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云木香不同提取物对小鼠胃排空和小肠推进功能的影响
目的:研究云木香3种提取物对小鼠胃排空和小肠推进功能的影响,并探讨云木香影响胃肠道的物质基础.方法:采用改良的酚红含量测定法观察云木香3种提取液对正常状态下、新斯的明所致的亢进状态下、阿托品所致的抑制状态下小鼠胃排空和小肠推进功能的影响.结果:挥发油能够显著降低正常小鼠胃酚红排空率(P＜0.01),能够显著提高阿托品所致抑制状态下的小鼠胃酚红排空率(P＜0.01),能够显著降低新斯的明所致亢进状态下的小鼠胃酚红排空率(P＜0.01),并降低小肠酚红推进率(P＜0.05).结论:云木香挥发油能够抑制正常小鼠胃排空,改善阿托品所致抑制状态下的小鼠胃排空障碍,拮抗新斯的明所致的小鼠胃排空和小肠推进功能亢进.挥发油是云木香对小鼠胃肠道起作用的物质基础.
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脱氢水飞蓟宾的溶解度及大鼠在体肠吸收特性考察
目的:测定脱氢水飞蓟宾(DHS)的溶解度并探讨DHS在小肠的吸收动力学特征.方法:采用HPLC测定DHS含量,流动相甲醇-0.2％甲酸水溶液(60∶40),检测波长255 nm.应用大鼠在体肠循环模型考察DHS在大鼠十二指肠、空肠、回肠的吸收特性.结果:DHS于20,37℃振荡24h的溶解度分别为0.46,1.23 mg·L-1.DHS在十二指肠、空肠及回肠中单位时间吸收率(n=3,x-±s)分别为(17.81 ±6.37)％,(8.41±2.43)％,(12.95 ±5.06)％,吸收速率常数(Ka)依次为(0.176±0.069),(0.089 ±0.053),(0.158±0.058) h-1;DHS在十二指肠的Ka随药物质量浓度的增加基本保持不变.结论:温度对DHS溶解度存在一定影响.DHS在十二指肠、空肠、回肠均有吸收,在十二指肠段吸收量和Ka显著高于空肠段.DHS在小肠的吸收机制以被动扩散为主.
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酚红氧化法定量测定吞噬细胞吞噬功能方法的建立
目的:建立用比色法定量测定吞噬细胞吞噬能力,以此判断机体的免疫功能.方法:吞噬细胞吞噬异物时产生的过氧化氢(H2O2)在辣根过氧化物酶作用下,可使酚红氧化为氧化型酚红,通过比色计检测氧化型酚红浓度以判断吞噬细胞的吞噬功能.结果:用此法制做了过氧化氢(H2O2)浓度工作曲线,酚红及氧化型酚红吸收曲线,并检测了SD正常大白鼠血液中性粒细胞、腹腔巨噬细胞吞噬能力,检测的灵敏度达到μmol/L(H2O2)/1×106个细胞.结论:此方法简易可行,灵敏度高,具有实用价值.
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基于P-糖蛋白的肠吸收在体单向肠灌流模型验证
对基于P-糖蛋白(P-gp)肠吸收单灌流模型进行验证.首先,通过酚红灌流,采用质量法进行水分校正,通过高效液相色谱法对灌流前后酚红水平进行检测,以验证肠上皮细胞的紧密连接结构正常,且肠上皮的完整性保持良好;其次,采用FDA指定阳性药地高辛对模型进行验证,给予大鼠不同质量浓度维拉帕米后,对大鼠回肠段地高辛吸收参数进行观察对比.酚红在大鼠体内回肠段存在吸收,吸收参数有效渗透系数Peff为(1.09±0.62)×10-6 cm·s-1,结果表明肠上皮细胞的紧密连接结构正常,且肠上皮的完整性保持良好,地高辛灌流不给予维拉帕米时,地高辛在回肠段存在一定程度的吸收,吸收参数有效渗透系数Peff为(1.07±0.59)×10-5 cm·s-1,给予大鼠0.01,0.1 mmol·L-1浓度的维拉帕米后,地高辛在大鼠回肠的吸收呈上升趋势,吸收参数有效渗透系数Peff分别为(1.58±0.69)×10-5,(3.28±0.95)×10-5 cm·s-1,高浓度时,数据差异具有统计学意义(P<0.05).地高辛灌流实验验证了小肠上皮P-gp表达完整,可以用于P-gp外排转运体的研究.
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卡巴胆碱改善重度烫伤大鼠胃血流量和胃排空功能的初步研究
目的:探讨不同剂量卡巴胆碱对烫伤大鼠胃血流量和胃排空功能的影响.方法:40只Wistar雄性大鼠,随机分为假烫组(n=5)、单烫组(n=5)和口服卡巴胆碱组(n=30),后者又根据卡巴胆碱剂量不同分为20、40、60、80、100、120 μg/kg组(每组5只).假烫组大鼠均给予0.1%酚红溶液1.5 ml灌胃.单烫组和口服卡巴胆碱组大鼠均经30%TBSAⅢ度烫伤后立即给予0.1%酚红溶液1.5 ml灌胃,口服卡巴胆碱组于伤后0.5 h给予相应剂量卡巴胆碱+1 ml生理盐水灌胃.大鼠均于伤后2 h处死,观察不同剂量卡巴胆碱对大鼠胃血流量及胃排空率的影响.结果:烫伤后大鼠胃排空率为(29.50±13.42)%,明显低于假烫组(92.19±5.24)%,P＜0.01.伤后2 h胃血流量从伤前的(476.00±71.24)U降低到(103.60±51.28)U,P＜0.01.烫伤后给予不同剂量卡巴胆碱均能增加胃排空率和胃血流量,但以60 μg/kg为显著(P＜0.01).结论:卡巴胆碱对烧伤休克大鼠胃血流量和胃排空有显著促进作用,佳剂量为60μg/kg.
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二氧化碳结合力测定误差1例
1资料和方法患者,男,48岁,临床诊断为中毒性细菌性痢疾.在治疗过程中静脉血用酸碱滴定法测二氧化碳结合力.加入0.01mmol/L酚红指示剂2滴,血清0.1ml和0.01mmol/L盐酸0.5ml,即呈现樱桃红色反应至终点(未加入0.01mmol/L氢氧化钠).重复实验结果相同.经检查,各种试剂和器具均符合要求.后到临床了解,发现该患者采血时同侧手背处正在静滴碳酸氢钠溶液,故采血时有大量碳酸氢钠混入,使得未加0.01mmol/L氢氧化钠时酚红指示剂已显色.
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肾脏功能试验及其临床评价(下)
2 肾小管和集合管功能试验肾小管和集合管功能试验主要包括肾近曲小管重吸收试验,肾小管排泌试验,肾小管和集合管水、电解质功能试验,肾小管和集合管酸碱调节功能试验.肾小管排泌试验包括肾小管对酚红及氨基马尿酸大排泌量(Tmpah)试验.
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Gaco-2细胞不同接种密度的模型评价
目的:观察不同的细胞接种量在不同时间对细胞模型评价指标的影响.方法:细胞采用的Transwell板接种培养21天并采用TEER(transepithelial electrical resistance)测定和酚红透过率来评价细胞模型完整性和通透性,考察不同细胞接种量在不同时间对细胞单层完整性的影响.结果:不同细胞接种量在生长第16天酚红透过率均明显降低,21天透过率均小于0.5%,TEER在21天达到>300 Ω/cm2.结论:建立的细胞模型完整性,通透性符合药物吸收转运试验要求,培养条件应随细胞状态和接种密度做出调整.
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小鼠酚红排泌实验影响因素的考察
目的:对小鼠酚红排泌实验的主要影响因素进行考察,提高小鼠酚红排泌实验的规范性.方法:通过对动物的品系、体质量、实验前禁食与否、处死时间、酚红浓度等可能影响酚红排泌实验的因素逐一进行考察.结果:动物的品系、体质量、处死时间对该实验有影响,实验前禁食与否、酚红浓度对该实验无影响.结论:通过控制实验影响因素能完善小鼠酚红排泌实验方法.
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用双波长分光光度法测定大鼠小肠循环液中酚红的含量
采用双波长分光光度法测定了大鼠小肠循环液中酚红的含量,方法的线性范围为1～8 mg/L,回收率为99.88%～99.99%(n=5),日内RSD为0.51%～1.27%(n=4),日间RSD为0.58%～2.29%(n=4).
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喘息灵胶囊Ⅰ(含马兜铃)和喘息灵胶囊Ⅱ(不含马兜铃)的祛痰作用比较
目的 比较喘息灵胶囊Ⅰ(原方,含马兜铃)和Ⅱ(新方,不含马兜铃)的祛痰作用.方法 用小鼠气管酚红排泄法和蛙食道纤毛运动法比较喘息灵胶囊2个样品的祛痰作用,并用量反应六点法计算其效价比.结果 喘息灵胶囊2个样品3个剂量均能明显增加小鼠气管酚红排泄量并增加蛙食道纤毛的运动;小鼠气管酚红排泄量的效价比Ⅰ∶Ⅱ=1∶0.96(95%可信限为0.65～1.41),增加蛙食道纤毛运动的效价比Ⅰ∶Ⅱ=1∶0.95(95%可信限为0.66～1.37).结论 喘息灵胶囊Ⅰ(原方)和Ⅱ(新方)均有明显的祛痰作用,2个样品的效价相当.
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食道癌色素诊断法新进展
色素内镜检查法,是将各种色素撒布或喷于消化道粘膜上,通过内镜观察、诊断的方法.日常施行的是:利用留在粘膜陷凹面上的色素查明胃区形态不规则和微妙的凹凸的靛卡红检查法、肠上皮化生粘膜上被特异性吸收染色的美蓝检查法、对胃酸分泌起反应的刚果红检查法以及近为诊断幽门螺杆菌用的是酚红检查法等.
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万寿菊花祛痰作用有效部位的实验研究
目的:对万寿菊花水提取物祛痰作用有效部位进行研究.方法:利用酚红作为祛痰效果指示剂,观察万寿菊花水提取物经聚酰胺柱分离后,各洗脱部位的祛痰作用.结果:50％乙醇洗脱部位祛痰效果显著.结论:万寿菊花祛痰作用有效部位为50％乙醇洗脱部位.
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大鼠小肠循环液中替硝唑的差示分光光度测定法
目的:建立大鼠小肠液循环液中的替硝唑的测定方法.方法:采用差示分光光度法,测定波长为318nm和291nm,溶剂的pH分别为pH2和pH5.结果:标准曲线在4.8μg/ml-19.2μg/ml范围内呈良好的线性关系,高中低3个浓度的日内RSD小于1.65%,日间RSD小于2.28%,回收率为98.6%-101.7%.结论:该法可准确测定大鼠小肠循环液中的替硝唑.
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幽门螺杆菌感染胃黏膜后胃内分布的观察
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡的重要致病因素,是胃癌的协同致癌因子,但其致病机制尚不十分清楚.细菌感染的部位与疾病发生部位的关系有助于探讨致病机制[1].本研究利用尿素酶酚红变色原理,通过内镜喷洒酚红溶液,直接观察Hp在胃黏膜上的分布,从而探讨其发病机制.材料与方法14例慢性浅表性胃炎,男6例,女8例,年龄为17～52岁.11例消化性溃疡,男9例,女2例,年龄为22～50岁,其中9例为十二指肠球部溃疡,2例为复合性溃疡.均经内镜确诊,均为活动期.内镜检查前1 d睡前服兰索拉唑30 mg,使胃pH达到5左右,内镜检查前口服糜蛋白酶4 000 U,清除黏液,这是染色成败的关键[2].内镜检查时将0 1%酚红与5%尿素溶液从活检孔道喷洒在胃黏膜上,观察颜色变化,如胃黏膜由黄色变成红色,作为胃黏膜染色,如胃黏膜颜色2 min内不变,为胃黏膜非染色,从胃窦到贲门均染色为全胃弥漫性染色,仅胃窦或胃体或胃底染色为局部斑片状染色L".分别取染色和非染色胃黏膜组织4块,2块作病理检查(石碳酸碱性红染色),2块作细菌培养.
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UPLC同时测定大鼠肠灌流液中桔梗皂苷D和酚红的浓度
目的 同时测定肠循环液中桔梗皂苷D和酚红的浓度.方法 采用RP-UPLC法,色谱柱为Hypersil Gold(2.1 mm×100 mm,3μm),流动相为乙腈-0.05％甲酸水(梯度洗脱),柱温35℃,流速0.3 mL/min,检测波长为210 nm.结果 方法精密度及线性关系良好,桔梗皂苷D及酚红的回收率分别为95.48％(RSD=0.91％)、103.32％(RSD=0.45％).结论 该法操作简便,结果准确,灵敏度高.
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酚红在神经细胞中的弱雌激素样作用研究
目的 研究酚红在神经细胞培养中的弱雌激素样作用.方法 使用不同培养基(其一含酚红、另一无酚红)培养MN9D细胞,并分别于培养基中加入胶质源性神经营养因子(GDNF),然后加入相同浓度6-羟多巴胺(6-OHDA)进行损伤,后四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的存活状况;提取不同培养基中的正常细胞,Western blot法检测雌激素α受体(ERα)在细胞内的移位.结果 培养基中没有酚红时的细胞存活率较有酚红时低,且当GDNF与酚红同时存在时,细胞的存活率比只有GDNF或酚红存在时高;酚红能够促使ERα从胞质转移至细胞膜.结论 酚红能够激活ERα,并具有一定的神经保护作用.
关键词： 酚红 雌激素 胶质源性神经营养因子 雌激素受体α 6-羟多巴胺 -
大鼠小肠循环液中酚红的双波长分光光度法的测定
目的：建立大鼠小肠循环液中酚红的 测定方法。方法：采用双波长分光光度法，以0.1mol/L NaOH为溶剂，558nm 为测定波长，570nm为参比波长。结果：线性范围为1～8μg/ml,回收率 为99.88%～99.99%(n=5)，日内RSD为0.51%～1.27%(n=4)，日间RSD为0.58%～2.29%(n=4)。 结论：该法可用于大鼠小肠液中酚红的测定。
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酚红外排水平评价肺上皮细胞多药耐药相关蛋白1的功能
目的:以酚红为多药耐药相关蛋白1(MRP1)的底物,丙磺舒为其抑制剂,通过酚红的外排水平建立评价肺上皮细胞MRP1的功能的方法.方法:小鼠静脉注射酚红(250 mg/kg),30 min后进行肺泡灌洗,测定灌洗液中酚红的浓度,并以雾化吸入MRP1特异性抑制剂丙磺舒(150 mg/kg)作为对照,观察给予抑制剂前后灌洗液中酚红浓度及灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值的变化,来评价小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变.结果:与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒后,血浆中酚红浓度无显著性差异,但与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒60 min后,其肺泡灌洗液中酚红浓度、灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值显著性降低.结论:肺泡灌洗液中酚红的外排水平反映小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变.
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克力恩抑菌作用的研究
1 材料与方法1.1 材料 1) 克力恩：化学名称：2，4，4′-三氯-2′-羟基二苯醚，5-氯-2-(2，4二氯苯氧基)苯酚，分子式：C12H7C13O2，分子量289．5。 2) 菌种：金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、枯草芽胞杆菌、粪链球菌、大肠杆菌。 3) 培养基：肉汤管、葡萄糖酚红肉汤管。1.2 方法 1) 菌种由江西医学院微生物学教研室及江西中医学院微生物教研室联合提供，菌种经肉汤管繁殖6 h后作为实验用菌液。 2) 克力恩经丙二醇稀释后放入肉汤中，当浓度较高时为白色混悬液，这种白色色泽对判定结果稍有影响，故用葡萄糖酚红肉汤作抑菌试验[1]。将克力恩用葡萄糖肉汤作对倍稀释，每管1．8ml，再加入0．2ml酚红，另做丙二醇及空白对照管，每管加入0．1ml6 h培养的肉汤菌液，混匀后于37℃孵育24 h。某些细菌生长可使葡萄糖发酵产酸，从而使酚红变为黄色，以仍保持红色的试管克力恩低浓度判定为MIC终点[2]。2 结果与讨论实验表明克力恩对实验细菌都具有不同程度的抑菌作用。具体结果如附表。
