首页 > 文献资料
-
大豆异黄酮对大鼠海马神经干细胞分化的影响
目的:研究过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对新生大鼠海马神经干细胞(NSCs)分化的影响以及大豆异黄酮(ISO)对抗ONOO-致脑神经细胞氧化损伤的作用及其可能的作用机制.方法:制备新生大鼠海马神经干细胞并经免疫荧光鉴定.以吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1,1 mmol·L-1)作为ONOO-供体引起海马神经干细胞出现分化障碍,再分别用氧合血红蛋白( HbO2,0.05 mmol·L-1),超氯化物歧化酶/过氧化氢酶(SOD/catalase,50 U·mL-1),褪黑激素(0.5 mmol ·L-1)以及ISO(0.1mg·L-1)进行干预,免疫荧光检测神经干细胞及其分化情况.结果:SIN-1引起海马神经干细胞巢蛋白阳性(NSE*)细胞数量明显减少,已分化神经细胞形态变化很明显.单独使用一氯化氮阴离子(NO-)清除剂HbO2或超氧阴离子(O-2)清除剂SOD/catalase可以增加NSE+细胞数量,改善形态变化.但ONOO-清除剂(褪黑激素)和ISO能够更明显地增加NSE+细胞数量并改善形态变化,尤以前者效果更加明显.结论:ONOO-可对新生大鼠海马神经干细胞的分化产生不利影响.ISO可以对抗ONOO-引起的海马神经干细胞的分化障碍,在脑神经细胞氧化损伤的修复方面具有良好的应用潜力.
-
血脂异常不同证候间患者血浆ONOO-、D-二聚体特点及其与血脂指标典型相关性分析
目的:探讨不同证候间血脂异常患者血浆过氧亚硝基阴离子(ONOO-)、D-二聚体特点、证候与血脂指标的典型相关性.方法:采用流行病学横断面调查的方法,测定116例不同证候血脂异常患者相关指标,分析不同证候患者血浆ONOO-、D-二聚体特点,对血脂指标与中医证候积分进行典型相关分析.结果:①痰浊阻遏证血脂异常患者血浆ONOO-高于脾肾阳虚证患者,D-二聚体低于脾肾阳虚证患者(P＜0.05);②TC和中医证候间有典型相关性、痰浊阻遏证和血脂指标间具有典型相关性.结论:血浆ONOO-及D-二聚体结合临床症状有可能成为评价血脂异常患者中医证候程度的参考指标之一.TC能更敏感反映中医证候程度,而痰浊阻遏证的严重程度与血脂指标的关系更加密切.血脂指标与证候积分的典型相关性为中医药防治血脂异常提供了依据.
-
丹皮酚对过氧亚硝基阴离子致成骨细胞增殖抑制的影响
目的:探讨过氧亚硝基阴离子(ONOO )对体外成骨细胞增殖的影响及丹皮酚(Pae)对抗ONOO 的作用.方法:采用改良的淬灭流动反应方法,体外制备ONOO .以不同终浓度加入成骨细胞培养体系中,用MTT法观察在不同时相对成骨细胞增殖的影响,并用不同终浓度的Pae消除ONOO (1 000μmol/L)对成骨细胞增殖的影响.结果:低浓度ONOO (50～200μmol/L)对培养的成骨细胞有促增殖作用;高浓度ONOO (1 000μmol/L)则明显抑制成骨细胞增殖.Pae(10-4～10-7mol/L)可消除ONOO (1 000μmol/L)对成骨细胞增殖抑制的作用.结论:低浓度ONOO 促成骨细胞增殖,高浓度ONOO 抑制成骨细胞增殖.Pae可消除高浓度ONOO 对成骨细胞增殖的抑制作用.
-
一氧化氮间接作用机制的研究进展
NO本身并无直接的毒性作用,相反 ,它在体内常发挥生理或保护作用.而"NO的毒性作用",主要是由于大量诱生的NO与体内同时大量产生的O-2等活性氧类反应,生成ONOO-或N2O3等一系列物质,由二者分别介导氧化损伤或亚硝基化损伤,因而是NO的间接作用.而NO的间接作用到底是通过ONOO-还是N2O3途径来介导,取决于NO与O-2的局部相对浓度.若NO与O-2的局部浓度几乎相等,则生成ONOO-,由ONOO-来介导;而若NO的浓度高出O-2浓度较多,则主要生成N2O3,由N2O3来介导.
-
过氧亚硝基阴离子介导内毒素致肺血管损伤及胆囊收缩素的保护作用
本文探讨过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在内毒素致肺血管损伤中的介导作用和八肽胆囊收缩素(CCK)的保护作用及其机制。结果发现，内毒素主要成分脂多糖(LPS)可诱导大鼠肺组织生成ONOO-，ONOO-能导致肺微血管壁通透性明显增加和肺脏严重病理变化；ONOO-可引起离体肺动脉反应性异常改变，LPS也可产生类似变化；ONOO-有较弱的舒血管作用并受到内皮细胞的抑制性调节；LPS诱导培养的牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)产生增多的ONOO-参与介导内皮细胞本身的损伤；CCK能拮抗LPS对BPAEC的损伤效应，此作用由CCK受体介导，并与抑制ONOO- 生成有关。结果提示，清除ONOO-或减少ONOO-生成可为防治内毒素引起的急性肺损伤等病理过程提供新对策；CCK是一种有应用前景的细胞保护因子
-
过氧亚硝基阴离子对肾功能的调节及其在盐敏感性高血压中的病理生理学意义
体内和体外研究显示,一氧化氮和超氧阴离子(O2-)相互作用,调节肾小管钠离子(Na+)重吸收,以维持肾Na+排泄.O2与一氧化氮反应生成过氧亚硝基阴离子(ONOO-),所以组织中O2-维持在低水平.一般认为ONOO是体内一种与许多病理生理条件相关的氧化自由基.虽然已有研究阐明一氧化氮和O2-对肾小管的作用,但ONOO-在调节肾小管Na+重吸收中的特定作用尚不确定.已有研究证实,一氧化氮和O2-在生成ONOO-过程中的相互作用对肾脏起重要保护作用,有助于在肾素血管紧张素系统激活的条件下,防止肾小管Na+过度重吸收.然而,在病理生理条件下,特别是在盐敏感性高血压(SSH)中ONOO-的调节作用尚不清楚.血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及高盐摄入均可增加一氧化氮和O2-生成,促进ONOO-产生.然而,在药理学抑制或基因缺失的情况下,一氧化氮合酶活性受损(解耦联),ONOO-的形成减少.研究发现,与野生型小鼠相比,长期输注AngⅡ联合高盐摄入可导致内皮型一氧化氮合酶基因敲除小鼠(eNOSKO,一种ONOO-生成少的模型)发生严重高血压,加重肾损害,表明ONOO-对输注AngⅡ所导致的这些不良反应起到保护作用.本综述全面讨论有关ONOO-对肾脏功能的影响,旨在确定其在肾功能调节中的复杂相互作用,及其失衡是否与SSH的病理生理学相关.
-
五种中药酚酸类化合物体外抗DNA损伤的作用
目的 探究中药酚酸类化合物抑制DNA损伤的效应,分析其构效关系.方法 以人工合成抗氧化剂水溶性维生素E Trolox为阳性对照,选取结构相近的没食子酸、咖啡酸、芥子酸、阿魏酸和对香豆酸5种天然酚酸类化合物,通过琼脂糖凝胶电泳检测其体外清除羟自由基、过氧自由基及过氧亚硝基阴离子从而抑制DNA氧化损伤的作用.对电泳结果进行吸光度分析,计算开环态DNA所占百分比,由此得出各化合物的IC50值.结果 5种酚酸类化合物均表现出抑制DNA损伤的作用,开环态DNA所占百分比随药物浓度增加而减少.5种化合物可抑制羟自由基引起的DNA损伤,IC50值分别为:没食子酸(1.13±0.03) mmol·L-1≈咖啡酸(1.14±0.07)mmol·L-1＜对香豆酸(1.41±0.06)mmol·L-1＜芥子酸(1.68±0.04) mmol·L-1＜阿魏酸(1.80±0.04) mmol·L-1＜Trolox (3.42±0.03) mmol·L-1；抑制过氧自由基引起的DNA损伤,IC50值分别为:没食子酸(0.12+0.02)mmol·L-1＜咖啡酸(0.14±0.03)mmol·L-1＜对香豆酸(0.17±0.08)mmol·L-1＜芥子酸(0.20±0.05)mmol·L-1＜阿魏酸(0.26±0.07) mmol·L-1＜Trolox(0,52±0.06) mmol·L-1；抑制过氧亚硝基阴离子引起的DNA损伤,IC50值分别为:芥子酸(0.81±0.01) mmol·L-1＜没食子酸(0.90±0.01)mmol·L-1＜阿魏酸( 1.20±0.02)mmol·L-1＜对香豆酸(1.62±0.02) mmol·L-1≈咖啡酸(1.71±0.03)mmol·L-1＜Trolox( 3.38±0.07) mmol·L-1.结论 该五种中药酚酸类化合物均具有抑制羟自由基、过氧自由基及过氧亚硝基引起的DNA损伤的作用,随相邻羟基数量增加,化合物抑制羟自由基和过氧自由基引起的DNA氧化损伤作用加强,而侧链-CH=CHCOOH和对位供电子基团能增强化合物抑制过氧亚硝基阴离子引起的DNA氧化损伤作用.
-
一氧化氮及其衍生物在缺血性脑血管病中的作用
缺血性卒中是导致死亡的主要原因,也是世界上常见的致残原因之一.脑缺血损伤能促进一氧化氮(nitricoxide,NO)的形成.过量的NO在缺血性脑损伤的发展过程中起着至关重要的作用.NO可能通过直接攻击蛋白质和脂质等生物大分子、破坏线粒体功能,或间接影响细胞信号转导通路和基因调控,从而加重缺血性脑损伤.过量的NO可能具有神经毒性,导致兴奋性神经毒性级联反应、炎性反应和细胞凋亡.然而,NO也可能在脑缺血过程中发挥神经保护作用.本文拟对NO及其衍生物在脑缺血损伤中的作用进行综述.
-
NADPH氧化酶抑制剂apocynin对力竭运动大鼠运动性蛋白尿的影响
目的:研究NADPH氧化酶抑制剂apocynin对力竭运动大鼠运动性蛋白尿产生的影响及其机制.方法:32只SD雄性大鼠随机分为安静对照组(C组)、对照+药物组(CA组)、力竭运动组(E组)、力竭运动+药物组(EA组).药物注射按10 mg/kg体重,每天一次,连续3d,并在末次药物注射1h后进行一次性跑台力竭运动.测定运动后尿UP、血液BUN水平、肾脏ROS浓度、NOS活性、NOS与3-NT蛋白含量.结果:结果显示,E组UP、肾脏ROS、iNOS含量及活性、3-NT明显升高,而EA组的这些指标与C组相比无显著性差异.结论:力竭运动可明显增加肾组织NADPH氧化酶活性,从而产生大量的ROS,后者可迅速地与由肾脏iNOS催化生成的NO反应,产生过量的ONOO-,诱发运动性蛋白尿的生成.
-
内毒素诱导肺动脉内皮细胞生成过氧亚硝基阴离子的意义
目的:探讨牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)产生过氧亚硝基阴离子(ONOO )的能力及其作用.方法:用流式细胞免疫荧光技术,定量检测内毒素主要成分脂多糖(LPS)诱导培养的BPAEC中ONOO-生成标志物硝基酪氨酸(NT)的含量,观察ONOO-对BPAEC形态变化的影响.结果:LPS可剂量依赖性诱导BPAEC产生ONOO-明显增多,并为氨基胍部分翻转;ONOO-可导致BPAEC明显回缩,胞体变小,细胞间隙增宽.结论:LPS诱导BPAEC产生增多的ONOO-可能参与介导LPS对BPAEC本身的损伤效应.
-
双抗体夹心法检测3-硝基酪氨酸方法的建立及应用
目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平.方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗体的浓度,建立定量检测3-硝基酪氨酸(3-NT)的双抗体夹心ELISA法.同时,测定心肌缺血再灌注大鼠心肌组织3-NT的含量.结果:本研究建立的双抗体夹心ELISA法检测3-NT的低检测下限为0.10 ng·ml-1,具有良好线性关系的检测范围是(0.15～7.50)ng·ml-1(r2=0.995);心肌缺血再灌注组大鼠的心肌组织中的3-NT水平为(1022.42±97.35)ng·mg pro-1,明显高于假手术组(246.58±56.52 ng·mg pro-1,P<0.01).结论:本研究建立的定量检测3-NT的双抗体夹心ELISA法能够方便、准确、快速地检测组织中3-NT的含量,为定量检测组织中ONOO-的水平提供了新的方法.
-
一氧化氮/过氧亚硝基阴离子在糖尿病致肺损伤中的作用
糖尿病(diabetes milltus,DM)是临床常见的慢性内分泌代谢性疾病,发病过程中可导致多器官功能受损甚至衰竭.氧化应激可能是组织损伤的重要病理生理学基础,高血糖时可导致活性氧、一氧化氮(nitrite oxide,NO)等过量生成,引起组织细胞结构损伤和功能障碍.然而,对一氧化氮与超氧阴离子的反应产物过氧亚硝基阴离子在肺损伤中的作用尚不清楚,我们利用糖尿病模型观察肺组织中NO、ONOO-以及脂质过氧化产物丙二醛(malondialhyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的变化,探讨NO/ONOO-在肺损伤中的作用及机制.
-
过氧亚硝基阴离子诱导大鼠气道上皮细胞凋亡及其机制探讨
目的 观察过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)对大鼠气道上皮(rat tracheal epithelial,RTE)细胞凋亡的影响并探讨其作用机制.方法 体外培养RTE细胞,外源性给予不同浓度ONOO-(0.25、0.50、1.00 mmol/L),培养1、6、12 h后,用流式细胞仪检测ONOO-对RTE细胞凋亡百分率的影响、透射电镜观察细胞形态学变化、琼脂糖凝胶电泳观察DNA裂解情况.结果 不同浓度ONOO-均以时间依赖方式引起RTE 细胞凋亡;透射电镜观察到染色质浓缩并凝集成块,核固缩以及凋亡小体形成等;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带出现.半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)抑制剂Ac-DEVD-CHO可明显抑制ONOO-诱导的RTE细胞凋亡.结论 ONOO-以时间依赖方式引起培养的RTE 细胞发生凋亡.caspase-3活化在ONOO-诱导RTE细胞凋亡中起着重要作用.
-
硝化应激参与介导缺血性脑损伤的研究进展
硝化应激(nitrosative stress)指机体对活性氮族(reactive nitrogen species,RNS)的高应激性,主要表现为病理过程中过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)过量生成,从而诱发细胞内蛋白质酪氨酸硝基化等分子事件,并终导致细胞损伤或凋亡级联反应.缺血性脑损伤病理过程中,硝化应激稳态失衡与血脑屏障及神经血管单元破坏密切关联,近年来以抗硝化应激来进行神经血管保护的药物研究受到关注.通过减少ONOO-生成和清除过多的ONOO-来对抗硝化应激损伤将有可能成为防治缺血性脑血管病的策略之一.
-
坎地沙坦不同治疗时机对2型糖尿病KK/Ta小鼠肾脏硝化氧化应激的影响
目的 本研究旨在探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂坎地沙坦治疗对自发性2型糖尿病KK/Ta小鼠肾内硝化氧化应激的影响及其作用机制.方法 KK/Ta小鼠随机分为(1)非治疗组;(2)早期治疗组:自6周龄起经口予坎地沙坦(4 mg·kg-1·d-1)治疗;(3)晚期治疗组:自12周龄起予坎地沙坦治疗,正常对照组采用BALB/c小鼠.应用免疫组化和免疫荧光染色检测肾脏中硝化氧化应激的标志物硝基酪氨酸,诱导型(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,竞争性RT-PCR检测iNOS和eNOS mRNA的表达.同时测定尿白蛋白排泄率,血压和糖耐量等临床指标.结果 28周龄KK/Ta小鼠尿白蛋白排泄率增加,肾脏iNOS mRNA和蛋白表达上调,硝基酪氨酸的形成增加.坎地沙坦治疗减少尿白蛋白排泄率,抑制肾脏iNOS mRNA和蛋白的表达,减少硝基酪氨酸的形成,早期治疗组和晚期治疗组的作用差异无统计学意义.4组小鼠eNOS mRNA和蛋白的表达水平无差异.结论 坎地沙坦治疗通过下调糖尿病状态下肾脏iNOS的表达,抑制过氧亚硝基阴离子的形成,抑制硝化氧化应激反应,发挥其降低尿白蛋白排泄率等肾脏保护作用.
-
3-硝基酪氨酸标准品的制备
目的 制备硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT),为定量检测组织中过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)的水平提供标准品.方法 使用淬灭流动反应方法合成ONOO-,与牛血清白蛋白反应生成硝基化牛血清白蛋白,于波长在430 nm处检测其3-NT的含量.结果 本研究成功地合成了ONOO-,并制备了较为稳定的3-NT的标准品.结论 为方便、准确、快速地检测组织中ONOO-的水平提供了基础.
-
NO、ONOO-在大鼠离体肾缺再灌注肾功能损伤中的作用
[目的]探讨一氧化氮(nitric oxide,NO)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)在大鼠离体肾缺血再灌注损伤时对肾功能的影响.[方法]应用离体灌流肾(isolated perfused kidney,IPK)技术观察肾I-R对菊粉清除率(Cin)、尿钠排泄指数(FENa)、肾血管阻力(RVR)的影响;阻断内源性NO生成对肾I-R所致的上述指标变化的影响;外源性直接给予NO供体硝普钠(SNP)、ONOO-对大鼠IPK肾功能的影响.[结果]①缺血再灌注导致大鼠IPK肾血管阻力(RVR)明显增大(P<0.05),IPK的Cin降低(P<0.05),肾I-R后IPK的FENa有较大幅度的增加(P<0.05).②SNP能够使健康大鼠IPK的RVR降低、Cin增加和FENa增大(P<0.05).而ONOO-使RVR增高、Cin降低和FENa增加(P<0.05).③iNOS抑制剂氨基胍(aminoguanidine,AG)使大鼠IPK的功能I-R后5 h RVR降低、Cin增大和尿钠减少(P<0.05);而应用NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA),加重了肾I-R大鼠IPK肾机能的损伤,I-R1h和I-R 5 h均出现了RVR增大、Cin降低和尿钠排泄增多(P<0.05).[结论]肾I-R所致NO大量生成后产生的ONOO-损伤了大鼠的肾功能.
-
过氧亚硝基阴离子对离体兔肺动脉反应性变化的影响
探讨过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite, ONOO-)对离体兔肺动脉反应性变化的影响.用离体血管环技术观察ONOO-孵育后肺动脉对钙离子载体A23187、 ADP、 ACh、硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)和苯肾上腺素(phenylephrine, PE)的反应性张力变化.结果显示: (1) ONOO-孵育后肺动脉对A23187、 ADP和ACh引起的舒张反应明显降低, ONOO-抑制内皮依赖受体依赖或受体非依赖性舒张反应有量效关系; (2) ONOO-孵育可剂量依赖性抑制肺动脉对SNP的舒张反应; (3) 0.5 mmol/L ONOO- 孵育后肺动脉对PE的收缩反应明显增强, 而1.0和2.0 mmol/L ONOO- 导致肺动脉的收缩反应明显降低; (4) 溶剂对肺动脉的反应性无明显影响, dec ONOO- 对PE和ADP的反应性影响不大, 但可增强A23187、 ACh和SNP的舒张反应.结果表明, ONOO- 可改变离体肺动脉的反应性.
-
内源性过氧亚硝基阴离子介导脂多糖导致肺动脉内皮细胞损伤
在培养的牛肺动脉内皮细胞(bovine pulmonary artery endothelial cells, BPAECs)水平上, 观察脂多糖( lipopolysaccharide, LPS)对BPAECs诱生过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite, ONOO-)能力及内皮源性ONOO-在LPS致BPAECs损伤中的作用.结果显示: (1) LPS剂量依赖性地引起BPAECs诱生ONOO-生成标志物硝基酪氨酸(nitrotyrosine, NT)的荧光强度(即ONOO-)明显增多, NT阳性细胞数和百分率也明显增多或增高(P<0.05); iNOS选择性抑制剂氨基胍(AG)明显抑制LPS诱生ONOO-增多(P<0.05), 而NT阳性细胞数和百分率分别减少或降低, 但无明显差异.(2)在LPS作用下BPAECs培养上清中的MDA含量和LDH活性明显增多和增高, 呈现剂量依赖性效应.加AG后MDA含量明显降低(P<0.001), LDH活性呈降低趋势.(3) LPS可诱导BPAECs凋亡明显增多, 用EB荧光染色后可见细胞染色质浓集、核变小等凋亡征象.AG可导致LPS引起的BPAECs凋亡明显减少, 但仍明显高于溶剂组.LPS可导致BPAECs线粒体呼吸抑制及膜电位下降.上述结果表明, LPS可引起BPAECs生成ONOO-增多, ONOO-参与介导LPS所致BPAECs过氧化损伤与细胞凋亡.
-
一氧化氮与肠屏障功能
肠屏障功能是肠道的一个重要特征,可以保护宿主不受外来抗原的干扰和入侵,它由一系列特异性和非特异性防御机制组成,包括肠管的蠕动、消化液的分泌、肠上皮细胞间的紧密连接以及肠道免疫系统.在烧伤、创伤、失血性休克、放疗、化疗、严重感染等情况下,会相继出现肠屏障破坏、细菌移位,严重者会发生多器官功能障碍.一氧化氮作为一种细胞的小分子物质,在各种生理病理中具有重要作用.近来研究发现,其毒性代谢产物过氧亚硝基阴离子(ONOO-)参与肠黏膜损伤.作者就一氧化氮与ONOO-在肠屏障功能的保护和损伤方面作一综述.
