塑的关系
目的 检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)、健康吸烟者及非吸烟者诱导痰上清液MMP-9、TIMP-1的浓度,分析MMP-9、TIMP-1的变化与气道重塑的关系.方法 采用双抗夹心酶联免疫吸附试验法检测COPD组46例、吸烟组42例和非吸烟组40例受试者诱导痰上清液MMP-9、TIMP-1的浓度.结果 COPD组诱导痰MMP-9浓度(782.2±328.4)ng/ml,高于吸烟组(362.6±210.2)ng/ml(P<0.01),高于非吸烟组(126.4±110.2)ng/ml(P<0.01).COPD组MMP-9/TIMP-1比值0.7±0.6低于吸烟组1.6±1.1(P<0.05)和非吸烟组1.5±1.3(P<0.05),吸烟组和非吸烟组无统计学差异(P>0.05).COPD组MMP-9浓度与COPD严重程度呈正相关,吸烟组MMP-9浓度与吸烟年盒数呈正相关.结论 在COPD发病中存在MMP-9/TIMP-1失衡.MMP-9/TIMP-1保持平衡或许可解释吸烟却不引起慢性气流受限.
关键词： 肺疾病 慢性阻塞性 基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶抑制剂1 气道重塑 -
参芪泄浊饮对腺嘌呤肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1基因表达的影响
目的:观察参芪泄浊饮对慢性肾衰大鼠肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因表达的影响.方法:采用Yokozawa法复制慢性肾衰大鼠模型,随机分为参芪泄浊饮高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组、模型组及空白组,高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组分别予参芪泄浊饮水煎液20 mL/(kg·d)、参芪泄浊饮10 mL/(kg·d)、氯沙坦9 mg/(kg·d),模型组与空白组大鼠均予纯净水10 mL/(kg·d),连续给药8周,全部大鼠麻醉后腹腔采血,取左肾,ELLISA法测量血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸转氨酶(ALT)并采用荧光定量PCR检测肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达.结果:①高剂量组Scr水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;②高剂量组MMP-9 mRNA表达水平明显高于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均高于模型组;高剂量组TIMP-1 mRNA表达水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;③各组ALT水平较空白组比较均无显著差别.结论:参芪泄浊饮可通过调节MMP-9及TIMP-1表达来缓解慢性肾衰肾脏功能的恶化.
关键词： 参芪泄浊饮 基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶抑制剂1 腺嘌呤 肾纤维化 -
人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒的构建及活性检测
背景:前期试验显示单个病毒载体介导的多基因共表达系统能够显著提高椎间盘退变转基因疗效.目的:构建人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒.方法:应用全基因合成技术,以"自剪切多肽2A"串联目的基因,并克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒Lenti-TGF-β3-P2A-CTGF-T2A-TIMP1.转染293细胞后,应用RT-PCR和Western-Blot技术分别检测转染后不同时间点目的基因mRNA和蛋白质表达水平.结果与结论:RT-PCR和Western-blot技术检测结果显示重组质粒成功表达了3种目的基因,并于转染后48 h左右达到峰值,"2A"结构下游基因蛋白质表达量约为上游基因的80%.说明成功构建了携带人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因的慢病毒多表达质粒.
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接受骨髓间充质干细胞移植的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶及抑制剂的变化
背景:Ⅰ型及Ⅲ型胶原含量与比例的变化是促使心脏几何形态改变、心肌收缩和舒展功能的重要因素,基质金属蛋白酶2及抑制剂是胶原代谢的土要调节物质.心肌梗死后心力衰竭大鼠接受骨髓干细胞移植后,心肌组织中这些指标会发生哪些变化?目的:观察接受骨髓十细胞移植治疗的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠,心肌组织中胶原含量与比例、基质金属蛋白酶2及抑制剂的变化.设计:随机对照实验.单位:解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系.材料:实验于2004-0712005-12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成.实验动物由北京医科大学动物实验中心提供,选取4周龄清洁级雄性SD大鼠用于骨髓间充质干细胞的制备,200～250 g清洁级雌性SD大鼠14只用于心肌梗死后心力衰竭模型的制备,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.方法:采用梯度离心法与贴壁培养法分离纯化、扩增骨髓间充质干细胞.结扎雌性SD大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死后心力衰竭模型.造模成功4周后将14只大鼠随机分为2组:移植组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受雄性SD大鼠来源的5×106骨髓间充质干细胞.对照组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受等体积磷酸盐缓冲液.每组7只.主要观察指标:移植治疗后21 d:①以苏木精一伊红染色和Masson染色评价左心室形态.②以免疫组织化学分析心肌基质金属蛋白酶2及抑制剂与瘢痕区Ⅰ型及Ⅲ型胶原的变化.③以Western杂交检测基质金属蛋白酶2及抑制剂蛋白的变化.结果:14只大鼠均进入结果分析,无脱失值.与对照组大鼠比较,骨髓间充质干细胞移植大鼠心肌梗死瘢痕区Ⅰ型胶原增加,Ⅲ型胶原降低,心肌组织基质金属蛋白酶抑制剂表达增加,基质金属蛋白酶2表达降低,心室壁增厚,心室腔缩小,心功能增强.结论:骨髓间充质干细胞移植心力衰竭大鼠后,基质金属蛋白酶2及抑制剂发生了动态变化,进而影响瘢痕区胶原比例重建,逆转心力衰竭心脏异常的胶原平衡.
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体外压力刺激对大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E_2和胰岛素样生长因子1的影响
背景:腧穴筋膜结缔组织成纤维细胞是针推治疗操作过程中的主要受力组织细胞之一,细胞生物学行为的调整对腧穴发挥治疗作用的功能关系密切.目的:通过体外实验观察压力刺激对大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E_2和胰岛素样生长因子1的影响.方法:体外培养大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞,随机分为空白对照组和压力刺激组.压力刺激组对细胞实施50kPa压力刺激,每次加力2 h,每8 h1次,共6次;空白对照组不加压.检测细胞外培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E_2和胰岛素样生长因子1含量的变化,并计算基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的变化.结果与结论:"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞压力作用后,培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E_2含量均增加(P<0.05或0.01),基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值增大(P<0.05),胰岛素样生长因子1变化无显著性意义.结果证实,压力刺激对腧穴筋膜组织成纤维细胞基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E_2合成释放的调节,以及对基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的提高,可能是腧穴接受针灸推拿治疗后发挥"疏经通脉"作用的细胞生物力学原理之一.
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重组人表皮生长因子对大鼠角膜碱烧伤后基质金属蛋白酶的影响
背景:研究表明,基质金属蛋白酶1与组织金属蛋白酶抑制剂1在碱烧伤后角膜缺损溃疡的发生发展转归中扮演着重要的角色.目的:观察重组人表皮生长因子对碱烧伤后角膜的促恢复作用,并探讨重组人表皮生长因子对角膜碱烧伤后基质金属蛋白酶及其抑制剂在大鼠角膜中的表达影响及意义.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/2009-05在辽宁医学院实验动物中心完成.材料:健康SD大鼠60只,体质量180～210 g,鼠龄6～8周,雌雄各半,实验前用裂隙灯显微镜检查证实无眼前段病变.方法:将60只大鼠随机分为实验组和对照组,每组30只.建立大鼠角膜碱烧伤模型,实验组大鼠角膜给予重组人表皮生长因子滴眼液滴眼,对照组给予生理盐水滴眼液滴眼,4次/d,连续用药21 d.于碱烧伤后1,4,7,14,21 d每组分别随机处死6只大鼠,取角膜组织.主要观察指标:①裂隙灯显微镜观察烧伤后两组大鼠角膜变化.②在碱烧伤后不同时期用免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测基质金属蛋白酶1及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.结果:裂隙灯显微镜观察,烧伤后第14天实验组角膜溃疡面积与同期对照组相比明显减少.对照组角膜中基质金属蛋白酶1于伤后第1天开始升高,14 d达到高,此后呈现下降趋势.而组织金属蛋白酶抑制剂1早期有所表达,而后活性逐渐下降,伤后第14天降至低水平,此后又再度上升,21 d时达到高.实验组各时间点基质金属蛋白酶1表达低于对照组,而组织金属蛋白酶抑制剂1表达高于对照组.结论:重组人表皮生长因子可通过调节基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达平衡,从而能有效促进角膜上皮缺损的修复.
关键词： 角膜 碱烧伤 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶抑制剂1 表皮生长因子 -
长针透刺膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平的变化
背景：基质金属蛋白酶抑制剂1在抑制关节退变、破坏方面有重要作用。
目的：观察长针透刺治疗大鼠膝骨关节炎后，大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平变化。
方法：将40只 SD 大鼠随机分成正常组、长针透刺组、药物组及模型组，每组10只，通过向 SD 大鼠膝关节腔内注射1.6%木瓜蛋白酶溶液并驱赶大鼠活动造模，2周后建立膝骨关节炎模型。正常组与模型组不干预，长针透刺组用0.3 mm×125.0 mm 的毫针透刺大鼠内外膝眼穴，药物组将透明质酸钠向关节腔内注射。
结果与结论：①ELISA 法检测：治疗4周后，正常组大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平高于模型组(P <0.05)，长针透刺组及药物组大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平高于模型组(P <0.05)。②结果证实，长针透刺能有效提高膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平。 -
香青兰总黄酮对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响
目的 观察香青兰总黄酮对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 采用卵白蛋白致敏和激发建立大鼠哮喘模型,给予香青兰总黄酮进行干预后,ELISA法检测大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的水平.结果 香青兰总黄酮180、360 mg·kg-1可降低哮喘大鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1、TGF-β1含量及MMP-9/TIMP-1比值(P＜0.05或P＜0.01).结论 香青兰总黄酮可纠正哮喘大鼠MMP-9/TIMP-1失衡,降低TGF-β1水平,改善哮喘气道重塑.
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参桂保心方对慢性心力衰竭大鼠基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶抑制剂1、B型脑钠肽及心室重构的影响
目的 观察参桂保心煎剂对心力衰竭大鼠基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、B型脑钠肽(BNP)水平及其对心肌组织的影响,探讨该药对心室重构的抑制作用.方法将90只SD大鼠分为2组,对照组15只,注射盐水;实验组75只,注射异丙肾上腺素3mg/(kg·d),4周后射血分数≤50％为造模成功.将实验组大鼠分为模型组,芪苈强心组,参桂保心高、中、低剂量组,每组15只.8周后测定心胸比,BNP,心肌MMP-2、TIMP-1表达,并进行HE染色.结果心胸比和BNP在治疗后均有下降,芪苈强心组及高剂量组尤为明显;MMP-2表达在治疗后均有减少,其中,高剂量组优于芪苈强心组.结论参桂保心可能通过减少MMP-2表达,调节MMP-2/TIMP-1的动态平衡,维持细胞外基质合成与降解平衡,达到抑制心室重构的作用.
关键词： 慢性心力衰竭 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶抑制剂1 B型脑钠肽 参桂保心方 -
TIMP1基因重组真核表达质粒的构建及其在MCF-7细胞中的表达
目的 构建3种TIMP1基因重组真核表达质粒,并在人乳腺癌MCF-7细胞中表达.方法 将TIMP1基因分别插入3种真核表达载体pcDNA3.1(+)、pVAX Ⅰ和pEGFP-C1,构建3种重组表达质粒pcDNA3.1(+)-TIMP1、pVAX Ⅰ-TIMP1和pEGFP-C1-TIMP1,转染MCF-7细胞,采用Real-time PCR和Western blot法检测TIMP1基因在MCF-7细胞中的表达.结果 3种重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;重组表达质粒pEGFP-C1-TIMP1转染MCF-7细胞48 h后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,而pcDNA3.1(+)-TIMP1和pVAX Ⅰ-TIMP1转染的细胞则观察不到绿色荧光;在转染的MCF-7细胞中,TIMP1基因mRNA转录水平和蛋白表达水平从高到低依次为pcDNA3.1(+)-TIMP1、pVAX Ⅰ-TIMP1和pEGFP-C1-TIMP1.结论 已成功构建了3种TIMP1基因重组真核表达质粒,其在MCF-7细胞中的表达量有差异.
关键词： 基质金属蛋白酶抑制剂1 真核细胞 基因表达 乳腺肿瘤 -
兔后交叉韧带断裂后外侧胫骨平台退变的组织学研究
目的:探讨兔后交叉韧带(Posterior cruciate ligament,PCL)断裂对外侧胫骨平台组织学的影响.方法:48只家兔膝关节随机配对为实验侧和对照侧造模,造模后第4、8、16、24周各随机处死12只,行外侧胫骨平台大体观察、HE染色、免疫组化检测基质金属蛋白酶13 (matrix metalloproteinase- 13,MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制剂1(Tisse inhibitor-1 of matrix metalloproteinase1,TIMP-1)表达.结果:①大体观察,随时间延长,实验组外侧胫骨平台软骨出现磨损,呈灰黄色,弹性差,骨赘形成.②组织学观察,随时间延长,胫骨平台软骨纤维化,细胞排列紊乱,簇聚细胞出现频率增加.③实验组MMP-13、TIMP-1表达均高于对照组,有显著性差异,P＜0.05.④实验组MMP-13、TIMP-1表达阳性率第4、8、16周逐渐升高,24周下降,各组比较有显著性差异,P＜0.05.结论:①兔膝关节PCL断裂会引起外侧胫骨平台软骨退行性变,且该退变随着时间的推移逐渐加重.②MMP-13与TIMP-1在PCL断裂膝关节外侧胫骨平台中的表达呈现先高后低的变化规律,造成MMP-13与TIMP-1的失衡,加速软骨退变.③MMP-13与TIMP-1表达增高提示MMP-13与TIMP-1可能参与了PCL断裂后外侧胫骨平台软骨的退变过程.
关键词： 后交叉韧带 外侧胫骨平台 基质金属蛋白酶13 基质金属蛋白酶抑制剂1 -
促肝细胞生长素对大鼠肺纤维化的干预研究
目的 观察促肝细胞生长素对大鼠肺纤维化模型的干预作用,并探讨其可能作用机制.方法 选择雄性Wistar大鼠56只,随机分为4组,正常对照组(A组)、博来霉素模型组(B组)、地塞米松治疗组(C组)及促肝细胞生长素治疗组(D组)每组各14只.除A组外,其他大鼠均经气管内灌注博来霉素A5(5mg/kg)水溶液0.2～0.3mL,诱导肺纤维化.C组和D组于造模后第2天开始腹腔注射地塞米松每天3mg/kg和促肝细胞生长素每天1mg/kg,A组和B组注射等量生理盐水.各组分别于气管内灌注后的第7和28天经麻醉腹主动脉放血法处死7只大鼠.分离肺组织,免疫组化方法 检测转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)蛋白在大鼠肺组织的表达.通过苏木精-伊红染色、Masson胶原染色及测定肺组织羟脯氨酸浓度来评价治疗效果.结果 ①D组造模后第7,28天肺组织羟脯氨酸含量、肺纤维化评分、TGF-β1蛋白表达、TIMP-1蛋白表达均显著低于B组(P<0.05～0.01);② D组造模后第28天MMP-9蛋白表达水平均显著高于B组(P<0.05).③ D组和C组各项指标比较差异无显著性意义(P>0.05).结论 应用促肝细胞生长素能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,其作用机制通过抑制TGF-β1和调节MMP-9、TIMP-1蛋白的表达而实现.
