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化痰降气胶囊对COPD模型大鼠支气管上皮细胞中多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响
目的 通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,观察化痰降气胶囊对支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1(MRPl)功能和表达的影响,探讨化痰降气胶囊治疗COPD的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠24只随机分为正常对照组、模型组和化痰降气胶囊组(简称化痰降气组).除正常对照组外,其余各组采用烟、二氧化硫定量熏吸并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法,建立COPD大鼠模型;观察化痰降气胶囊治疗后肺功能指标、支气管肺泡灌洗液细胞计数与分类、大鼠的肺组织病理学改变,并采用ELISA方法测定肺组织中白三烯C4(LTC4)的浓度及免疫组化测定肺支气管上皮MRP1的表达.结果 (1)模型组大鼠的肺顺应性(CL)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3％)/用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值、大呼气中段流量较正常对照组显著降低(P＜0.05).化痰降气组上述肺功能指标较模型组明显升高(P＜0.05).(2)模型组气道炎症加重,且出现明显肺气肿;化痰降气组也出现了炎症和肺气肿,但程度较轻.(3)与正常对照组比较,模型组及化痰降气组肺组织中的LTC4均显著升高(P＜0.01).与模型组比较,化痰降气组中肺组织的LTC4显著下降(P＜0.05).(4)与正常对照组比较,模型组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著降低(P＜0.01).与模型组比较,化痰降气组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著增强(P＜0.05).结论 化痰降气胶囊可能通过影响慢性阻塞性肺疾病状态下MRP1功能和表达,从而达到有效减轻COPD大鼠的气道炎症,延缓肺功能恶化等COPD发生和发展的目的.
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膜相关蛋白 Numb 在上皮性卵巢癌中的表达及其与耐药相关蛋白 P 糖蛋白、多药耐药相关蛋白1的关系
目的：探讨膜相关蛋白 Numb 在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及其与耐药相关蛋白 P 糖蛋白(P-gp)及多药耐药相关蛋白(MRP)-1的关系。方法选择2012年1月至2014年6月在四川大学华西第二医院妇科住院治疗的136例卵巢肿瘤患者及同期因子宫病变而无卵巢肿瘤行子宫及双侧附件切除的22例患者为研究对象,根据术后摘除卵巢组织的病理学检查结果,将其分为 EOC 组(n=92)、卵巢交界性肿瘤(BOT)组(n=23)、卵巢良性肿瘤组(n=21)及正常卵巢组(n =22)。采用免疫组化 SP 法检测患者卵巢组织的 Numb 蛋白、P-gp 及 MRP-1表达水平。统计学分析 Numb 蛋白在4组中及在 EOC 组不同临床特征患者中的阳性表达率差异,EOC 组患者3种蛋白阳性表达率差异及相关关系,以及与化疗敏感及耐药的关系。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并与受试者签署临床研究知情同意书。4组患者年龄,身高及体质量等一般临床资料比较,差异无统计学意义(P >0.05)。结果①卵巢组织中 Numb 蛋白阳性表达率比较：EOC 组较卵巢良性肿瘤组及正常卵巢组高,BOT 组较正常卵巢组高,且差异均有统计学意义(P <0.05)；而 EOC 组与 BOT 组比较、BOT 组与卵巢良性肿瘤组比较及卵巢良性肿瘤组与正常卵巢组比较,差异则均无统计学意义(P >0.05)。②EOC组不同临床特征患者卵巢组织 Numb 蛋白阳性表达率比较：FIGOⅠ~Ⅱ期患者显著低于Ⅲ~Ⅳ期患者,无淋巴结转移患者显著低于有淋巴结转移患者,且差异均有统计学意义(P <0.05)；而不同年龄、临床病理学类型、组织病理分级及残留灶大小之间比较,差异则无统计学意义(P >0.05)。③EOC 组患者卵巢组织的Numb 蛋白与 P-gp 阳性表达率比较,差异无统计学意义(P >0.05),二者表达无相关性(r =0.117,P =0.109)；而 Numb 蛋白阳性表达率较 MRP-1低,且差异有统计学意义(P <0.05),二者表达呈正相关关系(r=0.179,P =0.013)。④EOC 组完成随访的78例患者中,化疗敏感者为65例,化疗耐药者为13例。二者间 Numb 蛋白、P-gp 及 MRP-1阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P >0.05)；在化疗敏感患者或化疗耐药患者中,此3种蛋白阳性表达率两两分别比较,差异亦均无统计学意义(P >0.05)。结论Numb 基因在卵巢肿瘤的发生机制中可能作为癌基因存在。Numb 蛋白与卵巢肿瘤细胞增殖、侵袭和转移有关。Numb 蛋白与 MRP-1表达相关,但 Numb 蛋白能否与 P-gp 及 MRP-1一样,成为化疗耐药性的检测指标,尚需扩大样本量进一步研究证实。
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MRP1与VEGF在儿童急性白血病的表达及临床相关研究
目的 探讨儿童急性白血病患者多药耐药相关蛋白1(MRP1)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学S-P方法检测46例儿童急性白血病患儿治疗前后MRP1及VEGF的表达,结合临床分析,观察MRP1与VEGF的表达与临床化疗疗效的关系.结果 46例初治急性白血病患儿中MRP1阳性表达率为16/46(34.8%),VEGF为20/46(43.5%).Person相关分析表明,MRP1与VEGF表达无明显相关(r=0.215,P＞0.05).MRP1表达阳性患者的完全缓解(CR)率(37.5%)低于表达阴性患者CR率(73.3%),两者差异显著(P＜0.05);VEGF表达阳性者CR率为45%,表达阴性者CR率为69.2%,两者差异有显著性(P＜0.05).MRP1与VEGF均为阳性患儿9例中CR率为11.1%(1/9),表达均为阴性患儿19例中CR率为89.5%(17/19),两者比较有显著性差异(P＜0.05).结论 检测MRP1与VEGF蛋白表达对判断急性白血病的疗效有良好的预测作用,MRP1与VEGF阳性高表达可能是影响急性白血病患儿CR率的重要危险因素.
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非小细胞肺癌细胞MRP1表达及其与耐顺铂关系的研究
目的:研究多药耐药相关蛋白I(MRP1)是否在耐顺铂(DDP)的非小细胞肺癌(NSCLC)A549/DDP中高表达,探讨MRP1与NSCLC耐DDP的关系.方法:培养来源于同一母系的2株细胞系A549细胞系和A549/DDP细胞系,采用MTT法绘制A549细胞和A549/DDP细胞的生长曲线,分别计算A549细胞和A549/DDP细胞的耐药指数；应用RT-PCR检测A549细胞和A549/DDP细胞中MRP1 mRNA的表达水平.结果:A549及A549/DDP的半数抑制浓度分别为0.65 μg/mL和3.7 μg/mL,得出A549/DDP对DDP的耐药性是A549的5.5倍.A549/DDP中MRP1的在转录水平的表达显著高于A549中MRP1的表达,P＜0.05.结论:MRP1在耐DDP的NSCLC中高表达,而在不耐DDP的NSCLC中低表达,甚至不表达,说明MRP1的高表达与肺癌耐DDP有关,为以后研究通过抑制MRP1的表达从而逆转肺癌耐DDP提供理论依据.
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依维莫司和LBH589对耐药急性髓系白血病细胞增殖、凋亡及多药耐药相关蛋白表达的影响
目的 探讨雷帕霉素衍生物依维莫司(RAD001)或联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对耐药急性髓系白血病细胞株HL-60/ADM细胞增殖、凋亡和逆转耐药的影响.方法 采用不同浓度RAD001或联合LBH589处理HL-60/ADM细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活力,Hoechst33342染色法和AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡、阿霉素摄取率和多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达评估逆转耐药效应.进一步检测处理前后细胞信号通路蛋白变化,探讨其机制.结果 10～50 μmol/L RAD001均能够抑制HL-60/ADM细胞增殖、诱导凋亡,在作用48和72 h时30 μmol/L药物浓度达到大抑制效果,进一步增加药物浓度细胞增殖抑制率并没有明显增加(P＜0.05).不同浓度RAD001和LBH589联合处理HL-60/ADM细胞,没有明显的协同抑制增殖作用[协同指数(CI)≥1.0].10 μmol/LRAD001处理HL-60/ADM细胞可以明显下调细胞表面MRP1表达(93.90%±4.20%比79.10%±3.28%,P＜0.05),提高HL-60/ADM细胞阿霉索蓄积率(8.53%±0.68%比15.37%±1.46%,P＜0.01).深入机制研究表明,RAD001可以阻断PI3K/AKT/mTOR信号通路活性,通过上调P53抑制MRP1蛋白的活性.结论 RAD001与LBH589联合没有协同抑制HL-60/ADM细胞增殖作用.但RAD001单药能够有效抑制HL-60/ADM细胞增殖,诱导凋亡,通过阻断PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制细胞MRP1蛋白的表达,提高细胞阿霉素摄取率而逆转耐药.
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熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1表达影响的研究
[目的]研究熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1( MRP1)表达的影响.[方法]1)利用氯化锂-匹罗卡品制作癫痫大鼠模型.2)实验大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、熄风胶囊高剂量组(熄高组)、熄风胶囊中剂量组(熄中组)、熄风胶囊低剂量组(熄低组)、熄风胶囊大剂量+卡马西平(CBZ)组(联高组)、熄风胶囊大剂量+CBZ1/2剂量(联低组)和CBZ组.3)通过Western-blot方法检测癫痫大鼠海马和皮质MRP1的表达程度.[结果]实验结果显示治疗组与模型组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]熄风胶囊能有效抑制MRP1的过度表达.
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消岩汤对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药相关蛋白的调控作用
目的 探讨消岩汤含药血清对耐顺铂人肺腺癌A545659/DDP细胞多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)及其mRNA表达水平的影响,发现消岩汤对化疗耐药的作用靶点,为肺癌化疗耐药的临床治疗提供理论基础.方法 A549裸鼠皮下移植瘤模型ip给予等量生理盐水,2 mg/kg顺铂,消岩汤低、高剂量(20、40 g/kg)获得含药血清,选择耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞系作为获得性耐药模型,采用Western blotting免疫印迹法及RT-PCR技术,检测各组含药血清作用下A549/DDP细胞多药耐药基因MRP1、LRP及其产物MRP1、LRP蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,随着血清中药物浓度的增加,消岩汤低、高剂量组LRP与MRP1蛋白表达逐渐减弱(P＜0.05).LRP及MRPl mRNA水平也有所下降(P＜0.05),且随着药物浓度的增加,基因表达抑制越明显.结论 不同浓度的消岩汤含药血清对MRP1、LRP及其mRNA表达均具有不同程度的抑制作用,且浓度越高,抑制作用越明显,即与剂量呈正相关,揭示消岩汤逆转肺癌耐药可能与抑制MRP1和LRP蛋白功能有关.
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痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白1水平的影响
目的 观察痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达水平的影响,探讨痰热清治疗COPD的作用机制.方法 选择雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、COPD模型组和痰热清治疗组,每组10只.采用气管内滴入脂多糖(LPS)加香烟烟熏方法复制COPD模型,正常对照组不予任何处理.制模后痰热清治疗组尾静脉注射痰热清注射液2 mL/kg,COPD模型组和正常对照组则注射0.9％氯化钠注射液2 mL/kg;各组均连续给药14 d,然后观察大鼠体质量及呼吸功能,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定肺组织MRP1蛋白表达,取肺组织观察大鼠肺组织病理学改变.结果 治疗14d后3组大鼠体质量均较治疗前增加,但COPD模型组增加缓慢且低于痰热清治疗组(g:247.8±15.9比265.4±18.7,P＜0.05).COPD模型组0.3 s用力呼气容积占用力肺活量的比值(FEV0.3/FVC)较正常对照组明显降低(0.688±0.213比0.973±0.052),呼气峰流速[PEF (mL/s):3.28±0.74比4.58±1.48]、肺顺应性[Cydn(mL/cmH2O):317.1±130.3比515.1±140.2]和MRP1蛋白水平[吸光度(A)值:0.698±0.103比1.318±0.169]均较正常对照组明显降低,残气容积/肺总量比值(RV/TLC)较正常对照组明显升高(0.502±0.128比0.316±0.153);痰热清治疗组FEV0.3/FVC(0.801±0.142比0.688±0.213)、PEF(mL/s:4.24±0.36比3.28±0.74)、Cydn(421.2±342.0比317.1±130.3)、MRP1蛋白(A值:0.964±0.095比0.698±0.103]均较COPD模型组增高,RV/TLC较COPD模型组降低(0.411±0.105比0.502±0.128),差异均有统计学意义(均P＜0.05).光镜下可见:COPD模型组大鼠肺泡壁变薄、断裂,肺泡融合扩大,支气管黏膜大量上皮纤毛脱落、倒伏、粘连,杯状细胞增生,各级细支气管壁可见大量炎性细胞浸润,管腔内有炎性分泌物潴留;痰热清治疗组上述变化较COPD模型组有一定程度改善.结论 痰热清注射液可能通过增加大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达起到有效减轻COPD气道炎症、延缓COPD肺功能恶化和改善症状的作用.
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蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin抑制人肝癌SMMC-7721细胞株MRP1表达
目的:探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌细胞株SMMC-7721中多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance associ-ated protein 1,MRP1)表达的影响,并阐明Agkihpin抑制人肝癌SMMC-7721细胞活力的机制.方法:采用不同浓度的Agkihpin处理SMMC-7721细胞72 h后,应用免疫细胞化学、Western blot和RT-PCR等方法检测MRP1在SMMC-7721细胞中的转录和表达.结果:不同浓度Agkihpin作用SMMC-7721细胞72 h后MRP1表达均降低,显示Agkihpin可显著下调SMMC-7721细胞中MRP1转录和表达(P<0.05),并呈现出一定的浓度依赖效应.结论:Agkihpin能抑制人低分化肝癌细胞株SMMC-7721中MRP1的表达,并呈一定程度的浓度依赖效应,提示Agkihpin在一定程度上可用于提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性.
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急性白血病患者谷胱甘肽硫转移酶-π、多药耐药相关蛋白1表达与临床相关因素的分析
白血病细胞多药耐药(multi-drug resistance,MDR)性的产生是急性白血病(acute leukemia,AL)临床化疗失败的主要原因.MDR是指肿瘤细胞一旦对某种药物产生耐受,对其它结构、作用机制不同的化疗药物也交叉耐受.
关键词： 谷胱甘肽硫转移酶-π 多药耐药相关蛋白1 白血病 -
多药耐药相关蛋白1在骨肉瘤中的表达及同患者病理特征关系的分析
目的:探讨多药耐药相关蛋白1( MRP1)在骨肉瘤中的表达以及同患者病理特征之间的关系.方法:选取2016年1月至2017年1月我院收治的骨肉瘤患者80 例为研究组,同时选取同期20例健康体检人员为对照组,对比MRP1在两组研究对象当中的区别,同分析MRP1同患者肿瘤分期以及肿瘤大小的关系.结果:骨肉瘤患者的mdr1 的阳性单位及阳性率均显著高于正常骨组织当中的 mdr1阳性表达( P＜0.05) ;mdr1以及P-gP 表达在Ⅲ级患者以及Ⅳ级患者当中的阳性单位以及阳性数显著高于Ⅰ级患者以及Ⅱ级患者( P＜0.05) ;mdr1以及P-gP 表达在大肿瘤患者当中的阳性单位以及阳性率显著低于小肿瘤患者( P＜0.05) .结论:mdr1表达同骨肉瘤患者的病理分级呈正相关,同肿瘤大小存在负相关,临床治疗过程当中需要引起医务人员的重视.
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儿童难治性癫痫外周血多药耐药相关蛋白1表达研究
目的 研究儿童难治性癫痫外周血多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达情况.方法 2010年11月至2011年10月徐州市儿童医院门诊及住院收治的癫痫患儿60例,分为难治性癫痫组和药物控制良好组,各30例；选取同期来院体检的健康儿童30名为对照组.采用逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法测定3组外周血MRP1 mRNA及蛋白含量.结果 难治性癫痫组MRP1表达明显高于药物控制良好癫痫组及对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05)；药物控制良好癫痫组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 难治性癫痫患儿外周血MRP1表达增强.
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脊索瘤细胞系CM-319中放化疗抵抗相关基因的表达及临床意义
[目的]探讨多药耐药相关基因如缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、多药耐药基因(MDR1)及多药耐药相关蛋白(MRP1)在脊索瘤细胞系CM-319中的表达及临床意义.[方法] 用RT-PCR检测HIF-1α、MDR1、MRP1基因表达,间接免疫荧光及免疫细胞化学Envision法检测HIF-1α、MRP1蛋白在CM-319中的表达情况,并分析其与放化疗抵抗的关系.[结果] 常氧条件下,在脊索瘤细胞系中能检测到HIF-1α及MRP1 mRNA的表达,但未检测到MDR1 mRNA的表达(P<0.01),间接免疫荧光及免疫细胞化学可以检测到HIF-1α表达在细胞浆及核中,而MRP1主要表达在细胞浆中.[结论] HIF-1α与MRP1的过度表达在脊索瘤的放化疗抵抗中可能具有重要作用,而MDR1表达未被检测到,提示脊索瘤的放化疗抵抗主要与HIF-1α和MRP1相关.
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多药耐药相关蛋白1与人肝细胞耐砷性关系的研究
目的 探讨多药耐药相关蛋白1(MRP1)与人肝细胞(L-02)耐砷性之间的关系.方法 采用人肝细胞L-02细胞株,噻唑兰法(MTT)进行24 h急性NaAsO2毒性试验,选择细胞生存率在90%-95%时的NaAsO2浓度为诱导浓度,同时设1组不加砷诱导的L-02细胞作为同步对照.置于细胞培养箱中37℃,5%CO2常规培养6周,定期换液传代,每周用MTT法计算半数致死浓度(LC50)及细胞的生存率;6周后,将加砷诱导的L-02肝细胞与同步对照细胞在培养基中培养至细胞80%融合,然后进行24 h急性砷毒性试验(NaAsO2终浓度为0、2.5、5.0、10 μmol/L);采用real-time PCR检测细胞内MRP1mRNA的表达情况;MTT法检测细胞的存活率;石墨炉原子吸收光谱法检测各组细胞内总砷浓度.结果 实验组细胞MRP1mRNA的表达明显高于对照组(P<0.05);24 h急性砷毒性试验中,实验组不同砷浓度下细胞生存率和LC50.明显高于对照组(均P<0.001);实验组细胞内总砷浓度明显较同步对照组低(P<0.001).结论 L-02肝细胞具有可诱导的对砷的耐受性,其耐砷性与MRPI高表达有关.
关键词： 多药耐药相关蛋白1 人肝细胞(L-02) 耐受性 亚砷酸钠 -
慢性阻塞性肺病大鼠血浆白三烯C4水平、细胞免疫及支气管上皮多药耐药相关蛋白1 mRNA和蛋白水平的变化
目的 观察慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠血浆白三烯(LT)C4、T淋巴细胞亚群和支气管上皮多药耐药相关蛋白(MRP)1 mRNA的表达.方法 雄性Wistar 大鼠20只随机分为正常对照组、模型组.模型组采用气管注脂多糖加熏香烟方法复制COPD模型,荧光免疫试剂检测法检测大鼠血浆LTC4,采用直接免疫荧光标记的流式细胞分析T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+和CD8+细胞)比例,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析MRP1 mRNA基因表达.结果 与正常对照组比,模型组血浆LTC4蛋白的含量显著升高(P<0.05),CD3+有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),CD4+明显降低(P<0.001),CD8+明显增高(P<0.05),MRP1 mRNA基因表达显著减少(P<0.05).结论 LTC4很可能参与了COPD的支气管黏膜炎症、支气管平滑肌收缩和气道重构过程;T淋巴细胞的失衡提示COPD的细胞免疫功能降低,造成病情延绵难治;MRP1在COPD过程中起保护作用.
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多药耐药相关蛋白-1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中的表达及丙磺舒的干预作用
目的 观察难治性颞叶癫痫患者脑组织中多药耐药相关蛋白1( MRPl)及应用MRP1拮抗剂丙磺舒干预后的表达,探讨MRP1与难治性颞叶癫痫多药耐药的关系.方法 应用免疫组化检测难治性颞叶癫痫患者脑组织实验组和对照组MRP1的表达情况,同时应用免疫蛋白印记(Western blot)方法检测实验组、丙磺舒干预组和对照组MRP1的表达.结果 免疫组化结果显示MRP1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中表达增强,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).Western blot结果显示丙磺舒干预组MRP1蛋白水平较实验组明显较少,差异有显著性(P＜0.05).结论 脑内高表达的MRP1参与难治性颞叶癫痫的耐药机制,丙磺舒可以降低脑组织内MRP1的表达.
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海人酸致痫大鼠中多药耐药相关蛋白1和主穹窿蛋白的表达及作用
目的:探讨多药耐药相关蛋白1(MRP1)和主穹窿蛋白(MVP)在难治性癫痫中的耐药机制.方法:用免疫组化法检测海人酸(KA)致痫大鼠海马组织中MRP1和MVP的表达,应用SPSS17.0软件进行统计分析.结果:KA组的MRP1和MVP的表达均比对照组明显增高(P<0.01).KA组的MRP1和MVP的表达相似,随时间段逐渐升高,第3天、7天与第1天比较表达显著增高(P<0.05).结论:MRP1和MVP可能与难治性癫痫的耐药有关.
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熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫(癎)大鼠大脑皮质和海马多药耐药相关蛋白1表达的影响
目的:研究熄风胶囊单药及与卡马西平联合用药对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫(癎)大鼠反复自发性发作及多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)表达的影响.方法:应用氯化锂-匹罗卡品诱导难治性癫(癎)大鼠模型.将造模成功的癫(癎)大鼠随机分为模型组、熄风胶囊高剂量组、熄风胶囊中剂量组、熄风胶囊低剂量组、熄风胶囊高剂量加卡马西平组(高剂量联合组)、熄风胶囊高剂量加卡马西平1/2剂量组(低剂量联合组)和卡马西平组,每组10只,并选择10只正常大鼠作为对照.治疗28d后,取大脑皮质和海马组织,采用免疫组织化学方法检测癫(癎)大鼠大脑皮质与海马MRP1的表达.结果:各治疗组大鼠海马MRP1的表达均高于正常对照组,表达范围较广泛,阳性颗粒颜色较深,同时又低于模型组;在大脑皮质区,高剂量联合组、低剂量联合组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；无论是在海马CA1、CA3区,齿状回及大脑皮质区,高剂量熄风胶囊对MRP1的分布的作用要优于低剂量熄风胶囊和中剂量熄风胶囊；与卡马西平联合用药时均优于低剂量熄风胶囊、中剂量熄风胶囊及卡马西平(P＜0.05).结论:熄风胶囊单药及与卡马西平联合用药能有效地抑制癫(癎)大鼠海马与皮质MRP1的过度表达.
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多药耐药相关蛋白1在人肿瘤细胞系K562、A549、SGC7901和SGC7901/VCR的表达
目的:探讨多药耐药相关蛋白1(MRP1)在常见人肿瘤细胞的表达.方法:培养K562、A549、SGC7901和SGC7901/VCR细胞,RT-PCR检测ABCC1 mRNA的表达;SABC法检测MRP1蛋白的表达.结果:4种细胞均有ABCC1 mRNA的表达,SGC7901/VCR细胞的ABCC1 mRNA水平显著高于SGC7901细胞;SGC7901/VCR细胞MRP1表达显著高于SGC7901.结论:ABCC1/MRP1可能参与SGC7901细胞获得性多药耐药.
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血管内皮生长因子对胃癌BGC-823细胞多药耐药相关蛋白1启动子活性的影响
目的:检测血管内皮生长因子(VEGF)对多药耐药相关蛋白1(MRP1)基因启动子转录活性的影响并初步探讨其作用机制.方法:合成MRP1启动子片段,克隆到荧光素酶报告基因载体PGL3-Basic中;用脂质体2000将重组的报告基因载体与内参质粒β-半乳糖苷酶(β-gal)瞬时共同转染人胃癌BGC-823细胞,检测VEGF作用后MRP1启动子活性的改变;继之,采用PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002预处理转染的细胞,再检测VEGF对MRP1启动子转录活性的影响.结果:酶切鉴定和DNA序列分析表明成功地构建了重组PGL3-Basic-MRP1载体;荧光素酶活性分析表明重组PGL3-Basic-MRP1在BGC-823细胞中具有启动子活性(144±3.0),与空载体PGL3-Basic(60±4.910)相比,转录活性增高2.4倍,差异有统计学意义(P<0.01);VEGF能以剂量依赖的方式上调MRP1启动子区的转录活性,与无VEGF作用组(171±6.083)相比,大活性(924±19.975)增高5.4倍(P<0.05);LY294002能够显著抑制VEGF对MRP1启动子区的转录激活,当LY294002浓度为50 μmol/ml时,MRP1启动子活性(392±25.541)与无LY294002作用组(1 001±11.533)相比下降2.5倍(P<0.05).结论:VEGF对MRP1启动子活性具有上调作用,PI3K/AKT信号通路在这一过程中发挥了重要作用.
