首页 > 文献资料
-
基底外侧杏仁核微量注射吗啡和纳络酮对大鼠睡眠的影响
杏仁核参与多种行为活动调节,与下丘脑和脑干等调节睡眠部位有着广泛的纤维联系.曾有报道海人酸选择性损毁基底外侧杏仁核(BLA)神经元胞体后可引起慢波睡眠(SWS)增多,而用谷氨酸选择性兴奋BLA神经元胞体则引起SWS减少[1];在基底外侧杏仁核(BLA)注射cGMP引起觉醒增加和SWS减少;用亚甲蓝抑制内源性cGMP生成,则引起相反效应[2].表明BLA在睡眠和行为调控中有重要作用,有必要对其进行深入研究.
-
颞叶癫痫动物模型
癫痫是一种神经系统常见疾病,绝大多数癫痫患者可以通过药物控制发作,但是仍有约1/3患者为药物难治性癫痫,在难治性癫痫中绝大多数为颞叶癫痫.对颞叶癫痫动物模型的研究有助于了解其发病机制、脑电改变及病理生理特点,为寻找其治疗方法有一定帮助.现就颞叶癫痫动物模型的制作方法、行为学表现、脑电改变及病理特征进行总结.目前常用颞叶癫痫动物模型有海人酸模型和匹罗卡品模型,两种模型均可以通过系统给药和局部给药方式实现,可以诱发急性癫痫持续状态,之后出现反复自发发作从而形成慢性癫痫模型.两种模型均可引发海马起源的痫样放电,造成海马神经元变性、胶质细胞增生及苔藓纤维出芽,与人类颞叶癫痫相似.
-
柴贝止痫汤调节海人酸致痫大鼠脑组织耐药蛋白MRP2表达的研究
目的:观察中药柴贝止痫汤对海人酸(KA)致病大鼠模型脑组织耐药蛋白MRP2(MRP2)的作用.方法:采用侧脑室注射KA的方法建立癫痫大鼠模型,分为正常组、假手术组、模型组、卡马西平组、中药组和中西药组共6组,分别于给药1个月及3个月后取新鲜脑组织进行蛋白质印迹法(Western Blot)以及实时荧光定量PCR (RT-PCR)来观察各组大鼠脑内MRP2表达的情况并比较组间差异.结果:与模型组比较,1月及3月正常组、假手术组大鼠海马组织中MRP2的表达显著降低(P＜0.05),中药组及中西药组表达显著降低(P＜0.05).结论:长期服用卡马西平使MRP2在KA致痫大鼠脑组织中表达升高,而中药柴贝止痫汤可降低KA致痫大鼠脑组织中MRP2的表达.
-
电针督脉对癫痫后脑损伤大鼠脑胆固醇代谢的影响
目的:探讨电针督脉对癫痫后脑损伤的神经保护作用及其神经保护作用机制.方法:采用侧脑室立体定位注射海人酸(KA)建立大鼠癫痫持续状态(SE)模型后进行电针督脉百会和筋缩穴合刺干预.首先通过尼氏染色实验观察电针督脉对痫症继发脑损伤是否有神经保护作用.进一步利用Western Blotting和Real-time PCR分析胆固醇代谢相关酶胆固醇24S-羟化酶(CYP46)在蛋白和基因水平上的变化.结果:长时间电针督脉可以有效改善KA诱导的SE继发脑损伤,调节胆固醇代谢酶CYP46的表达,并抑制KA诱导的CYP46mRNA升高.结论:电针督脉可以通过影响胆固醇代谢途径对癫痫后的脑损伤发挥神经保护作用.
关键词： 癫痫 胆固醇24S-羟化酶 电针 海人酸 -
石菖蒲挥发油对癫痫大鼠海马氨基酸含量的影响
目的:研究石菖蒲萃取挥发油对癫痫大鼠海马内兴奋性与抑制性氨基酸含量的影响,探讨其抗癫痫的可能机制.方法:用超临界CO2萃取法(SFE-CO2)提取石菖蒲挥发油,脑室内注射海人酸(KA)建立大鼠癫痫模型,观察经挥发油治疗后的癫痫大鼠海马氨基酸含量的变化.结果:经石菖蒲挥发油35 mg*kg-1腹腔注射后的KA大鼠海马的GABA含量明显升高,谷氨酸(Glu)显著降低(P<0.05).结论:石菖蒲萃取挥发油可调节癫痫大鼠脑内的兴奋性与抑制性氨基酸的平衡,从而起到抗癫痫的作用.
-
构建海人酸诱导的内侧颞叶癫痫小鼠模型
目的 建立C57BL/6颞叶癫痫小鼠模型,观察其在行为学和病理学上的变化.方法 将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、0.9%氯化钠注射组(35μL/g)和海人酸注射组(12 mg/kg),进行单侧海马注射.注射5 d或5周后,取小鼠脑进行HE染色,观察海马病理结构改变;检测海马组织中mTOR通路标志物P-S6蛋白质表达量的改变.结果 (1)海人酸注射小鼠发生面部抽搐、双侧前肢痉挛等急性期癫痫持续发作和慢性期自发发作;(2)海马注射侧CA1、CA3神经元明显丢失,慢性期小鼠模型出现中齿状回颗粒细胞散布,符合海马硬化特征性病理改变;(3)小鼠海马组织中P-S6蛋白质的表达量在急性期(P<0.05)和慢性期(P<0.01)均上调.结论 单侧海马注射海人酸可成功建立C57BL/6小鼠内侧颞叶癫痫模型,可观察到与内侧颞叶癫痫临床表现类似的行为学、组织病理学上的改变.
-
卡马西平增加癫痫模型大鼠脑内P-糖蛋白的表达
目的 探讨癫痫发作与抗癫痫药物卡马西平(CBZ)对多药耐药基因编码的P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法 给雌性SD大鼠侧脑室注射海人酸(KA)或PBS,成模后再口服CBZ.成模或给药后3、5、7、14、21和28 d灌杀大鼠取脑,用免疫组化和双标免疫染色对脑中P-gp进行半定量及定位分析.尼氏染色观察海马神经元的变化.结果 模型大鼠脑电图及行为变化与人类癫痫相似,CBZ对癫痫发作没有作用.癫痫发作后第5天脑P-gp表达水平增加,7 d时高,21 d后恢复到正常水平.阳性产物主要位于海马的毛细血管内皮细胞,也见于皮层的毛细血管及神经元.CBZ对正常大鼠P-gp的表达没有影响.CBZ+KA组动物海马P-gp的表达与KA组动物相似,但7 d时其表达明显增强.结论 癫痫发作可诱导P-gp的表达;卡马西平在癫痫发作中也参与了P-gp的高表达.
-
Akt/mTOR信号通路在海人酸损伤大鼠海马组织中的激活
目的 研究Akt/mTOR信号通路在海人酸(KA)诱导的大鼠海马神经元损伤中的激活和HIF1α的表达情况.方法 成年SD大鼠随机分为3组,其中2组接受脑室注射,1组为假手术组.大鼠麻醉后颅骨钻孔但侧脑室注射KA 1.0μg(KA组)或等体积生理盐水(NS组)或相应位置颅骨钻孔但不予注射(假手术组).8和16 h及1、3和5 d后,用Western blot观察Akt和mTOR的表达及其磷酸化水平,用免疫组化观察HIF1α的表达情况.结果 尼氏染色显示,KA组大鼠海马CA3区1 d时即开始有死亡,5 d时累及CA1区.Akt在KA损伤16 h后就开始激活并持续至第5天;mTOR于第1天开始激活,第3天时达峰值.CA3区的HIF1α于第1天明显升高,CA1区的HIF1α表达则于3 d时明显升高.NS组和假手术组上述各指标变化均不明显.结论 KA诱导激活大鼠海马中Akt/mTOR通路,可能调节神经元的存活.
关键词： 海人酸 Akt/mTOR通路 HIF1α 大鼠 -
癫痫大鼠海马内凋亡神经元超微结构的研究
目的为揭示海人酸癫痫模型海马内神经元的死亡机制. 方法选用海人酸诱导的癫痫大鼠模型,对海马内凋亡神经元的超微结构进行观察. 结果电镜下,实验组大鼠海马齿状回门区和CA1区内可见散在的凋亡神经元,凋亡神经元主要表现为核周染色体的聚集和凝结成块,其核膜表现为皱缩和扭曲,在晚期凋亡的神经元有时可见核膜破裂.凋亡神经元胞浆内的细胞器保持完整. 结论凋亡参与了海人酸诱发癫痫发作后海马内神经元的死亡过程.
-
迷走神经刺激对海人酸致痫大鼠海马胶质细胞胶原纤维酸性蛋白的影响
目的 观察迷走神经刺激( VNS)对海人酸(KA)致痫大鼠海马星形胶质细胞(AS)的胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的影响,探讨AS与癫痫的关系及在VNS治疗癫痫中的作用.方法 36只SD大鼠随机分为对照组、KA组和VNS+ KA组,每组12只.侧脑室注射0.05％ KA溶液3μL制作大鼠癫痫模型；采用免疫组织化学和western blot方法检测VNS后KA致痫大鼠海马星形胶质细胞GFAP的变化.结果 大鼠侧脑室注入KA后3～5 min内癫痫发作,发作级别按国际公认Racine标准均达到Ⅳ～Ⅴ级；KA组大鼠海马GFAP阳性细胞数,western blot值显著高于对照组(P＜0.01),VNS+KA组大鼠海马GFAP阳性细胞数和western blot值显著低于KA组(P＜0.01).结论 VNS可抑制KA致痫大鼠海马星形胶质细胞GFAP的表达,提示抑制星形胶质细胞激活可能是VNS抑制癫痫的作用机制之一.
-
大鼠小脑共济失调模型及病理学研究
目的 建立SD大鼠海人酸(KA)损毁双侧小脑顶核制备的小脑共济失调动物模型;观察其共济失调的行为学和病理学改变.方法 采用大鼠脑立体定位仪,微量注射KA损毁SD大鼠双侧小脑顶核,制备SD大鼠小脑共济失调模型.采用自制鼠共济失调检测仪观察共济失调及行为变化、病理改变(光、电镜组织形态学改变).结果 KA损伤SD大鼠小脑共济失调模型行为学表现为后肢体行动困难、笨拙,行走不稳,躯体向左或右侧倾倒或打转,自己难以翻正,反应迟钝,胆小,紧张等表现;病理学证实注射部位的神经元大部分坏死、脱失,出现明显的神经变性损害的病理特点.结论 SD大鼠双侧小脑顶核微量注射KA可成功制备小脑变性动物模型,其损伤的病理变化以神经元退变为主,而小脑的完整性不受破坏,适用于神经干细胞移植和再生的研究.
-
海人酸致痫大鼠海马IL-1β、TNF-α的表达
目的 立体定向手术建立海人酸(KA)颞叶癫痫大鼠模型,检测海马内IL-1β、TNF-α蛋白及其mRNA的表达.方法 大鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组和模型组.模型组大鼠一侧海马CA3区注射KA (生理盐水组注射生理盐水),观察其行为学特征,HE染色和Nissl染色以及电镜观察其病理学改变,免疫组化法检测大鼠海马内IL-1β、TNF-α蛋白的表达,原位杂交法检测TNF-α mRNA的动态表达.结果 大鼠注射KA后出现湿狗样抖动、头面部肌阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作等,病理结果显示海马神经元变性、缺失及胶质细胞增生,模型组IL-1β在致痫后3 、6 h表达水平明显增加并于12 h达高峰,之后逐渐下降,7 d后与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);TNF-α蛋白与mRNA表达时程基本一致,3 h出现,12 h达高峰,而后逐渐下降,7 d后回归至对照组表达水平,15 、30 d又高于对照组(P＜0.05).结论 (1)大鼠一侧海马注射KA是人类颞叶癫痫理想的动物模型;(2)内源性IL-1β、TNF-α参与了癫痫发病机制.
-
大鼠海人酸点燃海马与杏仁核颞叶癫痫模型发作特点及海马病理学改变的研究
目的 对比观察大鼠海人酸点燃海马与杏仁核癫痫模型不同发作期的行为学、皮质脑电及海马病理学变化.方法 雄性成年Sprague-Dawley大鼠24只,按随机数字表法分为海马组、杏仁核组(模型组各9只,对照组各3只).将海人酸0.6μl(0.6μg,1.0μg/μl)定向注射到大鼠海马CA3区或杏仁核区建立两种癫痫模型.模型建立成功的大鼠按随机数字表法分为癫痫发作后1 d(急性期)、7 d(潜伏期)、30 d(慢性期)组,每组各3只.对照组于海马CA3区或杏仁核区注入等体积的生理盐水.观察不同发作时期大鼠的行为学和皮质脑电变化.采用免疫组织化学染色方法观察海马中神经元的标志物神经元核蛋白(NeuN)、星形胶质细胞的标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞的标志物离子钙结合衔接分子1(IIba1)表达的变化.结果 两种癫痫模型急性期及慢性期均有典型癫痫发作的行为学及脑电表现.海马模型组注入海人酸后(63.33±4.41)min出现部分性发作,间断伴有癫痫大发作;皮质脑电表现以多相棘波多见.杏仁核模型组注入海人酸后(28.67±3.48)min主要出现癫痫大发作;皮质脑电以尖波发作性节律多见.免疫组织化学染色显示,与对照组比较,从急性期到慢性期,两种模型在海马CA1、CA3和CA4区均为神经元丢失和星形胶质细胞增生逐渐加重,同时伴小胶质细胞在神经元丢失部位逐渐增多、聚集.但与海马模型组比较,杏仁核模型组慢性期在CA1和CA4区神经元丢失[CA1区NeuN的吸光度(A)值为10.83±1.52对比22.43±5.16,P<0.01;CA4区为12.87±2.13对比25.81±4.60,P<0.05]及星形胶质细胞增生(CA1区GFAP A值为61.20±7.33对比14.65±0.12,CA4区为76.73±5.40对比43.01±1.35,均P<0.01)更明显,CA1区小胶质细胞广泛聚集现象更严重(IIba1 A值为13.70±3.88对比1.08±0.01,P<0.01).结论 大鼠海人酸点燃海马及杏仁核癫痫模型均能模拟人颞叶癫痫特征,但在行为学、皮质脑电表现,特别是海马病理学改变方面存在差异.
-
恒河猴颞叶癫痫模型的建立
目的 应用立体定向方法单侧海马内注射海人酸,建立恒河猴颞叶癫痫模型,并评价其生物学特性.方法 通过立体定向手术,恒河猴右侧海马注射海人酸,观察恒河猴行为学、神经电生理、影像学、组织病理及超微结构改变.结果 海人酸注射后恒河猴出现典型的颞叶癫痫发作表现,脑电图表现为棘波、慢波、棘慢波、尖波发放.MRI、MRS可见海马硬化的表现,组织学标本显示颞角扩大、海马硬化,HE染色可见神经元缺失、胶质细胞增生、瘢痕萎缩,电镜显示神经元固缩、血脑屏障破坏、星形细胞肿胀、细胞器受损.结论 立体定向单侧注入海人酸后恒河猴癫痫发作明显,其行为学、神经电生理、影像学、神经病理改变符合颞叶内侧型癫痫表现,可作为癫痫模型.
-
伽玛刀对癫痫大鼠模型的治疗作用及机制研究
目的 研究伽玛刀照射对癫痫大鼠的放射生物学作用,探讨伽玛刀治疗癫痫的作用机制.方法 制备海人酸大鼠癫痫模型,利用自行设计的伽玛刀动物定向头架,分别应用100Gy和20Gy的伽玛射线对癫痫大鼠海马组织进行照射,观察大鼠行为学、脑电图、MRI及超微结构、脑组织氨基酸含量及GABA能神经元表达变化.结果 伽玛刀照射后大鼠癫痫发作次数明显减少.100Gy组照射后2个月MRI表现为靶区高信号,20Gy组5个月MRI未见改变.伽玛刀照射后兴奋性氨基酸含量显著低于癫痫组,GABA能神经元表达低于正常,但高于癫痫组.结论 伽玛刀照射对癫痫大鼠具有治疗作用,高剂量伽玛射线(100Gy)对致痫灶有毁损作用.低剂量伽玛射线(20Gy)通过抑制兴奋性神经元释放兴奋性氨基酸使癫痫发作减少.
-
海人酸大鼠癫痫模型的建立
目的 应用海人酸注射建立海人酸大鼠癫痫模型,评价其生物学特性.方法 通过立体定位手术,大鼠海马组织微量注射海人酸,术后观察大鼠行为学表现、电生理改变及海马超微形态结构变化.结果 海人酸注射后实验大鼠出现典型的颞叶癫痫发作过程,表现为湿狗样抖动、前肢抽搐、跌倒以及全身强直-阵挛性发作等,皮层脑电图出现多种形式的痫性放电,单神经元放电细胞外记录显示癫痫模型大鼠放电杂乱,形态不规整.电镜显示神经细胞固缩,星形细胞突起肿胀,神经突触水肿,可见兴奋性递质小泡,线粒体水肿崩解,嵴排列紊乱,血管内皮细胞水肿,血脑屏障破坏.结论 大鼠立体定向海人酸药物注射是一种较理想的癫痫模型.
-
海人酸致痫大鼠海马细胞外氨基酸类神经递质的变化
目的 分析海马细胞外氨基酸递质在癫痫发生中的作用,探讨海人酸致痫模型大鼠癫痫发生的机制.方法 应用立体定向方法建立海人酸大鼠颞叶癫痫模型,观察大鼠行为学和电生理变化,应用电镜观察大鼠海马超微结构,应用微透析获取大鼠海马细胞外液,高压液相色谱法测定透析液中的兴奋性氨基酸谷氨酸、抑制性氨基酸牛磺酸及γ-氨基丁酸的含量.结果 海人酸注射后大鼠出现典型的颞叶癫痫发作,皮层脑电显示痫性发作,电镜显示兴奋性神经递质增加,高效液相色谱分析显示海马细胞外谷氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸含量明显高于对照组(P＜0.05),虽然谷氨酸、γ-氨基丁酸都升高,而谷氨酸升高的更明显.结论 兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸的失衡在海人酸致痫大鼠模型的癫痫发生过程中发挥重要作用,是癫痫发生的原因之一.
-
Orexin-A细胞及其神经纤维在致痫模型大鼠中的变化
目的 观察癫痫模型大鼠中食欲素A(orexin-A)及其神经纤维在不同时间点的变化.方法 用海人酸腹腔注射诱发大鼠癫痫发作,并分别于癫痫终止后8h、1、3、7d和慢性复发时间点,行免疫组化方法检测orexin-A免疫反应阳性细胞数及其神经纤维的变化.结果 orexin-A免疫阳性细胞的分布主要在下丘脑和穹窿周围核,其免疫阳性神经纤维分布广泛；8h组阳性细胞数减少,而免疫反应神经纤维增多,具有统计学意义(P＜0.05).阳性细胞呈现先减少,后恢复,再次减少的趋势；而其免疫反应神经纤维平均光密度值曲线呈现先升高,后恢复,继续下降之后,再次升高的趋势.结论 orexin-A 细胞数及其神经纤维在大鼠癫痫发生的过程中随时间点与其出现了相反的变化,这表明其可能参与了癫痫发病的调节控制.
-
高脂饮食诱导的肥胖对颞叶癫痫小鼠海马损伤的影响
目的：探讨肥胖对颞叶癫痫发生、发展的影响。方法高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠建立肥胖小鼠模型，建模成功后单侧海马微量注射200 ng海人酸(kainic acid，KA)诱导颞叶癫痫，记录小鼠癫痫评分，测定血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme，CK-MB)浓度，Western blot检测海马S-100β的表达。海人酸注射5周后，观察小鼠海马病理结构改变。结果海人酸注射后，肥胖小鼠的癫痫行为评分较野生型鼠显著增高；海人酸注射24 h后，与野生型鼠相比，肥胖小鼠海马血清CK-MB浓度和海马S-100β表达升高；海人酸注射后，病理切片显示肥胖鼠海马CA3区神经元丢失和星形胶质细胞活化较野生型鼠更严重，肥胖鼠星形胶质细胞形态发生明显变化。结论肥胖可能加重了小鼠对海人酸诱导颞叶癫痫的损伤。
关键词： 肥胖 海人酸 星形胶质细胞 颞叶癫痫 C57BL/6J小鼠 -
瘦素在海人酸诱导小鼠颞叶癫痫海马损伤中的作用
目的：探讨瘦素(Leptin)与颞叶癫痫发生、发展过程的关系。方法外源Leptin注射C57BL/6J小鼠后，右侧海马微量注射200 ng海人酸(kainic acid，KA)诱导颞叶癫痫，记录小鼠癫痫评分，1周后观察小鼠海马病理变化，包括Western blot检测Bax的表达水平，尼式染色(Nissl staining)观察海马Hilus区神经元丢失，免疫荧光检测Hilus区星形胶质细胞活化与增殖。结果在200 ng KA诱导的颞叶癫痫模型基础上，10 mg/kg外源Leptin预处理后，癫痫评分增加约52%，Bax表达水平升高约75%(P＜0.05)，海马Hilus区神经元丢失严重，星形胶质细胞过度活化。结论 Leptin增加了KA诱导的神经元凋亡，加重KA诱导的神经病理过程。
