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人参三七川芎提取物对复制性衰老内皮细胞微丝形态学的影响
目的 探讨人参三七川芎提取物延缓内皮衰老的可能作用机制.方法 通过细胞体外传代,将人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)培养至第8代方法建立内皮细胞复制性衰老模型,结合β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色、CCK-8检测细胞增殖能力、流式细胞仪分析细胞周期方法进行衰老细胞鉴定.96孔板按照6×103～8×103/孔接种细胞,分为青年组、衰老组、白藜芦醇组和中药低、中、高剂量组,每组3个复孔.青年组为5代青年细胞,其余各组为8代复制性衰老细胞,白藜芦醇组加浓度为10 μmol/L白藜芦醇溶液100μl,中药低、中、高剂量组分别加浓度为50、100、200 mg/L的人参三七川芎提取物100μl.观察各组24h、48h、72h后纤维状肌动蛋白(F-actin)、单体肌动蛋白(G-actin)的形态学改变.结果 衰老组细胞SA-β-gal染色阳性明显高于青年组(P＜0.01);衰老组较青年组细胞表现为G0/G1期细胞比例上升,S期和G2/M期细胞比例下降,细胞增殖能力降低(P＜0.01).衰老组F-actin出现断裂、应力纤维,G-actin表现为向细胞周边区域伸展移位,而细胞中央区域染色变弱;白藜芦醇组和中药低、中、高剂量组可以维持复制性衰老HCMEC微丝的结构,减少G-actin向F-actin的转变,减少应力纤维的形成,并且干预效果随着干预时间延长表现更加明显.结论 人参三七川芎提取物能够保持复制性衰老HCMEC微丝的正常形态,这可能是其延缓内皮衰老的重要机制.
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温阳活血利水方含药血清对足细胞组织蛋白酶L、发动蛋白以及微丝、微管的影响
目的 探讨温阳活血利水方治疗原发性肾病综合征蛋白尿的可能作用机制.方法 将足细胞分为正常对照组、模型组、地塞米松组、10％中药血清组、20％中药血清组、空白对照组.除正常对照组、空白对照组外,其余各组用氨基核苷嘌呤霉素粉剂制备足细胞损伤模型.正常对照组和模型组加入完全培养基5 ml,地塞米松组加入392 μg/L地塞米松5ml,10％中药血清组、20％中药血清组、空白对照组分别加入10％中药血清、20％中药血清、空白对照血清各5ml.RT-PCR法与Western blot分别检测各组足细胞胞浆组织蛋白酶L (CatL)、发动蛋白mRNA和蛋白表达含量,并用激光共聚焦观察各组中足细胞骨架微丝、微管的形态结构变化.结果 与正常组比较,模型组CatL mRNA与蛋白含量升高,发动蛋白表达含量降低(P＜0.01);与模型组比较,各中药血清组与地塞米松组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,足细胞发动蛋白蛋白表达含量升高(P＜0.01);与10％中药血清组比较,20％中药血清组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,发动蛋白表达含量升高(P＜0.01).各组间足细胞发动蛋白mRNA表达含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 温阳活血利水方可能通过下调足细胞CatL的表达,减少CatL对发动蛋白的酶解,从而稳定细胞骨架中的微丝、微管等结构,减少足突融合,改善蛋白尿.
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睾丸支持细胞骨架的研究
本文就睾丸支持细胞的骨架构造、功能以及研究进展进行了阐述.特别对近年来骨架中波形蛋白作用与功能进行了重点介绍.理化因素对细胞骨架的影响,特别是模拟微重力和空间真实微重力下细胞微丝骨架结构的变化进行介绍.首次提出了精液中可以检出支持细胞骨架,以抛砖引玉的愿望,引起同道进行探讨.
